猪0型口蹄疫合成肽疫苗的免疫效果试验
两种猪口蹄疫O型疫苗应用效果对比试验
免疫 后分 别于 ２ １ ｄ 、 ２ ８ ｄ采 血 检测 。
ｒ ｅ ｓ ｐ ｉ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ ｓ ｙ ｎ ｄ ｒ ｏ ｍ ｅ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ｉ ｎ ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｍｅ ｎ ｓ ［ Ｊ 】 ． Ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ
Ｇｅ ｎ ｅ ｓ ， ２ ０ ０ ９ ， ３ ８ ： ３ ９ ２ —３ ９ ７ ．
猪， 随机 分成 ２ 个组 ， 每组 １ ０ ０头， 分 别免 疫猪 口 蹄 疫 ０型灭活疫苗和猪 口蹄疫 ０型合成肽疫苗。 结果显示： 接种猪 口 蹄 疫 ０型
合 成肽疫苗的试验猪平均免疫抗体合格率明显 高于接种猪 口蹄疫 ０型 灭活疫苗的试验 猪，且注射合 成肽疫苗的试验猪 临床 上 未 出现不 良免疫应激反应 ， 说 明合成 肽疫 苗具有 良好 的免疫原性和安全性 。
免 疫后 ２ １ ｄ 、 ２ ８ ｄ后 的抗 体效 价水 平 ，对 两 种 疫 苗
疫病 毒 （ Ｆ ＭＤ Ｖ ） 所 致 的偶 蹄 动 物 共 患 的急 性 、 热性、 高度 接 触性 传 染病 。临床 上 以 口腔 黏膜 、蹄 部 及乳 房皮 肤 发生 水疱 和 溃烂 为 主要特 征 。该病 具有 流行 快、 传播广、 发病 急 、 危害 大 等流 行病 学特 点 。 世 界动
综 合 性 防治措 施 相 结合 的方 法 ，收 到 了较 明显 的效 果， 但 由于传 统 的灭 活疫 苗质 量参 差 不齐 ， 干 扰 因素 多， 免疫 效果 不理 想 ， 对野 毒 与疫 苗产 生 的抗 体鉴 别 困难 ， 且 应 激 反应 强烈 ， 甚至造成死亡等情况， 给 广
大 养殖 户 带来 巨大损 失 ， 故使研 究 安全 、 高效 的新 型 口蹄 疫疫 苗成 为研 究 热 点 。猪 口蹄 疫 Ｏ型合 成肽 疫 苗 是采 用 固相 多肽 合成 技 术制 作 而成 ，具 有 良好 的 免 疫原 性和 安 全性 ，是近 年来 主 要推 广 的新 型猪 口
猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗(多肽2700+2800+MM13)的动物检验
猪口蹄疫0型、A型二价合成肽疫苗(多肽2700 +2800 +MM13)的动物检验陈智英张改平张震亓子明徐雪莫岩杨征勤徐杨(申联生物医药（上海）股份有限公司上海200241 )[摘要]通过接种小鼠、豚鼠和仔猪，检验3个批次猪口蹄疫0型、A型二价合成肽疫苗的安 全性和免疫效力。
检验结果表明：3批疫苗对小鼠、豚鼠未见任何局部和全身反应，对仔猪未出现 任何口蹄疫症状和因注射疫苗引起的毒性反应。
3批疫苗每头份的PD5。
为13. 59$15. 59,疫苗攻 毒保护效力批次间稳定且高于我国口蹄疫疫苗6PD5。
/头份的质量标准。
关键词：口蹄疫& 0型&A型；二价；合成肽疫苗；动物检验口蹄疫（Foot-and-mouth disease,F M D)是偶蹄 动物携带的一种急性、热性和高度接触性传染病，由小R N A病毒科（Picornaviridae) 口蹄疫病毒属(A夕的口蹄疫病毒w而，E M O T)所引起1-该病一旦发生，传播速 度很快，不易控制和消灭，严重危害养殖业健康发展，带来严重的经济损失[23]-世界卫生组织将其列为必 须上报的A类疫病，我国将其列人一类动物疫病。
目前对口啼疫的防治主要依靠疫苗的免疫预防，我国采取的是强制免疫措施。
临床上主要使用 病毒灭活疫苗和合成肽疫苗对易感动物进行防治。
合成肽疫苗存在无须操作全病毒、安全性高、稳定 性好、生产工艺简单等优点，是一种有效预防口蹄疫疫病的疫苗4。
为保证合成肽疫苗在生产实践中安全有效的应用，疫苗的质量控制至关重要。
国际上通用的疫 苗效力检测方法是本动物攻毒试验，欧洲国家多采用 50%保护剂量（50%protective doses，PD50)测定 法，南美国家多采用疫苗保护百分率（percentage of protection against generalized foot infection,PGP)测定法/]。
动物免疫攻毒保护试验是当前检验疫苗 效力的客观、有效手段。
猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果试验
猪口蹄疫Ｏ型合成肽疫苗免疫效果试验作者：邓广金来源：《湖北畜牧兽医》2009年第07期摘要:为了更好地了解猪口蹄疫O型合成肽疫苗与灭活疫苗免疫后抗体水平之间的差异,在梅州市选择2个规模化养猪场,每个猪场分2组,对试验猪分别免疫猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪口蹄疫O型灭活疫苗,对接种疫苗的试验猪进行免疫应激观察,结果显示:注射合成肽疫苗试验猪未出现不良免疫副反应,说明用合成肽疫苗临床使用的安全性较高;采用猪O型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒和正向间接血凝试验分别对使用上述两种口蹄疫疫苗免疫21d后的猪血清进行检测,结果表明:免疫猪口蹄疫O型合成肽疫苗用猪O型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒检测,抗体阳性合格率达到92.50%,免疫猪口蹄疫O型灭活疫苗用正向间接血凝试验检测,免疫合格率为35.83%,说明猪口蹄疫O型合成肽疫苗接种后的免疫效果明显优于传统灭活疫苗。
关键词:合成肽疫苗;口蹄疫;抗体;正向间接血凝试验中图分类号:S852.5+2文献标识码:A文章编号:1007-273X(2009)07-0028-02口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的急性、热性、高度接触性传染病,主要侵害偶蹄兽,偶见于人和其他动物。
临床上以口腔黏膜、蹄部及乳房皮肤发生水疱和溃疡为主要特征。
该病具有强烈的传染性,一旦发病,传播速度很快,往往造成大流行,不容易控制和消灭,带来严重的经济损失。
因此,世界动物卫生组织(OIE)一直将该病列为发病必须报告的A类动物疫病名单之首[1]。
目前对该病的防制主要是采用强制免疫、禁运、扑杀、消毒、封锁等措施,而免疫接种是最主要的也是最经济的防控措施。
目前,主要是研制和应用灭活疫苗[2],但该类灭活苗干扰因素多,对野毒与疫苗产生的抗体鉴别困难,而且疫苗的自身缺陷使之无法克服过敏反应和带毒的生物安全隐患问题[3],故许多学者把免疫谱广、免疫持续期长、安全性好的新型疫苗作为目前口蹄疫的主要研制方向。
猪口蹄疫O型合成肽疫苗是用固相多肽合成技术在体外人工合成含有口蹄疫病毒主要抗原位点的多肽[4],并连接人工合成的可激活辅助性T细胞的短肽,以此作为免疫原与进口佐剂混合乳化制成,能够很好的预防猪O型口蹄疫的发生。
不同口蹄疫疫苗免疫效果及检测方法评估
猪 口蹄疫 Ｏ型合成肽 疫苗， 分别 由上海和兰 州 某 公司生产 ； 口蹄疫 Ｏ型 （ Ｓ９ 猪 Ｏ／ ９株） 灭活疫苗 ， 由 兰州某公司生产。
收稿 日期 ：０ ０ ０ — ９ ２ １— １ １ 作者简介 ： 秦荣香（９ ７ ）女 ， １７ ～ ， 广西桂林人 ， 医师 ， 兽 主要从 事猪
病 防 治 工作 ．－ ａｌ ｉｒｎ ｘａｇ ６ ． ｍ Ｅ ｍ ｉｑｎｏｇｉｎ＠１ ３ ｏ ： ｔ
用不 同方法检测抗体 ， 并进行应激反应观察。 ２ 结果与分析 ２１ 不 同 方 法检 测 １蹄 疫 抗 体 结 果 ． ： ２ 从表 １ 看， 来 ３个厂 家 的试剂 盒检测 结果 大体 上一致 ， 只有少部分差别。 ８ 在 ０日龄免疫前， 部分 大 猪只 已没有 口蹄疫抗体，经首次免疫 １ 月后 （ｌ 个 １０ 日龄）合成肽 疫苗组 ９ ％以上 能检 测到免疫 抗体 ， ０ 但 常规 Ｏ Ｄ９株 组用进 口试剂 盒仍 未 能检 测 到抗 Ｓ 体， 只有上海 生产 的试剂盒 能检测到抗体 ， 阳性率达 ２％。 １０日龄二次免疫后于 １０ １０日龄检测， ０ 经 ２ ４、６ 合成肽疫苗组全部检测 到抗体，但常规 Ｏ ／９ Ｓ９ 株组 抗 体阳性率只有 ２ ％ ０ ０ ４ ％。 为 了进一步验证猪 口蹄疫 Ｏ型 Ｏ ／９ Ｓ９ 株灭活疫 苗 的免疫效果 ，实验室同时采用 国产 的间接血凝抑 制 （ Ｉ试剂检测不 同疫苗 的免疫效果。从表 ２ 以 Ｈ） 可 看 出 ，口蹄疫 ０型 Ｏ ／９株 灭活 疫 苗组在 首 免后 Ｓ９ １ 月仅 ３ ％产 生抗 体 ，在 二免 后 ２ 、０ｄ只有 个 ０ ０ｄ ４ ５ ％、０ ０ ６ ％能检 测到免疫抗体 ； 合成肽疫苗组无 论在 首免后 １ 月还是二免后 ２ 个 ０ｄ和 ４ ， ０ｄ 均检 测不到
猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果试验
～
３ １ ～３ １ （ ３ 。 ． ０ ． ８ｄ 表 ）
监测。
２ ２ 用 液 相 阻 断 Ｅ ＩＡ试 剂 对 浓 缩 灭 活 疫 苗 免疫 后 的 血 ． ＬＳ 清进行检测 ， 由表 ２可 以看 出 ， 免 ３周 抗 体 水 平仍 不 高 且 首 抗 体合 格 率 较 低 ， 免 ２周 后 抗 体 水 平 升 高 ， 抗 体 合 格 率 二 但 并 不 是 很 理想 。
口蹄 疫病 毒 Ｖ １ 构 蛋 白抗 体 Ｅ ＩＡ试 剂 盒 （ 海 优 耐 特 Ｐ 结 Ｓ Ｌ 上 生 物 医 药有 限 公 司 生 产 ） 。 １ ２ 方 法 ．
１ ２ １ 分组 ： 种 猪 场 试 验 的 每 头 母 猪 所 生 的 仔 猪 归 为 一 ．． 在 组， 一共 ６组 。 Ａ、 Ｃ三 组 为 合 成 肽 疫 苗 免 疫 组 ， Ｅ、 Ｂ、 Ｄ、 Ｆ三 组 为浓 缩 灭 活苗 免 疫组 １２２ 免 疫 时 间 和 剂 量 ： ．． 口蹄 疫 ４ 日龄 首 免 ， ０日龄 二 次 ０ ９
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ．
１ １ １ 试验 动 物 ： 择 昆 山 市 种 猪 场 梅 山 猪 中 相 同 待 生 产 ．． 选 日 、 期 生产 性 能 相 近 的 ６头 母 猪 ， 其 生 产 的 仔 猪 按 其 免 疫 对 程 序进 行 初 免 、 免 ， 每 头 仔 猪 唯 一 编 号 。 并 在 有 关 乡镇 二 对 选 择 了若 干 具有 不 同 免 疫 背 景 的 猪 场 进 行 了 合 成 肽 免 疫 与
１ ２ ３ 检 测方 法 按 试剂 盒说 明书 进 行 （ 程 略 ） ．． 过 。
猪O型口蹄疫合成肽疫苗和灭活苗免疫对比试验
１ 材 料 和 方 法
（ １ ）用猪 口蹄疫 Ｖ Ｐ １ 结构蛋 白抗体 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ诊断试剂对 两种 疫苗免疫后的血清进行检测 ， 从表 １ 可 以看出 ， 合成肽 疫苗 首免后 ３周平均抗体水平较 高 ，且抗体平 均合格率达 ８ ０ ％以上 ， 二免 ２ 周 后抗体一直维 持在较高水平 ， 且 合格率
３ ． ２ 检 测 结 果
合乳 化而成 ， 但灭活 苗免疫后常 出现食 欲减退 、 体温升 高等
不 良反 应 ， 免 疫 效 价 持 续 时 间不 长 。
本次试验采用徐州市鼓楼 区赵某猪场 ， 应用猪 口蹄疫 Ｏ
型合 成肽疫苗 、 猪 口蹄疫 Ｏ型灭活疫苗进行免疫试验 。通过
观察猪群免疫后 临床反应 和测 定免疫前和首次免 疫后 １ ４ Байду номын сангаас 、 ２ ８ ｄ 及二次免疫后 ７ ｄ 、 １ ４ ｄ 、 ２ ８ ｄ 、 ６ ０ ｄ抗体效价水平 ， 对猪 口蹄 疫 Ｏ型合成肽疫苗及 猪 口蹄疫 Ｏ型普通灭 活疫 苗免疫猪群 后的免疫原性 、 安全性 、 以及抗体水平和变化规律进 行比较 ， 为我市疫 苗选购提供依据。
性， 免疫副反应较小 ； 猪 Ｏ型 口蹄 疫 灭 活 苗 是 采 用 细 胞 培 养
２ ． ３ 血样采集
首先测定种猪 的抗体水 平和所产仔猪 的母
源抗体水平。在首次免疫后 ３周 、 ４周采血 ， 之后分别在二免 后 ２ 周、 ５ 周、 ９周 、 １ ２ 周采集血样 ， 以后每 隔 ４周采 血一次 ， 直至上市前一周。
程序进行 。
类 传染 病。 口蹄疫 的控制 和扑灭 ， 必须推行合理的免疫计
划 和 实施 生 猪 强 制 免疫 。
免疫猪O型合成肽疫苗对怀孕、泌乳母猪的影响
免疫猪O型合成肽疫苗对怀孕、泌乳母猪的影响摘要为研究猪口蹄疫O型合成肽疫苗在母猪免疫上的应用，选择3个猪场怀孕1～90 d的母猪57头，怀孕90～110 d的母猪30头，泌乳母猪41头，使用猪口蹄疫O型合成肽疫苗（多肽2570+7309）进行免疫。
首免1.5 mL/头，间隔4周后二免2.0 mL/头，跟踪观察120 d。
结果表明：所有免疫母猪均未出现食欲减退、体温升高、流产、产死胎、停乳等不良反应，所有母猪的健康状况均良好，妊娠母猪产活仔率高达99%。
说明猪口蹄疫O型合成肽疫苗（多肽2570+7309）可安全使用于不同阶段的泌乳、怀孕母猪。
关键词怀孕母猪；泌乳母猪；猪口蹄疫O型合成肽疫苗；免疫反应口蹄疫是由口蹄疫病毒所引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，主要特征是在口腔黏膜、蹄部、乳房、皮肤出现水疱，继而发生溃疡的一类传播速度极快的传染病[1]。
该病流行快，传播广，发病急，危害大，被世界动物卫生组织（OIE）列为A类传染病之首，我国也将其列为一类重大动物疫病。
同时，根据《动物防疫法》的要求，口蹄疫也是我国规定的重大动物疫病强制免疫病种之一。
但是在实际过程中，由于口蹄疫疫苗在免疫过程中极易产生较大的免疫反应，妊娠母猪尤为强烈[2-3]。
因此，很多村防疫员和兽医工作者对妊娠母猪都不予免疫，留下了很多免疫空白点和疫病隐患点。
为进一步了解口蹄疫疫苗对妊娠母猪是否有影响，开展了以下免疫试验。
1 材料与方法1.1 试验材料试验对象：选择石屏县3个猪场的健康无病、采食正常的怀孕母猪、泌乳母猪，品种为当地土杂母猪。
疫苗：申联生物医药（上海）有限公司生产的猪口蹄疫O型合成肽疫苗（多肽2570+7309），规格50 mL/瓶。
1.2 试验方法对怀孕母猪、泌乳母猪用猪口蹄疫O型合成肽疫苗共免疫2次，首免后4周进行第2次免疫，具体免疫程序见表1。
2 结果与分析对128头免疫猪口蹄疫O型合成肽疫苗的不同阶段的母猪跟踪观察120 d，结果发现，所有免疫猪口蹄疫O型合成肽疫苗的母猪均没有出现食欲减退、体温升高、流产、产死胎、停乳等不良反应，所有母猪的健康状况均良好[4]。
猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果观察
猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果观察作者：陈培赛，林元潮，曾瑞强来源：《兽医导刊》 2013年第12期陈培赛1，林元潮2，曾瑞强2（1. 温州市苍南县畜牧兽医局，浙江苍南 325800 ；2. 温州市苍南县灵溪镇农业综合服务中心，浙江灵溪 325800）口蹄疫是一种偶蹄动物烈性、高度传染性疾病，给世界畜牧业造成很大损失。
1974 年国际兽疫局（OIE）将该病列为国际动物卫生法典中18个A 类疾病之首, 在许多国家和地区都有该病的发生与流行。
目前对该病的防制主要是采取禁运、紧急屠宰和强制性免疫接种措施，而疫苗免疫是最主要的也是最经济的手段。
猪口蹄疫O 型合成肽疫苗采用固相多肽合成技术，在体外人工合成口蹄疫病毒主要抗原位点（合成肽）并连接人工T 细胞位点，以此作为免疫原与进口佐剂混合配制而成油乳剂疫苗，能够很好的预防猪O 型口蹄疫的发生。
温州市苍南县国土面积1300 平方公里，生猪总存栏数量约10 ～ 12万头，每户存栏数量100 ～ 500 头为主。
我县于2009 年8 月3 日开始试用申联生物医药（上海）有限公司的猪口蹄疫O 型合成肽疫苗，一直坚持使用至今，全县没有出现重大生猪口蹄疫疫情，取得了较好的防控效果，现将我县推广使用合成肽疫苗情况介绍如下。
一、猪口蹄疫O 型合成肽疫苗免疫效果观察1．初试及近年疫苗使用情况统计。
（1）初试情况。
2009 年8 月3 日，我县首先在新华畜牧有限公司进行猪口蹄疫O 型合成肽疫苗与高效灭活疫苗的对比试验。
通过试验发现合成肽疫苗免疫副反应小、抗体检测合格率高，受到了畜牧兽医部门和广大养殖场的高度认同。
（2）推广使用情况。
初试完成后，先在我县9 个规模猪场全面使用，免疫生猪约7 500 头。
10 月份以后，全县开始使用合成肽疫苗至今。
2009 年以来使用的猪口蹄疫疫苗情况见表12. 免疫后效果分析。
（1）免疫应激反应小。
合成肽疫苗接种后不会产生严重的副反应，曾观察到甚至使用了20 ml 注射的剂量也没有不良反应。
猪口蹄疫O型合成肽疫苗及猪口蹄疫灭活疫苗免疫效果试验
将 １ ０ ０头试 验 猪按 照疫 苗 说 明书 进行 免 疫 ， 每 头猪 耳 根后 肌 肉深 层注 射 ｌ 毫升 ， 第 一次 接种
后 间隔 ４Βιβλιοθήκη 再 加强 免疫 ２毫 升 。 ２ ． ３应 激 反 应 判 定 标 准
用猪 口蹄 疫 ０型 合 成 肽疫 苗 和猪 口蹄 疫 ０ 型灭 活疫 苗 在 同一 个猪 场 进行 免 疫注 射 ， 均 用酶
为 ９ ０ ％ ．１ ２ ０天 为 ６ ０ ％， １ ５ ０天 为 ５ ０ ％。 从 表 ２可
源 抗体 ； 第 一 次注 射疫 苗后 ２ ８天（ 二 免前 ） 开始第
二 次采 血 。然后 ， 每隔 ３ ０天采血 一次 。直 至抗 体
下 降 。采取前 腔 静脉或 耳静 脉采 血 ３ ～ ４毫 升 。按
６ ． １重 在 预 防 ， 从 饲养 管 理 人 手 ， 抓好 营养 、
卫生 、 人 员 意 识 等 方 面 的工 作 ． 尽 可 能 减 少 内源
头 随机 平均 分 为两 组 ， １组 ，注 射 猪 口蹄 疫 ０型
合 成肽 疫 苗 ； ２组 ， 注射 猪 １ ： ３ 蹄 疫 ０型 灭 活疫 苗 。 两组 仔猪 体重 差异 不显著 （ 见表 １ ） 。
猪 口蹄 疫 Ｏ 型合成 肽 疫苗及 猪 口蹄疫 灭活疫 苗免 疫效 果试验
孟 艳 ， 杨 秀女 ， 武秋 双 ， 郑 丽丽 ， 杨旭 光 （ １ ． 河北 省畜牧 兽 医研 究所 ， 河北保 定 ０ ７ １ ０ ０ ０ ； ２ ． 河 北省 动物 疫病 预 防控 制 中心 ， 河北 保定 ０ ７ １ ０ ０ ０ ；
蹄疫感染抗体阴性的 ２ ８ 日龄 左 右 断 奶仔 猪 １ ０ ０
或 服用 纯 中药制 剂 复方 益母 草
不同厂家猪O型口蹄疫疫苗免疫效果比较
’杨 本 勇 。王 克 才 ，李 井春 ，王 宏燕
（ 辽 宁省 动物 疫 病预 防控 制 中心 ，辽 宁 沈 阳 １ １ ０ １ ６ ４ ） ｌ ＿
中图分 类号 ￥ ８ ５ ２ ． ４ 文献标识码 Ａ 文章编号 １ ６ ７ ２ — ９ ６ ９ ２ （ ２ ０ １ ３ ） １ １ － ０ ０ ３ ７ — ０ ３
温孵 育 ６ ０ ｍ ｉ ｎ 。③ 洗 板 ：每 － Ｒ； Ｄ Ｉ ： Ｉ 入洗涤 液 ３ ０ ０
，
洗涤 ３ 次，最后在 吸水纸上拍干 。④每孔加
【 收稿 日期】 ２ ０ １ ３ － ０ ９ － ２ ４
［ 作者简介Ｊ 杨本 勇（ １ ９ ７ ３ 一 ） ， 男， 本科 ， 高 级兽医师 ， 主要从事 动 物疫病 的实验室检测和综合 防控方面工作 。
１ ． １ ． ３ 口蹄 疫病 毒 。型 （ Ｆ ＭＤ Ｖ一 ０） 抗 体检 测 试 １ ． ２ ． ５ 测定方 法 ① 标记好样 品，阳性 对照和 阴
剂盒 韩国Ｊ Ｂ Ｔ公 司 生 产 ，批 号 １ ０ ７ １ ６ ０ １ Ｓ Ｄ ０ ５ 。
１ ． １ ． ４ 试 验 器材
器。
０ ０ Ｉ ｘ Ｌ 。② 室 酶标 仪 、洗板 机 、微 量 移 液 样 品血清 、阳性对 照、阴性对 照各 ２
政府 招标采 购 的４ 家 以上 、食欲减退或厌食 、呕吐、腹泻 、精神状况
差及死亡症状 的均判 为免疫副反应 。 每 组各 阶 段猪 分 别 于 免疫 后
． ２ ． ４ 样 品采 集 ４ 个猪场 的仔 猪 、育 肥猪 、种 １
２ ８ ｄ 采血 ，分 离血清 ，进行抗体水平 的测定 。 性对照 ，每； ＥＤ Ｉ ； Ｉ 入样 品稀释液 ８ ０ Ｌ ，然后加 入
猪口蹄疫O型疫苗免疫效果监测分析
中国兽医杂志 ２１ ０ １年 （ ４ 第 ７卷 ） ８ 第 期
Ｃｈｎ ｓ ｏ ｒａ ｏ ｅｅｉａｙＭｅｉｉｅ ｉｅｅＪｕｎ ｌ ｆＶ ｔｒ ｒ ｄｃｎ ｎ
猪 口蹄 疫 。 型 疫 苗 免 疫 效 果 监测 分析
姜 东 ，周 兵 ，许 志 成 ，吴 文 开 。
（ ． 苏 省 盐 城 市 农 委 畜 牧 兽 医 站 ，江 苏 盐城 ２ ４ ０ １江 ２ ０ ２；
苗 （ 口佐 剂 。 型 浓 缩 苗 ） 批 号 ：０ ９ １ ； 型 合 进 ， ２０ ０４ ０
阻断 Ｅ ＩＡ 的 抗 体 效 价 ≥ ２ ＬＳ 判 定 为 合 格 ， 成 肽 合 疫 苗 ＶＰ 结 构 蛋 白抗 体 Ｅ ＩＡ 的抗体 效价 ≥２ １ ＬＳ 判 定 为合 格 ， 栏 家 畜 免疫 抗 体 合 格 率 ≥ ７ 判 定 为 存 Ｏ
表 １ 母 猪体 内 口蹄 疫 。 型 抗 体 水 平 合格 的 前题 ） 下， 其仔 猪 在吃初 乳 前 的抗 体水 平 经 检 测 为 ０ 吃初 ，
乳 后 的 ２ 日龄 内仔 猪 口蹄 疫 。 型 抗体 水 平 上 升 到 ４
２ 以上 占 １ ０ ， ０ 其说 明仔 猪 Ｏ 型 母 源抗 体 水平 与
同疫法 免方
散度 也 显著 降低 。普 莱柯 高抗 原含 量 的高效 价猪 瘟 活疫 苗 能被 猪瘟 母 源抗 体 和 免疫 抗 体 的干 扰 ， 再 不 严格 依 赖猪 瘟免 疫程 序 ， 因此该 苗 对 １ ￣３ ８ ０日龄仔
免疫学常用 试验方法 ［ ． 京 ： 民军医 出 Ｍ］ 北 人
龄 断 奶 ） 。
２ 试 验 结 果
１ ４ ４ 采 血 日龄 ．．
别在 接种 疫苗 前 和 产仔 前 １ｄ采 血 ， 产 仔 猪 分 别 所
口蹄疫灭活疫苗与合成肽疫苗免疫效果对比试验
２ ０ １ ５ 年
３ ｌ 卷
第２ 期
兽 药 应 用
口蹄疫 灭活疫苗 与合成肽 疫苗免疫效果对 比试验
孑 ， ｌ 、 鱼 羊 冈 Ｉ Ｊ
（ 安徽省来安县 雷官镇 兽医站，安徽来安 ２ ３ ９ ２ ２ ４ ）
［ 摘 要］ 使用猪０ 型口 蹄 疫高效灭活疫苗与猪０ 型 口蹄疫合成肽疫 苗免疫２ ８ —３ ５ 日 龄 商品猪 ，采用正向间接 血凝试验和Ｖ Ｐ １ 结构蛋 白抗体Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检 测免 疫前和首次免疫后１ ４ ｄ 、２ ８ ｄ 、３ ５ ｄ 、４ ２ ｄ 、５ ６ ｄ 及二次免疫后７ ｄ 、１ ４ ｄ 、２ ８ ｄ 抗体 水平。同时，
疫灭活疫苗与合成肽疫苗免疫效果试验，为临床免疫提供参考。
１ 材料与方法
１ ． １ 材 料
１ ． １ ． １ 试验 疫 苗
蹄灭 活苗 的对 照组 体 温变 化范 围为 ３ ８ ． ４ ８ ℃ ３ ９ ． ７ ６ ℃。体 温检 测结 果详 见表 ２ 。 表２免疫Biblioteka 一周 内猪体温变化情况 单位 ：℃
［ 关键词］ 口蹄疫疫 苗 免疫效 果
口蹄 疫 （ Ｆ ＭＤ）是 由 口蹄疫 病 毒 （ Ｆ ＭＤ Ｖ ）引起 的 偶蹄 动物 推 荐剂 量进行 ，其 他 疫苗 按 常规免 疫 程序进 行 。 的 一种 急 性 、热性 和高 度 接 触性 的传染 病 。世界 上 许 多 国家 和地 １ ． ２ ． ４ 检 测 方 法 区 都有 该 病 的 流行 与发 生 ，严 重 威 胁着 畜 牧业 的发 展 ，造 成 了 巨 按试 剂 盒说 明书 进行 （ 过 程 略 ）。 大 的经 济 损失 。国 际兽疫 局 （ Ｏ Ｉ Ｅ）于２ ０ ０ ８ 年１ 月２ １ 日将 该 病 列入 ２ 结 果 多 种动 物 共 患病 ，我 国将 该病 列 为 一类 动 物传 染 病 之首 。 目前 ， ２ ． １ 疫 苗 反 应 情 况 对该 病 我 国 主要 采 取 以免疫 注射 为 主 的综合 性 防 控措 施 来 预 防和 ２ ． １ ． １ 体 温 变化 控 制猪 口蹄疫 。来 安县 猪 口蹄 疫 防 控过 程 主要 是 猪 Ｏ型 口蹄疫 灭 各 组 免疫 后一 周 内 ，猪 群 体温 均 呈 现不 同程 度 的 波动 ，但波 活 疫苗 和 合 成 肽 Ｏ 型 口蹄 疫 疫 苗 ，为 探 明 两种 疫 苗 免 疫 反应 情 况 动 范 围均 在猪 体 正 常体 温范 围之 内 。使用 合 成肽 疫 苗 的试 验 组 ， 和 免疫 抗 体 变化 规律 ，本试 验 以商 品猪 为 免疫 对 象 ，开 展 了 口蹄 免疫 后 一周 内猪群 体温 在 ３ ８ ． ５ ４ ％一 ３ ９ ． ８ ６ ％之 间波 动 ，使用 Ｏ 型口
猪口蹄疫O型合成肽疫苗的免疫效果调查
口蹄疫 是 一种偶 蹄 动物 烈性 、 高度 传染 性疾 病 。 １７ ９４ 年 国 际兽 疫 局 （ Ｉ 将 该 病 列 为 国 际动 物 卫 生 法典 中 １ Ｏ Ｅ） ８ 个 Ａ类疫病 之 首 。 目前对 该病 的防 控主要 是采 取禁 运 、 紧 急屠 宰 和强 制性 免 疫接 种等 措施 ， 而疫 苗 免疫 是最 主要 的 也是 最经 济 的手段 。 由于 口蹄疫 病毒各 血清 型之 间没 有 但 交叉 保 护 ， 且 型 内毒 株 间也 存 在 抗 原差 异 ， 而 因此 给疫苗 的研 制 造 成 许 多 困难 。虽 然 细胞 疫 苗 具有 较 好 的免 疫 效 力 ， 由于细 胞 苗 的抗 原 生 产难 以准 确定 量 ， 但 无法 克 服疫
１ ． 血 清学 调查 ① 调查 对 象 ： 马店 市永 辉牧 业种 猪 ．２ ２ 驻 场、 驿城 区顺 和猪 场 、 城 区刘 阁办 崔庄 猪场 、 平 正平 饲 驿 遂
的临界值 为 ０３ 但 此次 抽 检 的血 清样 品测 其 Ｏ ． ４， Ｄ值 ９ ％ ０ 在 ２ －． ． ３０之间 ， 明猪 首 次免疫 后 的抗 体水 平较 高 ， ０ 说 完全 符合 要求 。 照产 品使 用 说 明书 ， 按 若在 首免后 ２ ８天 加强免 疫一 次 ， 抗体 水平 和保 护率会 更 高 、 免疫有 效期 会更 长 。 ３３ 猪 １蹄 疫 ０型合 成肽 疫 苗免 疫抗 体 的检 测 ． ： ７ 猪 口蹄 疫 ０型合 成 肽疫 苗 免疫 抗体 的检测 不 能使 用 传 统 的血 凝 试 验 和酶 联免 疫 吸附试 验 ， 因为其 致敏 抗原 非 纯净 病毒 粒
中 图分类 号 ：８ ２５ Ｓ５ ． 文献标 识码 ： Ｂ
．
文章 编号 ：０４ ５ ９（０ ８ ５０ ０ － ２ １０ — ００２０ ） — ０ ７ ０ ０
猪口蹄疫O型合成肽疫苗不同剂量免疫效果测定试验
免疫 后用 ＶＰ １ 一Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ检测， ３组 ３ ０ ｄ 、 ６ ０ ｄ 、 ９ ０ ｄ 、
１ ０ ５ ｄ 、 １ ２ ０ ｄ的样 品均为 阳性 ， 且 ３组不 同剂 量 间亦
无差 异 。
表 １ 猪 口蹄 疫 Ｏ 型 合 成 肽 疫 苗免 疫 抗 体 检 测 结 果
３ 结 果 分 析
合格 率 １ ０ ０ ， 且 不 同剂 量 间亦 无 明显 差 异 。而 庄
３ ． １ 猪 。 型 口蹄 疫 合 成 肽 疫 苗 免 疫 基 本 无 副 反 应 。本次试 验 虽未 设 列 浓 缩 苗 对 照组 ， 但 与 以往 使
浪县 浓缩 苗免 疫 ３ ０ ｄ后 抗 体 合 格 率 多 年 平 均 率 为
２ 对 策
２ ． １ 提 高认 识 。 加 强组 织领导
法 及重 大 动物疫 病 应 急 条 例 的宣 传 力 度 ， 强 化 产 地 检 疫及 监督 工作 ， 详 细 了解 所 育 肥贩 运 家畜 的来 源 及 防疫 情 况 ， 彻 底 消 除 育 肥 和 贩 运 户 的侥 幸 心 理 。 ２ ． ５ 参与 扶贫 项 目的 实施 ， 杜 绝 其它疫 病 的传入 县、 乡、 站业 务单 位要 积极 参 与农村 扶贫 项 目的 实 施工 作 ， 及 时 给扶 贫 部 门提 供本 地 区及 周 边 地 区 的动物 疫情 动 态 ， 掌 握 引 进 动 物 的健 康 状 况 和 防疫
关 研 究表 明 ： 合 成 肽疫 苗 免 疫 一 次 即 可 确保 高 效 价
抗 体 维持 至 出 栏 ， 大大优于浓缩苗 ， 完 全 可 以 达 到
部、 省 确定 抗体 合格 率 的 目标 ， 免疫 工作 难度 也将 大
大降低 。 （ 下 转第 ｌ ｌ ５页 ）
猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果试验
猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果试验作者：曹任辉来源：《科学种养》2013年第18期【摘要】为了更好地了解猪口蹄疫O型合成肽疫苗的免疫效果，笔者选择了3个规模养殖场进行试验，每个猪场实验猪分为2组，分别采用免疫猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪口蹄疫O型高效灭活疫苗，用猪口蹄疫O型VP1结构蛋白抗体ELISA试剂盒（VP1-ELISA）和正向间接血凝试验对免疫不同口蹄疫疫苗21d的猪血清进行检测。
结果表明，免疫猪口蹄疫O型合成肽疫苗用VP1-ELISA检测，抗体阳性率达到91.66%；免疫口蹄疫O型高效灭活疫苗用正向间接血凝试验检测，免疫合格率为57.5%。
由此可见，猪口蹄疫O型合成肽疫苗接种后的免疫效果要优于传统灭活疫苗。
【关键词】猪；口蹄疫；O型合成肽疫苗；VP1-ELISA；正向间接血凝试验1 前言口蹄疫是偶蹄动物的一种急性、高度接触性、发热性传染病[1]，给世界畜牧业造成了很大的损失。
1974年，国际兽疫局（OIE）将该病列为国际动物卫生法典中18个A类疾病之首，在许多国家和地区都有该病的发生与流行[2，3] 。
目前对该病的防制主要是采取禁运、紧急屠宰和强制性免疫接种措施，而疫苗免疫是最主要的也是最经济的手段。
细胞灭活苗一直作为控制口蹄疫发生与流行的常规疫苗[4]，虽然细胞疫苗具有较好的免疫效力，但由于细胞苗的抗原生产难以准确定量，而且该产品的自身缺陷使之无法克服过敏等疫苗引起的不良反应和生物安全隐患问题[5]，同时，疫苗的使用也会严重干扰口蹄疫的诊断，故许多科学家把寻找安全性好、免疫力高和抗原覆盖广的新型疫苗作为现在口蹄疫疫苗研究的主要方向。
口蹄疫病毒的衣壳蛋白VP1是其最主要的抗原蛋白，具有很强的抗原性，是诱导产生中和抗体的主要成分[6]。
猪口蹄疫O型合成肽疫苗采用固相多肽合成技术，在体外人工合成口蹄疫病毒VP1结构蛋白中最主要抗原位点（合成肽），并连接人工T细胞位点，以此作为免疫原与进口佐剂混合配制成油乳剂疫苗，这种疫苗能够很好地预防猪O型口蹄疫的发生。
新型猪口蹄疫O型疫苗应用效果试验
个 镇 的３ 个 规模 猪场 进行 了分 组试 验 ，现将 试验 结果 报告 如 下 。
１ ． ２ 试 验 方 法
１ ． ２ ． １ 试 验猪 选择
１ 材 料和方法
１ ． １ 材 料
１ ． １ ． １ 试验 猪
分 别在 ３ 个 养 殖 场随 机选 择 ２ ５ ０ 头４ ５ 日龄健 康 仔猪 作 为对 比试
０１ ０１ ２０ ０ ４。 定 切 实有 效 的 生猪 口蹄疫 免疫 程 序 ，进 一 步提 升 生猪 口蹄疫 科 学 ２ 猪Ｏ 型 口蹄疫 抗 体液 相阻 断Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 诊 断试剂 盒 。生 产厂 家 ：中 防治 水 平 ，２ ０ １ １ 年９ 月 ～２ ０ １ ２ 年１ ０ 月 ，我 们 使 用 Ｏ 型灭 活 苗 （ Ｏ ， ＭＡ Ｙ ９ ８ ／ Ｂ Ｙ ／ ２ ０ １ ０ 株 ）和 ０ 型合 成 肽疫 苗 在 扬 中市 油 坊 、西 来 桥 二 国农业 科学 院兰 州兽 医研 究所 。批 号 ：２ ０ １ ２ ０ ９ １ ９ ０ １ 。
・１ １ ８・
农威 特 生物科 技 股份有 限公 司。批 号 ：Ｈ１ １ １ ２ ６ ８ Ｊ 。 ｒ ａ ｉ ｎ 离一 ０２ ０ ａ ｒ ｉ ｎ ，吸出血清 ，４ ￣ Ｃ 保存 。选择２ ０ １ ２ 年２ 月２ ７ 日试验猪 猪 口蹄疫０ 型合成肽疫苗。生产厂家 ：新疆 天康畜牧生物技 作为 疫苗 抗体 跟踪 组群 ，于 二免 后６ 周 、９ 周 、１ ２ 周 ，ｌ ￣ Ｐ ｌ ０ ５ 日龄 、 １ ３ ０ 日龄 、 １ ５ ０ 日龄 分别 在前腔 静脉 采血 ５ ｍ ｌ 。血样 以３ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ 离 术股 份有 限公 司 。批号 ：２ ０ １ １ ０ ２ ８ 。 猪 口蹄 疫 ０ 型 合成 肽 疫 苗 。 生产 厂 家 ：中牧 实 业 股份 有 限公 卷
规模猪场不同口蹄疫疫苗的免疫效果试验
１ ． ３ 检测试剂 口蹄疫合成肽免疫抗体检测采用
Ｖ Ｐ Ｉ结构 蛋 白抗体 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ试 剂盒 ， 由上 海某 生 物 医 药 有 限公 司 生产 ； 猪 口蹄 疫灭 活 疫 苗 （ Ｏ型 Ⅱ） 免 疫 抗 体检 测 采用 正 向 间接 血 凝 试 剂 （ Ｉ Ｈ Ａ） ， 由中 国农 科 院某 兽 医研究 所 生产 ， 所用 试 剂均 在有 效期 内。
１ ． ４ 试 验 方 法
１ ． ４ ． １ 试验 分组
选用 ６ ０ 日龄健 康 仔 猪 １ ２栏共
１ ３ ４头 ， 随机分 为 ６组 ， Ａ１组 ２ ２头 ， Ａ ２组 ２ ２头 ， Ａ ３
普遍存在免疫抗体合 格率下 降和稳定性 较差等 问 题 。为提 高猪 口蹄疫 的免 疫 效 果 ， 杭 州 市 萧 山 区有
表 ２ 猪 口蹄 疫 ０ 型合 成肽 疫苗 的免疫 效果观 察
由表 ２可 见 ， 猪 口蹄 疫 ０ 型 合 成 肽 疫 苗 首 免 后， Ａ１ 组 的抗 体 合格 率 较 低 ， 但 均 已超 过 农 业 部 规 定抗 体 合 格 率 ≥ ７ ０ ％ 的规 定 ， 经 二 免 和 三 免后 ， 合 格率 均达 到 １ ０ ０ ％ 。证 实使 用猪 口蹄 疫 ０型合 成 肽
摘要 ： 为比较猪场不同口蹄疫疫苗的免疫效果 ， 选择健康仔猪 １ ３ ４头， 选用猪 口 蹄疫 Ｏ型合成肽疫苗及
由政 府招投标的 ３家公 司生产 的猪 口蹄疫 （ Ｏ型 Ⅱ） 灭 活疫 苗进行免疫效果试验 。经试验 ， １ ３ ４头 健康仔猪 在 ６ ０日龄 、 ９ ０日龄 、 １ ２ ０日龄 分别注射不 同种类 的疫 苗 ， 于免疫 后 ３ ０ ｄ 抽 取血样进行抗体检测 。结果 表明 ， 经 二 免后 的抗 体合格率均能达 到农业部 规定的抗体合 格率 ≥７ ０ ％ 要求 ， 表 明采用 Ｏ型合成 肽疫 苗及不 同厂家 生 产 的 Ｏ型 Ⅱ灭 活疫 苗经二免后猪群都能 产生 良好的抗体保护率 。
猪“一畜三针”注射免疫效果实验
５ ２ ． ２ ４ ％， 常 规 注 射 免 疫 方 法 的 口蹄 疫 、 猪瘟、 猪 蓝 耳
畜 三针 ” 的三种 疫苗 注射后 对猪 体 同时产生
Ｏ２ — ２ ２ ［ 收稿 日期 ］ ２０１３一 １ ９ ８ ２ 一） ， 女， 云南泸水人 ， 本科 ， 助 理 兽 医 ［ 作者 简 介］ 恒文芳（ 师， 主 要 从 事 动物 疫 病 监 测 工 作 。 ＊［ 通讯 作者 ］ 马文张 ， Ｅ — ｍａ ｉ ｌ ： ｙ ｕ ｎ ｎ ａ ｎ ｍｗ ｚ ＠ｓ ｉ ｎ ａ ． ｃ ｏ ｎ ｒ
１ ０ ０
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ａｎ ｉ ｍａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ Ｖｅ ｔ ｅ ｒ ｉ ｎ ａ ｒ ｙ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ
Ｖｏ １ ． ３ ２
Ｎｏ ． ５
２ ０ １ ３
猪“ 一 畜 三 针 ＂注 射 免 疫 效 果 实 验
和 １ ． ８ ５ 。
猪瘟 活疫 苗 （ 脾淋 源 ） 来源 于 云 南 生物 制 药 厂 ， 猪 繁殖 与呼 吸综合 症灭 活疫苗 来源 于扬州 威克制 药
表 １ 正常 注射 与“ 一畜三针” 对 比 试验 结 果 表
注射 方 法
一
注 射 数 头
５ Ｏ ５ ２
注射 量 ｍＬ
瘟 活疫 苗 （ 脾淋源） 分别注射 至左右颈部肌 肉 １ ． ２ ｍＬ； 猪 繁殖 与呼 吸综合 症灭 活疫苗 在臀部 肌 肉注射
１ ． ２ ｍＩ 。
畜三针” 注射 免疫在其 他地方 已经取得 成功。
不同猪口蹄疫O型疫苗免疫效果的对比试验
１ ． 免疫接种 将 １０头保 育猪 随机分成 两组 ， ．１ ２ ６ 每组 ８ ０头 ， 分别注射猪 口蹄疫 Ｏ型合成肽疫苗 １ ． ２ ｍＩ ／ 头与猪 口蹄疫 Ｏ型灭活疫苗 （Ｓ ９ １ ｍＬ ， ０ ／ 株）． ／ ９ ２ 头 并进行应激观察 。 １ ． 血清采 集 免疫 ２ ， ．２ ２ ５ｄ后 分别 从两组 中随机 抽取 ２ ０头猪 ， 每头静脉采血 ３ ５ｍ ， Ｌ 放入玻璃试 管 中， 并将其倾斜 成 ４ ￣ 待血液凝 固后将其置于 离 ５ 角， 心机， ０ ｍｎ 离心 １ ｉ， ３ ０ ／ ｉ， ０ ｒ ０ ｎ分离出血清样品置 ４ ｍ ℃ 冰箱中保存 。 １ － 抗体 检测 合 成肽 疫苗组 血清 用猪 ０型 口 ．３ ２ 蹄疫 Ｖ Ｉ 体检 测试 剂盒按 照说 明书检 测抗 体效 Ｐ 抗 价， 检测 结果按试剂盒要求判 定。 灭 活疫苗 组血清 用正 向间接血凝试验 （ Ｉ方法 Ｈ） 检测抗体效价 。 具体检测方法： ９ 在 ６孔 Ｖ型血凝板上 将被检 血清用 稀释液 作倍 比稀释 ， 同时设 阴性 、 阳性 对 照， 每孔血清量 ５ Ｌ 然后每孔 加入 ２ Ｌ口蹄 ０ ， ５ 疫正 向间接血凝抗原 ， 将血凝板置于微量振荡器上振 荡 １ ｉ， ｎ静置 １ ～ ， ｍ ． ２ 判定结果， ５ ｈ 或次 日判定结果嘲 。 ２ 结果与分析
收 稿 日期 ：ｏ ２ ０ 一 Ｏ ２ １— ９ ｌ 作者简介 ： 申锋 （ ９ ８ ） 男， 王 １ ７ 一 ， 河南郑 州人 ， 医师 ， 师 ， 兽 讲 硕士 长期从事动物疫病 防治的教 学和科研工作．
Ｅ— ｉ：ｍｆ ｎ ｗａ ｇ １ ３ Ｃ ｎ ｍａｌｚ ｅ ｇ ｎ ＠ ６ ．Ｏ ｌ
２１ ０ ２第 ５期
养猪 Ｓ Ｎ ＲＯ Ｕ ＴＯ ＷＩ Ｅ Ｐ Ｄ Ｃ Ｉ Ｎ
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猪0型口蹄疫合成肽疫苗的免疫效果试验
摘要
目前在生猪口蹄疫的防控措施上，主要采用的是以免疫为主的防控策略。
苏州市从上世纪末开始，相继推广使用猪0型口蹄疫灭活疫苗、猪0型口蹄疫进口佐剂浓缩苗（206疫苗），为口蹄疫综合防控工作发挥了重大作用。
但是由于疫苗自身的不足，使我市的养殖户产生了抵触拒免心理，在推广上受到了很大阻力。
为寻找一种更优质的疫苗，苏州市动物疾病预防控制中心与几家公司合作选用了猪0型口蹄疫合成肽疫苗，并分别在常熟等地区进行了临床试验，结果表明：新型疫苗能产生很好的免疫保护效力，为广泛使用猪0型口蹄疫合成肽疫苗奠定了基础。
关键词
猪0型口蹄疫合成肽疫苗；口蹄疫；免疫效果试验
口蹄疫是一种偶蹄动物烈性、高度传染性疾病，给世界畜牧业造成很大损失。
国际兽疫局（OIE）将该病列为国际动物卫生法典中A类疾病之首，在许多国家和地区都有该病的发生与流行。
口蹄疫的控制和扑灭，必须推行合理的免疫计划和实施生猪强制免疫。
目前，苏州市养猪业普遍使用的是猪口蹄疫灭活疫苗。
但近年来我市引进并开发了一种以人工合成肽为抗原的新型口蹄疫合成肽疫苗，它是采用固相多肽合成技术，在体外人工合成口蹄疫病毒主要抗原位点（合成肽）并连接人工T细胞位点，以此作为免疫原与进口佐剂混合配制而成的油乳剂疫苗。
我们通过其免疫原性、安全性、抗体持续性进行了实验和临床应用，取得了理想的效果。
1. 材料和方法
1.1 试验动物分组与设计
在海虞镇随机抽取了性能、日龄等比较相近的几个猪圈中的6头仔猪，并对其进行唯一编号，编号分别为：A、B、C、D、E、F。
其中前三头为合成肽试验组，后三头为灭活苗试验组。
所有试验仔猪在1月龄左右时进行初免，在初免结束30天左右进行二免，合成肽试验组每组接种疫苗1ml/头，灭活苗试验组每组接种疫
苗2ml/头。
1.2 疫苗和试剂
猪合成肽O型口蹄疫疫苗，购于申联生物医药（上海）有限公司生产，批号：20080905
猪口蹄疫O型灭活疫苗（OZK/93株），购于中农威特生物科技股份有限公司，批号：2008010
口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA试剂盒，购于申联生物医药（上海）有限公司，批号：200708034
O型口蹄疫液相阻断ELISA试剂盒，购于中国农业科学院兰州兽医研究所，批号：20071002
1.3仪器
微量移液器、酶标仪
1.4方法
VP1结构蛋白抗体ELISA检测方法按试剂盒说明书进行。
液相阻断ELISA检测方法按试剂盒说明书进行。
2.结果
2.1 VP1结构蛋白抗体ELISA检测结果见表1。
表1：VP1结构蛋白抗体ELISA检测抗体的消长规律
疫苗种类OD值
VP1结构蛋白平均OD值
首免3.周首免4周二免2周二免5周二免9周
合成肽疫苗
A 1.024 1.387 1.913 1.905 1.882 合格率% 76.2 100 100 100 100
B 1.124 1.258 1.788 1.874 1.737 合格率% 65.1 84.5 100 100 100
C 1.113 1.331 1.925 1.847 1.693 合格率% 66.2 82.5 100 100 100
注：本次试验阳性的OD值判定界为0.5到2.0之间，阳性对照孔平均OD值×0.23=临界值，若被检样品孔OD值≥临界值时，判为阳性。
由表1可见：合成肽疫苗首免3周平均抗体水平较高，且抗体水平合格率达80%以上，二免2周后抗体一直维持在较高水平，且合格率达100%。
2.2 液相阻断ELISA检测抗体结果见表2。
表2：液相阻断ELISA检测抗体的消长规律
疫苗种类平均
效价
液相阻断ELISA检测抗体的平均效价
首免3周首免4周二免2周二免5周二免9周
灭活浓缩疫苗
D 49.3 72.3 188.9 284 229.9 合格率% 22.2 44.5 55.6 67.5 68.5
E 16 63.5 211.3 284.1 205.3 合格率% 11.1 30.2 66.6 66.7 77.8
F 38.4 68.4 204.9 285.1 215.3 合格率% 15.9 35.9 58.7 66.9 72.5
注：抗体效价≥128，判为阳性
由表2可见，首免后3周抗体水平仍处于较低水平且抗体合格率也较低，二免2周后抗体水平升高，但是抗体水平及检测的抗体合格率并不是很理想。
3.小结与讨论
3.1 本次试验中，使用猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫后不良反应较猪口蹄疫O型合成肽疫苗要小的多，基本上无任何不良反应。
猪O型口蹄疫合成肽疫苗的多肽抗原纯度高，生产过程中不需要灭活剂灭活，不存在异体蛋白，是一种单一的抗原，能够有效的避免异体蛋白引发的过敏反应。
3.2 从免疫效果来看，由上表的实验数据明显可以看出两者的差距，合成肽疫苗所产生的抗体水平高，且持续时间长。
而抗体水平高的主要原因就是合成肽疫苗的核心成分即口蹄疫病毒VP1蛋白的合成及细胞位点的结合系采用全球最先进的合成仪控制，抗原含量精确稳定。
据资料报道，目前应用细胞生产口蹄疫灭活苗，其灭活剂BEI只灭活口蹄疫病毒，对培养液中的酶等没有明显作用，而酶在疫苗存放过程中可能会逐渐裂解灭活的口蹄疫病毒，使其效力逐渐减退。
而猪口蹄疫O型合成肽疫苗则完全克服了这一缺点，从而使其产品质量非常稳定。
3.3 从接种的剂量上来看，合成肽疫苗一般注射1ml可以保证动物体产生坚强的保护力。
而猪口蹄疫O型灭活疫苗要诱发有效的免疫应答，通常需要较大量的抗原，
因此，为保证免疫效果而采用2ml注射；其次，猪口蹄疫O型灭活疫苗随着时间的延长，抗原成分会不断被酶降解，免疫效力大大降低，临床应用中也证明了这一点。
因此，也需要足够量的抗原，这就造成在增加注射剂量的同时，免疫副反应也相应的增大。
3.4 从检测方面来看，合成肽的检测试剂盒比浓缩灭活苗检测的液相阻断试剂盒方便、高效、且成本低。
口蹄疫O型合成肽疫苗的免疫效果明显优于灭活苗，在首免4周后抗体大幅提升，免疫期维持时间长，发生的应激反应小，几乎没有任何不良反应，且注射剂量小，在用专用的VP1结构蛋白抗体ELISA检测抗体时，合格率高，且检测抗体结果所需的时间短，于目前我市防控口蹄疫采取一年春秋两次防疫具有重大的意义。
参考文献
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