果蝇单因子杂交实验.ppt
实验八一__果蝇的单因子实验
实验一果蝇的单因子实验一：目的1. 理解分离定律的原理；2. 掌握果蝇的杂交技术；3记录交配结果和掌握统计处理的方法。
二．原理一对基因在杂合状态中保持相对的独立性，而在配子形成时，又按原样分离到不同的配子中去。
理论上配子分离比是1:1，子二代基因型分离比是1:2:1，若显性完全，子二代表型分离比是3:1。
这就是分离定律。
孟德尔从豌豆中选取了许多稳定的，易于观察的性状观察分析。
所谓的性状是生物体所表现的形态特征和生理特性的总称。
孟德尔在研究豌豆等植物的性状遗传时，把植株所表现的性状总体区分为各个单位作为研究对象，这些被区分开的每一个具体性状称为单位性状（unit character）.如豌豆的花色，种子形状，子叶颜色，豆荚形状，未成熟豆荚的颜色，花序着生部位和株高等性状。
不同个体在单位性状上常有着各种不同的表现，如豌豆有红花和白花，种子形状有圆粒和皱粒，子叶颜色有黄色和绿色等。
这种同一单位性状在不同个体间所表现出来的相对差异，称为相对性状。
果蝇的长翅（+）和残翅（vg）是一对相对性状。
它们是位于常染色体上的一对等位基因。
野生型果蝇的双翅是长翅，（+/+）翅长过尾部。
残翅果蝇（vg/vg）的双翅几乎没有，只有少量残痕，无飞翔能力。
vg的座位是第二染色体67.0。
长翅对残翅显性完全。
交配方式：用长翅果蝇与残翅果蝇交配，得到子一代都是长翅，子一代雌雄个体间相互交配，子二代产生性状分离，出现两种表型，呈3:1之比。
现以长翅雌蝇与残翅雄蝇交配为例P：长翅（♀）×残翅（♂）+/+↓vg/vgF1：长翅＋/vg↓♀.♂相互交配F2：长翅残翅(1 +/+,2＋/vg) (1 vg/vg)三．材料与方法材料：黑腹果蝇( Drosophila melanogaster ) 的两个品系：野生型：长翅果蝇(+ ／+)突变型：残翅果蝇(vg ／vg)野生型果蝇的双翅为长翅(+ ／+) ，翅长超过尾部。
残翅果蝇(vg ／，g) 的双翅几乎没有，只留少量残痕，无飞翔能力。
果蝇的单因子实验(分析“果蝇”文档)共8张PPT
P性状长6特.翅征+：+野7×生~型8残天果翅蝇后v的g 双v，g翅是移长去翅，F（1亲+/+）本翅。长过再尾部过。 4~5天，F2成蝇出现，开始观察。连续统
↓ 材料
黑腹计果蝇7（~D8ro天sop。hilam被e l统ano计gast过er）的品系果、长蝇翅果放蝇（到++死）、蝇残翅盛果蝇留（v器gvg）中。。
统计检验 用χ2检验法对试验结果进行统计检验，验证分离定律。
这理里论3雌 上.蝇配培无子须分养处离女比和蝇是，1去:1在，亲2子5℃二本温代箱基中杂因培型交养分（离瓶反比交是放同1:样2到:1做，2一若5瓶显℃）性。温完全箱，子中二代培表养型分。离比反是3交:1。与正交方法一样。7~8 F2 1 + +天: 2后+ v，g : 1倒vg去vg(长亲:残本=3:果1) 蝇。
果蝇的单因子实验
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实验原理
实验用品 实验目的 实验步骤 作业
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实验目的
理解分离定律的原理，掌握果蝇的杂交技 术和记录交配结果和掌握统计处理方法。
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实验原理
一对基因在杂合状态中保持相对的独立性，而在配子形成时， P7~8长天翅后，+ +移去× F1残又亲翅本按v。g v原g 样分离到不同的配子中去。理论上配子分离比是1:1， 7~8天后，移去F1子亲本二。 代基因型分离比是1:2:1，若显性完全，子二代表型分离
↓
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❖ P 长翅 + + × 残翅 vg vg ↓ 麻醉接种 正常羽♀×残翅♂残翅♀×正常羽♂ 贴好标签，标签上注明日期、杂交组合和实验者姓名。
遗传学实验报告——果蝇杂交实验
遗传学实验报告果蝇双因子杂交、伴性遗传杂交和三点测交实验目的：学习果蝇杂交方法、遗传学数据统计处理方法；实验验证自由组合规律、伴性遗传规律；通过三点测交学习遗传作图。
实验原理: 1. 双因子杂交本实验使用18号野生型果蝇和14号纯合黑檀体、残翅果蝇进行杂交，其中黑檀体对灰体为隐性，残翅对长翅为隐性，两对基因位于非同源染色体上。
正交 反交18♀×14♂ 14♀ × 18♂双因子杂交遗传图解 2. 伴性遗传杂交本实验使用18号野生型果蝇与纯合白眼果蝇杂交，其中白眼相对于红眼是隐性性状，白眼基因位于X 染色体上。
正交 反交18♀ × w ♂ w ♀ × 18♂伴性遗传图解F 1⊗F 2: 灰长：灰残：黑长：黑残=9：3：3：1P灰长黑残F1⊗ F 2: 灰长：灰残：黑长：黑残=9：3：3：1 灰长P 黑残P X +X + X w YP X w X w X+YF 1: X +X w X +YF 1: X +X w Xw Y⊗ ⊗F 2: X + X + X +X + Y X w Y ♀红眼 ♀红眼 ♂红眼 ♂白眼 1 : 1 : 1 : 1 F 2: X +X w X w X X + Y X w Y ♀红眼 ♀白眼 ♂红眼 ♂白眼 1 : 1 : 1 : 1♀红眼♂白眼 ♂白眼♀红眼3. 三点测交本实验使用6号纯合白眼、卷刚毛、小翅果蝇与18号野生型果蝇杂交，获得F 1代后再自由交配即可获得具有8种表型的测交F 2代。
白眼、卷刚毛、小翅均为X 染色体上的隐性性状。
P 6号♀（wsnm/wsnm ） × 18号♂(+++/Y)白卷小红直实验材料：18号野生型果蝇 ，14号纯合黑檀体、残翅果蝇，白眼果蝇，6号纯合白眼、卷刚毛、小翅果蝇；麻醉瓶、酒精灯、玻璃板、毛笔、培养管、酒精棉球、乙醚、解剖镜 实验步骤：1. 杂交前提前将装有不同表型果蝇培养管中的成年果蝇全部放出，确保8-10小时后培养管中的雌果蝇都是刚刚孵化的处女蝇。
单因子杂交实验
单因⼦杂交实验单因⼦杂交实验⼀、实验⽬的通过野⽣型果蝇与⿊体果蝇的杂交（正交和反交）来观察其所得的F1的性状和F2中两种果蝇所占的⽐例。
⼆、实验原理纯种的野⽣型果蝇与纯种的⿊体果蝇杂交，由于野⽣型果蝇的性状全部为显性，所以杂交所得的F1全部表现为野⽣型的性状。
再将F1⾃交，所得的F2中显性⽐隐性的⽐例应该为3:1故野⽣型：⿊体为3:1。
三、实验器材及动物经过消毒灭菌已经装⼊培养基的果蝇培养管若⼲只。
纯种的野⽣型雌雄果蝇和纯种的⿊体雌雄果蝇若⼲只。
⽑笔，⿇醉瓶，⼄醚，镊⼦，恒温培养箱。
四、实验步骤1、从⽼师那⾥分别取⼏只纯种的野⽣型果蝇和⿊体果蝇（保证有雌有雄），分别将其装⼊不同的培养瓶后贴上标签。
放⼊恒温培养箱培养。
2、⼀星期以后，从培养箱中拿出瓶⼦，观察到培养瓶中有⾜够多的蛹后⽤⿇醉瓶加⼊⼄醚将其亲本除去。
3、将除了亲本的两个瓶⼦和两个装了培养基的空瓶⼦带回寝室收集野⽣型和⿊体的处⼥蝇，收集到后贴上标签。
（处⼥蝇必须在果蝇出⽣的12⼩时之内收集，判断果蝇的雌雄是背部有5条杆的是雌性，有3条杆的为雄性且其最后⼀条⿊⾊很粗）4、⽤⿇醉瓶将源培养瓶中的果蝇全部⿇晕，从中找出雄果蝇。
将⿊体雄果蝇放⼊野⽣型处⼥蝇瓶中，将野⽣型雄果蝇放⼊⿊体处⼥蝇的瓶中。
贴好标签，放⼊培养箱。
5、⼀周以后，将培养瓶从培养箱中取出，观察其中有⾜够多的蛹后，⽤⿇醉瓶加⼄醚将亲本处死。
再将培养瓶放⼊培养箱中继续培养。
6、⼀周以后，将培养瓶再次从培养箱中拿出，将⾜够多的F1转移到⼀个新的培养瓶中，贴上标签，放回培养箱中继续培养。
7、⼀周以后，将培养瓶再次从培养箱中取出，观察到有⾜够多的蛹以后，⽤⿇醉瓶加⼊⼄醚，将F1处死，在标签上注明F1已清后，将培养瓶放回去继续培养。
将处死的F1制⽚放在显微镜下观察其性状。
8、⼀周以后，将培养瓶从培养箱中取出，将所有的果蝇处死后，分辨出果蝇的雌雄以及是⿊体或者野⽣型，并数出每⼀种的个数。
9、如果⼀次数的所有果蝇不超过100个，则将培养瓶继续培养⼀周后，再数出各种果蝇的个数，与上⼀次所得相加。
果蝇杂交实验
果蝇杂交实验-——验证分离与自由组合定律张琪同组者：吴超、李明洋 09级生物工程专业 200900140173一、实验原理果蝇是遗传实验的常用材料，本次试验利用果蝇验证孟德尔分离定律（law of segregation）与自由组合定律（the Law of Independent Assortment）。
分离与自由组合定律是遗传学的基本定律，分离定律是指在生物的体细胞中，控制同一性状的遗传因子成对存在，不相融合；在形成配子时，成对的遗传因子发生分离，分离后的遗传因子分别进入不同的配子中，随配子遗传给后代。
自由组合定律（the Law of Independent Assortment）是指非同源染色体上的决定不同对性状的基因在形成配子时等位基因分离，不同对基因（非等位基因）之间互不干扰，其实质是F1产生配子时，等位基因分离，非同源染色体上的非等位基因自由组合。
分离定律及自由组合定律可以通过子一代、子二代的表现型和数量而加以验证。
分离定律表现在两个具有相对性状的纯种个体进行杂交，F1代全部表现显性个体的性状，F1代自交，F2代出现隐性个体的性状。
并且，在理论上，F2代中，显性个体与隐性个体的比例为3:1；自由组合定律表现在亲本杂交得到F1代杂合体，再由F1代个体自交得到F2代，预计应有四种表型，其比例应接近9：3：3：1。
果蝇的突变性状较多且多为形态变异，并且果蝇的染色体较少研究也较为透彻，在验证自由组合定律时可以选取14号果蝇（残翅vg，檀黑体e；vg基因和e基因分别位于第2、3号染色体上）与18号野生型果蝇杂交，以便于防止连锁产生干扰。
另外果蝇的生长周期较为适宜，在其最适生长温度25℃条件下，一个生活周期大约12-14天。
成虫羽化12小时后处女蝇开始交配，7-8小时内取样。
时间上较为充裕而又不会太长。
杂交实验中，子代预期的遗传比率可以根据棋盘法或分枝法正确的推算，子代中基因型和表型的各种组合的概率也可根据二项式分布简单地求得。
遗传学实验实验四果蝇的单因子试验
03 02
推断果蝇的基因型
根据实验数据，推断 出果蝇的基因型。
确定单因子对果蝇表 型的影响，以及其在 遗传中的作用。
利用遗传规律，分析 不同基因型果蝇之间 的组合关系。
验证单因子试验的可靠性
01
通过重复实验，验证单因子试验的可靠性。
02
比较不同实验结果的一致性和差异性，分析可能的 影响因素。
进行实验
按照实验方案进行单因子试验， 观察并记录果蝇在不同条件下的 生长和繁殖情况。
数据记录
详细记录每组果蝇的数量、生长 状况、繁殖情况等数据，以便后 续的数据分析和处理。
04
结果分析
分析实验数据
分析数据，确定表现型与 基因型之间的关系。
统计每个杂交组合中不同 表现型的果蝇数量。
观察并记录果蝇在不同杂 交组合下的表现型。
实验所需的果蝇品系
野生型果蝇
标记品系果蝇
作为实验对照，用于观察突变型果蝇 的表型差异。
用于追踪和鉴定特定基因型的果蝇。
突变型果蝇
具有特定遗传突变特征的果蝇，用于 单因子试验。
03
实验步骤
准备果蝇培养环境
01
02
03
准备果蝇培养瓶
选择适当大小的玻璃培养 瓶，清洗干净后晾干，加 入适量培养基。
控制培养环境
选择实验所需的果蝇品系
选择品系
根据实验目的，选择具有不同遗传背 景和特征的果蝇品系，以便更好地观 察和比较实验结果。
遗传标记
利用已知的遗传标记，确定果蝇品系 的基因型，以便在实验中对果蝇进行 准确的分类和鉴定。
进行单因子试验并记录数据
设计实验
根据实验目的和果蝇品系的特征， 设计单因子试验方案，确定实验 组和对照组。
果蝇遗传性状系列杂交实验ppt
5. 每个杂交组合放果蝇 2－3对，用毛笔把果蝇扫进 试管，试管要平放，待蝇醒后， 方能竖起，避免果蝇粘在培养 基上被闷死，杂交组合配 好后，放回培养箱。
6. 培养箱温度保持在25℃， 不要随意更改或调整其他旋 钮，以免影响整个实验。
实验结果的观察和统计
1.把各杂交组合的果蝇成虫分别倒出试管，
注意事项
1.果蝇要适度麻醉，挑蝇 用毛笔，忌用镊子和其他工 具，以免影响果蝇生长繁育
2. 挑处女蝇时， 每次只挑12小时内羽化成 虫，超过12小时的成虫已逐渐 有交配能力,必须一只不留地倒 出处死,才能进行第 二次挑选
3. 刚羽化的果蝇色淡白，体软绵， 难辨♀♂，务必小心区别 4. 使用毛笔和瓷板，要用酒精棉球 消毒，同时必须凉干才能使用。
3.按各杂交组合需选的果蝇品系，每瓶放入3 －5对，塞好瓶塞，贴好标签，置于25℃恒 温培养箱中培养。 4.过6－7天，可见到F1幼虫出现，即除去亲 本成虫（成虫一定要除干净）。 5.再过4－5天，观察各杂交组合F1成蝇的性 状，观察时要注意所有用具都要消毒（用 于培养F2），并做好记录。 6.分别把各杂交组合F1 果蝇适度麻醉，然后 选3－5对移入新的培养基中继续培养（无 需挑处女蝇）。
并逐个组合麻醉，观察性状，做好记录。 2.样本自由度为n-1
4.根据实际观察数计算理论值。 5.计算2 值，结果必须与显著平准作比较 如：p＞0.05 无显著差异 p≦0.05 差异显著 p≦0.01 差异极显著
6.计算过程各数值要求比2 表所给数值 的小数点后多取1位，以方便比较。
作业
• 根据实验经过和结果写1份实验 报告，要求结合遗传学有关的 内容进行分析和讨论。
果蝇遗传系列杂交实验
系列杂交实验内容
遗传学实验四：单因子杂交
实验四单因子分离规律验证王媛媛111140084 生命科学学院拔尖班一、实验目的1、熟悉以果蝇为材料进行遗传学杂交实验的基本方法；2、验证遗传的基本规律——分离规律。
二、预备知识遗传是自然界极其复杂的生命现象，只有通过少数有相对性状差异的类型之间进行杂交，并分析这些性状在亲本和杂种子代中的表现，才易于在复杂的遗传现象中找到遗传的基本规律。
分离规律、自由组合规律、连锁规律等都是采用这种杂交实验的方法发现的。
在果蝇杂交中，有相对性状的品系之间进行杂交，杂种F1表现为显性，杂种F1形成配子时，带有显隐杂合等位基因的一对同源染色体对等分离，等位基因也随着分离，产生两种不同配子，因此，不论显性性状还是隐性性状都将在F2中按一定的比例在不同的个体上重新出现。
杂交方法的要点如下：1）进行杂交的亲本必须是纯种，自交不产生分离，这样的个体才能作为杂交的亲本。
2）必须防止意外的杂交，雌蝇应选用孵化后12小时内的处女蝇。
3）正确记录杂交子代每种类型的个体数，并且尽可能获得较大的杂交群体，以正确可靠地反映出遗传规律。
4）保持相对稳定的环境条件，使杂交性状的表现不致因不同的条件影响而改变。
三、实验材料材料：野生型黑腹果蝇、黑体果蝇器材：解剖镜、毛笔、麻醉瓶、白瓷板、标签、吸水纸、培养瓶（4瓶/人）药品：乙醚、75%乙醇四、实验步骤1、亲本果蝇的培养。
2、处女蝇的收集：清除成虫后10小时内进行收集，收集的处女蝇分品系单独培养，如一次收集数量不够，可再作第二、第三次收集。
3、选处女蝇分正交（++♀/bb♂）反交（bb♀/++♂）两个杂交组合，分别置于新鲜培养瓶中，每瓶5～6对，贴上标签，注明亲本类型，实验日期，姓名，学号等，然后置于22℃～25℃培养箱中培养。
4、一周后，清空亲本果蝇。
5、二周后，观察F1果蝇体色，看是否与预期结果相符。
6、取5-6对F1果蝇放入新鲜培养瓶中，每种组合放两瓶。
7、三周后，清空F1果蝇。
8、四周后，F2成蝇长出，统计各类果蝇数，2～3天后再统计一次，统计过的果蝇处死。
果蝇杂交实验
果蝇杂交实验【摘要】经典遗传学的三大遗传定律分别是：分离定律，自由组合定律和连锁与交换规律。
果蝇具有生活史短、繁殖率高、饲养简便等特点，是研究遗传学的好材料。
本次通过自行设计实验方案，观察后代中果蝇的各种性状，结合各种统计处理方法，从而证明这三大定律并对X染色体上的三对基因进行定位。
【引言】孟德尔定律是G.J.孟德尔根据豌豆杂交实验的结果提出的遗传学中最基本的定律，包括分离定律和独立分配定律。
孟德尔最早选用豌豆，根据从简单到复杂的原则，提出了分离定律和自由组合定律。
对之后遗传学的发展奠定了基础。
分离定律（law of segregation）是指在生物的体细胞中，控制同一性状的遗传因子成对存在，不相融合；在形成配子时，成对的遗传因子发生分离，分离后的遗传因子分别进入不同的配子中，随配子遗传给后代。
其表现在两个具有相对性状的纯种个体进行杂交，F1代全部表现显性个体的性状，F1代自交，F2代出现隐性个体的性状。
并且，在理论上，F2代中，显性个体与隐性个体的比例为3:1。
自由组合定律（the Law of Independent Assortment）是指非同源染色体上的决定不同对性状的基因在形成配子时等位基因分离，不同对基因（非等位基因）之间互不干扰，其实质是F1产生配子时，等位基因分离，非同源染色体上的非等位基因自由组合。
最初由孟德尔在做两对相对性状的杂交实验时发现，基因分离比为9:3:3:1。
独立组合位于不同染色体上的2个等位基因是独立传给子代的。
因此可在验证自由组合定律的同时，选取其中一组性状来验证分离定律。
用于杂交的2对等位基因必须位于不同染色体上，即不能连锁。
所以实验选取14号果蝇（残翅vg，檀黑体e；vg基因和e基因分别位于第2、3号染色体上）与18号野生型果蝇杂交，得到F1代杂合体，再由F1代个体自交得到F2代，预计应有野生型、残翅、檀黑体、残翅檀黑体四种表型，其比例应接近9：3：3：1。
果蝇的杂交
2—3天检查一次，并作记录，共检查3次，约40—100 只，检查后的果蝇移去处理。 (4)选取F1代果蝇3—5对移入新培养瓶中，进行兄妹交 配繁殖。(此时不一定用处女蝇，为什么?)
同时选F1代的处女蝇与隐性亲本的雄蝇(残翅型) 各3—5只，移入另一个新培养瓶中，进行测交实验。
(2)7—8天后移出亲本，并观察核对亲本的性状。
(3)待出现F2成蝇后，观察有关性状的表现及数量。以 后每隔两天统计记录一次，要求达到60—120只。 检查记录过的果蝇要及时移去处理。
(4)取F1雌雄蝇4—5对移入一个新培养瓶中，使其交配 繁殖。
(5)7—8天后移出F1雌雄蝇，待F2成蝇孵出后，每隔两天
两对性状的表现，忽视白眼、红眼性状的存在； 当做伴性遗传实验时，只看红眼、白眼这对性状的表现，
忽视残翅、长翅和个杂交组合，只需观察一个实 验，相对省时省事；还节省实验材料，解
决培养设备资源紧缺的问题。
作业：
一、实验分组进行，10人一组，两人做一个杂交组 合。每人要参加全部实验过程，但均有自己侧重负责的 内容，既要充分发挥个人的能力，又要实现同学间的互 补，培养团队精神。实验数据资源共享.组长负责安排、 检查和督促。
通过这一个实验同时进行上述3个实验的观察（各取所需）： 当做单因子杂交实验时，只看残翅和长翅这对性状的表
现，忽视白眼、红眼和黑檀体、灰体性状的存在； 当做双因子实验时，只看黑檀体、灰体和残翅、长翅这
两对性状的表现，忽视白眼、红眼性状的存在； 当做伴性遗传实验时，只看红眼、白眼这对性状的表现，
忽视残翅、长翅和黑檀体、灰体性状的存在。
选取具有非同一连锁群的两对相对性状的果蝇，如长 翅黑擅体与残翅灰身杂交，观察后代中这两对相对性 状的遗传表现，从而验证孟德尔自由组合规律。
果蝇的单因子杂交
实验步骤： 实验步骤：
1 选择处女蝇：放出并杀死培养瓶中的全部成 选择处女蝇： 然后羽化后未超过8小时的雌蝇即为处女蝇。 蝇，然后羽化后未超过8小时的雌蝇即为处女蝇。
2 杂交：野生型果蝇和白眼果蝇杂交，正反交 杂交：野生型果蝇和白眼果蝇杂交， 各做一瓶。23℃恒温培养。 各做一瓶。23℃恒温培养。 3 移走亲本：待F1幼虫出现即可放掉亲本。 移走亲本： 幼虫出现即可放掉亲本。 4 观察F1：观察F1的眼色、性别。 观察F 观察F 眼色、性别。 5 F1 互交 ： 在新培养瓶内 ， 正反交各放入 5~6 互交： 在新培养瓶内， 正反交各放入5 6 果蝇，培养。 对F1果蝇，培养。 6 移去 F1 ： 待 F2 幼虫出现即可放掉并处死 F1 果 移去F 幼虫出现即可放掉并处死F 蝇。 7 观察 F2 ： 观察 F2 的 眼色 、 性别 后处死 ， 连续 观察F 观察F 眼色、 性别后处死 后处死， 观察统计数据。 观察统计数据。 8 数据处理及统计分析：分析实验结果与预期 数据处理及统计分析： 理论的符合程度。 理论的符合程度。
实验用品： 实验用品：
用具：显微镜、双筒解剖镜、放大镜、镊子、 用具：显微镜、双筒解剖镜 、 放大镜 、 镊子、 麻醉瓶、白瓷板、毛笔、载玻片、盖玻片等。 麻醉瓶、白瓷板、毛笔、载玻片、盖玻片等。 药品：乙醚等。 药品：乙醚等。
实验步骤： 实验步骤：
1 选择处女蝇：收集突变型处女蝇（Why）。 选择处女蝇：收集突变型处女蝇（Why） 2 杂交 ： 野生型雄蝇和突变型雌果蝇杂交 4~6 杂交： 野生型雄蝇和突变型雌果蝇杂交4 6 23℃恒温培养。 对，23℃恒温培养。 3 移走亲本：待F1幼虫出现即可放掉亲本。 移走亲本： 幼虫出现即可放掉亲本。 4 观察F1：观察F1的形态。 观察F 观察F 的形态。 5 F1 互交 ： 在 2 瓶新培养瓶内 ， 各放入 5~8 对 F1 互交： 瓶新培养瓶内， 各放入5 8 果蝇，培养。 果蝇，培养。 6 移去 F1 ： 待 F2 幼虫出现即可放掉并处死 F1 果 移去F 幼虫出现即可放掉并处死F 蝇。