IL-17中和抗体
il17分子量
il17分子量IL-17是一种细胞因子，全称为白细胞介素17。
它是由T细胞产生的一类细胞因子，主要参与免疫系统的调节与炎症反应。
本文将从IL-17的分子量、结构、功能和在疾病中的作用等方面进行介绍。
IL-17的分子量约为30 kDa。
它是一种由细胞产生的蛋白质分子，在结构上属于肽链结构。
IL-17由细胞因子家族中的IL-17A至IL-17F共6个亚型组成，其中IL-17A和IL-17F是最为常见的两个亚型。
IL-17的功能主要与免疫系统的调节和炎症反应相关。
IL-17能够刺激炎症细胞产生多种促炎细胞因子，如肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素-1（IL-1）。
同时，IL-17也能够诱导和增强炎症反应，促进炎症细胞的浸润和炎症因子的释放，从而参与炎症反应的调节。
IL-17在多种疾病中起着重要的作用。
首先是免疫性疾病，如类风湿关节炎、银屑病和强直性脊柱炎等。
IL-17的过度表达与这些疾病的发生和发展密切相关。
其次是肿瘤。
研究发现，IL-17能够促进肿瘤的发生和发展，与肿瘤的侵袭和转移相关。
此外，IL-17还与感染性疾病如肺炎、肾炎和结核病等有关。
IL-17的信号传导途径主要是通过结合其受体IL-17R，激活下游信号分子，最终调控炎症细胞的活化和炎症因子的释放。
研究发现，IL-17的信号通路与其他细胞因子的信号通路相互作用，形成复杂的调控网络。
因此，研究IL-17的信号通路机制对于深入了解其生物学功能和疾病机制具有重要意义。
针对IL-17的治疗策略主要是通过抑制其活性或阻断其信号传导途径。
一些治疗手段如抗体、融合蛋白等已经在临床上得到应用，并取得了一定的疗效。
然而，由于IL-17在多种疾病中的复杂作用机制，目前的治疗方法仍然存在一定的局限性，需要进一步的研究和探索。
总结起来，IL-17是一种重要的细胞因子，参与免疫系统的调节和炎症反应。
它的分子量约为30 kDa，属于肽链结构。
IL-17的过度表达与多种疾病的发生和发展相关，因此研究其在疾病中的作用机制对于疾病的防治具有重要意义。
IL-17的信号传导及功能研究
IL-17的信号传导及功能研究淋巴细胞(lymphocyte)是构成机体免疫系统的主要细胞群体, 占外周血白细胞总数的20%~45%, 成年人体内约有1012个淋巴细胞。
CD4+T细胞在特定的细胞因子环境中被病原体激活后, 可以分化为具有不同的生物学功能的细胞亚群以协助及动员其他免疫细胞一起清除入侵的病原体。
CD4+T细胞按其所产生的细胞因子谱, 最初被分为TH1细胞和TH2细胞。
TH1细胞主要分泌g干扰素(interferon-g, IFN-g),胞内细菌感染时, TH1细胞优先分化并引发吞噬细胞介导的宿主防御应答。
而TH2细胞主要分泌白介素-4(interleukin-4, IL-4)、白介素-13(interleukin-13,IL-13)和白介素-25(interleukin-25, IL-25或IL-17E)。
蠕虫感染及对环境病原菌的应答中, 主要是TH2细胞参与, 以介导体液免疫为主。
最近, 随着一类新的被命名为TH17细胞的CD4+T 细胞亚群的发现, CD4+T细胞的细胞亚群分类随之被更新为三类。
TH17细胞,以其分泌白介素-17(interleukin-17, IL-17)而得名, 除此之外, 它们还分泌IL-17F、IL-21和IL-22[1]。
IL-17作为TH17细胞分泌的特征性细胞因子而倍受关注, 由于IL-17RA跟其他已知的受体没有同源性, 使得其信号转导研究相对滞后, 但随着其下游关键接头蛋白Act1的发现, IL-17信号通路的分子机制正逐步被阐明。
现在已知TH17-IL-17轴在宿主防御、自身免疫性疾病发病以及肿瘤中发挥重要的作用, 相关研究已渐成为医学及免疫学研究的热点。
本文主要就近些年来IL-17的产生、信号传导的分子机制及其生理功能的研究进行系统阐述。
1 IL-17与IL-17受体1.1 IL-17细胞因子家族1993年, Rouvier等[2]首次从激活的啮齿类T细胞杂交瘤中克隆出CTLA-8的cDNA序列, 并发现其与一种T细胞疱疹病毒——松鼠猴疱疹病毒(Herpesvirussaimiri)的第13个开放阅读框(HSV13, vIL-17)有57%的同源性。
IL17的免疫调节作用及相关临床病症
溃疡性结肠炎 ( ulcerative colitis，UC)
溃疡性结肠炎( ulcerative colitis，UC)是一 种常见的复发性、非特异性慢性结肠炎症，病变以 局限于黏膜和黏膜下层为主要特点。
研究发现，UC 组患者血清 IL-23 和 IL-17 水 平明显高于正常，差异有显著统计学意义(P＜ 0.01) ，轻度、中度、重度 UC 患者血清 IL-23 和 IL-17 的浓度水平均呈逐渐升高趋势。说明 IL-23 和 IL-17 确实参与 UC 发生、发展过程，且可能在 UC 的发病机制中发挥积极的作用。
Th17细胞亚群的分化调节
由天然CD4+T细胞分化而来。 抗原呈递细胞（如DC）位于初始CD4+T细胞
分化途径上游： 炎症刺激环境+DC+Treg→Th17 抗原刺激信号+DC产生的IL-12→Th1 抗原刺激信号+DC产生的IL-4→Th2
Th-17细胞与CD4+CD25+Treg（调节性T细胞） 的分化相互抑制和排斥
感染发生后，天然免疫系统产生的IL-6抑制了Treg 的生成，在TGF-β协同作用下促进了Th-17的生成。
Th17与Treg可以相互转化，形成免疫网络。IL-6、 IL-23水平升高时，Treg自我分化为Th-17，IL-17 分泌释放增强，炎症反应持续存在和加重。在集体 炎症反应中，当Th17增加时常提示Treg减少。
参考文献
【1】戴小波,孙万邦.IL-17免疫调节作用的研究进展[J].检验医学与临床,2011,86（3）:32-35 【2】李绪斌,杨文东.类风湿关节炎早期患者血清IL217及MMP29水平变化[J].检验医学与临 床,2011,10(10):2524-2525 【3】张新春,王丽,胡华丽,刘磊.类风湿性关节炎检测 CRP 和 IL-17 的临床价值[J].中国实用医 药,2011,26(9):123-125 【4】夏婧,周影娜,张湘燕,张程.慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血清中ＩＬ－１７、ＭＭＰ－９水 平的变化及意义[J].贵州医药,2011,35(8):691-694 【5】林秋水,周许辉,王新伟,熊怡淞,东人,袁文.退变颈椎间盘中 IL- 17 表达与分布的研究[J].颈腰 痛杂志,2011,32(2):83-87 【6】郑紫丹,万晓强,刘梁英.溃疡性结肠炎患者血清 IL-23 和 IL-17 的水平变化及意义[J].细胞与分 子免疫学杂志,2011,27(2):203-204 【7】 Saito S,Nakashima A,Shima T,et al.Th1/Th2/Th17 and regulatory T-cell paradigm in pregnancy[J].Am J Reprod Immunol,2010,63(6):601-610. 【8】 Zeng WP,Chang C,Lai JJ.Immune suppressive activity and lack of T helper differentiation are differentially regu- lated in natural regulatory T cells[J].JImmunol,2009,183(6):3583-3590. 【9】 Toh ML,Kawashima M,Hot A,et al.Role of IL-17 in theTh1 systemic defects in rheumatoid arthritis through selective IL-12Rbeta2 inhibition[J].Ann Rheum Dis,2010, 69(8):1562-1567. 【10】 Liu ZJ,Yang L,Cui Y,et a1.IL-21 enhances NK cell activation and cytolytic activity and induces Th17 cell differentiation in inflammatory bowel disease[J].Inflamm Bowel Dis,2009,15(8):1133-1144.
Th17细胞、IL17与自身免疫性疾病
Th17细胞、IL-17与自身免疫性疾病作者：杨洁高继东张惠莉赵成玉【摘要】白介素17(IL-17)是新发现的炎症细胞因子. 它是由一种新的CD4+T细胞亚群Th17细胞高水平分泌，IL-17与其受体结合后通过信号转导介导炎症性反应，在多种自身免疫疾病和炎性疾病中发挥关键作用。
【关键词】 Th17细胞白介素17 自身免疫性疾病近年来，发现一类可以特异性产生IL-17的细胞，主要分泌IL-17(以下也称IL-17A)、IL-17F及少量IL-6和TNF-α等细胞因子，与传统Th1和Th2 细胞分泌的细胞因子谱明显不同，被称为Th17细胞亚群[1-2]。
其中分泌的IL-17具有调节前炎性因子、趋化因子等的产生及分泌，介导防御胞外病原微生物的感染，在类风湿性关节炎、自身免疫性甲状腺疾病等自身免疫性疾病的发生、发展中发挥重要作用[3]。
1 Th17细胞的发现实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)是小鼠自身免疫病模型，Park 等[4] 对动物模型的研究发现：清除或中和Thl型细胞因子γ干扰素或IL-12的功能，并不能预防或减轻疾病的进展。
而IL-23的缺失延缓EAE疾病的进展，还可降低体内IL-17细胞的比例。
随后的研究中，给予EAE小鼠抗IL-17抗体处理，可以延缓EAE所致麻痹的发生，并且使已经发生的麻痹明显减轻。
以上研究说明缺失IL-17T+细胞可以使EAE的发病受抑制，从而认识到IL-17T+细胞而不是经典的Thl细胞在此环境中诱导自身免疫病的发生。
因此，将这种能分泌IL-17的CD4+T细胞命名为一群新的T细胞亚群-Th17细胞。
Th17的重大发现及其作用的深入研究有助于指导我们对自身免疫性疾病发病机制的认识及开展新的治疗方法。
2 IL-17家族Th17主要效应因子是IL-17。
IL-17是含有一个N-末端信号肽的155个氨基酸的糖蛋白,分子质量为35ku，是一个由二硫键连接的同源二聚体组成的糖蛋白，在蛋白的C末端区域有5个空间上保守的半胱氨酸残基，形成IL-17家族典型的半胱氨酸结节。
小鼠白细胞介素(17(IL)17)说明书
小鼠白细胞介素（17(IL）17)说明书小鼠白细胞介素-17(IL-17)酶联免疫测定试剂盒使用说明本试剂盒仅用于研究目的检测范围:3PG/mL-120 pg/mL目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样品中白细胞介素-17的含量实验原理本试剂盒采用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素-17的水平用纯化的小鼠白细胞介素-17抗体包被微孔板，制备固相抗体。
将白细胞介素-17(IL-17)依次加入包被有单克隆抗体的微孔中，然后与辣根过氧化物酶标记的白细胞介素-17(IL-17)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标记的抗体复合物。
彻底清洗后，加入基质TMB进行显色TMB 在辣根过氧化物酶的催化下变成蓝色，在酸的作用下变成黄色。
颜色的深度与样品中的白细胞介素-17呈正相关。
用酶标仪在450纳米波长下测定吸光度(吸光度值)，用标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素-17的浓度。
试剂盒由1 2 3 4 5 6 30倍浓缩洗涤液酶标试剂酶标包被板样品稀释液显影剂A溶液显影剂B溶液20毫升× 1瓶6毫升×1瓶1 2孔×8条6毫升×1瓶6毫升×1瓶6毫升×1瓶6毫升×1瓶6毫升×1瓶/瓶789 10112终止液标准(240皮克/毫升)标准稀释液说明书密封板膜密封袋6毫升×1瓶0.5毫升×1瓶1.5毫升×1瓶1部分2件1 96T 256组成标本采集后应尽快提取，提取应根据相关文件进行，提取后应尽快进行实验如果不能立即进行试验，样品可以在-20℃下保存，但应避免重复冻融2。
因为NaN3抑制辣根过氧化物酶(HRP)活性，所以不能检测到含有NaN3的样品。
操作步骤1。
标准稀释:该试剂盒提供原始标准样品的一个标准样品。
用户可以根据下图在小试管中稀释120皮克/毫升60皮克/毫升30皮克/毫升15毫克/毫升7.5毫克/毫升5号、4号、3号、2号、1号、150微升原标准品、150微升标准稀释液、150微升5号标准品、150微升标准稀释液、150微升4号标准品、150微升标准稀释液、150微升标准稀释液、150微升标准稀释液、150微升标准稀释液、150微升3号标准品、150微升样品添加:分别设置空白孔(空白对照孔不添加样品和酶标试剂，其他步骤相同)、标准孔和个待测样品孔将50μl标准物质准确加入酶标包被板，将40μl样品稀释液加入待测样品孔，然后加入10μl待测样品(样品最终稀释5倍)添加样品将样品添加到酶标板孔的底部，尽量不要接触孔壁，轻轻摇动并混合均匀。
抑制IL—17活性短肽疫苗的抗动脉粥样硬化的治疗作用
抑制IL—17活性短肽疫苗的抗动脉粥样硬化的治疗作用目的将具有抑制IL-17活性的短肽疫苗主动免疫ApoE-/-小鼠，研究IL-17疫苗对动脉粥样硬化的治疗作用。
方法选取8 w龄健康雄性ApoE-/-小鼠，分两组，一组用生理盐水腹腔注射，一组用IL-17疫苗（0002）腹腔注射，每组12只，分别于0、2、4、6 w共免疫4次，实验结束后，测体重，以自动分析仪检测血清中血脂含量，留取心脏以油红染色的方法检测主动脉瓣环及主动脉大体标本的斑块面积及其成分分析。
结果结果表明IL-17疫苗（0002）在未影响小鼠体重及血脂情况下显著的减少斑块面积（P＜0.01）。
结论通过诱导产生具有靶向阻断作用的中和性抗体来产生作用的IL-17疫苗，为动脉粥样硬化的防治提供新思路。
标签：抑制IL-17活性短肽疫苗；ApoE-/-小鼠；动脉粥样硬化；斑块面积动脉粥样硬化（AS）及其心血管并发症严重威胁人类健康。
现代研究证实，动脉粥样硬化是一种缓慢进展性自身免疫性血管疾病。
T淋巴细胞是介导特异性免疫应答的主要免疫细胞[1]，按照其功能不同可以分为多种亚群，如Th1、Th2、CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）等。
以往的研究证实，AS动物模型和冠心病患者体内存在Th1细胞功能亢进和Treg细胞功能减低，抑制Th1细胞功能可以延缓AS进程[2-3]。
最近研究发现，机体存在一种新型的不同于Th1和Th2的CD4+效应性T细胞，该细胞特异性的产生白介素17（IL-17），称为Th17细胞。
有研究表明，冠心病患者和AS小鼠体内存在Th17细胞功能亢进，应用抗IL-17抗体干预可以显著减少AS斑块面积，提示IL-17在AS发病中起到重要促进作用。
因此，有理由针对IL-17这一靶点，进行免疫学干预，为AS的防治提供新思路。
我们的前期实验筛选设计了4条IL-17肽段（0001、0002、0003、0004），通过实验证明了所制备的IL-17疫苗（0002）所产生的抗体具有高度的特异性、稳定性及中和活性，并发现此短肽疫苗能有效引起小鼠的免疫反应。
人白细胞介素17(IL-17)说明书
人白细胞介素17（IL-17）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素17（IL-17）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-17（IL-17）水平。
用纯化的人白细胞介素-17（IL-17）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-17，再与HRP标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素-17（IL-17）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-17（IL-17）含量。
试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
IL-17的免疫调节作用
Th-17受到细胞因子的调节
• Th17发育成熟后,细胞的稳态、增殖及IL-17的释放主要 由IL-17、IL-23及IL-21调节。 • IL-23：由DC及其他抗原呈递细胞分泌的细胞因子IL-23 可以激活JAK-STAT信号途径,引起JAK2、Tyk2的磷酸化, 从而促进STAT3磷酸化，激活STAT3而促进IL-17的分泌。 另外，IL-23不像其他T细胞存活因子(如IL-7)一样持续 产生,因此,Th17细胞的长期存活依赖慢性炎症。 • IL-21 ：Th17细胞分泌的IL-21通过自分泌环路,促进 STAT-3和RORγ t表达,促进Th17细胞的增殖,是Th17细胞 生物学效应放大的主要机制。
B. IL-17可以提高CXC趋化因子的表达,进一步促进中性粒细胞 在炎症部位聚集;IL-17还可以引起支气管上皮细胞、静脉 内皮细胞、关节滑膜细胞释放CXC趋化因子配体(CXCL)-8, 引起中性粒细胞的趋化反应。
C. IL-17可以上调共刺激分子、主要组织相容性复合物(MHC) 抗原及T淋巴细胞刺激抗原肽呈递能力,促进DC成熟。 D. IL-17还可以放大共刺激分子如细胞黏附因子(ICAM)-1的诱 导作用，协同刺激T细胞的活化。
IL-17的分化调节作用
A. IL-17通过刺激靶细胞释放前炎症细胞因子及动员中性 粒细胞的细胞因子发挥作用,诱导IL-6、-氧化氮(NO) 和前列腺素E2(PGE2)产生,同时上调IL-1β 、TNF-α 、 INF-γ 和CD40配体等炎症细胞因子基因表达,促进局部 炎症的进展和扩大。IL-17与TNF-α 、IL-1β 相互作用, 产生协同效应,促进NO的合成及PGE2的表达,与IFN-γ 协同作用使靶细胞IL-8、单核细胞趋化蛋白(MCP)1mRNA表达增高，介导中性粒细胞和单核细胞聚集于炎 症部位,引起中性粒细胞蛋白酶和髓过氧化物酶(MPO) 等蛋白水解酶活性的增高,在体内引起中性粒细胞以间 隔腔室的形式大量聚集。
抗人白介素-17RA单克隆抗体的制备及活性检测
抗人白介素-17RA单克隆抗体的制备及活性检测徐真真;孙春昀;谢良志【摘要】目的制备具有中和人白介素-17RA (hIL-17RA)免疫活性的单克隆抗体,并探讨其生物学活性.方法通过基因工程技术制备抗hIL-17RA的单克隆抗体.采用OctetRED系统检测其亲和力,ELISA、Western blot和流式细胞术分析抗体的结合作用和种属交叉反应,人包皮成纤维细胞-1上细胞因子分泌实验检测抗体的中和活性.结果抗hIL-17RA单克隆抗体亲和力常数KD＜1.0×10-12mol/L,并与其他物种有一定的交叉结合反应,它能结合白介素(IL)-17RA并有效阻断其与配体的结合,抑制下游相关细胞因子IL-6、IL-8和人CXC趋化因子配体1的分泌.结论成功制备1株抗hIL-17 RA的中和抗体,为IL-17 RA相关疾病通路的研究提供了工具,也为IL-17RA靶点药物的开发奠定了一定的基础.【期刊名称】《中国医学科学院学报》【年(卷),期】2016(038)004【总页数】6页(P428-433)【关键词】白介素-17RA;白介素-17A;白介素-17F;抗体;人包皮成纤维细胞-1【作者】徐真真;孙春昀;谢良志【作者单位】中国医学科学院北京协和医学院细胞工程中心,北京100005;神州细胞工程有限公司新药研发部,北京100176;中国医学科学院北京协和医学院细胞工程中心,北京100005【正文语种】中文【中图分类】R915目前，白介素(interleukin，IL)- 17超家族包括6个配体(IL- 17A～IL- 17F)和5个受体(IL- 17RA～IL17 RE)。
IL- 17A最早在1993年发现，当时命名为CTLA8。
其受体IL- 17RA于两年后确认，且与以往发现的细胞因子受体家族无同源性[1]。
IL- 17受体家族成员都是一型单次跨膜蛋白，具有保守结构基序，包括胞外的类纤维结合素Ⅲ结构域、跨膜结构域和一个胞内的SEF/IL- 17R (SEFIR)结构域。
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市面上唯一的人的IL-17中和抗体—R&D systems公司
白细胞介素家17族（Interleukin 17 family，IL-17家族），是与白细胞介素17（Interleukin 17，IL-17）具有较高同源性、在脊椎动物进化中高度保守的一组蛋白质，目前共有六个成员，IL-17A （原IL-17）、B、C、D、E和F[1]。
其中，IL-17B、C、D、E、F的编码基因，是在人类基因组大规模测序过程中，通过同源性分析、EST序列拼接得到的。
白细胞介素17E（Interleukin 17E，IL-17E），又称作IL-25，是由活化的记忆T细胞产生的一种前炎细胞因子，可诱导多种趋化因子和细胞因子的表达，在炎症和造血过程中发挥重要作用。
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Cell Il-6 Secretion Induced by IL-17F and Neutralization by Human IL-17F Antibody.Recombinant Human IL-17F induces IL-6 secretion in the NIH-3T3 mouse embryonic fibroblast cell line in the presence of in a dose-dependent manner (orange line), as measured by the Mouse IL-6 Quantikine kit (Catalog # M6000B). Under these conditions, IL-6 secretion elicited by IL-17F is neutralized (green line) by increasing concentrations of Mouse Anti-Human IL-17F Monoclonal Antibody (Catalog # MAB13352). The ND50 is typically 0.1-0.6 ug/mL.。