动物细胞工程高三一轮复习ppt课件
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高三生物一轮复习课件动物细胞工程
拓展 提升科学思维
3.科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞，尝试说出几种获取iPS细 胞的方法。（结合教材46页）
借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者 用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞。iPS细胞最初是由成纤维细胞转 化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞。
成纤维细胞 T细胞和B细胞
导入特定基因
导入特定蛋白 小分子化合物诱导
iPS 细胞
治疗阿尔茨海默症 治疗心血管疾病
突破 强化关键能力
1.(2023·山西运城高三模拟)对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养，下
列说法错误的是（C ）
A.在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 B.动物细胞培养应在含5%CO2的CO2培养箱中进行，CO2的作用维持培 养液的pH C.为了防止动物细胞培养过程中受污染，可向培养液中加入适量的干扰素 D.在合成培养基中，通常需加入血清等一些天然成分
应用： ①人造皮肤的构建； ②动物分泌蛋白的规模化生产； ③用于药理及细胞发育方面的研究。
考点一 动物细胞培养
4.培养的条件：
糖类、氨基酸、无 机盐、维生素 …
培养基的构成：合成培养基 + 血清等天然成分
将细胞所需的营养物 质按种类和所需量严 格配制而成的培养基
含人类未知、细胞生长增
殖所必需的物质，满足细
动物细胞培养 原理：细胞的增殖
的概念和原理 在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术
动
物
动物细胞培养
(1)营养条件 (2)无菌、无毒的环境
细 的条件
(3)温度、pH和渗透压
胞
(4)气体环境
培 动物细胞培养 取动物 单个 细胞 原代 传代
高三生物一轮复习课件细胞工程【动物】
传代培养
响外，还会发生接触抑制现象）
生 概念 原理
命 观
注意事项
念
动物细胞培养 地位 条件： 过程： 取动物组织
➢ 为什么要传代培养：悬浮培养的细胞会因细胞密度
过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质等因素 制成细胞悬液
传代培养
放入CO2培养 箱中培养
制成细胞悬液
转入培养液进行原代培养 细胞贴壁 接触抑制
分瓶
进行传代培养
生 概念 原理
动物细胞培养 地位 条件： 过程：
命 观
细胞悬液用胰蛋白酶或胶原蛋白酶将组织分散成单个细胞后制成培养液。
念 细胞贴壁大多数体外培养的细胞需要__贴__附__于__某__些__基__质表__面_才能生长
，然后
在 适宜的培养条件 下，让这些细胞生__长___和_增__殖__的技术；
原理： 细胞增殖（有丝分裂） 地位： 动物细胞工程的基础 条件：
✓ 营养 ✓ 无菌、无毒 ✓ 温度、pH 和渗透压 ✓ 气体环境
生 概念 原理
动物细胞培养 地位
命 观
条件：
血清中不仅含有蛋白质、氨基酸、葡
念
萄糖、激素等多种营养物质，还有激
✓ 营养
葡萄糖、不包括 素及多种未知的促细胞生长因子、促
1.成分
淀粉、蔗糖等
贴附因子及其他活性物质，能促进细
①已知成分
胞的生长、增殖和贴附。
将细胞所需的_营__养__物__质_（糖类、氨基酸、无机盐、维生素等）按其
_种__类__和所__需__量___严格配制而成的培养基，称为合__成__培__养__基___
②未知成分
使用合成培养基时，通常需加入_血__清_等一些天然成分
原因：血清中含有尚未全部研究清楚的细胞所需的营养物质 。
高考生物 第一轮复习 2.2动物细胞工程精品课件 新人教版选修3
第四页，共46页。
二、植物体细胞杂交(zájiāo)与动物细胞融合 的比较
植物体细胞杂交
细胞 融合 原理
细胞膜的流动性、细胞 的全能性
动物细胞融合 细胞膜的流动性
细胞 用纤维素酶、果胶酶去 用胰蛋白酶或胶原蛋白
融合 除细胞壁后诱导原生质 酶使细胞分散后，诱导
方法
体融合
细胞融合
第五页，共46页。
植物体细胞杂交 动物细胞融合
上表中还需进行(jìnxíng)的操作是 ____________。 ③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养 液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中 继续培养。 ④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在 显微镜下观察________，并对比分析。若丙组 淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常， 则说明_______________________。
第二十一页，共46页。
病毒表面的A蛋白为主要抗原，因此可用A蛋 白制备疫苗，刺激机体产生抗体。对于病毒的 检测可采用与已知病毒进行核酸序列比较的方 法，也可根据抗原与抗体发生特异性结合 (jiéhé)的特点，用抗A蛋白的单克隆抗体进行 检测。
第二十二页，共46页。
【答案】 (1)逆(反)转录 (2)限制性核酸内切 酶(限制性内切酶、限制酶) DNA连接酶(注： 两空顺序可颠倒) (3)细胞(xìbāo)融合 杂交 瘤细胞(xìbāo) (4)A蛋白 核酸(基因)序列 抗A蛋白的单克隆抗体
第二十五页，共46页。
其碳源为蔗糖，在组织培养的脱分化阶段必 须在黑暗条件下进行，而再分化过程需要一 定的光照条件；动物细胞培养就是细胞的增 殖，不能体现细胞的全能性，而植物(zhíwù) 组织培养体现了植物(zhíwù)细胞的全能性。 【答案】 C
二、植物体细胞杂交(zájiāo)与动物细胞融合 的比较
植物体细胞杂交
细胞 融合 原理
细胞膜的流动性、细胞 的全能性
动物细胞融合 细胞膜的流动性
细胞 用纤维素酶、果胶酶去 用胰蛋白酶或胶原蛋白
融合 除细胞壁后诱导原生质 酶使细胞分散后，诱导
方法
体融合
细胞融合
第五页，共46页。
植物体细胞杂交 动物细胞融合
上表中还需进行(jìnxíng)的操作是 ____________。 ③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养 液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中 继续培养。 ④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在 显微镜下观察________，并对比分析。若丙组 淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常， 则说明_______________________。
第二十一页，共46页。
病毒表面的A蛋白为主要抗原，因此可用A蛋 白制备疫苗，刺激机体产生抗体。对于病毒的 检测可采用与已知病毒进行核酸序列比较的方 法，也可根据抗原与抗体发生特异性结合 (jiéhé)的特点，用抗A蛋白的单克隆抗体进行 检测。
第二十二页，共46页。
【答案】 (1)逆(反)转录 (2)限制性核酸内切 酶(限制性内切酶、限制酶) DNA连接酶(注： 两空顺序可颠倒) (3)细胞(xìbāo)融合 杂交 瘤细胞(xìbāo) (4)A蛋白 核酸(基因)序列 抗A蛋白的单克隆抗体
第二十五页，共46页。
其碳源为蔗糖，在组织培养的脱分化阶段必 须在黑暗条件下进行，而再分化过程需要一 定的光照条件；动物细胞培养就是细胞的增 殖，不能体现细胞的全能性，而植物(zhíwù) 组织培养体现了植物(zhíwù)细胞的全能性。 【答案】 C
高中生物高考2022届新教材一轮复习人教版 第十单元 第6课 动物细胞工程 课件(111张)
2.动物细胞培养： (1)原理：_细__胞__增__殖__。 (2)过程：
(3)培养条件： ①无菌、无毒的环境：对_培__养__液__和所有培养用具进行无菌处理；添加 _抗__生__素__；定期更换培养液以便清除_代__谢__产__物__。 ②营养：除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外通常还需加入 _血__清__、__血__浆__等一些天然成分。 ③温度和pH：适宜的温度为_3_6_._5_±__0_._5__℃__；适宜的pH为_7_._2_～__7_._4_。
2.教材选修3 P53：1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒在前人工 作的基础上，继续探索和尝试，并且充分发挥想象力，设计了一个极富创造 性的实验方案(图2-24)。他们想到，如果把一种B淋巴细胞与能在体外大量增 殖的骨髓瘤细胞进行融合，所得到的融合细胞就能大量增殖，产生足够数量 的特定抗体。 制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细 胞？ 提示：每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体，但不能无限增殖；骨髓瘤 细胞可快速大量增殖，却不能产生抗体。若将两种细胞融合在一起，则既能产 生特异性抗体又能快速增殖。
第6课 动物细胞工程
核心概念·自查
【概念导图】 一图知全局
【概念梳理】 闭书测基础 一、动物细胞培养和核移植技术 1.动物细胞工程常用的技术手段： _动__物__细__胞__培__养__、动物细胞核移植、_动__物__细__胞__融__合__、生产单克隆抗体等，其 中_动__物__细__胞__培__养__技术是其他动物细胞工程技术的基础。
④气体环境
(4)应用：生产细胞产品，如干扰素、疫苗、单克隆抗体；检测并判断某种物 质毒性的大小；临床医学研究。
3.动物体细胞核移植技术和克隆动物： (1)原理：_动__物__体__细__胞__核__具__有__全__能__性__。 (2)核移植分类：_胚__胎__细__胞__核移植和体细胞核移植。 (3)过程：
高中生物——动物细胞工程》课件ppt
卵母细胞
2.过程： 取供体细胞 取卵母细胞 培养到 MⅡ中期
供体细胞培养 卵母细胞去核
供体细胞注入去核的卵母细胞
供体核进入受体卵母细胞 重组胚胎
代孕母牛 生出与供体遗传物质基本相同的个体
3.克隆动物的研究意义：
1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.治疗人类疾病，作为供体 4.保护濒危动物
在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培 养到第 10 代，到这时的培养称为原__代__培__养_______。
⑷为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用胰蛋白酶 处理 然后配置成 细胞悬液 ，再分装。
⑸在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡，
原因是细胞没有发生癌变
核移植技术和克隆动物
3 .从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉 核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植 入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状 （B ） A、难以预测 B、像甲 C、像乙 D、像丙 4.生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再 是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功 “复生”野驴的方法是 （C ） A．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分 化、再分化，培育成新个体 B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个 体 C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中， 经孕育培养成新个体 D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体
随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖
细胞 悬浮 液
细胞株
细胞系遗传物质改变
10代 细胞
50代 细胞
无限传 代
原代培养
传代培养
多数组织细胞固定在表面 生长和分裂。
高三生物一轮复习课件动物细胞工程
条
积累对细胞自身造成危害
件 适宜的温度、 PH和渗透压
36.5°C
7.2~7.4 等渗溶液
气体环境
95%的空气：O2维持细胞代谢 5%的CO2：维持培养液PH
动 基础 物动 细物 胞细 工胞 程培
养
概念
原理 培养 条件
从动物体中取出相关的组织，将它们分散成单个细胞，然 后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术
(2) 写 出 以 小 鼠 甲 的 脾 脏 为 材 料 制 备 单 细 胞 悬 液 的 主 要 实 验 步 骤 ：
取__小___鼠__甲__脾__脏__剪__碎___，__用__胰__蛋__白__酶__处___理__使__其__分__散__成___单__个__细__胞__，__加__入___培__养______ 液__制___成__单__细__胞__悬__液___________。
动
概念
动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物 细胞形成一个细胞的过程。
物
原理 细胞膜的流动性
细 动 方法 PEG融合法、电融合法、灭活病毒
胞 物 应用 制备单克隆抗体 杂交瘤技术
工细 程胞
给小鼠注射特定抗原，得到特定抗体的B淋巴细胞
融
诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 得到多种杂交细胞
合 过程 筛选杂交瘤细胞 进行克隆化培养和抗体检测
不可以；细胞传代培养一般传至10代后就不易传下去
1.(2023·东北师大附中)实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。
D 下列叙述错误的是( )
实验小鼠―― 甲→皮肤组织―― 乙→皮肤细胞悬液―― 丙→细胞群体 1―― 丁→细胞群体 2
A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒 B.乙过程需要用胰蛋白酶等处理皮肤组织，使细胞分散开 C.丙过程表示原代培养，该过程中会出现接触抑制现象 D.丁过程表示传代培养，此过程中的细胞分瓶后能无限增殖
生物新教材一轮复习课件：第48讲 动物细胞工程
3.涉及技术 动物细胞培养技术、动物细胞融合技术 、核移植技术、 胚胎移植技术 等。其中,核移植是核心技术。
4.过程
5.动物细胞培养与动物体细胞核移植的比较
旁栏边角 (选择性必修3 P54思考·讨论)通过体细胞核移植方法生产的克隆动物,不是 对体细胞供体动物进行了100%的复制,原因是_____பைடு நூலகம்____________。 提示:克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核,但核外还有少部分DNA(如 线粒体DNA)来自受体卵母细胞。
易错辨析 (1)制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织,再用胃蛋白酶处理。( × ) (2)肝细胞培养过程中通常在培养液中通入含有95%空气和5% CO2的混合 气体,CO2的主要作用是刺激细胞呼吸。( √ ) (3)动物细胞培养要定期更换培养液,其目的是清除代谢物,防止细胞代谢 物积累对细胞自身造成危害。( √ ) (4)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞。( × )
易错辨析 (1)体细胞核移植过程中通常采用MⅡ期的去核卵母细胞作为受体细胞。
(√) (2)动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。(选择性必修3 P52 正文)( √ ) (3)重构胚的激活可用Ca2+载体、蛋白酶合成抑制剂等。(选择性必修3 P53 图2-18)( √ ) (4)重构胚是天然形成的胚胎,具有发育成完整个体的能力。(选择性必修3 P53相关信息)( × ) (5)体细胞核移植技术成功率非常高,各个环节也相对完善。(选择性必修3 P54正文)( × )
5.原代培养和传代培养
6.干细胞的培养及其应用 (1)概念:干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,与组织、器官的 发育、再生和修复密切相关。 (2)来源:早期胚胎、 骨髓 和脐带血等。
4.过程
5.动物细胞培养与动物体细胞核移植的比较
旁栏边角 (选择性必修3 P54思考·讨论)通过体细胞核移植方法生产的克隆动物,不是 对体细胞供体动物进行了100%的复制,原因是_____பைடு நூலகம்____________。 提示:克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核,但核外还有少部分DNA(如 线粒体DNA)来自受体卵母细胞。
易错辨析 (1)制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织,再用胃蛋白酶处理。( × ) (2)肝细胞培养过程中通常在培养液中通入含有95%空气和5% CO2的混合 气体,CO2的主要作用是刺激细胞呼吸。( √ ) (3)动物细胞培养要定期更换培养液,其目的是清除代谢物,防止细胞代谢 物积累对细胞自身造成危害。( √ ) (4)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞。( × )
易错辨析 (1)体细胞核移植过程中通常采用MⅡ期的去核卵母细胞作为受体细胞。
(√) (2)动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。(选择性必修3 P52 正文)( √ ) (3)重构胚的激活可用Ca2+载体、蛋白酶合成抑制剂等。(选择性必修3 P53 图2-18)( √ ) (4)重构胚是天然形成的胚胎,具有发育成完整个体的能力。(选择性必修3 P53相关信息)( × ) (5)体细胞核移植技术成功率非常高,各个环节也相对完善。(选择性必修3 P54正文)( × )
5.原代培养和传代培养
6.干细胞的培养及其应用 (1)概念:干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,与组织、器官的 发育、再生和修复密切相关。 (2)来源:早期胚胎、 骨髓 和脐带血等。
【课件】2023届高三一轮复习生物：+细胞工程课件
细胞工程
考点一 植物细胞工程 植物组织培养
植物细胞工程基本技术： 植物体细胞杂交
植物的茎段为什么可以培育出完整的植株？
植物细胞的全能性
植物的茎段是怎样培育成一株完整的植株？
菊花花瓣培育 出的菊花
植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等， 培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件， 诱导其形成完整植株的技术。
②作物脱毒 a.作物病毒积累
马铃薯 草莓
香蕉
病毒在作物 体内积累
作物产量降低 品质变差
无性 感染的病毒很 繁殖 容易传给后代
b.脱毒方法
取顶端分生区（如茎尖、根尖：病毒极少，甚至无毒）进行植 物组织培养，获得脱毒苗。
c.优点 明显提高农作物的产量和品质
考点一 植物细胞工程
4、植物细胞工程的应用-植物新品质的培育
考点一 植物细胞工程 (2019年高考-新课标Ⅲ卷)培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管 苗的过程如图所示。
（4）步骤⑥要进行照光培养，其作用是 ___诱__导__叶__绿__素__的__形__成__，__使__试__管__苗__能__够__进__行__光__合__作__用_________。 （5）经组织培养得到的植株，一般可保持原品种的__遗__传__特__性____， 这种繁殖方式属于___无__性_______繁殖。
直接获取困难 含量低、从植物组织提取会大量破坏植物资源 化学合成困难 有些产物不能或难以通过化学合成途径得到
细胞产物的工厂化生产 利用植物细胞培养来获得目标产物
考点一 植物细胞工程 4、植物细胞工程的应用-细胞产物的工厂化生产
②植物细胞培养(细胞产物工厂化生产) 在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。
考点一 植物细胞工程 植物组织培养
植物细胞工程基本技术： 植物体细胞杂交
植物的茎段为什么可以培育出完整的植株？
植物细胞的全能性
植物的茎段是怎样培育成一株完整的植株？
菊花花瓣培育 出的菊花
植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等， 培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件， 诱导其形成完整植株的技术。
②作物脱毒 a.作物病毒积累
马铃薯 草莓
香蕉
病毒在作物 体内积累
作物产量降低 品质变差
无性 感染的病毒很 繁殖 容易传给后代
b.脱毒方法
取顶端分生区（如茎尖、根尖：病毒极少，甚至无毒）进行植 物组织培养，获得脱毒苗。
c.优点 明显提高农作物的产量和品质
考点一 植物细胞工程
4、植物细胞工程的应用-植物新品质的培育
考点一 植物细胞工程 (2019年高考-新课标Ⅲ卷)培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管 苗的过程如图所示。
（4）步骤⑥要进行照光培养，其作用是 ___诱__导__叶__绿__素__的__形__成__，__使__试__管__苗__能__够__进__行__光__合__作__用_________。 （5）经组织培养得到的植株，一般可保持原品种的__遗__传__特__性____， 这种繁殖方式属于___无__性_______繁殖。
直接获取困难 含量低、从植物组织提取会大量破坏植物资源 化学合成困难 有些产物不能或难以通过化学合成途径得到
细胞产物的工厂化生产 利用植物细胞培养来获得目标产物
考点一 植物细胞工程 4、植物细胞工程的应用-细胞产物的工厂化生产
②植物细胞培养(细胞产物工厂化生产) 在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。
人教版高中生物复习课件：动物细胞工程(共16张PPT)
❖ 2、（2007天津理综）ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ用细胞工程方法,以SARS病毒核衣壳蛋
白为抗原制备出单克隆抗体.下列相关叙述正确的是(D )
A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为 单克隆抗体
❖ B.体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克 隆抗体
❖ C.将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEG诱导融合后的细 胞均为杂交瘤细胞
足够数量的、能产生 特定抗体的细胞群
体外培养 注射到小鼠腹腔
单克隆抗体
❖1、所有高尚教育的课程表里都不能没有各种形式的跳舞：用脚跳舞，用思想跳舞，用言语跳舞，不用说，还需用笔跳舞。 ❖2、一切真理要由学生自己获得，或由他们重新发现，至少由他们重建。 ❖3、教育始于母亲膝下，孩童耳听一言一语，均影响其性格的形成。 ❖4、好的教师是让学生发现真理，而不只是传授知识。 ❖5、数学教学要“淡化形式，注重实质.
问题
展示小组 展示形式
原因、概念 G6
板书
特点
G7
板书
制备过程 G3及其他人 表演
展示要求：
①展示小组组长带领全组同学对展示同学进行帮扶指导， 使展示能体现全组的最高智慧。
②书面展示字迹要工整、书写规范，还要用彩笔归纳方法
③非展示同学继续讨论，做好补充、质疑（可获得双倍加 分）的准备。如果你有新发现或新感受请到黑板上的自由 展示区来展示
问题
原因、概念
原理
制备过程
展示小组 G6
G7 G3
展示形式
板书 板书 表演
评价小组 G4
G2 G1
评价要求：
1、面向全体、声音洪亮，吐字清晰。
2、先打分后评价，若未得满分，红笔画出错误地方，说明扣分原因
动物细胞工程高三一轮复习(超好)PPT课件
原因是__卵_母__细__胞_的__细_胞__质__中_的__遗__传_物__质_会__对__克_隆__动_物__的__性_状__产__生_影__响____。
(4)与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了
______已__经_分__化__的_动__物_. _体_细___胞__核___具_有__全_能__性_______________核__移植技10术
妙学妙记
1、制备过程的 “122” 一融合，二筛选，二培养
2、单克隆抗体的优点 可、特、灵
杂交瘤细胞 能产生特异性抗体
(1)优点：特异性强、 灵敏度高，可大量制备。
.
12
问题强化：
1）、本过程利用了哪些原理？ 免疫原理，动物细胞融合和动物细胞培养原理
2）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 继承了双亲细胞的遗传物质，能无限增殖又能分泌特异性抗体。
(1)在制备抗HSVⅠ的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的HSVⅠ蛋白， 一段时间后，若小鼠血清中抗_____H_S__V_Ⅰ__蛋的白抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产 生了_____体__液反免应疫，再从小鼠的______脾_中脏获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠 的________骨细髓胞瘤融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细 胞具有的特点是_________无__限__增__殖_且__产__生_。特异性抗体
易错点1 动物细胞培养时，可使。
胰蛋白酶为7.2～7.8，而动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4。
易错点2 动物细胞培养液中加入5%CO2的目的是维持气体平衡或用于呼吸。
目的是“维持培养液的pH”。
易错点3 选择MⅡ末期的卵母细胞作核移植的受体细胞。
高三生物一轮复习课件动物细胞工程
无菌、 ①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理
无毒
②在无菌环境下进行操作
环境
③定期更换_培__养__液__，以便清除代谢物
温度、pH ①温度：哺乳动物细胞多以_3__6_.5__±_0_._5__℃__为宜
和渗透压 ②pH：多数动物细胞生存的适宜pH为__7_.2__～__7_.4_
还需要考虑渗透压
气体环境
需贴附于基质表面
2、过程
取动物组织
制成细胞悬液 转入培养液进行
原代培养
放入CO2培养箱 中培养
分瓶后的细胞培养 传代培养
悬浮生长类：直接用离心法收集
放入CO2 培养箱中培养
贴壁生长类：重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用
离心法收集。将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养。
基础过手
P45思考题：植物组织培养和动物细胞培养的比较
制备单克隆抗体
基础过手—利用细胞融合定位
已知人的体细胞和小鼠的体细胞(2N=40) 杂交(融合)后，杂种细胞在有丝分 裂过程中，人的染色体逐渐地丢失，最后仅保留少数几条。由于人染色体的 丢失是随机的，因此不同的杂种细胞会保留不同的人染色体。 举例：测定不同的杂种细胞中人胸苷激酶的活性，结果见下表。由表分析： 人胸苷激酶基因位于__1__7__号染色体上。
实质：动物细胞培养是对体内细胞生长和繁殖的模拟
糖类、氨基
营养
酸、无机盐、
条件
维生素
动物细胞 培养所需 的基本条
件
无菌、无毒的环境 其他 适 宜 的 温度 、 pH和 条件 渗透压
适宜的气体环境
一、动物细胞培养
1、条件
营养
①无机物：无机盐等 严格配置而成的合成培养基+血清等天然成分 ②有机物：糖类、氨基酸、维生素、_血__清__等
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易 难
.
学生活动：课本P48图，完成学案填空
3．体细胞核移植的过程
选取10代以内的 细胞，因为：
一__般__能__保__持__正_常__ 的__二__倍__体__核__型___
_。
重组细胞 重组胚胎
.
阅读题目 圈出关键词 分析考点
1.(2016·全国课标卷Ⅱ，40)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动
原因是__卵_母__细__胞_的__细_胞__质__中_的__遗__传_物__质_会__对__克_隆__动__物_的__性_状__产__生_影__响____。 (4)与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了
______已__经_分__化__的_动__物__体_细___胞__核__._具_有__全__能_性_______________核__移植技术
妙学妙记
1、制备过程的 “122” 一融合，二筛选，二培养
2、单克隆抗体的优点 可、特、灵
杂交瘤细胞 能产生特异性抗体
(1)优点：特异性强、 灵敏度高，可大量制备。
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问题强化：
1）、本过程利用了哪些原理？ 免疫原理，动物细胞融合和动物细胞培养原理
2）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 继承了双亲细胞的遗传物质，能无限增殖又能分泌特异性抗体。
(1)原代培养和传代培养的分界点是哪个？
B点之前的培养称为原代培养，之后的培养称为传代培养。
(2)AB段和DE段繁殖速度缓慢的原因是什么？
发生了接触抑制。
癌细胞
(3)E点后细胞大多数具有异倍体核型，这样的细胞有什么特点？
E点后的细胞属于细胞系，能无限增殖。
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[例1] (浙江高考)实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基
（5%）
2015江苏， 3,2分
2014全国Ⅰ， 2014浙江，
40,15分
3,6分
2013浙江，
6,6分
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一、过程
教材 P44-45
单个细胞
细胞悬液
考点一.动物细胞培养 2次胰蛋白酶
原代培养
①先用_胰__蛋 __白 __酶 __等处理贴满瓶壁的细胞，
50代后
传传代代培培养养②1再_0_～ 分__瓶_5_0继_代续左培右养时，细胞增殖缓慢，甚至停止 细胞癌变
楚的成分
(3)温度和
温度：3_6_._5_±__0_.5_℃__ pHpH：7_._2_～__7_.4__
(4)气体环境OCO2：2：__细维__胞持__代___培谢 ____养__所_液_必_的_需_p_H的___
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1.分析命题热图，明确答题要点 阅读题目 圈出关键词 分析考点
如图，为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线，图中B、E两点表 示经筛选、分装后继续培养。据图分析：
考点三、动物细胞融合与单克隆抗体的制备
1.动物细胞融合 (1)原理：细胞膜的流动_性_ 。 (2)融合方法：聚乙二醇(PEG)、灭活的病__毒_ 、电激等。 (3)意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成 为 可 能 ， 也为制造_单__克__隆__抗__体_开辟了新途径。
抗体
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2.单克隆抗体 (1)制备过程
本过程如下图所示。下列叙述错误的是
(C )
实验 小鼠
―甲―→
皮肤 组织
―乙―→
皮肤 细胞
―丙―→
培养 细胞1
―― 丁→
培养 细胞2
A．甲过程需要对实验小鼠进行消毒 条件
B．乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化
C．丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型
培养过程过程中
D．丁过程得到的细胞具有异质性
细胞变化
阅读题目
3）第、1次两-次-筛--选-杂目交的瘤是细什胞么（？多种）。 第2次-----能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
灭活的病毒能使细胞膜打开，细胞发生融合，不灭 4活）的、话为会什感么染细细胞胞融，合而过不程能中诱使导用细病胞毒融需合要。灭活？不灭活行吗？
③部分细胞_核__型 ___发生改变，获得不死性，能无
限增殖
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醒特
①动物细胞培养原理：___细__胞__增_殖____。其过程所用培养基一般是
____液_培体 养基。
别
②动物细胞培养时选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养，因 为__分__化_程__度__低_，__增__殖_能__力__强_，__更__易_于. 培养。
欢迎大家莅临指导
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动物细胞工程
许玉娟 2018.1.10
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考试大纲
考点
2016全国 2014全国 自主命题 地区
1.动物细胞 动物细胞培 培养与体细 养与体细胞 2016全国Ⅱ， 胞克隆。Ⅰ 克隆（15%） 40,15分
2.细胞融合
与 单克隆抗 体。Ⅱ
3.生物技术 中的伦理问
题。 Ⅰ
动物细胞融 合与单克隆 抗体的制备。
保证细胞内有害代谢产物的及时排出。
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（3）．培养条件 (1)无菌、无毒的环境：①对培__养___液__和所有_培__养__用 ___具__进行无菌 处理。②加入抗生素。③定期更换培养液。
无机物：无机盐、_微__量__元_素___等 (2)营养有_动__机物__物血__：清__糖、__、血__氨浆__基：酸补、充促培生养长液因中子没有完全搞清
③动物细胞培养过程中两次用到____胰__蛋__白_酶___，第一次的作用是
___将__剪_碎__的__组_织__分__散_成__单_；个细第胞二次是_____将__贴__壁_细__胞__从_瓶__壁，上目分的离下是来避
提 免动物细胞的接触抑制。
④将动物细胞分散成单个细胞培养的原因：
保证细胞所需要的营养供应。
物(二倍体)的流程。回答下列问题：
பைடு நூலகம்供体 性别
XX或XY
(1)图中 A表示正常细胞核显，微染操色作体去数核法为 2 n，则其性选染修三色体P4的9 组成可为
________。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适供当体核 (2时)经因期过此再多，进次选行传材，代时去后必核，须时供关常体注采细传用胞代__中次___数遗____。传____物___质____（__核__的_型_方_）_法__。的稳定性会降来低源。 卵母 (3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其
圈出关键词
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分析考点
考点二、动物体细胞核移植技术 和克隆动物
1．动物核移植概念 (1)供体：动物一个细胞的细__胞__核___。 结
果
(2)受体：去掉细胞核的卵__母__细__胞____。
(3)结果：形成重组胚胎，发育成动__物__个__体__。
2．类型胚 _体__胎细__细胞__胞核__核移__移植__植_