浙科版选修3 基因工程PPT幻灯片
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基因工程
在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和 “拼接”,从而对生物的基因进行改造和重新组合,然 后导入受体细胞内,使重组基因在受体细胞内表达,产 生出人类所需要的基因产物。
核 心: 构建重组DNA分子 操作水平: 分子水平 技术原理: 基因重组 技术优点: 定向改造 工 具: 限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体
(2)切割完成后,采用 DNA连接酶 酶将运载体 与该抗病基因连接,连接后得到的DNA分子称 为 重组DNA分子。
3、(运)载体—“基因的运输工具” 质粒
①存在:细菌和酵母菌细胞 质中的小型环状DNA分子
②本质: ③特点:
限制性核酸内切酶的种类
EcoR.I 限制性核酸内切酶
粘性末端
粘性末端
DNA酶
断裂磷酸二酯 键,将DNA水解成 单个脱氧核苷酸。
对象
两个DNA片段
单个核苷酸 加到已有的核
限制性核酸内切酶
酸片段上
断裂磷酸二酯
键,将DNA切割成
模板 无
以一条DNA链 片段。
为模板
3、(运)载体—“基因的运输工具”
作用:①与目的基因相连接; ②将目的基因导入受体细胞
作为运载体的必备条件: ➢ 能够在宿主细胞中复制并稳定地保存,而对宿主细胞的
【习题】 农业科技工作者在烟草中找到了一抗
病基因,现在采用基因工程技术将该基因转入棉
花,培育抗病棉花品系。请回答下列问题:
(1)要使运载体与该抗病基因连接,首先应使用
限_制__性__内__切__酶_进行切割。假如运载体被切割后,得
到的分子末端序列为
,则能与该运载体
连接的抗病基因分子末端是( A )
生物B基因片段
……GAATTC…… ……CTTAAG……
EcoRⅠ酶切
……G AATTC…… ……CTTAA G……
……G AATTC…… ……CTTAA G……
……GAATTC…… ……CTTAAG……
不同来源的DNA片段混合
……GAATTC…… ……CTTAAG……
将不同种来源的DNA片段连接起来
资料
苏云金芽孢杆菌 毒蛋白
棉铃虫中毒死亡
棉铃虫
理论基础一:DNA是遗传物质
a、肺炎双球菌转化实验 b、噬菌体侵染细菌实验
三个实验图片
理论基础二:DNA的双螺旋结构
1953年,沃森和克 里克发现了DNA双螺旋 的结构,开启了分子生 物学时代,使遗传的研 究深入到分子层次。
生物A基因片段
……GAATTC…… ……CTTAAG……
生存没有影响。 ➢ 具有多种限制核酸内切酶切点,以便与目的基因连接。 ➢ 具有某些标记基因,便于进行检测和筛选。
常用的载体: 质粒 、λ噬菌体、动植物病毒
基因工程的诞生
1972年,美国斯坦福大学的科学家得到 了猿猴病毒SV40DNA和噬菌体DNA连接 物,这是第一个人工DNA重组产物。
1973年,斯坦福大学的科学家进一步实 现了细菌之间的性状转移,这是基于工 程发展史上第一个成功的基因克隆实验, 标志着基因工程的诞生。
可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,
即恢复被限制性核酸内切酶切开的两个DNA片段之间的 磷酸二酯键
2、DNA连接酶—“基因的针线”
作用:把两个DNA片段的粘性末端缝合起来。 形成的键:脱氧核糖与磷酸之间的磷酸二酯键。
P来自百度文库
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P
CG
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GC
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思考:DNA连接酶与DNA聚合酶一样吗?
形成磷酸二酯键