GC和GC-MS测定阿那曲唑中的11种残留溶剂
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被测物均能得到很好的分离，峰面积与浓度呈 该法可用于阿那曲唑
良好的线性关系，精密度和回收率良好，通过 GC-MS 对样品中检出的残留溶剂进行了确证。结论
通信作者： 王建，男，博士，主任药师，博
E-mail: wangjianhw2000@
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Chin J Mod Appl Pharm, 2015 May, Vol.32 No.5
提示可能存在随机误差；2 次违反了 10 X 规则，2 次违反了 41s 规则， 1 次违反了 22s 失控规则， 提示可 能存在系统误差。但由于之前采用的是单规则方法 中的说明书范围来判断，故误差并没有及时纠正。 3.2 影响质控结果的因素 根据质控图来判断质控结果， 当室内质控 “在 控”时发出监测结果，当室内质控“失控”时， 及时查明失控原因后再发出监测结果。根据质控 图来判断是否存在漂移趋势性变化，分析出现这 种定向趋势的原因，排查误差并分析可能存在的 影响因素并及时纠正，以确保血药浓度监测结果 的准确可靠[8]。 实验记录中应对操作人员、试剂批号、定标 日期、冰箱温度、实验室环境、仪器的校正及故 障、测定过程中的异常现象等均应详细记录，以 便及时发现问题并解决问题。 在监测中发现 EMIT 法受温、湿度及空气洁净度等环境因素的影响较 大，为保持仪器的灵敏度和精密度，需控制好环 境因素，并做好实验记录，及时发现问题。监测 时实验室的温度应尽量控制在恒温，温差不能太 大，且操作时的温度与定标时的温度要保持一致[9]。 试验中也发现在冬天和夏天，室温不易控制在恒 温时，测定的结果偏差较大。EMIT 法的试剂价格 昂贵，故应按照说明书要求来储存试剂，在保证 结果准确可靠的同时，避免不必要的经济损失； 试剂在 2~8 ℃条件下贮存，开封后需在 12 周或有 效期内使用。 应用 EMIT 法监测血药浓度时， 会发 生“试剂瓶底效应”影响测定结果，在本实验室 的监测工作中也发现试剂反复使用多次后剩余少
Chin J Mod Appl Pharm, 2015 May, Vol.32 No.5
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， 建立了毛细管气相色谱法测定阿
那曲唑中 11 种残留溶剂的方法，考察全国 4 家制 药公司产品中的残留溶剂，并对样品中检出的残 留溶剂，采用气质联用法进行确证，旨在为国家 药品标准增订阿那曲唑残留溶剂检查项目提供科 学依据。 1 仪器与试药ห้องสมุดไป่ตู้Agilent 6890N 气相色谱仪 ( 美国 Agilent 公 司)；Agilent 7694E 顶空进样器；GC-MS-QP2010 Vitra 气质联用仪(日本 Shimadzu 公司)。 乙醇、异丙醇、二氯甲烷、正己烷、异丙醚、 乙酸乙酯、三氯甲烷、环己烷、正庚烷为分析纯， 甲醇、二甲基甲酰胺、乙腈为色谱纯。 样品来源：浙江海正药业股份有限公司，批 号： A120701 、 A120801 、 A121101 ；扬子江药业 集团有限公司，批号：12061521、130904211；重 庆华邦胜凯制药有限公司， 批号： ANA-20131001；
Analysis of Eleven Residual Organic Solvent in Anastrozole by GC and GC-MS LI Jiani1, GAO Fang1, WANG Jian2*(1.Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310014, China; 2.Zhejiang Institute
中国现代应用药学 2015 年 5 月第 32 卷第 5 期
关键词：阿那曲唑；气相色谱法；气相色谱-质谱联用；残留溶剂；顶空进样 中图分类号：R917.101 文献标志码：B DOI: 10.13748/ki.issn1007-7693.2015.05.015 文章编号：1007-7693(2015)05-0578-05
采用顶
空进样，色谱柱为 DB-624(6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷固定液 )石英毛细管柱，柱温为 40 ℃，维持 7 min，以 10 ℃·min1 速率升至 180 ℃，维持 4 min，二甲基甲酰胺为溶剂。结果 原料药中残留溶剂的检测。
作者简介：李佳妮，女，硕士生 导 Tel: (0571)86459458 Tel: 13588259592 E-mail: lijiani697233@
for Drug Control, Hangzhou 310004, China) ABSTRACT: OBJECTIVE To establish a method of GC for the determination of residual solvents in anastrozole, a method of GC/MS for the verification of residual solvents in anastrozole. METHODS DB-624 capillary column through head-space sampling mode was used. The column temperature was maintained at 40 ℃ for 7 min, then was raised to 180 ℃ at the rate of 10 ℃·min1 and maintained at 180 ℃ for 4 min. The sample was dissolved in dimethylformamide. RESULTS The measured solvents were separated completely. The calibration curve of each solvent showed a good linear relationship with good precision and accuracy. The residual solvents in anastrozole were confirmed by GC-MS. CONCLUSION The established method is simple and reliable, which can be used for determination of residual solvents in anastrozole. KEY WORDS: anastrozole; GC; GC-MS; residual organic solvents; head-space sampling
收稿日期：2014-09-24
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GC 和 GC-MS 测定阿那曲唑中的 11 种残留溶剂
李佳妮 1，高芳 1，王建 2*(1.浙江工业大学，杭州
摘要：目的
310014；2.浙江省食品药品检验研究院，杭州 310004)
建立 GC 测定阿那曲唑中的 11 种残留溶剂，用 GC-MS 对样品中检出的残留溶剂进行确证。方法
[1-6]
浙江尖峰海洲制药有限公司，批号：13AN11001。 2 2.1 方法与结果 残留溶剂测定方法 取本品约 0.4 g，精密称定，置顶空瓶中，精 密加入二甲基甲酰胺溶液 5 mL 使其溶解，密封瓶 口，作为供试品溶液；精密称取甲醇、乙醇、异 丙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、异丙醚、醋酸 乙酯、三氯甲烷、环己烷和正庚烷各适量，加二 甲基甲酰胺溶液制成每 1 mL 分别约含 0.2，0.2， 0.2 ， 0.03 ， 0.05 ， 0.02 ， 0.2 ， 0.2 ， 0.005 ， 0.2 和 0.2 mg 的混合溶液，精密量取 5 mL 置顶空瓶中， 密封瓶口，作为对照品溶液。按中国药典 2010 年 版Ⅱ部附录残留溶剂测定法测定， 以 DB-624 毛细 管柱(30 m×0.32 mm×1.8 μm，固定液为 6%氰丙 基苯基 -94% 二甲基聚硅氧烷 ) 为色谱柱，柱温为 40 ℃ 维 持 7 min ， 以 每 10 ℃·min1 速 率 升 至 180 ℃，维持 4 min；检测器为氢火焰离子化检测 器 (FID) ，检测器温度为 250 ℃；进样口温度为 200 ℃；分流比为 20∶1。顶空进样，顶空瓶平衡 温度为 90 ℃，平衡时间为 30 min，进样体积为 1.0 mL。取对照品溶液顶空进样， 各成分峰之间的 分离度应符合要求。分别精密量取供试品溶液与 对照品溶液顶空进样，记录色谱图，按外标法以 峰面积计算。含甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈、二 氯甲烷、正己烷、异丙醚、醋酸乙酯、三氯甲烷、 环己烷和正庚烷分别不得 >0.3% ， 0.5% ， 0.5% ， 0.041%，0.06%，0.029%，0.5%，0.5%，0.006%， 0.388%和 0.5%。
REFERENCES
[1] [2] [3] 李好枝. 体内药物分析[M]. 第 2 版. 北京: 中国医药科技出 版社, 2011. 王治国. 临床检验质量控制技术[M]. 第 3 版. 北京: 人民卫 生出版社, 2014: 240-241, 189. 罗伟, 罗智敏, 刘建兵, 等. 用 Excel 绘制两种实验室常用 室内质量控制图方法 [J]. 检验医学与临床 , 2013, 10(5): 620-622. 张学文. 用 Excel 绘制临床检验 Z-分数质控图[J]. 检验医学 与临床, 2009, 6(1): 78-79. GB/T20032302-T-361. 中华人民共和国国家标准临床实验 室定量测定室内质量控制指南[S]. 2003 XU Y J. Assessment the quality control of the blood concentrations of Tacrolimus monitored by EMIT [J]. China Med Her(中国医药导报), 2011, 8(7): 52-54. QIAO X Y, CHEN C, JIANG J Y. Evaluation of quality control for therapeutic drug monitoring of tacrolimus by enzyme-multiplied immunoassay technique [J]. Pharm Care Res(药学服务与研究), 2010, 10(1): 40-43. ZOU Y G, BAI Y J, WANG L L, et al. Analysis of internal quality control for TDM of CsA and FK506 by EMIT [J]. West China J Pharm Sci( 华 西 药 学 杂 志 ), 2010, 25(5): 582-584. JIANG Y, ZOU S L, XIA Z L. Application of indoor quality control in blood concentration monitoring of tacrolimus by EMIT method [J]. China Pharm( 中国药房 ), 2011, 22(25): 2342-2343.
阿那曲唑为强效非甾体类芳香化酶抑制剂， 临床上用于治疗绝经后妇女的晚期乳腺癌，收载 于中国药典 2010 年版第 2 增补本，但质量标准中 缺少残留溶剂检查项。综合国内 4 个主要厂家产 品的生产工艺，其合成过程中使用到甲醇、乙醇、 异丙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、异丙醚、醋 酸乙酯、三氯甲烷、环己烷和正庚烷，根据新药 审批和中国药典的要求，必须对其残留溶剂进行 控制，因此确定这 11 种溶剂为控制的残留溶剂种 类。笔者根据中国药典 2010 年版Ⅱ部附录残留溶 剂检查法和人用药品注册技术要求国际协调会议 (ICH)的要求
量试剂时，会出现结果的漂移。及时绘制质控图， 及时发现漂移，及时更换新的试剂盒，从而保证 监测结果的准确性。 综上所述，Westgard 多规则控制方法有较高的 误 差 检 出 率 ， 优 于 以 X 3s 作 为 失 控 限 的 Levey-jennings 质控方法， 使用 Westgard 多规则控 制方法来判断质控结果，提高了监测数据的可靠 性，可以为临床提供准确的血药浓度监测结果。
被测物均能得到很好的分离，峰面积与浓度呈 该法可用于阿那曲唑
良好的线性关系，精密度和回收率良好，通过 GC-MS 对样品中检出的残留溶剂进行了确证。结论
通信作者： 王建，男，博士，主任药师，博
E-mail: wangjianhw2000@
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Chin J Mod Appl Pharm, 2015 May, Vol.32 No.5
提示可能存在随机误差；2 次违反了 10 X 规则，2 次违反了 41s 规则， 1 次违反了 22s 失控规则， 提示可 能存在系统误差。但由于之前采用的是单规则方法 中的说明书范围来判断，故误差并没有及时纠正。 3.2 影响质控结果的因素 根据质控图来判断质控结果， 当室内质控 “在 控”时发出监测结果，当室内质控“失控”时， 及时查明失控原因后再发出监测结果。根据质控 图来判断是否存在漂移趋势性变化，分析出现这 种定向趋势的原因，排查误差并分析可能存在的 影响因素并及时纠正，以确保血药浓度监测结果 的准确可靠[8]。 实验记录中应对操作人员、试剂批号、定标 日期、冰箱温度、实验室环境、仪器的校正及故 障、测定过程中的异常现象等均应详细记录，以 便及时发现问题并解决问题。 在监测中发现 EMIT 法受温、湿度及空气洁净度等环境因素的影响较 大，为保持仪器的灵敏度和精密度，需控制好环 境因素，并做好实验记录，及时发现问题。监测 时实验室的温度应尽量控制在恒温，温差不能太 大，且操作时的温度与定标时的温度要保持一致[9]。 试验中也发现在冬天和夏天，室温不易控制在恒 温时，测定的结果偏差较大。EMIT 法的试剂价格 昂贵，故应按照说明书要求来储存试剂，在保证 结果准确可靠的同时，避免不必要的经济损失； 试剂在 2~8 ℃条件下贮存，开封后需在 12 周或有 效期内使用。 应用 EMIT 法监测血药浓度时， 会发 生“试剂瓶底效应”影响测定结果，在本实验室 的监测工作中也发现试剂反复使用多次后剩余少
Chin J Mod Appl Pharm, 2015 May, Vol.32 No.5
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， 建立了毛细管气相色谱法测定阿
那曲唑中 11 种残留溶剂的方法，考察全国 4 家制 药公司产品中的残留溶剂，并对样品中检出的残 留溶剂，采用气质联用法进行确证，旨在为国家 药品标准增订阿那曲唑残留溶剂检查项目提供科 学依据。 1 仪器与试药ห้องสมุดไป่ตู้Agilent 6890N 气相色谱仪 ( 美国 Agilent 公 司)；Agilent 7694E 顶空进样器；GC-MS-QP2010 Vitra 气质联用仪(日本 Shimadzu 公司)。 乙醇、异丙醇、二氯甲烷、正己烷、异丙醚、 乙酸乙酯、三氯甲烷、环己烷、正庚烷为分析纯， 甲醇、二甲基甲酰胺、乙腈为色谱纯。 样品来源：浙江海正药业股份有限公司，批 号： A120701 、 A120801 、 A121101 ；扬子江药业 集团有限公司，批号：12061521、130904211；重 庆华邦胜凯制药有限公司， 批号： ANA-20131001；
Analysis of Eleven Residual Organic Solvent in Anastrozole by GC and GC-MS LI Jiani1, GAO Fang1, WANG Jian2*(1.Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310014, China; 2.Zhejiang Institute
中国现代应用药学 2015 年 5 月第 32 卷第 5 期
关键词：阿那曲唑；气相色谱法；气相色谱-质谱联用；残留溶剂；顶空进样 中图分类号：R917.101 文献标志码：B DOI: 10.13748/ki.issn1007-7693.2015.05.015 文章编号：1007-7693(2015)05-0578-05
采用顶
空进样，色谱柱为 DB-624(6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷固定液 )石英毛细管柱，柱温为 40 ℃，维持 7 min，以 10 ℃·min1 速率升至 180 ℃，维持 4 min，二甲基甲酰胺为溶剂。结果 原料药中残留溶剂的检测。
作者简介：李佳妮，女，硕士生 导 Tel: (0571)86459458 Tel: 13588259592 E-mail: lijiani697233@
for Drug Control, Hangzhou 310004, China) ABSTRACT: OBJECTIVE To establish a method of GC for the determination of residual solvents in anastrozole, a method of GC/MS for the verification of residual solvents in anastrozole. METHODS DB-624 capillary column through head-space sampling mode was used. The column temperature was maintained at 40 ℃ for 7 min, then was raised to 180 ℃ at the rate of 10 ℃·min1 and maintained at 180 ℃ for 4 min. The sample was dissolved in dimethylformamide. RESULTS The measured solvents were separated completely. The calibration curve of each solvent showed a good linear relationship with good precision and accuracy. The residual solvents in anastrozole were confirmed by GC-MS. CONCLUSION The established method is simple and reliable, which can be used for determination of residual solvents in anastrozole. KEY WORDS: anastrozole; GC; GC-MS; residual organic solvents; head-space sampling
收稿日期：2014-09-24
[4] [5] [6]
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GC 和 GC-MS 测定阿那曲唑中的 11 种残留溶剂
李佳妮 1，高芳 1，王建 2*(1.浙江工业大学，杭州
摘要：目的
310014；2.浙江省食品药品检验研究院，杭州 310004)
建立 GC 测定阿那曲唑中的 11 种残留溶剂，用 GC-MS 对样品中检出的残留溶剂进行确证。方法
[1-6]
浙江尖峰海洲制药有限公司，批号：13AN11001。 2 2.1 方法与结果 残留溶剂测定方法 取本品约 0.4 g，精密称定，置顶空瓶中，精 密加入二甲基甲酰胺溶液 5 mL 使其溶解，密封瓶 口，作为供试品溶液；精密称取甲醇、乙醇、异 丙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、异丙醚、醋酸 乙酯、三氯甲烷、环己烷和正庚烷各适量，加二 甲基甲酰胺溶液制成每 1 mL 分别约含 0.2，0.2， 0.2 ， 0.03 ， 0.05 ， 0.02 ， 0.2 ， 0.2 ， 0.005 ， 0.2 和 0.2 mg 的混合溶液，精密量取 5 mL 置顶空瓶中， 密封瓶口，作为对照品溶液。按中国药典 2010 年 版Ⅱ部附录残留溶剂测定法测定， 以 DB-624 毛细 管柱(30 m×0.32 mm×1.8 μm，固定液为 6%氰丙 基苯基 -94% 二甲基聚硅氧烷 ) 为色谱柱，柱温为 40 ℃ 维 持 7 min ， 以 每 10 ℃·min1 速 率 升 至 180 ℃，维持 4 min；检测器为氢火焰离子化检测 器 (FID) ，检测器温度为 250 ℃；进样口温度为 200 ℃；分流比为 20∶1。顶空进样，顶空瓶平衡 温度为 90 ℃，平衡时间为 30 min，进样体积为 1.0 mL。取对照品溶液顶空进样， 各成分峰之间的 分离度应符合要求。分别精密量取供试品溶液与 对照品溶液顶空进样，记录色谱图，按外标法以 峰面积计算。含甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈、二 氯甲烷、正己烷、异丙醚、醋酸乙酯、三氯甲烷、 环己烷和正庚烷分别不得 >0.3% ， 0.5% ， 0.5% ， 0.041%，0.06%，0.029%，0.5%，0.5%，0.006%， 0.388%和 0.5%。
REFERENCES
[1] [2] [3] 李好枝. 体内药物分析[M]. 第 2 版. 北京: 中国医药科技出 版社, 2011. 王治国. 临床检验质量控制技术[M]. 第 3 版. 北京: 人民卫 生出版社, 2014: 240-241, 189. 罗伟, 罗智敏, 刘建兵, 等. 用 Excel 绘制两种实验室常用 室内质量控制图方法 [J]. 检验医学与临床 , 2013, 10(5): 620-622. 张学文. 用 Excel 绘制临床检验 Z-分数质控图[J]. 检验医学 与临床, 2009, 6(1): 78-79. GB/T20032302-T-361. 中华人民共和国国家标准临床实验 室定量测定室内质量控制指南[S]. 2003 XU Y J. Assessment the quality control of the blood concentrations of Tacrolimus monitored by EMIT [J]. China Med Her(中国医药导报), 2011, 8(7): 52-54. QIAO X Y, CHEN C, JIANG J Y. Evaluation of quality control for therapeutic drug monitoring of tacrolimus by enzyme-multiplied immunoassay technique [J]. Pharm Care Res(药学服务与研究), 2010, 10(1): 40-43. ZOU Y G, BAI Y J, WANG L L, et al. Analysis of internal quality control for TDM of CsA and FK506 by EMIT [J]. West China J Pharm Sci( 华 西 药 学 杂 志 ), 2010, 25(5): 582-584. JIANG Y, ZOU S L, XIA Z L. Application of indoor quality control in blood concentration monitoring of tacrolimus by EMIT method [J]. China Pharm( 中国药房 ), 2011, 22(25): 2342-2343.
阿那曲唑为强效非甾体类芳香化酶抑制剂， 临床上用于治疗绝经后妇女的晚期乳腺癌，收载 于中国药典 2010 年版第 2 增补本，但质量标准中 缺少残留溶剂检查项。综合国内 4 个主要厂家产 品的生产工艺，其合成过程中使用到甲醇、乙醇、 异丙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、异丙醚、醋 酸乙酯、三氯甲烷、环己烷和正庚烷，根据新药 审批和中国药典的要求，必须对其残留溶剂进行 控制，因此确定这 11 种溶剂为控制的残留溶剂种 类。笔者根据中国药典 2010 年版Ⅱ部附录残留溶 剂检查法和人用药品注册技术要求国际协调会议 (ICH)的要求
量试剂时，会出现结果的漂移。及时绘制质控图， 及时发现漂移，及时更换新的试剂盒，从而保证 监测结果的准确性。 综上所述，Westgard 多规则控制方法有较高的 误 差 检 出 率 ， 优 于 以 X 3s 作 为 失 控 限 的 Levey-jennings 质控方法， 使用 Westgard 多规则控 制方法来判断质控结果，提高了监测数据的可靠 性，可以为临床提供准确的血药浓度监测结果。