稳态荧光分析方法与应用进展
稳态瞬态荧光光谱仪在荧光探针开发上的应用
稳态瞬态荧光光谱仪在荧光探针开发上的应用下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改,请根据实际需要进行相应的调整和使用,谢谢!并且,本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,如想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!稳态瞬态荧光光谱仪在荧光探针开发中的核心作用在现代科学研究中,荧光探针是一种不可或缺的工具,广泛用于生物学、化学、医学和环境科学等领域,它们能够通过荧光信号的变化来揭示特定分子事件或环境条件。
荧光分析法在药物分析中的应用新进展探索
荧光分析法在药物分析中的应用新进展探索摘要:在分析研究理论的基础上,探讨了其在药物分析中的应用,并提出了今后的发展方向。
我们就是在探索荧光分析法在药物分析中的应用新进展。
关键词:荧光分析法;药物分析;应用新进展前言:根据分析化学以及药物化学分析理论,药物分析在此基础上发展。
电化学分析、色谱以及光化学分析是常见的手段。
而其中光化学分析中包括原子吸收光谱分析和荧光分析等等,分析中光化学分析是很好的选择,它的灵敏度很高,检测比较准确,优势也比较突出。
在本文中使用荧光分析法加快药物分析的研究。
荧光分析法与其他分析法不同,最主要的优势就是具有较少的干扰、灵活度高、线性的范围较宽,而且仪器结构比较简单,成本也比较低。
目前应用到了生活中的各个领域,比如说在药物分析中和环境保护中。
一、常见的荧光分析法的应用1、同步荧光光谱法在药物分析中,常用的方法有同步荧光光谱法,主要包括不同类型的方法,如恒波长法、恒能量法法和可变角法。
我们采用恒波长法进行分析,它在药物分析中的应用是扫描检测激发波长和发射波长之间的距离,实现药物相关含量的检测,分析过程中要注意波长间距的选择,避免荧光光谱的变化利用化合物的特性进行优化,消除干扰,降低强度。
这个技术它的灵活度较高,分辨率越强,已经成为检测样品中的有效方法。
2、胶束增敏荧光分析法在药物分析中胶束增敏荧光法它是在20世纪后期兴起的一种化学分析方法,同步荧光技术的原理是扫描发射和激发波长,得出荧光光谱。
其主要原理是检测药物分子结构或分子温度、电荷等的变化,结合微观条件下胶束引起荧光分子无辐射还原的特点。
在这种变化的同时,速度不变,量子效率提高分子中的成分被吸附在外围,对其行动进行限制。
这种缝隙法比较简便,检测的灵敏性也较高,具有较高的研究价值。
它具有增溶和增稳作用。
例如,发现甲醛在酸性介质中可以催化刚果红氧化成溴酸钾,生物活性混性十二烷基硫酸钠可以提高反应的灵敏度,可以更快地建立和测定甲醛的方法,测量的结果也与药典法相符。
蛋白质稳态技术中的稳定性测量与分析方法
蛋白质稳态技术中的稳定性测量与分析方法蛋白质是生命体内重要的基础组成部分,其稳定性对于其功能和结构的保持至关重要。
在蛋白质研究中,稳定性测量与分析方法具有重要的意义,可以帮助科学家们更好地了解蛋白质的特性和功能。
本文将介绍蛋白质稳态技术中常用的稳定性测量与分析方法。
1. 热变性曲线测量法热变性曲线测量法是一种常用的蛋白质稳定性测量方法。
通过在不同温度下监测蛋白质的二级结构变化,可以得到蛋白质的热变性曲线。
在热变性曲线中,蛋白质的熔解温度(Tm)可以用来评估蛋白质的稳定性。
高熔解温度表示蛋白质更加稳定,而低熔解温度则表示蛋白质较不稳定。
2. 地方性波谷测量法地方性波谷测量法是一种测量蛋白质稳定性的新方法。
通过在不同压力下监测蛋白质的变化,可以得到地方性波谷图。
地方性波谷图中的波谷位置和形状可以反映蛋白质的稳定性。
高波谷位置和尖锐的波谷表示蛋白质更加稳定,而低波谷位置和平缓的波谷则表示蛋白质较不稳定。
3. 荧光分析法荧光分析法是一种常用的蛋白质稳定性分析方法。
通过荧光染料与蛋白质结合,可以测量蛋白质的荧光光谱。
荧光光谱中的峰值位置和强度可以用来评估蛋白质的稳定性。
稳定的蛋白质通常具有清晰的峰值和较高的荧光强度,而不稳定的蛋白质则可能表现为模糊的峰值和较低的荧光强度。
4. 微量色谱法微量色谱法是一种高效的蛋白质稳定性测量方法。
通过将蛋白质溶液通过柱层析,并监测蛋白质峰的形状和保留时间,可以评估蛋白质的稳定性。
稳定的蛋白质通常表现为清晰的峰形和较长的保留时间,而不稳定的蛋白质则可能表现出模糊的峰形和较短的保留时间。
总结起来,蛋白质稳定性测量与分析方法包括热变性曲线测量法、地方性波谷测量法、荧光分析法和微量色谱法。
这些方法可以帮助科学家们评估蛋白质的稳定性,并进一步了解蛋白质的结构和功能。
相信随着技术的不断进步,蛋白质稳态技术将在生命科学领域中发挥越来越重要的作用。
稳态-瞬态荧光光谱仪实验报告
稳态-瞬态荧光光谱仪实验报告1. 了解稳态荧光和瞬态荧光的基本概念和原理;2. 学习荧光光谱仪的使用方法;3. 研究荧光作用的动力学特性。
实验原理:荧光指的是当物质受到紫外线或其他激发光源的激发后从激发态跃迁到基态时所发生的发光现象。
荧光是一种具有单色性、狭带性和宽度较小的光谱线,荧光光谱通常由荧光强度(I)和发射波长(λ)两个参数描述。
稳态荧光与瞬态荧光:稳态荧光是指物质受到长时间的激发后,其达到稳态时所产生的荧光。
稳态荧光光谱是弛豫时间很短的发光现象,荧光持续时间与激发源相同,荧光的时间与激发源没有关系。
稳态荧光光谱实验可以用荧光光谱仪进行测定。
瞬态荧光是指物质受激后所发生的短暂的荧光。
瞬态荧光往往随着激发时间的改变而发生变化,因此瞬态荧光可以用来研究物质的动力学过程,如荧光猝灭、激发传递等。
荧光光谱仪:荧光光谱仪是一种专门测量荧光的仪器,其原理是利用荧光物质在激发光的作用下产生的荧光现象,将荧光频率分开,通过光谱仪分光装置记录下来,通过电子计算器处理,得出荧光光谱。
实验步骤:1. 样品制备:将样品加入水或其他溶剂中,搅拌混合均匀,用0.45μm滤膜过滤,将滤液移入荧光比色皿中。
2. 荧光光谱测定:将荧光比色皿置于荧光光谱仪中,选择相应的激发波长和发射波长测定荧光光谱,测定后将光谱数据保存。
3. 瞬态荧光测定:利用荧光光谱仪测定激发束界面上样品发光观察时间,测量其强度及荧光衰减曲线,记录数据并进行分析。
实验结果:通过稳态荧光和瞬态荧光实验,我们可以得出荧光物质的荧光光谱,同时也能够深入了解荧光作用的动力学特性,为进一步的研究提供了基础数据。
实验结论:稳态荧光和瞬态荧光是研究荧光作用的重要手段,荧光光谱仪则是对荧光的测量和分析提供了有效的工具。
通过本次实验,我们深入了解了稳态荧光和瞬态荧光的基本原理和特性,并掌握了荧光光谱仪的使用方法,对进一步的荧光研究奠定了基础。
稳态荧光法研究芘探针浓度和溶液极性对疏水缔合聚合物自缔合行为的影响
稳态荧光法研究芘探针浓度和溶液极性对疏水缔合聚合物自缔合行为的影响杨雪杉;郭拥军;柳建新;梁严;钟金杭;冯茹森【摘要】采用溶液聚合合成了丙烯酰胺-丙烯酸钠-十六烷基二甲基烯丙基氯化铵微嵌段疏水缔合水溶性共聚物(AL),以芘(Py)为探针,运用稳态荧光光谱法研究了芘浓度和溶液极性对该共聚物在水溶液中聚集行为的影响.结果表明,当研究参数主要考察I3/I1时,芘浓度适宜偏低,当主要考察IE/IM时,芘浓度过高适宜.而随着溶液极性的增加,聚合物缔合效应增强,聚集数增大.%A micro-block hydrophobically associating water-soluble copolymer(AL) of acrylamide-sodi-umacrylate-cetyldimethyldiallylammoniumchloride (AM-NaAA-C16 DMAAC) was prepared by solution polymerization. Using steady-state fluorescence spectrometry with pyrene as a probe, the effects of pyrene concentration and solution polarity on the aggregation behavior in the aqueous solution of the copolymer was studied. The results showed that, when the parameters were mainly about I3/I1, pyrene probe concentration appropriate lower, whereas the main investigation was IE/IM, it suitable for high. In addition, with the increase of the solution polarity, the polymer association effect enhanced and the aggregation number increased.【期刊名称】《应用化工》【年(卷),期】2013(042)002【总页数】6页(P195-199,204)【关键词】稳态荧光;疏水缔合聚合物;自缔合行为;芘浓度;溶液极性【作者】杨雪杉;郭拥军;柳建新;梁严;钟金杭;冯茹森【作者单位】西南石油大学化学化工学院,四川成都610500;西南石油大学化学化工学院,四川成都610500;西南石油大学“油气藏地质及开发工程”国家重点实验室,四川成都610500;西南石油大学“油气藏地质及开发工程”国家重点实验室,四川成都610500;西南石油大学化学化工学院,四川成都610500;西南石油大学化学化工学院,四川成都610500;西南石油大学化学化工学院,四川成都610500【正文语种】中文【中图分类】TQ423.11疏水缔合共聚物是一类含有少量疏水基团的水溶性功能大分子[1]。
tio2 稳态荧光光谱
tio2 稳态荧光光谱
二氧化钛(TiO2)是一种常见的半导体材料,其稳态荧光光谱是一个非常重要的分析手段,用于研究二氧化钛的电子结构和光物理性质。
下面是对二氧化钛稳态荧光光谱的详细说明:
1. 荧光光谱的基本原理:荧光光谱是一种通过测量物质在受到激发光照射后发出的荧光来分析物质特性的方法。
当物质受到激发光照射时,其电子结构会被激发,随后电子会回落到基态,同时发出荧光。
荧光光谱可以提供关于物质电子结构和光学性质的重要信息。
2. 二氧化钛的荧光光谱:对于二氧化钛荧光光谱的研究,通常采用脉冲激光或连续激光器作为激发源,以测量二氧化钛在受到激发后发出的荧光。
通过测量不同波长的荧光强度和分布,可以获得二氧化钛的能级结构和电子跃迁信息。
3. 稳态荧光光谱:稳态荧光光谱是一种特殊的荧光光谱技术,它通过长时间平均测量来获取荧光信号的统计性质。
稳态荧光光谱通常采用连续激光器作为激发源,并使用光电倍增管或单光子计数器来检测荧光信号。
4. 二氧化钛稳态荧光光谱的应用:二氧化钛稳态荧光光谱可以用于研究二氧化钛的电子结构和光物理性质。
通过对荧光光谱的分析,可以了解二氧化钛的能级结构、电子跃迁类型和能量转移过程等重要信息。
此外,二氧化钛稳态荧光光谱还可以用于二氧化钛材料的质量控制和优化,以及新型二氧化钛材料的设计和开发。
二氧化钛稳态荧光光谱是一种非常有用的分析手段,可以提供关于二氧化钛材料电子结构和光物理性质的详细信息,对于二氧化钛材料的研究和应用具有重要意义。
模块化稳态荧光光谱仪 Fluorolog-QM
模块化稳瞬态荧光光谱仪Fluorolog-QM ™系列新一代高灵敏度、高灵活性滚滚长江东逝水Fluorolog-QM TM独特优势2Fluorolog-QM™第四代Fluorolog荧光光谱仪“仪器性能、通用性及操作便捷性的飞跃提升”反射式光路设计,保证全波长范围性能优化高灵敏度保证优异的杂散光抑制比,像差校正长焦长单色仪(单级:350 mm,双级:700 mm)新一代专业分析软件,满足所有稳态和寿命测试需求,具有多种全新功能扩展波长范围,从深紫外到近红外区域可同时连接4种光源和6个检测器,且全部由电脑控制,实现多功能测试即插即用,100 MHz脉冲光源,强化TCSPC寿命功能 近红外稳态和磷光寿命检测波长至5500 nm优化的光学设计,深紫外激发(低至180 nm),无臭氧DeltaDiode, DataStation, DAS6, FelixFL, FluorEssence, EzSpec, EzTime, NanoSizer都是3技术和应用Fluorolog-QM 涵盖广泛的发光相关研究材料研究 ● 地球科学4混合体系瞬时反应三维光谱偏振和各向异性磷光吸收及透射时间分辨发射谱滴定测试荧光/磷光寿命测试比率荧光量子产率微孔板分析仪微区分析低温荧光温度控制上转换时间相关动力学纳米材料科学化学分析科学生物物理学高分子化妆品材料研究食品科学石油化工地质学法医学光伏领域稀土元素环境科学制药行业•Food Science•Life Sciences5● 化学 ● 食品科学 ● 生命科学需要更深紫外的光源?6荧光光谱仪灵敏度测试的行业标准是根据水拉曼计算信噪比。
Fluorolog-QM的信噪比在标准测试中已被证实具有超高水平,并且是在使用超低功率光源条件下实现的。
分辨率对光致发光研究至关重要。
高质量的分辨率可实现材料科学和分析化学等研究领域至关重要的光谱细节表征。
分辨率是检测极窄光谱特征的关键,是研究无机材料和晶体相互作用过程的关键。
(完整word版)稳态-瞬态荧光光谱仪操作说明书
稳态/瞬态荧光光谱仪(FLS 920)操作说明书一、仪器测试原理时间相关单光子计数原理是FS920测量荧光寿命的工作基础。
时间相关单光子计数法(time-correlated single photon counting)简称“单光子计数(SPC)法",其基本原理是,脉冲光源激发样品后,样品发出荧光光子信号,每次脉冲后只记录某特定波长单个光子出现的时间t,经过多次计数,测得荧光光子出现的几率分布P(t),此P(t)曲线就相当于激发停止后荧光强度随时间衰减的I(t)曲线。
这好比一束光(许多光子)通过一个小孔形成的衍射图与单个光子一个一个地通过小孔长时间的累计可得完全相同的衍射图的原理是一样的。
二、测量之前需要特别注意的事项1.在切换光源、修改设置或放样品之前必须把狭缝(Δλ)关到最小(0.01nm),否则会损坏光电倍增管!如果打开样品室盖子之后,Em1的Signal Rate增加,请停止实验并立即与工作人员联系!2.测量样品的瞬态性质之前,请用先对样品的稳态性质进行表征,了解样品的激发光谱与发射光谱及最佳激发波长和发射波长;3.用PMT检测时,必须等稳压电源CO1的温度示数在-15ºC以下才可以开始采集数据;4.狭缝范围0。
01~18nm,调节时注意不要超过其上限;(L1: 1mm相当于1.8nm, 200—900nm);(L2: 1mm相当于5。
4nm, 900—1900nm)5.每次设置完参数后都要点击Apply或者回车键确定;6.文件保存路径为:C:\data\导师\自己文件夹7.用专用u盘拷贝数据并到另一台电脑发送数据8.如实填写仪器使用记录,爱护仪器。
三、稳态荧光光谱的测定1.紫外可见区稳态荧光光谱的测定步骤1)打开Xe900电源,待其稳定,稳定后电压约16—17V,电流25A;2)打开CO1电源和FLS920主机电源;3)打开计算机,双击桌面上F900图标,进入工作站4)点击窗口左上角的按钮,进入Signal Rate设置窗口,先将Excitation Wavelength和Em1Wavelength处的Δλ均设置为0。
荧光光谱分析动力学法及应用
荧光光谱分析动力学法及应用指导老师:胡广林教授作者:秦志平学号:07401015海南大学材料与化工学院应用化学摘要提出了动力学法用于荧光光谱分析的基本原理,并推导了用于定量分析的四个公式。
关键词动力学;原理;荧光光谱AbstractAbstract:the basic principle of fluorescence Spectrophomet analysis with kinetic has been put forward.Four formulas of quantitative analysis for fluorescence spectrophometry with kinetics has been deduced.Key words:kinetic ;priciple; fluorescence specrophometryX 射线荧光光谱分析(XRFA)具有制样简便、分析速度快、重现性好、准确度高、分析范围广和对环境无污染等特点,己应用于冶金、有色金属、地质、矿山、建材、环境、科学和商检等诸多领域.然而.由于XRFA 中存在不可避免的基体效应、矿物粒度效应、样品不规则效应和元素间的干扰(谱线重叠和吸收)效应等.使得XRFA 技术的应用受到一定的局限性.就普通XRFA 技术(如波长色散X 射线荧光分析)而言.用于常量及半微量元素的分析.尚能获得较理想的准确度;但这种技术如果用于微量尤其是痕量元素的测定.误差通常就很大.尤其是复杂基体样品中微量或者痕量元素的分析就更是如此.为提高微量尤其痕量元素测定的准确度.采用湿法化学技术分解样品和进行微量尤其是痕量元素的预富集是非常必要的.虽然这会影响XRFA 技术的测定速度.而操作也较为繁琐、费时.但毕竟为XRFA 技术在微量尤其是痕量分析方而的发展.找到了一条好的路.从现有的预富集技术来看.微量元素测定的检测下限大都可以达到0. xug 的数量级.但这仍是不能很好地满足痕量元素测定的要求.动力学分析技术(包括正催化和负催化技术)具有灵敏度高、有一定选择性的特点己经在分光光度技术中得到很广泛的应用,其检测下限往往可以达到纳克数量级.但能否用于XRFA 技术尤其是分析方法的基木原理.尚很少见人报道过.文中进行了理论推导提出了动力学分析用于XRFA 技术的基木原理和定量分析的四个基木公式.1基本原理1.1正催化(诱导)动力学技术正催化反应也称催化反应.还包括诱导反应.现假定由物质A 和B 反应生成物质M 和N 的反应在一定条件(如温度、酸度和离子 强度等一定)下为慢反应.因物质X 的存在.其反应速度明显加快.可表示为A+bB=mM+nN (1)前人己经证明用反应物A 的浓度或活度表示的速度方程为c c c x X b B a A A dt dCα- (2) 或者以生成物M 的浓度或活度表示的速度方程为c c c x X b B a A Bdt dC α (3) 以上各式中的C A , C B C M 和C X 分别为物质A ,和X 在某一时刻的浓度或活度,b, m,n 和x 为反应系数,a, b ’为浓度或活度指数,dCA/dT 和dCm/dt 分别为物质A 和M 的浓度或活度对反应时间的导数或微分.1. 1. 1以反应物A 的浓度或活度表征如果反应物B 的初始浓度或活度远大于的反应物A 的初始浓度或活度,则因反应进行到某一时刻而消耗的量可以忽略,可认为Cs 为常数.实际分析中,总可以找到催化反应对X 和A 而言为一级反应或假一反应的物质X 的浓度或活度.此时(2)式变为c c x A A dt dcα (4)假定物质A 在反应进行到某一时刻的浓度或活度可以用其中某个元素的一条谱线的X 射线荧光强度I A 。
论原子荧光光谱分析技术的创新与发展
论原子荧光光谱分析技术的创新与发展【摘要】原子荧光光谱分析技术是一种重要的分析方法,具有广泛的应用价值。
本文首先介绍了原子荧光光谱分析技术的概述和应用价值,接着对其发展历程和关键技术创新进行了详细探讨。
结合研究进展,分析了原子荧光光谱分析技术在环境监测和生物医学领域中的应用情况。
展望了该技术的未来发展方向,并探讨了它对科学研究和技术发展的重要影响。
通过本文的阐述,读者可以更深入地了解原子荧光光谱分析技术的创新与发展,以及其在不同领域的应用前景。
【关键词】关键词:原子荧光光谱分析技术、创新、发展、历程、关键技术、研究进展、环境监测、生物医学、未来发展方向、影响、应用价值。
1. 引言1.1 原子荧光光谱分析技术概述原子荧光光谱分析技术是一种基于原子的分析方法,利用原子在光激发下吸收特定波长的能量并发射特征光谱的特性进行元素分析。
其原理是原子在高能级激发后会回到基态并发射特定波长的光谱线,每种元素都有独特的谱线,通过测量这些谱线的强度和波长可以确定样品中元素的种类和含量。
原子荧光光谱分析技术具有灵敏度高、准确性好、分析速度快、不需预处理样品、非破坏性等优点,被广泛应用于环境监测、食品安全、药品分析、地质勘探等领域。
随着仪器设备的不断改进和技术的进步,原子荧光光谱分析技术在分析精度和灵敏度上都取得了重大突破和创新,为科学研究和工业生产提供了强大的技术支持。
1.2 原子荧光光谱分析技术的应用价值原子荧光光谱分析技术是一种重要的化学分析技术,具有广泛的应用价值。
其主要应用领域包括环境监测、生物医学领域以及工业生产等方面。
在环境监测方面,原子荧光光谱分析技术可以用于检测环境中的各种重金属和有机物质的含量,包括汞、铅、镉等对人体有害的物质。
通过该技术,可以快速准确地分析出环境样品中的各种成分,为环境保护和治理提供重要依据。
在生物医学领域中,原子荧光光谱分析技术可以用于检测人体内的微量元素含量,如铁、锌、镉等,帮助医生诊断疾病和制定治疗方案。
时间分辨光谱和稳态光谱
时间分辨光谱和稳态光谱全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:时间分辨光谱和稳态光谱是光谱学中的两种重要的研究方法,它们分别通过不同的技术手段来研究物质的光谱特性。
时间分辨光谱是一种通过分析物质吸收或发射光的时间演变来研究物质的性质和动力学过程的方法,而稳态光谱则是研究物质在静态状态下的光谱特性。
本文将分别介绍时间分辨光谱和稳态光谱的原理、应用以及在科学研究和工程应用中的意义。
时间分辨光谱是一种通过记录物质吸收或发射光的时间演变来研究物质的性质和动力学过程的方法。
在时间分辨光谱中,研究者可以通过快速激发样品并记录其光谱响应的方式来研究样品的动力学行为。
时间分辨光谱主要包括时间分辨荧光光谱、时间分辨吸收光谱等。
时间分辨光谱在很多领域都有广泛的应用。
在生物医学领域,时间分辨荧光光谱可以用来研究生物分子的结构和动力学过程,进而帮助诊断疾病。
在材料科学领域,时间分辨光谱可以用来研究材料的电子结构和光电性质,从而为材料设计和合成提供重要参考。
在环境监测和食品安全领域,时间分辨光谱也可以用来分析和鉴定样品中的化学成分。
稳态光谱是研究物质在静态状态下的光谱特性的方法。
在稳态光谱中,研究者通常测量材料吸收或发射光的强度,并通过分析光谱曲线来研究材料的结构和性质。
稳态光谱包括紫外-可见吸收光谱、红外光谱、拉曼光谱等。
第二篇示例:时间分辨光谱和稳态光谱是光谱学中两个重要的概念,它们在研究物质的性质和变化过程中扮演着不可替代的角色。
时间分辨光谱是通过观察物质在不同时间点上的光谱变化来研究其动力学过程,而稳态光谱则是在物质处于稳定状态时获得的光谱信息。
本文将从时间分辨光谱和稳态光谱的定义、原理、应用以及未来发展等方面展开讨论,以便更好地了解这两种光谱技术的特点和价值。
让我们来了解一下时间分辨光谱和稳态光谱的基本定义。
时间分辨光谱是一种能够在极短时间尺度内解析物质动力学过程的光谱技术,它能够提供随时间演变的光谱信息,从而揭示了物质的光学、结构和电子性质在不同时间点上的变化。
荧光寿命测定的现代方法与应用
七彩的荧光
主要内容
• 荧光及荧光分光光度计的发展 • 荧光寿命的基本原理 • 荧光寿命测定的现代方法及数据处理 • 测定荧光寿命的一些应用 • 测定荧光寿命的仪器
The Development of Fluorescence Microscopes
The first fluorescence microscopes were developed between 1911 and 1913 by German physicists Otto Heimstt and Heinrich Lehmann as a spin-off from the ultraviolet instrument.
时间相关单光子记数法(Time-Correlated Single-Photon
Counting , TCSPC)
实际测定中,必须调节样品的荧光强度,确保每次激 发后最多只有一个荧光光子到达终止光电倍增管。否 则会引起“堆积”效应(Pileup Effect)。
“堆积”效应是指荧光衰减曲线向短寿命一方偏移 的现象。
(b) 检测时间门与荧光衰 减关系示意图
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
频闪技术(Strobe Techniques)
频闪技术(Strobe Techniques)的优缺点: 新一代频闪分时光谱仪有着TCSPC 的准确性,比
相调制测定速度更快,操作也很方便,仪器价格也大 大降低。不过脉冲法得到的荧光衰减曲线包含噪音的 水平尚无法知道,在数据分析时应当有所估计。
频闪技术(Strobe Techniques)
频闪技术也叫脉冲取样技术( Pulse Sam-pling Techniques) ,1987 年PTI 公司将纳秒级频率荧光寿命测定仪商品化。最近 PTI 公司推出了新一代频闪分时光谱仪。脉冲取样法测定荧光寿 命工作原理如下图所示。
紫外可见区稳态荧光光谱
紫外可见区稳态荧光光谱紫外可见区稳态荧光光谱指的是在紫外可见波段范围内,物质在激发状态下发射的稳态光谱。
稳态荧光光谱是一种非常重要的分析方法,广泛应用于化学、生物、环境等领域的实验研究和工业生产中。
本文将详细介绍紫外可见区稳态荧光光谱的原理、应用以及相关技术。
首先,我们来了解一下稳态荧光光谱的原理。
稳态荧光光谱是通过将样品置于紫外可见光的照射下,激发其电子到高能级,然后观察其发射的荧光光谱。
在紫外可见区,分子的电子能级之间的能量差距较小,因此激发的电子很容易跃迁回到基态,同时发射出特定波长的光子。
这种发射出的光谱即为稳态荧光光谱。
稳态荧光光谱的应用非常广泛。
首先,它可以用于物质的结构表征和分析。
不同的物质具有不同的化学结构和分子构型,因此它们在激发状态下发射的荧光光谱也会有所不同。
通过对荧光光谱的观察和分析,可以推断出物质的化学组成、结构特征以及物质间的相互作用等信息。
其次,稳态荧光光谱也可用于荧光探针的设计和合成。
荧光探针是一种能够被选定的分子或离子高选择性地识别和检测的化合物。
通过设计合成特定结构的荧光探针,并观察其发射的荧光光谱,可以实现对目标分子的高灵敏度和高选择性的检测。
最后,稳态荧光光谱还可以用于物质的定量分析。
荧光强度与物质的浓度成正比,通过测量荧光强度的变化,可以对物质的浓度进行定量分析。
在实际的应用中,稳态荧光光谱的测量通常需要使用荧光光谱仪。
荧光光谱仪是一种精密的仪器,可以同时测量样品在不同波长下的光吸收和荧光发射。
在测量时,首先,将待测样品溶解在合适的溶剂中,并配制成一定浓度的溶液。
然后,将溶液置于荧光光谱仪中心,通过逐渐增加照射能量来激发样品的电子。
通过荧光光谱仪的探测系统,可以实时监测到样品发射的荧光光谱,并将其转换成电信号进行记录和分析。
需要注意的是,在进行稳态荧光光谱测量时,要尽量减少干扰。
首先,溶液的浓度要适宜,过浓的溶液会导致荧光发射强度过强而饱和,影响测量结果。
稳态瞬态荧光光谱
稳态瞬态荧光光谱
稳态瞬态荧光光谱是一种用于表征化合物分子内部电子能级跃迁的
技术。
该技术在分子结构分析、药物设计和生物医学研究等领域都有
广泛应用。
本文将对稳态瞬态荧光光谱进行详细介绍,包括定义、测
量原理、应用和前景等方面。
一、定义
稳态瞬态荧光光谱是一种用于表征分子电子态转移过程的技术。
它利
用分子在受到激发后发生的荧光现象,揭示分子内部的化学和物理过程,从而确定分子的结构和性质。
二、测量原理
稳态瞬态荧光光谱测量原理主要是利用激发激光产生的电子能量激发
样品分子中的原子或分子电子从基态跃迁到激发态,产生稳态荧光和
瞬态荧光,通过测定他们的发射光谱和寿命来分析分子的结构和性质。
三、应用
稳态瞬态荧光光谱在化学、生物化学等领域都有广泛应用。
在化学领域,它可以用来分析分子结构、电荷转移和能级跃迁等过程。
在生物
化学方面,它可以研究细胞代谢过程,包括蛋白质结构和功能、肿瘤
生长等方面。
四、前景
随着技术的不断提升,稳态瞬态荧光光谱被越来越广泛地应用于科学
研究中。
同时,关于其在材料、化学、生物医学和环境等方面的应用
也在不断地拓展和完善中,为人类的生活和健康带来更加明显的贡献。
五、总结
稳态瞬态荧光光谱是一种先进的分析技术,能够准确分析分子的结构
和性质。
其应用领域广泛,能够解决许多科学难题,并取得了显著的
成果。
它在科学研究中的应用前景十分广阔,并将继续发挥重要作用。
蛋白质稳态技术的成像分析方法
蛋白质稳态技术的成像分析方法蛋白质是生物体中最重要的分子之一,它们在细胞内发挥着各种重要的生物学功能。
了解蛋白质的分布和动态变化对于研究细胞的功能和机制具有至关重要的意义。
蛋白质稳态技术的成像分析方法为我们提供了分子水平上观察蛋白质的局部化、相互作用及其动态变化的工具。
蛋白质稳态技术的成像分析方法主要包括荧光显微镜技术、原核生物中的生物传感器技术以及同位素稳定分析技术。
这些方法能够帮助研究人员直接观察蛋白质在细胞内的分布、定位以及相互作用等关键信息。
首先,荧光显微镜技术是广泛应用于蛋白质稳态研究的一种方法。
通过将荧光染料或荧光蛋白标记到目标蛋白质上,研究人员可以直接观察到蛋白质在细胞内的定位和行为。
例如,通过免疫荧光标记的方法,可以将特定抗体与目标蛋白质结合,然后使用荧光染料标记这些抗体,从而实现对蛋白质的定位和分布的观察。
此外,还可以使用荧光蛋白标记技术,通过将荧光蛋白基因导入细胞,使其表达与目标蛋白质形成融合蛋白,并利用荧光显微镜观察其在细胞内的行为。
其次,原核生物中的生物传感器技术是一种研究蛋白质稳态和相互作用的重要方法。
生物传感器是利用生物体本身的信号传导系统或表达系统来检测和测量特定的化学或生物学事件。
通过工程化原核生物,将目标蛋白质与报告蛋白质结合形成生物传感器,研究人员可以通过监测报告蛋白质的信号变化来推测目标蛋白质在细胞内的定位和变化。
例如,可以利用荧光蛋白作为报告蛋白质,并将其与目标蛋白质进行融合,在细胞内观察荧光的变化来研究目标蛋白质的动态行为。
最后,同位素稳定分析技术是一种利用同位素标记来研究蛋白质动态变化的方法。
这种方法通过将同位素稳定标记物(例如15N、13C等)与蛋白质一起培养或者合成,然后追踪同位素标记物在目标蛋白质中的分布和代谢情况。
通过分析同位素标记物的变化,可以了解蛋白质的合成、降解和动态变化等重要信息。
同位素稳定分析技术常常与质谱分析等技术结合使用,以实现对蛋白质动态变化的深入研究。
稳态光致发光光谱
稳态光致发光光谱
稳态光致发光光谱法,又叫静态光致发光光谱法,是一种非常受欢迎的光谱分析技术,在生活中应用广泛。
光谱分析是指用光来分析或测量物质的物理或化学性质,在许多研究领域,如医学研究、食品安全分析以及物质结构分析等,光谱分析发挥着重要作用。
稳态光致发光光谱法是一种基于能量转移原理的光谱分析技术,它可以测量物质中化学张力的位移及物质结构变化,从而定量分析未知物质的物质组成及获取所需数据。
该方法的优点在于可以分析有机、无机等物质的体积结构,可显著提高实时监测的精度,且可快速判定物质组成或形貌等信息,广泛应用于气体中细微成分分析、小分子有机化合物测定中污染物特征检测、免疫学检测及医学研究等。
稳态光致发光光谱法的应用也涉及到了娱乐领域。
它可以用来分析一种动漫、电影或游戏的图像与氛围,检测图像背景和每一个元素的亮色度、频率、色度及其它复杂的光谱参数,从而可以帮助玩家更轻松的掌握焦点信息。
总之,稳态光致发光光谱法不仅在研究领域应用广泛,而且还可以将其作为一种娱乐理念应用到日常生活当中,带给人们惊喜和消遣。
它正在成为当今社会事物研究的一个必要工具,也正在成为现代日常生活中有趣的娱乐项目。
稳态和时间分辨的荧光淬灭研究
稳态和时间分辨的荧光淬灭研究以稳态和时间分辨的荧光淬灭研究为标题,我们将探讨荧光淬灭现象以及其在稳态和时间分辨研究中的应用。
荧光淬灭是指在特定条件下,荧光分子的发射过程被非辐射性机制所抑制,导致荧光信号的减弱或消失。
这一现象在生物化学、生物医学以及材料科学等领域有着广泛的应用。
在稳态和时间分辨的研究中,荧光淬灭技术被广泛应用于分析样品的特性和动态过程。
我们来探讨稳态荧光淬灭的研究。
稳态荧光淬灭是指在稳定的实验条件下,荧光信号的强度随着特定的外界因素的改变而发生变化。
这些外界因素可以是温度、溶剂极性、金属离子浓度等。
通过测量荧光信号的变化,我们可以了解样品的性质以及其与环境的相互作用。
例如,研究人员可以通过改变溶剂的极性来研究荧光分子在不同环境中的行为。
当溶剂的极性增加时,荧光分子的发射强度会减弱,这是由于溶剂分子与荧光分子之间的相互作用导致荧光淬灭。
通过测量荧光信号的强度随溶剂极性的变化,我们可以得到溶剂极性对荧光分子行为的影响。
除了稳态荧光淬灭研究,时间分辨荧光淬灭也是一种常用的研究手段。
时间分辨荧光淬灭是指通过测量荧光信号的寿命来研究样品中的动态过程。
荧光信号的寿命是指荧光分子从吸收光子到发射光子所经历的时间。
时间分辨荧光淬灭可以揭示样品中不同分子之间的能量传递、电子转移以及化学反应等过程。
通过测量荧光信号的寿命,我们可以了解这些过程的速率、机制以及受到什么因素的影响。
例如,研究人员可以利用时间分辨荧光淬灭技术来研究光敏剂在生物体内的行为。
光敏剂是一类具有荧光性质的分子,可以在特定波长的光照射下产生活性物质,从而实现治疗或诊断作用。
通过测量光敏剂的荧光寿命,我们可以了解其在生物体内的激发和衰减过程,从而优化光敏剂的设计和应用。
总结起来,稳态和时间分辨的荧光淬灭研究在分析样品的特性和动态过程中具有重要的应用价值。
稳态荧光淬灭可以帮助我们了解样品与环境之间的相互作用,而时间分辨荧光淬灭则可以揭示样品中的动态过程和反应机制。
稳态荧光检测原理
稳态荧光检测原理近年来,荧光检测技术在分析测试、生物医学等领域得到了广泛的应用。
其中,稳态荧光检测技术被广泛应用在生物分子的结构和功能研究中,为生物学研究提供了强有力的工具。
本文主要介绍稳态荧光检测原理。
稳态荧光检测技术使用荧光染料或蛋白质标记剂作为探针,在外界激发物的作用下发出特定的荧光信号。
稳态荧光检测可以通过检测样品中的荧光信号强度、颜色、寿命等参数来获取内在的信息。
其基本原理是利用荧光染料的分子构造特性,使其在一定波长的激发光作用下发生特定的荧光反应,进而获取被测试样品中的信息。
稳态荧光检测的成像原理一般是利用显微镜或激光扫描仪等设备,通过荧光显微镜或激光扫描仪将被测试的样品进行成像,然后分析样品的荧光强度分布情况,以得出样品的结构和功能信息。
稳态荧光检测的原理是基于分子内部存在着多种物理过程,而多种物理过程产生的荧光信号的强度、颜色、寿命等参数与分子内部的结构、构象、环境参数有密切的关系。
因此,稳态荧光检测技术可以通过对分子内部结构和环境参数的分析,得出分子在生物学、化学、物理学等学科领域内的应用。
稳态荧光检测技术中最常见的荧光探针是荧光素类化合物和蛋白质标记剂。
荧光素类化合物包括荧光染料、荧光标记核苷酸、荧光蛋白等。
荧光素类化合物是一类化学合成的小分子化合物,可以特异性地与大分子相互作用并产生特定的荧光反应。
蛋白质标记剂则是一类蛋白质分子,可以与蛋白质分子特异性地结合并产生荧光反应。
稳态荧光检测技术可以分为直接检测和间接检测两种。
直接检测是利用稳态荧光探针直接采集被测试样品的荧光信号,以获得样品的结构和功能等信息。
间接检测则是利用荧光共振能量转移(FRET)和荧光厌氧等现象来研究双分子相互作用、蛋白质结构等问题。
在稳态荧光检测中,荧光强度和颜色通常是判断荧光探针与被测试样品相互作用的主要参数。
荧光强度可以反映荧光探针的浓度、样品的环境参数、探针与样品的结合状态等信息。
荧光颜色则是荧光探针所发射的波长波长区间,通常将荧光颜色与探针的化学结构相对应。
芘稳态荧光法研究疏水碳原子数对两性型表面活性剂聚集行为的影响
芘稳态荧光法研究疏水碳原子数对两性型表面活性剂聚集行为的影响陈雅雯;郭宁宁;李娇;曹柯萌;段华锋【期刊名称】《广东化工》【年(卷),期】2024(51)2【摘要】为研究疏水碳原子数对两性型表面活性剂聚集行为的影响,笔者以疏水性芘为荧光探针,测定了疏水链碳原子数(m)分别为12、14、16、18的磺酸钠两性型表面活性剂(记作S_(m))的临界胶束浓度(CMC),并确定了合成样品的微极性。
以373 nm与384 nm的荧光强度之比I1/I3与样品浓度的关系可知,样品S12~S18的CMC分别为7.90×10^(-4)mol/L、5.39×10^(-4)mol/L、4.72×10^(-4)mol/L、4.14×10^(-4)mol/L,平衡I1/I3分别为1.667、1.211、1.272、1.294。
表明随着疏水链碳原子数的增加,合成样品形成有序聚集体的能力增强,所具有的表面活性随之增加,其中疏水碳原子数为14的样品S14形成聚集体的结构最为紧密。
【总页数】3页(P32-34)【作者】陈雅雯;郭宁宁;李娇;曹柯萌;段华锋【作者单位】山西科技学院【正文语种】中文【中图分类】TQ【相关文献】1.稳态荧光探针法测定脂肪醇聚氧乙烯醚型非离子表面活性剂聚集行为2.稳态荧光法研究芘探针浓度和溶液极性对疏水缔合聚合物自缔合行为的影响3.十二烷基硫酸钠对两性咪唑类离子液体表面活性剂1-磺丙基-3-十二烷基咪唑内盐界面聚集行为的影响4.含双疏水链阴离子型两性分子单分子膜的聚集行为5.疏水性多糖的合成及荧光法研究其在水中的自聚集行为因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
• 获得分子的大小以及分子之间相互作用的信息。
– – – – 免疫分析 激素-受体作用 蛋白-多肽相互作用 DNA-蛋白相互作用以及酪氨酸激酶分析等方面的研究。
荧光偏振免疫分析(FPIA)
荧光分析法(第三版), 王尊本, 科学出版社, 荧光分析法(第三版), 许金钩 王尊本, 科学出版社,2007
N H3C NH CH3 S N CH3
CH3
The RLS spectra pf MB with DNA(pH 8.14)
MB在DNA分子骨架上的组装 在 分子骨架上的组装
Huang et al, Bull. Chem. Soc. Jpn, 72, 1501-1508(1999)
荧光偏振技术(1926年,Perrin)
β-carotene在表面活性剂中的同步以及3D荧光光谱
550
0.5000 19.81 39.13
1800 1600 1400 1200 1000 800
4.55E-4 mol/L 3.62E-4 mol/L 2.74E-4 mol/L 1.10E-4 mol/L 7.12E-5 mol/L 6.25E-5 mol/L 5.37E-5 mol/L 4.49E-5 mol/L niosome membrane phase solvent
5 .0 0 0
Y = 0 .0 7 0 1 + 1 .8 9 * 1 0 X R = 0 .9 9 8
4
4 .0 0 0
Relative I
FL
3 .0 0 0
20 15
I
2 .0 0 0
1 .0 0 0
10 5 0 250 300 350 400
0 .0 0 0 0 .0 0 5 .0 0 x 1 0
500
58.44 77.75
Excitation wavelength / nm
97.06
450
116.4 135.7 155.0
350
IFL
400
600 400
300
200
250 250
0
300
350
400
450
500
550
400
450
500
550
600
Emission wavelength / nm
40 35 30 25
FL
wavelength / nm
6 .0 0 0
2 . 7 4 E - 4 m o l/L 2 . 4 0 E - 4 m o l/L 2 . 0 6 E - 4 m o l/L 1 . 7 1 E - 4 m o l/L 1 . 3 7 E - 4 m o l/L 1 . 0 7 E - 4 m o l/L 6 . 8 5 E - 5 m o l/L 3 . 4 8 E - 5 m o l/L n io s o m e m e m b r a n e p h a s e s o lv e n t
∆λ=15 nm
HO
OH HO OH
hydroquinone
292/328 nm
resorcinol
275/303 nm
Anal Bioanal Chem (2004) 378 : 1648–1651
共振光散射原理和应用
• 光散射 • 共振光散射
– λLS≈λAbs
2 n12 − n0 2 16π a NI0 sin α 2 I= 2 4 n + 2n2 rλ 0 1 4 6
分子荧光产生机理-Jablonski Diagram
荧光分光光度计结构示意图
透射光 吸收光谱 氙灯(或高压汞灯) 氙灯 或高压汞灯) 或高压汞灯 (200-800 nm)
荧光信号
• • • • 荧光寿命 荧光光谱 荧光强度随光谱变化 成像(荧光物质在样本中分布的空间信息)
• 1993年Pasternack 等用共振光散射技术研究了卟啉类 化合物在核酸上的聚集,首次将该技术应用于分析 化学。 • 黄承志等利用光散射技术研究了生物大分子体系的 散射光谱。
金纳米(AuNPs)共振光散射测定糖原
10000 8000 RLS Intensity 6000 4000 2000 0 200
10000 8000 6000 4000 2000 0 0 200 400 600 800
B
300
400 500 600 Wavelength (nm)
700
800
AuNPs
AuNPs和500 ng•mL-1糖原
+
无法显示图像。计算机可能没有足够的内存以打开该图像,也可能是该图像已损坏。请重新启动计算机,然后重新打开该文件。如果仍然显示红色 “x”,则可能需要删除该图像,然后重新将其插入。
三维荧光分析方法应用 天然与人工处理琥珀的三维荧光光谱
天然琥珀
热处理琥珀
热处理琥珀
热填充处理琥珀
亓利剑等,宝石和宝石学ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ志,2005,7卷,1期,10-16
同步荧光分析方法的应用
• 恒波长同步荧光分析
– 多环芳烃和生物大分子的检测 – 小分子与蛋白相互作用的热力学研究
• 恒能量同步荧光分析
– 多环芳烃的检测
一般稳态荧光仪的功能
• 2D荧光光谱:荧光强度-激发(发射)波长 • 3D-荧光光谱:激发波长-发射波长-荧光强度 • 同步荧光光谱(固定∆λ):以一定波长差同时扫 描激发和发射单色器,∆λ=Stokes位移;荧光强度激发(发射)波长 • 共振光散射(固定∆λ=0 nm) • 荧光偏振技术:平面偏振光激发样品。 • 荧光动力学方法 • 导数荧光方法
稳态荧光分析方法与 应用进展
北京大学化学学院 邹明健 许潇 李娜 2009年1月9日
The Discovery and Development of the Green Fluorescent Protein,(GFP )绿色荧光蛋白 (
2008诺贝尔化学奖 诺贝尔化学奖
Osamu Shimomura 1960s Martin Chalfie 1990s Roger Y. Tsien’s, today
SFS, ∆λ=20 nm
a. Settled sewage b. Final effluent c. Filtered sewage
SFS, ∆λ=20 nm
a. Tyrosin b. Humic acid c. Tri-distilled water
280 nm
280 nm
Wat. Res. Vol. 29, No. 6, pp. 1599-1602, 1995
KAuGn
KChSn
K ChSG n
[ChSG n ] = [ChS][G n ]
Talanta 76, 1207-1211, 2008. J. Phys. chem. B (accepted)
共振光散射研究亚甲基蓝(MB)在核酸 分子骨架上的组装
DNA mg/mL a. 0 b. 0.4 c. 0.8 d. 1.2
– 强度 – 寿命
可获得的信息
• 分子结构信息:荧光发射波长,荧光寿命,大分子 表面荧光物质的荧光强度随溶剂极性的变化等等 • 分子浓度信息:荧光强度增强或猝灭 • 分子在溶剂中的状态:荧光光谱的红移或者蓝移, 静态或动态猝灭,荧光寿命的变化等等 • 分子间的相互作用:荧光猝灭,荧光寿命,共振能 量转移、新的荧光峰的产生 • 分子的大小:分子的转动速度对偏振光的消偏等
• 可变角同步荧光分析
– 天然产物检测 – 高背景体系中微量组分的检测
生活污水的同步荧光谱(SFS)研究(λex=248 nm)
FL & UV absorption
a. b. Settled sewage Final effluent
FL
a. Tyrosin b. Cinnamic acid c. Humic acid
稳态荧光
荧光分析法
偏振荧光
时间分辨荧光
2D荧光 3D荧光 同步荧光 共振光散射 荧光动力学, 共振能量转移, … … 荧 光 成 像 脉冲时间分辨 频域时间分辨
-5
1 .0 0 x 1 0
-4
1 .5 0 x 1 0
-4
2 .0 0 x 1 0
-4
2 .5 0 x 1 0
-4
3 .0 0 x 1 0
-4
C o n c e n tr a tio n / m o l/L
w a v e le n g th / n m
unpublished results
大气样品中对苯二酚与间苯二酚的同步荧光测定
• 以平面偏振光激发荧光分子时,静止的荧光分子则发 射与入射光相同偏振面的偏振光(各向异性/偏振)。 • 由于分子存在旋转翻滚运动,发射光的偏振平面与入 射光会有差异,产生消偏振。 • 消偏振 vs 分子运动
– 大分子(如蛋白质)运动缓慢,发射光偏振度较高。 – 小分子,旋转与翻滚速度快,发射光有不同程度的消偏振 现象。