黄芩乙醇回流提取工艺研究_杨宏静

黄芩乙醇回流提取工艺研究

杨宏静

（重庆三峡医药高等专科学校，重庆404020）

［中图分类号］R282.710.2 ［文献标识码］A ［文章编号］1004-2814(2013)06-492-02

黄芩为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi 的干燥根［1］。黄芩味苦、性寒。归肺、胆、脾、大肠、小肠经，具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎的功效［2］。黄芩中主要含有黄酮类化合物，以黄芩苷为代表的黄酮类成分是黄芩抗菌、抗炎、解热的主要有效成分［3］。为了充分提取黄芩的有效成分，我们用单因素考察及正交试验设计，对黄芩的提取工艺进行了研究，确定了适合黄芩生产提取的工艺。

1 实验仪器与材料

仪器。回流提取装置、高效液相色谱仪（Agilent1100）、色谱柱：Waters Sunfire C184.6×150mm。

试剂与药品。黄芩药材（购于安国以岭中药饮片有限公司）、黄芩苷（批号110715-200815，购于中国药品生物制品检定所）、乙醇为医用级、甲醇为色谱纯、水为重蒸水。

2 方法与结果

2.1提取溶媒考察

因素水平：参考有关文献中黄芩的提取工艺研究［4，5］，选取水、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇为单因素考察水平，进行试验。

实验方法：取黄芩选净，称取15g，分别加入6倍量的溶剂，回流提取2次，每次1.5小时，提取液滤过，合并，定容至200mL量瓶中，备用。

黄芩苷含量测定方法：①对照品溶液的配制：取

黄芩苷对照品约10mg，精密称定，置250mL量瓶中，

加甲醇溶解并稀释至刻度，即得。②供试品溶液的制

备：各精密量取提取液2mL，置50mL量瓶中，加甲醇

稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL，置10mL量瓶中，

加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。③色谱条件：

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇－0.2%磷

酸溶液（45：55）为流动相，流速1mL/min；检测波长

280nm。④测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品

溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

实验结果见表1。

表1 黄芩提取溶媒考察结果

实验号因素水平黄芩苷含量（mg/g）1水67.52

250%乙醇84.35

360%乙醇87.62

470%乙醇85.64

580%乙醇67.30结论：由以上结果可知，60%乙醇作溶媒时，黄芩

苷含量高于水和其它浓度乙醇作溶媒时黄芩苷的含量，

故选择60%乙醇为提取溶媒。

2.2正交试验

正交设计：选取影响提取物收率的提取次数（A）、

提取时间（B）、加醇量（C）为考察因素，以黄芩苷的

［摘 要］ 目的：研究优选黄芩乙醇回流的提取工艺。方法：采用单因素考察及正交试验设计，以黄芩苷的含量为考察指标优选黄芩提取工艺。结果：黄芩提取工艺选择为加8倍量60%乙醇提取2次，第1次2h，第二次1.5h。结论：用此方法提取黄芩药材效率高、结果稳定。

［关键词］黄芩；黄芩苷；单因素考察；正交设计；提取工艺

［Abstract］ Objective：To study the best extraction process for Scutellariae Radix.Methods：Using single factor and orthogonal design to determine the content of baicalin as the index of evaluation.Results：The optimum condition for the extraction of Scutellariae Radix was adding 8 times of 60% alcohol，extracting for 2 hours first time and 1.5 hours second time，totally extracting 2 times.Conclusion：The optimum condition was efficient and stable.

［Key words］ Scutellariae Radix；Baicalin；Single factor；Orthogonal design；Extraction technology

含量为指标，选取如下水平进行试验，见表2。

表2 因素水平表因素水平A B C D 提取次数（次）提取时间（h）加醇量（相当于药材倍数）空白11161

22 1.5823

3

210

3

实验方法：取药材，净选干燥，粗碎，按处方配比，称取葛根15g，以60%乙醇为提取溶媒。在平行操作的条件下，按L9（3）4正交表，回流提取，提取液合并，滤过，减压回收乙醇，适量浓缩，转移至1000mL 量瓶中，放冷至室温，加60%乙醇稀释至刻度，摇匀，备用。

黄芩苷的含量测定方法：同上。实验结果见表3和表4。

表3 黄芩正交实验表

实验号列号结果

A（次）B（h）C（倍）D（空白）Yi（mg/g）

1

116162.9021 1.58277.4831210386.464218396.7252 1.5101101.696226298.38731102106.5483 1.563102.5893281102.10Ij 226.84266.16263.86266.69G=834.35CT=77441.61IIj 296.79281.75276.30282.40IIIj 311.22286.94294.69285.76Ij251456.3970884.1569622.1071123.56IIj288084.3079383.0676341.6979749.76IIIj296857.8982334.5686842.2081658.78Rj=Ij 2+Iij 2+IIIj 2236398.58232558.77232805.99232532.09Sj=Rj/3-CT

1357.9177.98160.3869.08

表4 方差分析

方差来源离均差平方和自由度均方

F 值

显著性A 1357.912678.9619.66*

B 77.98238.99 1.13

C 160.38280.19 2.32

D 69.08234.54 注：F 0.05（2，2）=19.00，F 0.01（2，2）=99.00。

结果：由表3可知，3个因素的影响大小顺序为提取次数大于加醇量大于提取时间。最佳工艺为A 3B 3C 3，即加10倍量60%乙醇提取3次，每次2h。表4中方差分析表明，A 因素对黄芩苷的含量有显著性影响（P ＜0.05），B 因素和C 因素对黄芩苷的含量均无显著性影响。A 因素中，随着提取次数的增加，黄芩苷的含量虽有不同程度的增加，但Ⅱ到Ⅲ增幅变小，为了缩短生产周期，采用提取2次。B 因素对黄芩苷的含量无显著性影响，考虑到浸提时溶媒对药材组织的浸润和渗透过程，故将提取时间选为第1次2h，第2次1.5h。C 因素对黄芩苷的含量亦无显著性影响，考虑到药材提取的吸收溶剂膨胀，因此将用量选定为8倍量。故经优选后确

定的工艺为A 2B （3，2）C 2，即加8倍量60%乙醇提取2次，第1次2h，第2次1.5h。2.3验证试验

取药材，净选干燥，粗碎，按处方配比，称取黄芩15g，以60%乙醇为提取溶媒，按最佳工艺A3B3C3组合条件和选定工艺A2B（3，2）C2的组合条件进行重复验证对比实验，测定黄芩苷的含量，测定结果见表5。

表5 验证试验结果

试验号试验条件黄芩苷含量（mg/g）平均含量（mg/g）

1A 3B 3C 3110.07108.162A 3B 3C 3107.723A 3B 3C 3106.684A 2B （3，2）C 2104.08102.965A 2B （3，2）C 2102.646

A 2

B （3，2）

C 2

102.15

由上表可见，以黄芩苷的含量为考察指标，最佳工艺A 3B 3C 3和选定工艺A 2B （3，2）C 2的差距均不大；但选定工艺省工节能，故选定A 2B （3，2）C 2为提取工艺，即药材加8倍量60%乙醇提取提取2次，第1次2h，第2次1.5h。3 讨 论

黄芩中所含黄酮类成分为其主要有效成分，此类成分易溶于乙醇。通过单因素提取溶媒的考察，得出此类成分在60%乙醇中溶解度较大。用正交实验设计，优选了影响提取物收率的3个因素，得出最佳提取工艺，结合实际生产，对各影响因素进行了优化，最终确定了黄芩的提取工艺为加8倍量60%乙醇提取2次，第1次提取2h，第2次提取1.5h。

［参考文献］

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）

（2010版）［M］.北京：中国医药科技出版社，2010：283.

［2］高学敏.中药学［M］.北京：人民卫生出版社，

1998：118.

［3］李欣，魏朔南.黄芩的生物学研究进展［J］.中国

野生植物资源，2006，25（6）：11-15.

［4］丁芳林，张雯杰，陈波，等.正交法优化超声醇提

黄芩活性成分研究［J］.湖南中医药大学学报，2008，28（3）：14-16.

［5］宋承富，叶萍.黄芩提取物工艺研究［J］.中华中

医药学刊，2011，29（3）：641-644.

［收稿日期］2013-02-16