厌氧菌检验(实验)
结核分枝杆菌、厌氧菌及其它微生物的检测
最终鉴定需要进行生化反应及终末代谢产物等检 查。
生化试验主要包括多种糖类发酵试验、吲哚试验 硝酸盐还原试验、触酶试验、卵磷脂酶试验、脂 酶试验、明胶液化试验、硫化氢试验等——厌氧 API条。
目前用于厌氧菌快速鉴定还有自动微生物鉴定系 统等。
实验内容
1、记录抗酸染色步骤。 2、油镜下观察抗酸杆菌涂片,并记
厌氧菌的分离与鉴定
(三)标本接种
标本接种3个血琼脂平板,分别置于有氧、 无氧和含5-10%CO2的环境中培养。若只 要求检测厌氧菌,只需接种1个厌氧血琼 脂平板。
厌氧菌的分离与鉴定
(四)耐氧试验
当厌氧血平板上有细菌生长时,为了确 定是否为厌氧菌,必须做耐氧试验。挑 取菌落分别转种2块需氧血琼脂平板和1 块厌氧血琼脂平板,然后将平板分别放 置在需氧、厌氧和CO2环境中培养。
荧光染色结果报告
—:观察70个视野未发现抗酸杆菌; ±:70个视野内发现1-2条抗酸杆菌; 1+:50个视野内发现2-18条抗酸杆菌; 2+:10个视野内发现4-36条抗酸杆菌; 3+:每个视野内发现4-36条抗酸杆菌; 4+:每个视野内发现36条以上抗酸杆菌。
厌氧菌的分离与鉴定
厌氧菌标本的采集 涂片与染色 标本接种 耐氧试验 鉴定试验
干后油镜下观察结果。
抗酸染色结果观察
油镜下观察涂片,在淡蓝色背景下可见染成红 色细长或分枝状杆菌,此为抗酸染色阳性细菌 。
抗酸染色结果报告
—:观察300个视野未发现抗酸杆菌; ±:300个视野内发现1-2条抗酸杆菌; 1+:100个视野内发现1-9条抗酸杆菌; 2+:10个视野内发现1-9条抗酸杆菌; 3+:每个视野内发现1-9条抗酸杆菌; 4+:每个视野内发现9条以上抗酸杆菌。
厌氧菌检验的基本流程和注意事项
厌氧菌检验的基本流程和注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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谈厌氧菌检验的重要性及注意事项
谈厌氧菌检验的重要性及注意事项目的:研究厌氧菌检验的重要性及注意事项。
方法:结合临床经验,回顾性阐述厌氧菌检验的注意事项。
结果:厌氧菌在感染性疾病中的致病作用日益受到临床重视。
临床感染的很多实例证明开展厌氧菌检验极为必要。
结论:不同地区和不同医院厌氧菌的耐药谱不同,经验用药时要根据本地区和本实验室的药敏谱选药。
因此,为提高疗效,减少抗生素的毒副作用,最好根据药敏试验选择药物治疗。
标签:厌氧菌;无氧;培养;检验厌氧菌是一类在无氧条件下比在有氧环境中生长好的细菌,这类细菌缺乏完整的代谢酶体系,其能量代谢以无氧发酵的方式进行。
它能引起人体不同部位的感染,包括阑尾炎、胆囊炎、中耳炎、口腔感染、心内膜炎、子宫内膜炎、脑脓肿、心肌坏死、骨髓炎、腹膜炎、脓胸、输卵管炎、脓毒性关节炎、肝脓肿、鼻窦炎、肠道手术或创伤后伤口感染、盆腔炎以及菌血症等。
厌氧菌在感染性疾病中的致病作用日益受到临床重视,临床感染的很多实例证明开展厌氧菌检验极为必要。
1 厌氧菌检验概况过去我国厌氧菌培养在实验室检验中开展的并不理想,临床医生重视程度不够,大多数实验室没有将厌氧菌培养作为常规检验开展,加上厌氧菌培养方法学落后,且受培养基的配制和保存的限制,制约了厌氧菌培养在实验室中的正常开展,造成厌氧菌的漏检率很高。
据报道[1],我国从未开展过厌氧菌培养的实验室占77%之多,有90%的实验室没有鉴定厌氧菌的设备,几乎所有临床细菌室均不开展厌氧菌药敏试验。
近年来,国内从临床感染病例中分离出厌氧菌的报道日益增多,临床医生已认识到厌氧菌在感染性疾病中的重要性,并能识别厌氧菌的重要特征,能认真、正确地采样、送检,且随着厌氧菌培养技术的不断进步,厌氧菌检验已成为临床细菌学检验的重要组成部分。
为提高感染性疾病的病原学诊断水平,开展厌氧菌培养是非常必要的。
据资料显示,如仅做需氧菌培养,在23份漏检标本中检出9株厌氧菌,这说明在做细菌需氧菌培养的同时应做厌氧菌培养[2],否则将会造成大量病原菌漏检,它不仅关系到疾病诊断的正确性,且影响治疗效果或导致治疗不彻底。
厌氧性细菌及检验
厌氧性细菌及检验● 考点概念及分类分布与临床意义厌氧菌标本的采集与送检分离与鉴定常见厌氧性细菌【内容讲解】一、厌氧菌概述概念:一大群专性厌氧,必须在无氧环境中才能生长的细菌。
分类:二、厌氧菌感染(一)厌氧菌在正常人体的分布及感染类型1.厌氧菌在正常人体的分布正常人的肠道、口腔、阴道等处均有大量的厌氧菌寄居。
厌氧菌与需氧菌和兼性厌氧菌共同组成人体的正常菌群,其中绝大多数为无芽胞厌氧菌。
其中肠道中的厌氧菌数量是大肠埃希菌的1000~10000倍。
表5-22-2 重要的厌氧菌种类及其在正常人体内的分布--------------------------------------------------------------------------厌氧菌皮肤上呼吸道口腔肠道尿道阴道--------------------------------------------------------------------------一、芽胞菌革兰阳性杆菌梭状芽胞杆菌属0 0 ±++±±二、无芽胞菌(一)革兰阳性杆菌乳杆菌属0 0 +++±++双歧杆菌属0 0 +++0 ±优杆菌属±±+++0 ±丙酸杆菌属++++++?±放线菌属0 ±+++ 0 0(二)革兰阴性杆菌类杆菌属0 +++++梭杆菌属0 +++++±普雷沃菌属0 +++++++紫单胞菌属0 +++++++(三)革兰阳性球菌消化球菌属++++++±++消化链球菌属++++++±++(四)革兰阴性球菌韦荣菌属 0 +++±+--------------------------------------------------------------------------2.外源性感染梭状芽胞杆菌属引起的感染,其细菌及芽胞来源于土壤、粪便和其他外界环境。
厌氧菌及检验
二、厌氧菌感染
(一)厌氧菌在正常人体的分布
厌氧菌与需氧菌一起组成了人体的 正常菌群。人体许多部位厌氧菌在种类 和数量上远多于需氧菌,如在结肠中 99%的细菌都是厌氧菌。 临床厌氧菌感染中,由正常菌群的 无芽胞厌氧菌的感染最为多见。
常见厌氧菌在正常人体的分布
主要菌属
芽胞厌氧菌 梭菌属 无芽胞厌氧菌 革兰阳性杆菌 丙酸杆菌属 双歧杆菌属 乳杆菌属 优杆菌属 放线菌属 革兰阴性杆菌 类杆菌属 普雷沃菌属 紫单胞菌属 梭杆菌属 革兰阳性球菌 消化球菌属 消化链球菌属 革兰阴性球菌 韦荣菌属 0 + + + +- + + + + + ++ ++ ++ ++ +- +- ++ ++ 0 0 0 0 + + + + ++ + ++ ++ ++ ++ + + + + + + +- + + + ++ 0 0 ++ 0 + 0 0 +- +- += + + + ++ +- ++ ++ ++ + +- 0 +- 0 0 +- +- ++ +- 0 0 0 ++ +- +-
5. 厌氧袋运送法
6. 棉拭运送法 (略) 应在20~30min内处理完毕,最迟 不超过2h,防止标本中兼性厌氧菌过 度生长,抑制厌氧菌的生长。如不能 及时接种,应将标本保存于室温(因 冷藏对厌氧菌有害气味 直接涂片 染色镜检
分离培养
(接种非选择性及选择性培养基)
(二)厌氧菌感染的原因 1. 局部组织的氧化还原电势降低 如血 管损伤、烧伤、动脉硬化、肿瘤压迫、组织 坏死等,可造成局部组织的缺血、缺氧,使 Eh降低;此外,大面积外伤伴有需氧菌感 染消耗了氧,为厌氧菌感染提供了条件。 2 . 机体免疫功能下降 如接受免疫抑制 剂、放疗或化疗的患者;糖尿病、慢性肝、 肾疾病病人及老人、婴幼儿、早产儿等,因 免疫力下降易併发厌氧菌感染。
实验十二 厌氧性细菌(1稿)
实验十二厌氧性细菌(厌氧培养方法)厌氧性细菌(Anaerobicbacteria)是一大群必须在无氧或低氧环境中才能生长繁殖的细菌;一般情况下,这类细菌在无氧条件下比在有氧环境中生长好,不能在空气(氧气浓度大于18%)和(或)二氧化碳浓度小于10%以下的固体培养基表面生长。
这类细菌缺乏完整的代谢酶体系,其能量代谢多以无氧发酵的方式进行。
它能引起人体不同部位的感染,包括阑尾炎、胆囊炎、中耳炎、口腔感染、心内膜炎、子宫内膜炎、脑脓肿、心肌坏死、骨髓炎、腹膜炎、脓胸、输卵管炎、脓毒性关节炎、肝脓肿、鼻窦炎、肠道手术或创伤后伤口感染、盆腔炎以及菌血症等。
(一)无芽胞厌氧菌主要种类及生物学性状无芽胞厌氧菌共有23个属,与人类疾病相关的主要有10个属。
1.革兰阴性厌氧杆菌有8个属,类杆菌属中的脆弱类杆菌最为重要。
形态呈多形性,有荚膜。
除类杆菌在培养基上生长迅速外,其余均生长缓慢。
2.革兰阴性厌氧菌有3个属,其中以韦荣菌属最重要。
为咽喉部主要厌氧菌,但在临床厌氧菌分离标本中,分离率小于1%,且为混合感染菌之一。
其他革兰阴性球菌极少分离到。
3.革兰阳性厌氧菌有5个属,其中有临床意义的是消化链球菌属,主要寄居在阴道。
本菌属细菌生长缓慢,培养需5~7天。
4.革兰阳性厌氧杆菌有7个属,其中以下列3个属为主:(1)丙酸杆菌属:小杆菌,无鞭毛,能在普通培养基上生长,需要2~5天,与人类有关的有3个种,以痤疮丙酸杆菌最为常见。
(2)双歧杆菌:呈多形性,有分枝,无动力,严格厌氧,耐酸。
29个种中有10个种与人类有关,其中只有齿双歧杆菌与龋齿和牙周炎有关。
其他种极少从临床标本中分离到。
(3)优杆菌属:单一形态或多形态,动力不定,严格厌氧,生化反应活泼,生长缓慢,常需培养7天,最常见的是迟钝优杆菌。
(二)微生物学检查要从感染灶深部采取标本。
最好是切取感染灶组织或活检标本,立即送检医.学教育网搜集整理。
1.直接涂片镜检:将采集的标本直接涂片染色镜检,观察细菌形态、染色及菌量,为进一步培养以及初步诊断提供依据。
厌氧菌检验 微生物学实验
实验六、厌氧菌检验一、厌氧培养1、刨肉基法方法:将破伤风梭菌、产气荚膜梭菌分别接种在庖肉培养基中,35℃48h,观察结果。
2、厌氧罐法方法:将破伤风梭菌接种在高渗芽孢培养基中并放置于厌氧罐中;将破伤风梭菌、产气荚膜梭菌分别接种在血平板中并置于厌氧罐中,放厌氧袋,密闭,置35℃48h观察结果。
二、观察厌氧菌培养结果:1、庖肉基1)破伤风梭菌:肉汤混浊,部分消化,微变黑,有少量气体,有腐败性恶臭味。
2)产气荚膜梭菌:产生气体,肉渣呈粉红色,不被消化。
2、血平板1)破伤风梭菌:呈薄膜状生长,菌落半透明、灰白色、边缘疏松呈羽毛状,伴β溶血。
2)产气荚膜梭菌:多数菌株有双层溶血环,内环完全溶血,外环不完全溶血。
3、梭菌平板破伤风梭菌:形成直径1mm 以上不规则的菌落,中心紧密,周边疏松,似羽毛状。
三、涂片、革兰染色镜检:破伤风梭菌产气荚膜梭菌G-,细长,芽胞圆形,比菌体大,G+,粗短大杆菌,两端钝圆,单个或成双排列。
位于菌体顶端,使细菌呈鼓槌状芽胞椭圆形,位于菌体中央或次极端,芽胞直径不大于菌体四、芽孢染色:制片①5%孔雀绿加热3~5min,水洗甩干;②0.5%沙黄水溶液染色0.5~1.0min,水洗甩干干后镜检,如图所示:菌体呈红色,芽孢呈淡绿色。
破伤风梭菌产气荚膜梭菌五、汹涌发酵试验(试教)产气荚膜梭菌:分解乳糖产酸,使酪蛋白变性,同时产生大量气体,将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状,并将液面上的凡土林层向上推挤,甚至冲开管口棉塞,气势凶猛,为“汹涌发酵”。
六、讨论:1、做生化试验时,有些细菌为致病菌,故实验时要保护好自己,且实验废弃物要妥善处理,以免发生有害菌的感染。
2、所有接种的菌株暴露于有氧环境中不得超过20min3、厌氧菌检验:可据厌氧菌的菌体形态、染色反应、菌落性状以及对某些抗生素的敏感性等作出初步鉴定。
最后鉴定则要进行生化反应及终末代谢产物等项检查。
4、破伤风梭菌微生物检验:根据破伤风的典型临床表现即可作出诊断,故一般不作细菌学检查。
厌氧菌检验实验报告
一、实验目的1. 了解厌氧菌的生长特性及其检验方法。
2. 掌握厌氧菌分离纯化的基本操作。
3. 学会运用生化反应和显微镜观察等方法对厌氧菌进行鉴定。
二、实验原理厌氧菌是一类在无氧或低氧环境下生长繁殖的微生物。
在实验室条件下,通过厌氧技术模拟厌氧环境,可以使厌氧菌生长繁殖,从而进行分离、纯化和鉴定。
三、实验材料1. 厌氧菌培养箱2. 厌氧菌培养基:庖肉培养基、疱肉消化汤、疱肉琼脂平板等3. 实验器材:无菌接种环、无菌试管、无菌吸管、显微镜、酒精灯、培养皿等4. 实验试剂:5%氢氧化钠、95%乙醇、1%结晶紫溶液、革兰氏染色液等四、实验步骤1. 培养基制备a. 将庖肉培养基、疱肉消化汤和疱肉琼脂平板按照说明书进行制备。
b. 将制备好的培养基在厌氧条件下进行高压灭菌。
2. 样品接种a. 将待检样品接种于疱肉消化汤中,进行初步培养。
b. 将培养后的疱肉消化汤接种于庖肉琼脂平板上,进行分离纯化。
3. 厌氧培养a. 将接种好的庖肉琼脂平板放入厌氧培养箱中,在37℃条件下培养48小时。
b. 观察菌落生长情况,记录菌落特征。
4. 菌落形态观察a. 取少量菌落涂片,进行革兰氏染色。
b. 在显微镜下观察菌落形态、革兰氏染色结果,初步判断菌属。
5. 生化反应鉴定a. 对分离纯化的厌氧菌进行糖发酵试验、氧化酶试验、过氧化氢酶试验等生化反应。
b. 根据生化反应结果,进一步鉴定菌属。
6. 显微镜观察a. 对分离纯化的厌氧菌进行涂片、染色和显微镜观察。
b. 观察菌体形态、排列方式等特征,辅助鉴定菌属。
五、实验结果1. 厌氧菌在庖肉琼脂平板上生长良好,形成灰白色、湿润、边缘不整齐的菌落。
2. 革兰氏染色结果显示,部分菌落为革兰氏阳性,部分菌落为革兰氏阴性。
3. 生化反应结果显示,部分菌落发酵葡萄糖,部分菌落不发酵葡萄糖;氧化酶试验和过氧化氢酶试验结果均为阳性。
4. 显微镜观察结果显示,部分菌落为革兰氏阳性球菌,部分菌落为革兰氏阴性杆菌。
17章 厌氧性细菌检验
微生物学检验
• 分离培养 • PCR毒素鉴定 • 质谱方法 • VIDAS检测细菌AB毒素
第三节 革兰阴性无芽胞厌氧杆菌
第三节 革兰阴性无芽胞厌氧杆菌
革兰阴性无芽胞厌氧杆菌
临床常见革兰阴性无芽胞厌氧杆菌(non-spore-forming anaerobic gram-negative bacilli)的有
肉毒梭菌
• 芽胞椭圆形,粗于菌体,位于次极端,呈汤匙状或网球拍状 • 神经毒素分A~G 7个型,各型毒素只能被同型抗毒素中和 • 肉毒毒素不耐热,煮沸1分钟即可被破坏
致病性
• 致病物质 – 肉毒毒素 剧毒(对人致死量为0.1µg)
• 食物中毒
– 进食污染食物(多为罐头、肉制品、豆制品)发生食 物中毒--食入毒素
3~10:1 1:1 10:1 1:1 1:1 1,000:1
103-5/g 10:1 109-10/ ml 5:1
常见厌氧菌 丙酸杆菌,梭状芽孢杆菌 丙酸杆菌
韦荣球菌,普雷沃菌,卟啉单胞菌, 消化链球菌,拟杆菌(脆弱拟杆菌 除外),真杆菌 同牙垢 同牙垢 同牙垢 乳杆菌 厌氧链球菌,乳杆菌
拟杆菌,梭杆菌,真杆菌,双歧杆 菌,厌氧球菌 梭杆菌
• 严格厌氧,在血琼脂平板上,48h培养后,菌落直径3~5mm, 圆形,略凸起,白色或淡黄色、不透明、边缘不整齐、表面 粗糙。在CCFA平板上生长的菌落在紫外线照射下可见黄绿色 荧光
致病性
• 产生A、B两种毒素
– A毒素为肠毒素,能使肠壁出血坏死,液体积蓄 – B毒素为细胞毒素,能直接损伤肠壁细胞,造成伪膜性结
• 对氧敏感的破伤风溶血毒素(tetanolysin) • 质粒编码的破伤风痉挛毒素(tetanospasmin)
临床微生物检验:厌氧菌
种类
1、生物学分类
(2) 革兰阳性无芽胞杆菌(正常菌群) 乳酸杆菌、双歧杆菌、优杆菌属、丙酸杆菌属
(3) 革兰阴性无芽胞杆菌 类杆菌属、普雷沃菌属、卟啉单胞菌属、梭杆
菌属 (4) 革兰阳性厌氧球菌
脉炎等 5.有恶臭的分泌物 6.胃肠和生殖道手术后感染、流产后发生的感染 7.其它:镜检有菌而培养阴性,或在液体及半固体
培养基深部长的细菌等
厌氧菌的检验
临床标本
肉眼观察 及直接镜检
需氧培养
分离培养
厌氧培养
2-7d
确定厌养培养
增菌培养 厌氧培养
生长
无生长
生长
兼性厌氧菌
专性厌氧菌
保存菌种
分类鉴定
药物敏感试验
引起人类疾病的各种常见厌氧芽胞梭菌
细菌名称
所致疾病
破伤风梭菌 产气荚膜梭菌
肉毒梭菌
艰难梭菌
破伤风 气性坏疽、毒血症、坏死性肠炎、
E试验
布氏血琼脂 0.5麦氏比浊度 24-48H MIC精确
ß内酰胺酶 琼脂培养基 单个菌落
30-50min 经济快速检测对青
霉素G和AMP的耐药
耐药性:甲硝唑敏感,氨基糖甙类耐药
梭状芽胞杆菌属
• 厌氧菌中唯一有芽孢菌属 • 厌氧的粗大革兰阳性杆菌 • 是目前细菌中最大的一个菌属 • 广泛分布在自然界(以芽孢的形式)
• 发生内源性感染危险因素(条件) 1.局部组织血液供给障碍:局部缺氧 2.机体局部屏障作用破坏:组织氧张力↓ 3.机体免疫功能↓ 4.菌群失调 5.长期应用氨基糖苷类药物可诱发厌氧菌感染
(新)厌氧菌的检验
破伤风梭菌能产生强烈的外毒素,即破
伤风痉挛毒素(Tetanospasmin)或称神 经毒素(Neurotoxin)。破伤风毒痉挛毒素 是一种神经毒素,为蛋白质,由十余种 氨基酸组成不耐热,可被肠道蛋白酶破 坏,故口服毒素不起作用。在菌体内的 痉挛毒素是单一和一条多肽链,分子量 15万。破伤风毒素的毒性非常强烈,仅 次于肉毒毒素。破伤风梭菌没有侵袭力
1
厌氧菌标本的采集和送检
标本的采集和送检------------
1 标本决不能被正常菌群污染; 2 应尽量避免空气
标本的采集
标本来源 封闭性脓肿 妇女生殖道 下呼吸道分泌物 胸腔 窦道,子宫腔,深部创伤 组织 尿道 收集的方法 针管抽取 后穹隆穿刺抽取 肺穿刺术 胸腔穿刺术 静脉注射的塑料导管穿入 无菌外科切开 上阴部膀胱穿刺
24~48小时后,可形成直径1mm 以上不 规则的菌落,中心紧密,周边疏松,似 羽毛状菌落,易在培养基表面迁徒扩散。 在血液琼脂平板上有明显溶血环,在疱 肉培养基中培养,肉汤浑浊,肉渣部分 被消化,微变黑,产生气体,生成甲基 硫醇(有腐败臭味)及硫化氢。
一般不发酵糖类,能液化明胶,产生硫化
氢,形成吲哚,不能还原硝酸盐为亚硝酸 盐。对蛋白质有微弱消化作用。本菌繁殖 体抵抗力与其他细菌相似,但芽胞抵抗力 强大。在土壤中可存活数十年,能耐煮沸 40~50分钟。对青霉素敏感,磺胺类有抑 菌作用。
0 + + +
+ ++ ++ ++
++ ++ ++ +
0 + ± ±
± + ++ +
厌氧菌培养与鉴定技术
ANAEROBIC/HYPOXEMIC WORKSTATION历史:所有这些罐子,其培养皿/样本操作均在有氧环境中进行,而仅在培养时才置于厌氧环境中。
ELECTROTEKELECTROTEK完善的厌氧培养技术始于适当的样本采集和运输。
适当地采集试样,并快速置于厌氧运输小瓶中ELECTROTEK厌氧罐由于不能提供操作过程的厌氧环境,并且因容量的限制而无法实现灵活的样本厌氧培养,故其应用也越来越受到限制。
一台允许所有操作与培养综合功能的厌氧工作站使厌氧菌实验避免了氧气暴露的风险。
因不当的制备或贮存,使培养介质含有氧气或氧化性物质,最终将抑制厌氧菌的生长。
任何时候都应当使用经预还原处理的厌氧培养介质。
ELECTROTEK专性厌氧菌培养最好是在经预还原处理且厌氧灭菌的培养基上(PRAS培养基)。
养肉汤。
预还原是指氧气通过培养基组分物质化学移除。
ELECTROTEK以下为常见的主要用于临床标本厌氧菌分离的培养基:1、布鲁氏菌血琼脂2、卡那霉素/万古霉素血琼脂(KVLB琼脂)3、拟杆菌属胆汁七叶甙琼脂(BBE琼脂)4、苯乙醇琼脂(PEA琼脂)5、硫乙醇酸钠肉汤ELECTROTEKELECTROTEK布鲁氏菌血琼脂:含有血细胞允许溶血试验,可使特定微生物快速生长非选择性培养基,所有厌氧菌均能很好生长同样,疾病预防控制中心的厌氧菌血琼脂也可被使用。
ELECTROTEK卡那霉素/万古霉素血琼脂(KVLB ):革兰氏阴性厌氧杆菌选择性培养基。
绝大多数的革兰氏阴性兼性厌氧杆菌被卡那霉素抑制,绝大多数革兰氏阳性菌被万古霉素抑制。
产色厌氧菌(如普雷沃菌属和卟啉单胞菌属)在KVLB 琼脂上产生许多色素。
ELECTROTEK 拟杆菌属胆汁七叶甙琼脂(BBE ):绝大多数厌氧菌被庆大霉素和胆汁抑制,只有脆弱拟杆菌群作为唯一的厌氧菌能在此琼脂上快速生长。
当细菌(如脆弱拟杆菌群)分解七叶甙而生长于此琼脂上时,将显现深棕色反应。
ELECTROTEK苯乙醇琼脂(PEA ):该介质支持绝大多数专性厌氧菌生长且抑制兼性厌氧菌生长(如肠杆菌科),专性厌氧菌可呈弥漫性或过度生长。
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芽胞染色法(spore stain)
方法: 涂片→干燥→固定→5%孔雀绿加温染 3~ 5min →水洗→0.5%沙黄1min→水洗、晾 干、油镜检
结果: 菌体呈红色,芽胞呈绿色。
破伤风梭菌形态特点
破伤风梭菌菌落特点
产气荚膜梭菌形态特点
外环不完全溶血由α毒素引起
内环完全溶血由θ毒素引起
厌氧菌检验
王频佳 检验医学院
实验ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ的
1.掌握产气荚膜梭菌和破伤风梭菌的形态特 点和培养特性。 2.熟悉厌氧菌的常用培养方法、一般鉴定原 则和鉴别要点。
第二次
1.观察细菌在庖肉基中的生长现象 2.观察厌氧菌的生长情况及菌落特点 3.革兰染色镜检:产气荚膜梭菌、破伤风梭
菌
4.芽胞染色:破伤风梭菌 5.汹涌发酵现象观察(示教)