刚果红

用这办法判断酶活力大小的，实际上刚果红是结合到培养基的多糖底物，但分解纤维素的细菌能产纤维素酶，能分解这个多糖底物成为寡糖，这样刚果红便不能结合上往了，氯化钠呢即可使结合不牢的刚果红洗往，这样便留下大大小小的透明圈，大的透明圈当然分解纤维素的能便强啦。

刚果红染色法的原理
刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。

当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红——纤维素的复合物便没法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

刚果红染色法：
常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色响应，另一种是在倒平板时便加入刚果红。

办法一在长出茵落的培养基上，覆盖质量浓度为1 mg／mI。

的CR溶液，10～15 min后，倒往CR 溶液，加入物质的量浓度为l mol／I。

的NaCI溶液，15 min后倒掉NaCl溶液，此时，产生纤维素酶的茵落周围将会出现透明圈。

办法二配制质量浓度为10 mg／mI。

的CR溶液，灭菌后，按照每200 mI。

培养基加入1 mI。

的比例加入CR溶液，混匀后倒平板。

等培养基上长出茵落后，产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的透明圈。

两种刚果红染色法的比较
刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过20年的历史，课本中给出了两种办法。

办法一是传统的办法，缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色响应基本上是纤维素分解菌的作用。

办法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂问题，缺点是由于在纤维素粉和琼脂、土豆汁中全部含有淀粉类物质，能使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性响应。

但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊，由于培养基中纤维素占主要地位，因此能与纤维素酶产生的透明圈相区分。

办法二的另一缺点是：有些微生物具有降解色素的本事，它们在长时间培养过程中会降解刚果红而形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。

这个没有方程式，首先这只是个简单的酶促反应，纤维素可以被纤维素酶分解为纤维二糖，再分解为葡萄糖，而纤维素可以和刚果红染液形成红色复合物。

而纤维素分解菌产生纤维素酶，将菌落的周边的纤维素分解，复合物消失，红色褪去，出现透明圈。

刚果红和纤维素能形成红色复合物，但是在有纤维素分解菌时，它会将周围的纤维素分解掉，所以使菌落周围红色褪去，出现透明圈。