层析技术的应用
层析技术简单介绍及其应用
层析技术简单介绍及其应用层析技术(Tomography)是一种通过对物体进行多角度投影扫描来重建其内部结构的成像技术。
它的基本原理是使用射线或波束从不同的方向通过物体,然后通过对每个方向的投影进行综合分析来重建物体的内部结构。
层析技术可以用于各种领域,包括医学、工程、地质学和材料科学等。
在医学领域,层析技术常用于进行X射线断层扫描(CT扫描)。
CT扫描是一种无创且精确的成像方法,可以用来检测和诊断各种疾病和病变,如肿瘤、骨折和血管病变等。
在CT扫描中,X射线通过患者的身体,然后使用感应器测量X射线通过后的强度。
通过多个不同的角度进行扫描和测量,计算机可以根据这些数据生成患者身体的三维图像,从而帮助医生做出准确的诊断和治疗计划。
层析技术在工程领域也有广泛的应用。
例如,它可以用于检测和识别材料的缺陷,如焊接缺陷和裂纹等。
通过将材料放置在扫描仪中并进行多角度扫描,工程师可以获得材料的内部结构信息,从而判断其质量和可靠性。
此外,层析技术还可以用于工艺过程的监测和优化,如石油勘探和制造业中的流体流动和混合过程等。
地质学是另一个应用层析技术的领域。
地球内部的结构和成分对于理解地球演化和资源勘探具有重要意义。
通过射线或波束的投射和测量,地球科学家可以重建地球内部的密度分布和物质成分,在不必进行物质采样的情况下了解地球深处的情况。
这对于勘探石油、天然气和矿产资源等具有重要价值。
总结来说,层析技术是一种通过多角度投影扫描来重建物体内部结构的成像技术。
它在医学、工程、地质学和材料科学等领域都有重要的应用。
通过层析技术,我们可以获得物体的三维结构信息,帮助医生进行疾病的诊断和治疗,工程师检测材料的质量和可靠性,地球科学家了解地球内部结构和成分。
层析技术原理
层析技术原理
层析技术是一种分离和分析混合物中成分的方法,它基于不同化学
物质在固定相(如硅胶、活性炭等)上的吸附特性。
该技术可以用于
食品、医药、环境监测等领域。
原理:1. 吸附:样品通过柱子或板块时,其中的化学物质会被固定相表面吸附。
2. 洗脱:洗脱剂流经固定
相时,将已吸附的化学物质从固定相表面解除,并带走它们。
3. 分离:由于不同化学物质在固定相上的亲和力不同,所以它们会被洗脱剂按
照一定顺序逐个排出来。
4. 检测:检测器对每个组分进行检测并记录
其信号强度。
根据峰高或峰面积大小可计算出每种成分在样品中所占
比例。
应用:1. 食品行业层析技术可用于饮料、果汁、啤酒等食品中
添加剂残留量及营养成分含量的检测与控制;也可以对植物提取液进
行有效成分提取和纯化处理。
2. 医药行业层析技术广泛应用于草药提
取液中有效成份纯化及新型药物开发过程中杂质去除工作;同时还能
够快速准确地确定血清生化指标值等临床诊断数据。
3. 环境监测层析
技术可用于水体、土壤等环境样本中有机污染物及重金属元素含量检
测与评估;同时也能够为大气污染源追溯工作提供科学依据。
层析的原理和应用
层析的原理和应用1. 层析的概念和基本原理层析(Chromatography)是一种将混合物中的组分分离和提纯的技术方法。
它基于组分之间在固定相和流动相之间的相互作用力的不同,使各种组分在系统中以不同速度迁移,达到分离的目的。
层析技术广泛应用于化学、生物、环境等领域。
层析技术的基本原理是利用流动相在固定相上的移动来实现物质的分离。
固定相通常是具有一定吸附性或分配性的材料,如硅胶、纸张、亲水性基质等。
流动相则是将待分离的混合物溶解在溶剂中,通过与固定相的相互作用,使各组分在固定相上以不同速率迁移。
2. 层析技术的分类和应用层析技术根据其基本原理和操作方式的不同,可以分为多种类型。
以下是其中几种常见的层析技术及其应用:2.1 薄层层析法(TLC)薄层层析法是一种在薄层材料上进行的层析技术。
常用的薄层材料包括硅胶和氧化铝等。
它具有简单、快速、经济的特点,广泛应用于药物分析、食品安全检测、环境监测等领域。
2.2 柱层析法柱层析法是将固定相填充在柱中,通过流动相沿着柱内固定相的分布,实现各组分的分离。
根据固定相的不同,柱层析法又可分为凝胶柱层析和高效液相层析等。
柱层析法在药物分离纯化、天然产物提取、有机合成等领域具有广泛应用。
2.3 气相层析法(GC)气相层析法是将待分离的混合物蒸发为气体状态,通过在柱中固定相的分离,最终使各组分在检测器上进行定性和定量分析。
气相层析法广泛应用于石油化学、环境监测、食品安全等领域。
2.4 液相层析法(LC)液相层析法是将待分离混合物溶解于液相,在柱中利用固定相进行分离。
液相层析法根据流动相的不同,可分为常压液相层析和高效液相层析等。
液相层析法在制药、生物、环保等领域具有广泛应用。
2.5 离子层析法(IC)离子层析法是利用不同组分之间的化学亲合性进行分离的一种层析技术。
它广泛应用于水质分析、环境监测、生物学研究等领域,尤其是对离子的分析具有很高的选择性和灵敏度。
3. 层析技术的优点和局限性层析技术具有许多优点,使其成为众多分析方法中的重要手段。
层析成像原理及应用
层析成像原理及应用一、引言层析成像(Tomography)是一种通过对物体进行多次扫描,然后利用计算机重建出物体内部结构的技术。
它可以提供高分辨率的三维图像,广泛应用于医学、工业检测等领域。
本文将介绍层析成像的原理及其在医学诊断、材料检测等方面的应用。
二、层析成像原理层析成像的原理基于射线投影的思想,通过对物体进行多个角度的射线投影扫描,然后通过计算机对这些投影数据进行重建,得到物体的三维结构。
具体来说,层析成像主要包括以下几个步骤:1. 射线投影:在不同的角度上,通过物体的不同位置进行射线投影,得到一系列的投影图像。
2. 数据采集:将投影图像转化为数字信号,并存储在计算机中。
3. 重建算法:对采集的数据进行处理,使用重建算法恢复出物体的内部结构。
4. 图像显示:将重建后的数据以图像形式显示出来,供观察和分析。
三、层析成像的应用1. 医学诊断层析成像在医学领域被广泛应用于疾病的诊断和治疗。
其中最常见的应用就是X射线计算机断层扫描(CT)。
CT扫描可以提供人体内部器官的高分辨率图像,用于检测和诊断各种疾病,如肿瘤、骨折、脑出血等。
同时,CT还可以辅助手术规划,提高手术成功率。
2. 工业检测层析成像在工业领域也有重要应用。
例如,金属材料的缺陷检测。
通过对金属材料进行层析成像扫描,可以检测出内部的裂纹、气孔等缺陷,帮助判断材料的质量和可靠性。
此外,层析成像还可以用于材料的密度分布分析、形状重建等方面,对提高工业产品的质量和效率具有重要意义。
3. 资源勘探层析成像在石油、矿产等资源勘探中也有广泛应用。
通过对地下岩石和矿石进行层析成像扫描,可以获取地下结构的信息,识别石油、矿石等资源的分布情况,为勘探和开采提供重要依据。
层析成像在资源勘探领域的应用,不仅提高了勘探效率,还减少了勘探成本和环境影响。
4. 环境监测层析成像在环境监测中也有一定的应用。
例如,地下水资源的调查和管理。
通过对地下水进行层析成像扫描,可以获得地下水的分布情况、流动方向等信息,帮助科学家和决策者制定合理的水资源管理策略。
薄层层析分离技术的原理和应用
薄层层析分离技术的原理和应用薄层层析分离技术(Thin Layer Chromatography,TLC)是化学分离分析技术中的一种经典的方法,它在各种科研领域中得到了广泛的应用。
本文将从原理和应用两个方面对薄层层析分离技术进行介绍。
一、原理1. 薄层层析分离技术的基本原理薄层层析分离技术是基于化学物质在固定相(薄层硅胶等)和流动相(含有溶剂的液相)中运动时的协同作用来进行物质分离的一种方法。
化学物质在固定相中会因为与涂层材料之间的极性和吸附性差异而发生分离,因此这种分离技术常常被用来对复杂混合物中的化学物质进行定性或定量分析。
2. 薄层层析分离技术的过程薄层层析分离技术的过程可以分为三个步骤:样品的制备、薄层涂层材料的选取和设备的制备。
(1)制备样品:将待分离物质用适当的溶剂溶解或提取,制成样品溶液。
(2)选取涂层材料:涂层材料要选用与待分离物质有足够的吸附能力的固体物质,如硅胶、氧化铝等。
然后将这些固体物质均匀地涂在无水薄层板上,使涂层厚度相同。
(3)设备制备:设备一般由薄层板、涂层材料和流动相组成。
待分离物质通过样品施加在薄层层析板的一边,此时,待分离物质会根据其在涂层材料和流动相之间的吸附和分配状态沿着板子逐渐移动。
二、应用1. 定性分析薄层层析分离技术在化学分离分析领域的应用最广泛的就是对化学物质进行定性分析,如有机分析中对结构相似的物质进行鉴定。
2. 定量分析薄层层析分离技术还可以用来进行化学物质的定量分析。
在这种情况下,定量方法是比定性方法更复杂的,因为有必要确定待分离物和标准物在吸附场中的吸附和分配行为,并且必须保证定量方法的准确性和精密度。
3. 活性物质检测薄层层析分离技术除了可以用来分离和检测化学物质,还可以用来检测活性物质,如抗菌物质、抑制物和酶。
4. 生物分离薄层层析技术在生物分离领域中也有应用。
如用于蛋白质的纯化,薄膜层析也可以作为分离生物样品中的氨基酸或核苷酸的一种方法,还可以通过薄层层析技术提取和分离植物中的生物活性成分。
层析和膜技术在生物制药中的应用
凝胶层析的应用
分子量测定
测定依据:不同分子量的物质,只要在凝胶的分 离范围内(渗入限与排阻限之间),其洗脱体积 Ve及分配系数Kd值随分子量增加而下降。 待测物质洗脱体积与分子量关系符合下式: Ve=-KlogM+C
K、C 是常数,为直线方程的斜率和外推截距。 同时 Kav=-K′logM +C
层析技术在 生物制药中的应用
一. 离子交换层析技术
定义:利用溶液中各种带电颗粒与离子交 换剂之间结合力的差异进行物质分离的操 作称离子交换法。 离子交换剂由惰性的不溶性载体,功能基 团和平衡离子组成。 平衡离子带正电荷的为阳离子交换剂,平 衡离子带负电荷的为阴离子交换剂,可见 离子交换剂是一类具有活性基团的荷电固 相颗粒。
该法操作简便,需要样品量较少,实用价值较大。
凝胶层析的应用:分子量测定
三. 亲和层析
人们发现生物体中许多高分子化合物具有和某些相对应的 专一分子可逆结合的特性, 例如 酶与底物、抗原与抗体、激素与受体、核糖核酸与 其互补的脱氧核糖核酸,多糖与蛋白复合体等,都具有这 种特性。 生物分子间的这种结合能力称为亲和力,根据生物分子 特异亲和力而设计的层析技术称为亲和层析,在亲和层析 中起可逆结合的特异性物质称为配基,与配基结合的层析 介质称为载体。
离子交换层析技术
离子交换反应:
R—SO3—X+ +Y+ = R—SO3—Y++X+
离子交换剂与交换离子间的作用是由静电引力而产生的, 是一个可逆的反应过程,当这个反应达到动态平衡时,其
平衡点随着pH、温度、溶剂的组成及交换剂本身性质的改
变而变化。例如,向平衡体系中加入过量的X+ 离子,反应 倾向于生成R-SO3-X+。
薄膜层析技术在分离与分析中的应用研究
薄膜层析技术在分离与分析中的应用研究薄膜层析技术是一种高效分离与分析技术,近年来在生物医药、食品、环境等领域得到广泛应用,并取得了显著的进展。
本文将介绍薄膜层析技术的概念、原理、特点及其在不同领域的应用研究,以期对该技术的更深入了解。
一、薄膜层析技术的概念及原理薄膜层析技术是一种基于体积传输过程的分离技术,其原理是通过液相在高速流动下,经过被固定于薄膜上的吸附剂或离子交换剂的作用,使目标物质与其他成分分离。
与传统的层析技术相比,薄膜层析技术具有分离速度快、分离效率高、成本低等优点。
二、薄膜层析技术的特点1. 快速:由于传质效率高,薄膜层析技术可在短时间内完成大量样品的分离。
2. 高效:由于薄膜的特殊结构,可提供更高的分离效率,从而实现更纯的目标物质。
3. 成本低:由于操作简单、无需大量的耗材和复杂设备,薄膜层析技术的成本较低。
4. 应用范围广:由于可以选择各种吸附剂或离子交换剂,可应用于各种不同的样品分离和分析。
三、薄膜层析技术在生物医药领域的应用研究1. 生物药物的分离与纯化薄膜层析技术结合吸附剂,在生物药物的制备过程中起到分离和纯化的作用。
其中,蛋白质的纯化是生物医药领域中最常见的应用之一。
利用薄膜层析技术,可通过选择特定的吸附剂,使目标蛋白质与其他成分分离,从而获得较高纯度的蛋白质。
2. 体液分析薄膜层析技术可用于生物体液中多种成分的分离和定量分析,如血清和尿液中的蛋白质、代谢产物等。
该技术可实现高通量、灵敏度高的分析,为临床诊断提供有力支持。
四、薄膜层析技术在食品领域的应用研究1. 食品添加剂的分离与检测薄膜层析技术可用于各类食品添加剂的分离和检测。
例如,可利用离子交换薄膜对食品中的磷酸盐进行定量分析,或对食品中的色素、甜味剂等进行分离。
此外,该技术还可用于蛋白质、淀粉、脂肪酸等成分的分离。
2. 食品安全性评估薄膜层析技术可用于食品中毒性物质的筛查和分离。
例如,可利用吸附剂薄膜对食品中的残留农药、防腐剂等进行检测和分离,或对不同来源的食品样品进行比较分析,从而为食品安全性评估提供有力的实验数据。
层析技术基本原理及应用
层析技术(Chromatography)是一种用于分离混合物中不同成分的重要方法,广泛应用于化学、生物化学、药学等领域。
以下是层析技术的基本原理及应用:
基本原理:
1. 分离原理:
-层析技术利用不同物质在固定相(stationary phase)和移动相(mobile phase)之间的分配系数不同来实现分离。
-样品在固相上受到吸附力和解吸力的影响,在移动相的推动下,不同组分以不同速度迁移,最终实现分离。
2. 类型:
-按照相对位置可分为吸附层析、分配层析、离子交换层析等。
-常见的层析技术包括气相色谱、液相色谱、离子色谱、薄层色谱等。
应用领域:
1. 生物化学:
-在蛋白质纯化、药物筛选、基因分析等方面广泛应用。
-用于分离和鉴定生物样品中的蛋白质、氨基酸、核酸等生物分子。
2. 制药工业:
-用于药物分析、药物提取和纯化等环节。
-常用于药物配方中主成分和杂质的分离和检测。
3. 环境监测:
-用于水质、大气、土壤等环境样品中有害物质的检测与分析。
-能够帮助监测环境中的污染物并进行有效处理。
4. 食品安全:
-在食品中添加剂、残留农药、重金属等的检测和分析中发挥作用。
-有助于确保食品安全和合规。
总的来说,层析技术通过精密的分离原理和操作流程,可以对复杂混合物进行高效分离和分析,为科学研究和工业生产提供了重要的技术支持。
层析原理的应用有哪些内容
层析原理的应用有哪些内容1. 简介层析原理是一种物理分析技术,通过对样品进行分离和测量,获取样品内部的结构和成分信息。
在各个领域都有广泛的应用,以下是层析原理在不同领域的应用。
2. 药学•药物研发:层析原理可用于药物分析,通过对药物样品进行分离和检测,了解药物的成分和结构。
•药物质量控制:层析原理可用于药物批量生产中的质量控制,确保药物的质量符合标准。
3. 化学•化学分析:层析原理是一种常用的分离和测量方法,可用于化学分析中对样品中各种成分的分离和检测。
•化学反应监测:层析原理可用于监测化学反应的过程和产物,帮助了解反应机制和优化反应条件。
4. 食品科学•食品质量检测:层析原理可用于食品中有毒和有害物质的分离和检测,确保食品的质量和安全性。
•食品添加剂分析:层析原理可用于食品添加剂的分离和检测,监控食品中添加剂的含量和种类。
5. 环境科学•水质分析:层析原理可用于水质样品中各种有机物和无机物的分离和检测,了解水质的污染程度和污染源。
•大气污染监测:层析原理可用于大气样品中各种有害气体和颗粒物的分离和检测,了解大气污染程度和来源。
6. 生物科学•分子生物学研究:层析原理可用于生物样品中各种生物分子(如蛋白质、核酸)的分离和检测,帮助了解生物分子的结构和功能。
•药物代谢研究:层析原理可用于药物代谢产物的分离和检测,了解药物在体内的代谢途径和代谢产物。
7. 材料科学•材料表征:层析原理可用于材料样品中各种成分和结构的分离和检测,了解材料的性质和组成。
•材料改进:层析原理可用于材料研发过程中对样品中不同成分的分离和检测,优化材料的性能和组成。
8. 质量控制•层析技术广泛应用于质量控制领域,包括药物制造、化学品生产、食品加工等行业,用于检测样品中的杂质和成分,确保产品质量符合标准。
9. 其他应用•法医学:层析原理可用于法医学的毒物分析,检测尸体或生物体内是否含有毒性物质。
•地质学:层析原理可用于地质样品中各种成分和结构的分离和检测,了解地质样品的特征和成因。
层析技术简单介绍及其应用
层析法的主要介绍及其应用1.层析法的概念层析法又称色谱法[1].色层法或层离法(Chromatography),是一种应用很广的分离分析方法。
1903年,俄国的植物学家M,C.UBeT在研究分离植物色素过程中,首先创造了色谱法,这是一种根据化合物的不同结构和不同的物理,化学特性,从而具有不同吸附性能的原理,以分离混合物中的化学成分的一种物理化学分离方法,最初用于有色物质,之后应用于大量的无色物质。
色谱法的名称虽然仍然沿用,但已失去原来的含义。
层析法和其他分离方法比较,具有分离效率高,操作又不太麻烦的优点。
因此,层析法的应用越来越广,对于近代化学科学的发展有巨大的影响。
在制药、化工、农业、医学等方面都有着广泛的应用。
2.层析法的历史及原理层析法的历史1903年3月21日俄国植物学家茨维特(Michael Tswett,1872-1919)在华沙自然科学学会生物学会议上发表了“一种新型吸附现象及其在生化分析上的应用”研究论文,介绍了一种应用吸附原理分离植物色素的新方法,并首先认识到这种层析现象在分离分析方面有重大价值。
1906年他在德国植物学杂志发表文章,首次命名上述分离后色带为色谱图,称此方法为色谱法(Chromatography)。
1907年在德国生物学会年会上,展示过带有色带的分离柱管和纯化过的植物色素溶液。
茨维特被世人公认为色谱创始人。
德籍奥地利化学家R.Kuhn 等利用他的方法在纤维状氧化铝和碳酸钙的吸附柱上将过去一个世纪以来公认为单一的结晶状胡萝卜素分离成a 和b 两个同分异构体,并由所取得的纯胡萝卜素确定出了其分子式。
Kuhn正是由于在维生素和胡萝卜素的离析与结构分析中取得了重大研究成果而获得了1938年诺贝尔化学奖.1952年,Martin和James发表第一篇气液色谱论文,首次用气体作流动相,配合微量酸碱滴定,发明了气相色谱,它给挥发性化合物的分离测定带来了划时代的革命。
2.2层析法的原理层析Chromatography(色谱),利用混合物中各组分的物理化学性质间的差异(溶解度、分子极性、分子大小、分子形状、吸附能力、分子亲合力等) ,使各组分在支持物上集中分布在不同区域,借此将各组分分离。
凝胶层析应用
凝胶层析应用凝胶层析是一种广泛应用于生物化学和分子生物学领域的技术,其原理是通过不同大小、形状和电荷的分子在凝胶上的不同分布实现对混合物分离纯化的目的。
该技术能够对多种生物大分子(如蛋白质、酶、核酸等)进行分离和纯化,是生物分离技术中的一大重要技术。
凝胶层析技术应用广泛,主要包括以下几个方面:1.蛋白质纯化:凝胶层析技术可以用于蛋白质的纯化和分离,通常使用大小分子筛进行分离。
对于疏水性蛋白质,也可以采用亲水性的凝胶来分离。
此外,对于具有特定生物活性位点的蛋白质,还可以使用亲和层析技术进行分离。
2.DNA和RNA分离纯化:凝胶层析技术可以用于DNA和RNA的分离和纯化。
分子量大的DNA分子可以通过薄片凝胶层析分离,而RNA 可以通过膜凝胶层析分离。
此外,在一些特殊情况下,例如合成寡核苷酸等,也可以采用凝胶层析技术进行纯化。
3.糖类分离纯化:凝胶层析技术可以用于糖类的分离和纯化,一般使用凝胶色谱法。
不同的凝胶可以用于不同的糖类分离,例如:使用离子交换凝胶可对磷酸、硫酸盐和其他离子进行分离;使用亲和凝胶可以选中某种特定的糖类,将其分离。
凝胶层析技术有很多的优点,例如分离效果好,分离速度快,分离条件温和等。
但是也存在着一些缺陷,如数据解释的困难和重复性差。
因此,在应用凝胶层析技术时,需要注重方法优化和数据质量的控制。
总之,凝胶层析技术是一种非常重要的生物分离技术。
在生物化学和分子生物学领域中,它具有广泛的应用前景,为相关研究提供了有力的技术支持。
对于科学家和生物工程师来说,应该注重借助现代化的设备和方法,优化凝胶层析技术并且不断提高自身的技能水平,从而更好地开展科学研究。
生物化学中的层析技术
生物化学中的层析技术生物化学是研究生物体内化学成分和化学变化的科学领域。
层析技术是生物化学中常用的一种分离和纯化方法,通过利用物质在不同相之间的分配行为进行分离。
本文将介绍生物化学中的层析技术及其在科研和实验中的应用。
一、什么是层析技术层析技术是一种基于物质在不同相或载体中的分配行为进行分离的方法。
它利用分配系数不同的物质在固相和液相之间的分配行为,通过不同的分离条件实现目标物质的纯化或分离。
层析技术广泛应用于生物化学、有机化学和分析化学等领域。
二、层析技术的分类1. 按固相类型分类(1)柱层析:将固相填充在柱子中,通过液相的流动将目标物质与杂质分离。
常见的柱层析包括凝胶过滤层析、离子交换层析和亲和层析等。
(2)薄层层析:将固相涂覆在玻璃或塑料板上,通过液相的上升和扩散分离物质。
薄层层析广泛应用于分离、纯化和鉴定有机化合物等。
2. 按液相类型分类(1)液液层析:液相为液体,通过两种不同性质的液体在固相上的分配行为分离物质。
液液层析包括正相层析和反相层析等。
(2)气液层析:液相为溶解在惰性气体中的液体,通过物质在气液界面的分配行为分离物质。
气液层析常用于鉴定挥发性有机化合物。
三、层析技术的应用1. 生物样品的纯化层析技术在生物化学中被广泛应用于样品的纯化和分离。
例如,蛋白质的纯化通常使用离子交换层析、分子筛层析或亲和层析等方法。
这些层析技术具有高分离效率和纯度,可以快速且有效地纯化目标蛋白质。
2. 生物大分子的分离层析技术也用于生物大分子(如核酸和多肽)的分离和纯化。
例如,核酸的分离常使用凝胶过滤层析和亲和层析等方法;多肽的分离则可以使用反相层析和凝胶过滤层析等方法。
3. 药物分析与检测层析技术在药物分析和检测中起着重要作用。
例如,高效液相层析(HPLC)可以用于药物代谢产物的分离和定量分析,以及药物纯化和质量控制等方面的应用。
4. 工业生产中的应用层析技术在工业生产中也有广泛的应用。
例如,酒精的分离可以使用蒸馏和分子筛层析等方法;有机酸的分离和纯化则可以使用阴离子交换层析等方法。
层析原理的应用有哪些方面
层析原理的应用有哪些方面1. 医学影像层析•计算机断层扫描(CT):层析原理在医学影像中得到了广泛的应用,尤其是在计算机断层扫描(CT)中。
CT扫描通过利用层析原理,将人体切片成多个图像层,提供了高分辨率的三维图像。
这对于诊断和治疗疾病非常重要,如癌症、骨折、血管病变等。
•正电子发射断层成像(PET):层析原理还应用于正电子发射断层成像(PET)技术。
该技术通过观察放射性同位素在体内发射的正电子,生成组织和器官的活体映像图像。
PET扫描在癌症、脑部和心脏疾病的诊断和治疗中有着重要的作用。
2. 工业领域的层析应用•材料表征:层析技术在工业领域中用于材料的非破坏性测试和表征。
通过使用层析技术,可以获得材料内部的细节信息,如内部缺陷、组织结构等。
这对于材料的质量控制和性能评估非常关键。
•油气勘探:在油气勘探中,层析原理广泛应用于地下结构和油气藏的成像。
通过分析地下岩石、流体和气体的密度差异,层析技术可以提供具有高分辨率的地下结构和油气储量的地质图像。
3. 安全检查和卫生领域的层析应用•安全检查:层析技术在安全检查领域也有广泛的应用。
例如,在机场安检中使用层析成像技术可以检测出携带爆炸物或危险物品的人员。
此外,层析技术还可以用于检测食品中的有害物质,以确保食品安全。
•医疗领域:除了医学影像,层析原理还应用于医疗设备的设计和研发。
例如,层析技术可以用于设计放射治疗设备,以确保放射线的精确定位和剂量控制,提高治疗的效果。
4. 科学研究中的层析应用•化学分析:层析技术在化学研究领域中有广泛的应用。
例如,层析色谱法(HPLC)和气相色谱法(GC)利用层析原理分离和分析混合物中的不同成分。
这对于确定物质的组成和纯度非常重要。
•生物学研究:层析技术在生物学研究中被广泛应用。
例如,层析技术可以用于分离和纯化蛋白质、核酸和其他生物大分子。
这对于研究生物化学过程和开发新药物非常关键。
5. 环境监测中的层析应用•水质监测:层析技术在水质监测中起着重要的作用。
离子层析技术在生物分离中的应用
离子层析技术在生物分离中的应用生物分子的分离和纯化是生物制药、诊断和医学研究等领域的重要基础和关键技术。
离子层析技术是生物分离中最为常见的一种方法。
离子层析技术是利用生物分子的电荷性质进行分离的一种方法,适用于生物分子的分离纯化和富集。
在生物制药、基因工程、蛋白质纯化等方面均有广泛的应用。
离子层析技术的原理离子层析技术是利用生物分子带电的官能团与具有相反电荷的某些固定离子在特定的条件下发生强吸附作用而进行分离的一种方法。
离子层析柱中的离子会与反离子集合成固体静电层,在离子层析柱中,受到各种因素的影响会导致分子的吸附和解吸附。
在柱流中离子与反离子之间形成的离子上下挥动,最终被分离出来。
离子层析的分离机理可以分为静态和动态分离。
静态分离是指离子通过静电相互吸引在分子上的附着。
动态分离是指离子在液相溶液中通过流体相互作用进行分离。
离子的流动速度随着离子的大小、电荷数、流动速度、浓度、环境温度等因素有变化。
离子层析技术的优点离子层析技术相对于其他生物分离技术来说具有以下优点:1. 可以选择性地富集目标生物分子;2. 操作简单,容易操作;3. 操作过程中不破坏生物分子的原始结构和活性;4. 在分离液面积不大的情况下,可处理大量样品;5. 对某些不稳定的生物分子也可以进行分离。
离子层析技术的应用离子层析技术广泛应用于生物分离和纯化中。
下面将从蛋白质分离、基因组分离和生物酶分离从三个方面介绍离子层析技术的应用。
1. 蛋白质分离蛋白质是生物体内最重要的有机分子之一,它们发挥着丰富的生物学作用。
离子层析技术在蛋白质分离中具有极为重要的应用。
选择性地采用不同种类的吸附剂来吸附不同性质的蛋白质,使其在某种相互竞争的条件下逐步被洗脱也是离子层析技术在蛋白质分离中的一种应用。
2. 基因组分离离子层析技术在基因组分离中也具有广泛的应用。
其主要原理是利用凝胶过滤、毛细管电泳等方法将DNA片段进行分离、提取和纯化。
基因组离子层析也被广泛应用于医学、农业和食品科技领域。
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用随着食品工业的快速发展和全球贸易的加速,食品安全问题日益受到人们的关注。
食品安全检测是保障食品质量和保障公众健康的重要环节,快速、准确的检测技术对于食品安全已经成为不可或缺的一环。
胶体金免疫层析技术是一种迅速、敏感、特异性好,并且易于操作的检测技术。
本文将介绍胶体金免疫层析技术的原理、特点及在食品安全现场快速检测中的应用。
一、胶体金免疫层析技术原理胶体金免疫层析技术是基于抗原与抗体之间的特异性结合原理。
首先将目标分子作为抗原,与特异性的抗体反应形成抗原-抗体复合物,然后将其与胶体金颗粒结合。
当抗原-抗体复合物与胶体金颗粒结合时,会发生颗粒聚集,产生可见的颜色变化。
通过颜色的变化可以判断样品中是否存在所需检测的目标分子,从而实现快速检测。
1. 快速性:胶体金免疫层析技术无需复杂的操作步骤,通常能在几分钟内完成检测。
对于食品安全现场快速检测来说,时间就是金钱,因此快速性是其最大的优势之一。
2. 敏感性:胶体金免疫层析技术对目标分子的检测灵敏度高,可以检测到极低浓度的目标分子。
这使得其在食品安全检测中能够及时发现微量的有害物质,保障公众健康。
3. 特异性:胶体金免疫层析技术对目标分子的检测特异性好,能够区分目标分子和其他干扰物质,减少误判的可能性。
4. 易操作性:胶体金免疫层析技术不需要复杂的仪器设备,操作简单,适用于各种现场检测环境。
5. 成本低廉:胶体金免疫层析技术的试剂成本低廉,相对于传统的检测方法,可以大大降低检测成本。
1. 残留农药检测:农药残留是食品安全的一个重要问题,特别是对于农产品出口国家来说,农药残留的限量标准要求更加严格。
胶体金免疫层析技术可以快速检测食品中的农药残留情况,为食品出口提供可靠的检测数据。
2. 食品中毒素检测:食品中的毒素是一种常见的食品安全隐患,例如黄曲霉素、赭曲霉素等。
采用胶体金免疫层析技术可以对食品中的毒素进行快速检测,及时发现食品中的毒素污染问题。
薄层层析的原理和应用
薄层层析的原理和应用1. 薄层层析的基本原理薄层层析(Thin Layer Chromatography,简称TLC)是一种用于分离、检测和定量分析化合物的常用技术。
它基于物质在固定相(固定在薄层板上)和流动相(液态或气态)之间的不同分配行为,利用物质在两相中的相互作用,实现了化合物的分离。
2. 薄层层析的应用薄层层析在许多领域中得到广泛应用,下面列举了几个主要的应用领域:2.1 药学•薄层层析可用于药物的质量控制和分析,如药物纯度、含量等。
•它还可用于药物相互作用的研究,如药物与蛋白质、细胞的相互作用。
2.2 食品科学•薄层层析在食品科学中被广泛应用于食品成分的分析。
•它可用于检测食品中的添加剂、农药、重金属等有害物质。
2.3 环境科学•薄层层析可用于环境科学的高效、快速分析。
•它可用于监测水和土壤中的污染物,以及空气中的有害物质。
2.4 法医学•薄层层析在法医学中可用于毒物学分析。
•它可用于分析尸体组织中的药物、毒物等。
3. 薄层层析的实验操作步骤薄层层析的实验操作步骤如下:1.准备薄层板:选择合适的薄层板,并在板上涂敷均匀的固定相。
2.样品处理:将待测样品进行适当的前处理,如提取、稀释等。
3.样品施加:在薄层板上均匀施加待测样品。
4.等待固定:等待样品在薄层板上固定。
5.流动相选择:选择适当的流动相,并将薄层板放入层析槽中。
6.层析槽中流动相:添加流动相至适当高度,使其浸泡薄层板底部,但不要超过固定相线。
7.封槽:用盖子或纸封住层析槽。
8.等待迁移:等待迁移过程完成。
9.干燥:将薄层板取出,用吹风机或加热干燥。
10.显色:将薄层板暴露在合适的显色试剂中,使化合物呈现可见的斑点。
11.分析和测量:使用工具(如扫描仪或相对比色计)对薄层板上的斑点进行定量或定性分析。
4. 薄层层析的优点和局限性4.1 优点•简单易行、操作方便。
•分离效果好、分离时间短。
•可用于分析多种类型的样品。
•成本低廉、设备要求较低。
层析分析技术在生命科学中的应用
层析分析技术在生命科学中的应用生命科学是一个综合性的领域,涉及到了分子生物学、生物化学、细胞生物学、遗传学、药物学等多个学科。
随着科技的不断进步,人们对于生命科学的认识也越来越深入。
其中,层析分析技术是生命科学中一种广泛应用的技术,其广泛应用于蛋白质纯化、酶学研究、分子诊断、药物筛选等领域。
一、层析分析技术简介层析分析技术是一种将混合物中各成分分离开来的技术。
该技术根据成分分子在不同吸附材料上的亲和力差异,通过流经这些材料的溶液轮廓分离成分,从而达到纯化的目的。
层析技术包括不同类型的液相层析、气相层析、离子交换层析、亲和层析、凝胶过滤层析等方法。
不同类型的层析技术因吸附选择性及吸附条件不同而互相区分。
二、层析分析在生物大分子纯化中的应用DNA、RNA和蛋白质等生物大分子是生命科学中的基本元素,对于这些分子的研究,纯化是必不可少的一步。
生物大分子的分离纯化主要基于其不同的性质进行。
蛋白质的性质包括分子量、异构体、电荷、亲和性和溶解度。
层析分析技术可以根据不同的蛋白质特性进行选择,从而实现对蛋白质的纯化。
离子交换层析是蛋白质纯化中最常用的层析技术之一。
离子交换层析通过杂质蛋白质、多肽、核酸、盐和其他杂质分离出纯化的目标蛋白质。
离子交换层析可用于纯化负电荷(酸性)和正电荷(碱性)蛋白质。
其实现方法是将样品注入填充有磷酸纤维素、硫酸纤维素、乳清蛋白、DEAE - 硫酸纤维素以及CM - 硫酸纤维素等电荷大分子的固相载体中,利用不同的缓冲液中不同pH下离子交换材料带电荷的环境作用使之分离。
这种方法比较突出的优点是高纯度,且样品准备简便,但需慎重控制pH梯度。
亲和层析是另一种常用的层析技术,它是以靶蛋白质与提供特异性亲和力的吸附剂之间的高亲和性为基础分离纯化。
目前应用较广的亲和层析列是以蛋白质对于金属离子、亲和标记、抗体等化合物的亲和性为基础,选用填充有这些化合物的柱体来除去不具亲和力的非目的性蛋白质。
三、层析分析在药物研究中的应用随着基因工程和高通量策略的逐渐成熟,现代药物研究对于蛋白质药物的需求日益增加。
测流层析技术的原理及应用
测流层析技术的原理及应用1. 简介测流层析(Flow Cytometry)技术是一种高效、精确的细胞分析技术,广泛应用于生物医学研究领域。
该技术通过将细胞单个、快速地通过激光束,通过对细胞内的荧光、散射光的检测和分析,实现对细胞的特征、数量的测量和排序。
2. 原理测流层析技术基于激光散射和荧光信号检测原理,通过激光器产生的激光束,将待测物(如细胞)单个地通过检测区域,并对其产生的散射光和荧光光进行检测和分析。
根据细胞所产生的不同散射光和荧光光的特征,可以获得细胞的大小、形状、颜色、荧光强度等信息。
3. 测流层析技术的应用测流层析技术在生物医学研究领域有广泛的应用,以下是其中的几个主要应用:3.1 细胞表型分析通过测流层析技术,可以获得细胞的多个特征,如大小、颜色、蛋白质表达水平等,进而对不同类型、状态的细胞进行鉴定和分类。
•测流层析可以对细胞进行表面标记,通过分析细胞表面标记物的表达水平,可以鉴定细胞的类型,如癌细胞与正常细胞的区别。
•测流层析可以测量细胞内蛋白质的表达水平,从而揭示不同细胞的功能和代谢状态。
3.2 免疫细胞分析测流层析技术在免疫学研究中有重要应用,用于检测和分析免疫细胞的特征和免疫应答。
•测流层析可以用于检测和分析免疫细胞表面标记物的表达水平,如CD4、CD8、CD25等,从而了解免疫细胞的类型和数量。
•测流层析可以用于检测和分析免疫细胞的功能,如细胞因子生产、细胞增殖等,从而了解免疫细胞的活性和免疫应答。
3.3 微粒分析测流层析技术可以用于微粒的分析和排序,包括细胞外囊泡、病毒、细菌等。
•测流层析可以测量微粒的大小、形状、浓度等特征,从而对不同类型的微粒进行区分。
•测流层析可以测量微粒上的标记子的表达水平,如蛋白质标记、核酸标记等,从而了解微粒的特性和功能。
3.4 DNA/RNA分析测流层析技术可以用于DNA/RNA的分析,包括DNA含量、DNA异常、RNA表达等。
•测流层析可以测量细胞内DNA含量的变化,从而揭示细胞的有丝分裂状态、细胞周期等信息。
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层析技术的应用层析技术的应用一、层析技术的原理和分类(一)层析技术的原理层析法是目前广泛应用的一种分离技术。
本世纪初俄国植物学家M.Tswett发现并使用这一技术证明了植物的叶子中不仅有叶绿素还含有其它色素。
现在层析法已成为生物化学、分子生物学及其它学科领域有效的分离分析工具之一。
层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。
所有的层析系统都由两个相组成:一是固定相,它或者是固体物质或者是固定于固体物质上的成分;另一是流动相,即可以流动的物质,如水和各种溶媒。
当待分离的混合物随溶媒(流动相)通过固定相时,由于各组份的理化性质存在差异,与两相发生相互作用(吸附、溶解、结合等)的能力不同,在两相中的分配(含量对比)不同,而且随溶媒向前移动,各组份不断地在两相中进行再分配。
与固定相相互作用力越弱的组份,随流动相移动时受到的阻滞作用小,向前移动的速度快。
反之,与固定相相互作用越强的组份,向前移动速度越慢。
分部收集流出液,可得到样品中所含的各单一组份,从而达到将各组份分离的目的。
(二)层析法分类见表16-5~7(三)层析法的特点与应用表16-5按两相所处状态分类流动相液体气体液体液-液层析法气-液层析法固定相固体液-固层析法气-固层析法层析法是根据物质的理化性质不同而建立的分离分析方法。
根据层析峰的位置及峰高或峰面积,可以定性及定量。
层析法与光学、电学或电化学仪器连用,可检测出层析后各组份的浓度或质量,同时绘出层析图。
层析仪与电子计算机联用,可使操作及数据处理自动化,大大缩短分析时间。
由于层析法具有分辨率高、灵敏度高、选择性好、速度快等特点,因此适用于杂质多、含量少的复杂样品分析,尤其适用于生物样品的分离分析。
近年来,已成为生物化学及分子生物学常用的分析方法。
在医药卫生、环境化学、高分子材料、石油化工等方面也得到了广泛的应用。
表16-6按层析原理分类名称分离原理组份在吸附剂表面吸附固定相是固体吸附剂,各能力吸附层析法不同各组份在流动相和静止液相(固相)中的分配系数不分配层析法同固定相是离子交换剂,各组份与离子交换剂亲和力不离子交换层析法同固定相是多孔凝胶,各组份的分子大小不同,因而在凝胶层析法凝胶上受阻滞的程度不同固定相只能与一种待分离组份专一结合,以此和无亲亲和层析法和力的其它组份分离表16-7按操作形式不同分类名称操作形式柱层析法固定相装于柱内,使样品沿着一个方向前移而达分离将适当粘度的固定相均匀涂铺在薄板上,点样后用流薄层层析法动相展开,使各组份分离用滤纸作液体的载体,点样后用流动相展开,使各组纸层析法份分离将适当的高分子有机吸附剂制成薄膜,以类似纸层析薄膜层析法方法进行物质的分离二、层析法实验技术(一)凝胶层析法凝胶层析又称分子筛过滤、排阻层析等。
它的突出优点是层析所用的凝胶属于惰性载体,不带电荷,吸附力弱,操作条件比较温和,可在相当广的温度范围下进行,不需要有机溶剂,并且对分离成分理化性质的保持有独到之处。
对于高分子物质有很好的分离效果。
⒈凝胶的选择根据实验目的不同选择不同型号的凝胶。
如果实验目的是将样品中的大分子物质和小分子物质分开,由于它们在分配系数上有显著差异,这种分离又称组别分离,一般可选用Sephadex G-25和G-50,对于小肽和低分子量的物质(1000-5000)的脱盐可使用Sephadex G-10,G-15及Bio-Gel-p-2或4。
如果实验目的是将样品中一些分子量比较近似的物质进行分离,这种分离又叫分级分离。
一般选用排阻限度略大于样品中最高分子量物质的凝胶,层析过程中这些物质都能不同程度地深入到凝胶内部,由于K d 不同,最后得到分离。
⒉柱的直径与长度根据经验,组别分离时,大多采用2-30cm长的层析柱,分级分离时,一般需要10 0cm左右长的层析柱,其直径在1-5cm范围内,小于1cm产生管壁效应,大于5cm则稀释现象严重。
长度L与直径D的比值L/D一般宜在7-10之间,但对移动慢的物质宜在30-40之间。
⒊凝胶柱的制备凝胶型号选定后,将干胶颗粒悬浮于5-10倍量的蒸馏水或洗脱液中充分溶胀,溶胀之后将极细的小颗粒倾泻出去。
自然溶胀费时较长,加热可使溶胀加速,即在沸水浴中将湿凝胶浆逐渐升温至近沸,1-2小时即可达到凝胶的充分胀溶。
加热法既可节省时间又可消毒。
凝胶的装填:将层析柱与地面垂直固定在架子上,下端流出口用夹子夹紧,柱顶可安装一个带有搅拌装置的较大容器,柱内充满洗脱液,将凝胶调成较稀薄的浆头液盛于柱顶的容器中,然后在微微地搅拌下使凝胶下沉于柱内,这样凝胶粒水平上升,直到所需高度为止,拆除柱顶装置,用相应的滤纸片轻轻盖在凝胶床表面。
稍放置一段时间,再开始流动平衡,流速应低于层析时所需的流速。
在平衡过程中逐渐增加到层析的流速,千万不能超过最终流速。
平衡凝胶床过夜,使用前要检查层析床是否均匀,有无“纹路”或气泡,或加一些有色物质来观察色带的移动,如带狭窄、均匀平整说明层析柱的性能良好,色带出现歪曲、散乱、变宽时必须重新装柱。
⒋加样和洗脱凝胶床经过平衡后,在床顶部留下数亳升洗脱液使凝胶床饱和,再用滴管加入样品。
一般样品体积不大于凝胶总床体积的5%-10%。
样品浓度与分配系数无关,故样品浓度可以提高,但分子量较大的物质,溶液的粘度将随浓度增加而增大,使分子运动受限,故样品与洗脱液的相对粘度不得超过1. 5-2。
样品加入后打开流出口,使样品渗入凝胶床内,当样品液面恰与凝胶床表面相平时,再加入数毫升洗脱液中洗管壁,使其全部进入凝胶床后,将层析床与洗脱液贮瓶及收集器相连,预先设计好流速,然后分部收集洗脱液,并对每一馏份做定性、定量测定。
⒌凝胶柱的重复使用、凝胶回收与保存一次装柱后可以反复使用,不必特殊处理,并不影响分离效果。
为了防止凝胶染菌,可在一次层析后加入0.02%的叠氮钠,在下次层析前应将抑菌剂除去,以免干扰洗脱液的测定。
如果不再使用可将其回收,一般方法是将凝胶用水冲洗干净滤干,依次用70%、90%、95%乙醇脱水平衡至乙醇浓度达90%以上,滤干,再用乙醚洗去乙醇、滤干、干燥保存。
湿态保存方法是凝胶浆中加入抑菌剂或水冲洗到中性,密封后高压灭菌保存。
⒍凝胶层析的应用⑴脱盐:高分子(如蛋白质、核酸、多糖等)溶液中的低分子量杂质,可以用凝胶层析法除去,这一操作称为脱盐。
本法脱盐操作简便、快速、蛋白质和酶类等在脱盐过程中不易变性。
适用的凝胶为Sepha dexG-10、15、25或Bio-Gel-p-2、4、6。
柱长与直径之比为5-15,样品体积可达柱床体积的25%-30%,为了防止蛋白质脱盐后溶解度降低会形成沉淀吸附于柱上,一般用醋酸铵等挥发性盐类缓冲液使层析柱平衡,然后加入样品,再用同样缓冲液洗脱,收集的洗脱液用冷冻干燥法除去挥发性盐类。
⑵用于分离提纯:凝胶层析法已广泛用于酶、蛋白质、氨基酸、多糖、激素、生物碱等物质的分离提纯。
凝胶对热原有较强的吸附力,可用来去除无离子水中的致热原制备注射用水。
⑶测定高分子物质的分子量:用一系列已知分子量的标准品放入同一凝胶柱内,在同一条件下层析,记录每一分钟成分的洗脱体积,并以洗脱体积对分子量的对数作图,在一定分子量范围内可得一直线,即分子量的标准曲线。
测定未知物质的分子量时,可将此样品加在测定了标准曲线的凝胶柱内洗肿后,根据物质的洗脱体积,在标准曲线上查出它的分子量。
⑷高分子溶液的浓缩:通常将SephadexG-25或50干胶投入到稀的高分子溶液中,这时水分和低分子量的物质就会进入凝胶粒子内部的孔隙中,而高分子物质则排阻在凝胶颗粒之外,再经离心或过滤,将溶胀的凝胶分离出去,就得到了浓缩的高分子溶液。
(二)离子交换层析法离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相,利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。
⒈离子交换剂预处理和装柱对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。
溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理,使之成为带H+或OH-的交换剂型。
阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理,使最终转为-OH-型或盐型交换剂;对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理,使最终转为-H-型交换剂。
洗涤好的纤维素使用前必须平衡至所需的pH 和离子强度。
已平衡的交换剂在装柱前还要减压除气泡。
为了避免颗粒大小不等的交换剂在自然沉降时分层,要适当加压装柱,同时使柱床压紧,减少死体积,有利于分辨率的提高。
柱子装好后再用起始缓冲液淋洗,直至达到充分平衡方可使用。
⒉加样与洗脱加样:层析所用的样品应与起始缓冲液有相同的pH和离子强度,所选定的pH值应落在交换剂与被结合物有相反电荷的范围,同时要注意离子强度应低,可用透析、凝胶过滤或稀释法达此目的。
样品中的不溶物应在透析后或凝胶过滤前,以离心法除去。
为了达到满意的分离效果,上样量要适当,不要超过柱的负荷能力。
柱的负荷能力可用交换容量来推算,通常上样量为交换剂交换总量的1%-5%。
洗脱:已结合样品的离子交换前,可通过改变溶液的pH或改变离子强度的方法将结合物洗脱,也可同时改变pH与离子强度。
为了使复杂的组份分离完全,往往需要逐步改变pH或离子强度,其中最简单的方法是阶段洗脱法,即分次将不同pH与离子强度的溶液加入,使不同成分逐步洗脱。
由于这种洗脱p H与离子强度的变化大,使许多洗脱体积相近的成分同时洗脱,纯度较差,不适宜精细的分离。
最好的洗脱方法是连续梯度洗脱,洗脱装置见图16-6。
两个容器放于同一水平上,第一个容器盛有一定pH的缓冲液,第二个容器含有高盐浓度或不同pH的缓冲液,两容器连通,第一个容器与柱相连,当溶液由第一容器流入柱时,第二容器中的溶液就会自动来补充,经搅拌与第一容器的溶液相混合,这样流入柱中的缓冲液的洗脱能力即成梯度变化。
第一容器中任何时间的浓度都可用下式进行计算:C=C2-(C2-C1)(1-V)A2/A1式中A1、A2分别代表两容器的截面积:C1、C2分别表示容器中溶液的浓度;V为流出体积对总体积之比。
当A1=A2时为线性梯度,当A1>A2时为凹形梯度,A1>A2时为凸形梯度。
洗脱时应满足以下要求:①洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不致于太拥挤。
②梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。
③梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。
目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。
图16-6梯度洗脱示意图⒊洗脱馏份的分析按一定体积(5-10ml/管)收集的洗脱液可逐管进行测定,得到层析图谱。
依实验目的的不同,可采用适宜的检测方法(生物活性测定、免疫学测定等)确定图谱中目的物的位置,并回收目的物。