F-7000荧光分光光度计使用操作步骤
F-7000简易操作 (中)
日立F-7000荧光分光光度计简易操作步骤<一>开机顺序：（1）接通电脑及打印机电源，进入Windows操作系统。
（2）接通光度计左侧电源开关（POWER）约5秒钟后主机右上方绿色氙灯指示灯点亮，表示氙灯已经启辉工作。
（3）双击电脑屏幕上FL Solutions 荧光分析快捷框，进入仪器操作界面。
<二>关机顺序：（4）使用仪器操作软件退出操作系统并关闭氙灯。
（5）保持主机通电10分钟以上最后关闭主机电源开关。
（目的是让灯室充分散热）<三> 波长扫描的简易操作：（Wavelength Scan）点击快捷栏“Me thod”后，立即显示了分析方法（Analysis Method）的五个模块界面，分别为“常规”（General），“仪器条件”（Instrument），“监视界面”(Monitor)，“处理”(Processing)，“报告”(Report)。
下面详细介绍每个界面：（1）General （常规）*Measurement（测量方式）--------选择Wavelength （波长扫描）*Operator （操作者名）---------键入操作者性名*Insturment (仪器型号) ----------自动给出*Sampling (进样器类型) -------选用自动进样器后该项自动指定*Comments (注释表)-----------可输入简单注释说明*☐ Use sample table（使用样品表）----（2）Instrument （仪器条件）*Scan mode (扫描方式) ---------- Excitation (激发波长扫描)Emission（发射波长扫描）Synchronous（同步扫描）*Data mode （数据方式）---------Fluorescence （荧光采集）Luminescence （发光采集）Phosphorescence（磷光采集）*EM WL （发射波长）------------输入范围0nm, 200nm～900nm*EX Start WL （激发起始波长）----输入范围200nm～890nm*EX End WL （激发终止波长）-----输入范围210nm～900nm* EX WL (激发波长)-------------输入范围0nm, 200nm～900nm*EM Start WL （发射起始波长）-----输入范围200nm～890nm*EM End WL （发射终止波长）-----输入范围210nm～900nm*Scan speed （扫描速度）-----------30,60,240,1200,2400,12000,30000,60000nm/min八挡可选（磷光扫描仅有三挡：30,60,240nm/min）*Delay （延迟时间）----------输入范围0～9999秒（重复测量时仅对第一次测量有效）*EX Slit （激发单元狭缝）-----------1, 2.5 ,5, 10, 20,五挡可选。
日立F-7000荧光分光光度计的使用
日立F-7000荧光分光光度计的使用
日立F-7000荧光分光光度计的使用
梁向晖毛秋平钟伟强*
【摘要】荧光分光光度法广泛应用于医药、农业、环境科学、生命科学、材料科学及食品科学等领域。
简要介绍F-7000 荧光分光光度计的基本构造和工作原理，同时以荧光增白剂33#为测试对象，对它的操作及维护进行详细介绍。
【期刊名称】分析仪器
【年(卷),期】2018(000)004
【总页数】6
【关键词】荧光分光光度计高灵敏度荧光增白剂
经验交流
基金项目：广东省研究生教育创新计划项目(2017JGXM-MS04); 广东省功能分子工程重点实验室资助课题(2017kf05)。
当紫外线照射到某些物质的时候，这些物质会发射出各种颜色和不同强度的可见光，而当紫外线停止照射时，所发射的光线也随之消失，这种光线称之为荧光。
荧光分光光度计具有灵敏度高、选择性强、取样量少、方法简便等优点。
现已广泛应用于药物分析、农业、生命科学、环境科学、材料科学、食品科学等诸多领域[1-7]。
日立F-7000荧光分光光度计具有如高灵敏度(信噪比为15000∶1)、高扫描速度(可达60000nm/min)等功能。
本文简要介绍F-7000荧光分光光度计的工作原理和基本构造，同时以荧光增白剂33#(杀虫丹)为测试对象，对它的操作及维护进行详细介绍。
荧光增白剂33#的化学名称乙硫甲威，分子式是C11H15NO2S，分子量:225.3073；CAS号:29973-13-5。
分子结构式如图1所示。
F-7000荧光分光光度计使用操作步骤解析
• ！！Attention：激发光终止与起始波长差不 小于10nm。
– 选择扫描速度“Scan Speed”（通常选 240nm/min）。 – 选择激发/发射狭缝（EX/EM Slit）。 – 选择光电倍增管负高压“PMT Voltage”（一 般选700V）。 – 选择仪器响应时间“Response”（一般选 Auto）。 – 选择光闸控制“□Shutter Control”打√，以使 仪器在光谱扫描时自动开启，而其他时间关闭。 – 选择“Report”设定输出数据信息、仪器采集 数据的步长（通常选0.2nm）及输出数据的起 始和终止波长（Data Start/End）。
图6 关闭运行软件
• （2）约十分钟后，关闭仪器主机电源，即按下仪 器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）。 （目的是仅让风扇工作，使Xe灯室散热）。
•
（3）关闭计算机。
寻找激发波长的方法
测试前，激发波长未知，可以按照以下步骤寻找激发波长。
• 1. 首先在发射光谱设置中输入一个激发光波长数 值，如300 nm，设置发射光谱范围，通常起始值 大于激发波长，小于激发波长的二倍，得到一个 发射光谱，得到一个或几个发射波长的峰值 • 2. 重新在激发光谱中设置，输入步骤一中得到的 发射波长，设置激发光谱范围，通常起始值大于 发射波长的一半，小于发射波长，得到激发波长 的峰值 • 3. 按照步骤二的过程，将几个发射波长都输入， 得到几个激发波长 • 4. 重复步骤一的过程，输入步骤二，三中得到的 激发波长，观察发射光谱的峰形，确定发射光谱。
• ！！Attention：Data Start/End需与 “Instrument”选项中设置一致，否则所得 到的数据点会逐渐减少，而无法作图。
（4）参数设置好后，点击“确定”。
荧光分光光度计的使用流程
荧光分光光度计的使用流程1. 准备工作在使用荧光分光光度计之前，需要进行一些准备工作。
以下是一些必要的准备事项： - 确保荧光分光光度计已经连接到电源，并且通电正常。
- 检查荧光分光光度计的灯泡是否正常工作，灯泡是否需要更换。
- 确保荧光分光光度计的样品室是干净的，没有任何杂质或污垢。
2. 打开荧光分光光度计软件打开荧光分光光度计的软件，通常会有一个图形界面供用户使用。
以下是打开软件的步骤： 1. 双击荧光分光光度计软件的图标，启动软件。
2. 在软件界面上找到并点击“打开”按钮，选择要分析的样品文件。
3. 样品的输入在荧光分光光度计软件中，需要输入样品的相关信息。
以下是样品输入的步骤：1. 在软件界面上找到并点击“新建样品”按钮，创建一个新的样品文档。
2. 在样品文档中填写样品的名称、浓度、体积等信息。
4. 调整荧光分光光度计的参数荧光分光光度计的参数调整非常重要，直接影响到后续的实验结果。
以下是参数调整的步骤： 1. 在软件界面上找到并点击“参数设置”按钮，进入参数设置界面。
2. 根据实验要求，调整荧光分光光度计的激发波长、发射波长、积分时间等参数。
5. 测量样品的荧光信号完成参数调整后，可以开始测量样品的荧光信号了。
以下是测量样品荧光信号的步骤： 1. 将准备好的样品放入荧光分光光度计的样品室中。
2. 在软件界面上点击“开始测量”按钮，荧光分光光度计开始记录样品的荧光信号。
3. 等待一段时间后，荧光分光光度计会自动停止测量。
6. 分析和保存实验结果测量完成后，需要对实验结果进行分析和保存。
以下是实验结果分析和保存的步骤： 1. 在软件界面上找到并点击“数据分析”按钮，进入数据分析界面。
2. 根据需要，选择相应的数据分析方法，进行实验结果的分析。
3. 点击“保存”按钮，将实验结果保存到指定文件夹中。
7. 清洁和关闭荧光分光光度计实验结束后，需要进行荧光分光光度计的清洁和关闭。
以下是清洁和关闭荧光分光光度计的步骤： 1. 关闭荧光分光光度计软件，确保所有操作已保存。
荧光分光光度计的操作流程
荧光分光光度计操作流程荧光分光光度计是一种用于测量物质荧光发射和吸收的仪器。
它通过激发样品中的分子发生电子跃迁，然后测量这些分子返回基态时所发射的荧光强度，从而确定样品中特定物质的含量。
以下是荧光分光光度计的操作流程步骤：步骤一：准备工作1.打开荧光分光光度计电源，并确保仪器正常启动。
2.检查仪器是否连接到电脑或其他数据采集设备，以便记录和保存实验数据。
3.清洁测量室并检查样品池是否干净，如果有杂质应先清洗。
步骤二：校准仪器1.进行荧光分光光度计的校准，以确保仪器测量结果的准确性和可靠性。
2.根据仪器使用说明书选择适当的参考物质（例如标准溶液）进行校准。
3.将参考物质放入样品池中，并在仪器上设置相应参数（例如激发波长、发射波长和积分时间）。
4.进行校准测量，并记录校准曲线。
步骤三：设置实验参数1.根据实验需要，确定激发波长和发射波长，并在仪器上进行设置。
2.设置积分时间，以确保荧光信号能够充分积累并获得准确的测量结果。
步骤四：样品处理1.准备样品溶液，并将其转移到荧光透明的样品池中。
2.确保样品池中无气泡或杂质，以避免对测量结果产生干扰。
3.根据实验需要，可以对样品进行稀释或前处理，以提高测量灵敏度和准确性。
步骤五：测量荧光信号1.将样品池放入仪器的样品室中，并关闭仪器的盖子以避免外界干扰。
2.启动荧光分光光度计并开始测量。
3.仪器会自动激发样品并记录返回的荧光信号。
4.测量完成后，仪器会显示荧光强度值或荧光曲线图。
步骤六：数据分析和处理1.将测量得到的荧光强度值或荧光曲线导出到电脑或其他数据处理软件中。
2.进行数据分析，例如计算样品中目标物质的浓度或比较不同样品之间的荧光强度差异。
3.根据实验需要，绘制荧光谱图、浓度曲线等图表以可视化展示结果。
步骤七：清洁仪器1.测量完成后，及时清洁样品池和仪器表面，避免样品残留对下次实验产生干扰。
2.关闭荧光分光光度计电源，并进行必要的维护和保养。
以上就是荧光分光光度计的操作流程步骤。
仪器操作流程荧光分光光度计的操作指南
仪器操作流程荧光分光光度计的操作指南操作指南荧光分光光度计是一种用于测量样品的荧光光谱和荧光强度的仪器。
准确的操作流程能够确保测量结果的准确性和重现性。
本操作指南将介绍荧光分光光度计的基本操作流程，以帮助您正确地操作该仪器。
一、准备工作1. 检查仪器：确保仪器运行正常，灯泡、滤光片和样品池等部件是否齐全、完好，无破损或损坏。
2. 清理仪器：使用干净的软布轻轻擦拭仪器表面，以去除灰尘和污垢。
二、打开仪器1. 打开电源开关，待仪器运行稳定。
2. 检查仪器显示屏是否正常显示。
三、选择测试模式1. 根据实验需求，选择适当的测试模式：荧光光谱或荧光强度测量。
2. 使用仪器面板上的选择钮或相关命令设置仪器工作模式。
四、设置仪器参数1. 设置激发波长：根据需要，在仪器面板上或相关命令中设置激发波长。
2. 设置发射波长：根据需要，在仪器面板上或相关命令中设置发射波长。
3. 设置积分时间：根据样品的荧光强度，确定适当的积分时间。
4. 设置滤光片：根据实验需求，选择适当的滤光片。
5. 设置温度：如需要稳定的温度环境，设置合适的温度参数。
五、样品处理1. 准备样品：根据实验要求，制备需要测量的样品。
2. 使用无尘纸轻轻擦拭样品池，确保样品池表面干净无污垢。
3. 将样品注入样品池中，保持样品池盖密封。
六、开始测量1. 点击仪器面板上的开始测量按钮，或输入相关命令以开始测量。
2. 仪器将自动进行激发和发射光源的控制，同时记录测量数据。
七、数据处理1. 根据实验要求选择适当的数据处理方法。
2. 对荧光光谱测量结果进行波长校正、基线校正等处理操作。
3. 对荧光强度测量结果进行数据分析、结果计算等操作。
八、保存数据1. 将测得的数据保存至计算机或其他存储设备中。
2. 如需要，可以在仪器面板上导出数据以备将来使用。
九、关闭仪器1. 停止测量操作。
2. 关闭仪器电源开关。
操作荧光分光光度计需要仔细的步骤和耐心，确保操作准确无误，以获取可靠的测量结果。
F-27000荧光分光光度计使用操作步骤
F-2700荧光分光光度计操作规程1、开机：（1）开启计算机（2）开启仪器主机电源按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）同时，观察主机正面面板右侧的Xe LAMP 和RUN指示灯依次亮起来，都显示绿色为正常。
（3）双击桌面图标（FL Solutions 4.1 for F-7000），主机自行初始化，扫描界面自动进入（4）初始化结束后，须预热15-20分钟，出现操作主界面（界面右下角出现Ready）2、点击扫描界面右侧“Method”在“General”选项中的“Measurement”选择“wavelength scan”测量模式在“Instrument”选项中设置仪器参数和扫描参数选择扫描模式“Scan Mode”：Emission/Excitation（发射光谱/激发光谱）选择数据模式“Data Mode”：Fluorescence (荧光测量)设定波长扫描范围扫描荧光激发光谱(Excitation)：需设定激发光的起始/终止波长（EX Start/End WL）和荧光发射波长（EM WL）扫描荧光发射光谱(Emission)：需设定发射光的起始/终止波长（EM Start/End WL）和荧光激发波长（EX WL）其他选项可选择默认值（也可根据具体实验要求自行设定）参数设置好后，点击“确定”3、设置文件存储路径（此步也可不进行参数设置，可以在按5中方法进行保存）（1）点击扫描界面右侧“Sample”（2）样品名可自行命名（3）选中“Auto File”，可以自动保存原始文件和TXT格式文本文档数据（4）参数设置好后，点击“OK”4、扫描测试（1）打开盖子，放入待测样品后，盖上盖子（请勿用力）（2）点击扫描界面右侧“Measure”，窗口在线出现扫描谱图5、数据处理与保存（1）选中自动弹出的数据窗口（2）右键--“Trace”，进行读数并寻峰等操作（3）“File”--“Save as”对数据进行保存6、关机顺序：（1）关闭运行软件FL Solution 2.1 for F-7000（2）选中“Close the lamp，then close the monitor windows？”点击“Yes”窗口自动关闭同时，观察主机正面面板右侧的Xe LAMP指示灯暗下来，而RUN指示灯仍显示绿色（4）约十分钟后，关闭仪器主机电源，即按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）（目的是仅让风扇工作，使Xe灯室散热）（5）从样品池中取出所有比色皿，清洗干净以便下一次使用（6）关闭计算机F-2700荧光分光光度计日常维护1、定期打扫仪器室和仪器，保持仪器的清洁（每周打扫一次）2、仪器长时间不用，每隔一月要启动一次仪器3、请注意开关机的顺序步骤若步骤1-（2）若是未先开主机，则程序会抓取不到主机讯号4、使用前后需检查试样室以及仪器表面是否有遗漏溶液，如果有请立即擦拭干净5、比色皿的清洗（1）常规洗法用后立即清洗，依次用溶剂（自己测试样品时的溶剂）—自来水（所用溶剂不亲水的话此步可以省略）—去离子水（所用溶剂不亲水的话此步可以省略）—放在比色杯盒内，不用盖上让其自然挥干，洗好的比色皿应当是透明、没有水迹的。
日立F-7000荧光分光度计的操作规程
日立F-7000荧光分光度计的操作规程F-7000 偏振稳态荧光光谱仪使用说明一、荧光光谱仪的开启开启电脑，待Win XP操作界面显示后，接通光度计左侧电源开关（POWER），约5秒钟后主机右上方绿色氙灯指示灯点亮，表示氙灯已经启动工作，预热15分钟。
二、基本操作步骤1．双击桌面快捷方式FL Solutions，进入仪器操作主界面；2．待仪器初始化完成后，点击快捷栏Method按钮后，立即显示了分析方法(Analysis method)的五个重叠界面，分别为“常规”（General），“仪器条件”（Instrument），“模拟画面”（Monitor），“处理”（Processing），“报告”（Report）五个界面；3．点击常规(General)按钮，在测量方式(Measurement)中选择实验所需的扫描方式；4．点击实验条件(Instrument)按钮，依次在扫描模式(Scan mode)中选择扫描模式；在数据模式(Data mode)中选择采集类型；并在相应位置设置扫描波长，扫描波长范围、扫描速度、电压（一般为400V）、响应时间（一般为Auto）、狭缝等参数。
点击“OK”按钮，返回仪器操作主界面；5．点击Sample按钮，编辑样品名称(Sample name)，勾选自动保存(Auto File)和选择文件存放路径(File name) 。
点击OK按钮，确认上述设置，返回主界面；6．取四面透光的石英比色皿，手指捏住上端棱角处，先用蒸馏水润洗3次，再用样品液润洗3次，然后装入约1cm高度的样品溶液，用擦镜纸吸干比色皿外壁；7．打开试样室盖，将比色皿放入试样槽中。
若为固体样品时，则放到专用的样品架上测定。
盖上试样室盖。
三、数据的采集及处理1．点击Measure按钮，开始数据采集；2．待检测自动完成，屏幕出现扫描图谱后，点击工具栏中功能(Utility)下拉菜单的Lamp off，关闭氙灯；3．点击Report按钮，打印报告；4．关掉图谱窗口，系统自动保存图谱文件。
Hitachi荧光分光光度计F-7000说明书
Diffraction grating
■ Stigmatic concave diffraction grating, mechanically ruled, resulting in a very bright monochromator of F-number 2.2.
Ruling engine. A dividing engine for ruling diffraction gratings, invented in 1880s by Henry Augustus Rowland of Johns Hopkins University. Compared to a holographic grating, mechanically ruled gratings have the following advantages: (1) Mirror-finished groove surface results in high diffraction efficiency. (2) Groove spacing required for aberration correction can be adjusted,
● High-resolution multi-stage slit with a resolution as small as 1nm
● Shutter control for minimizing sample deterioration
4
Fluorescent intensity Ca2+ (nM)
The acquisition of these data was made possible by the 3-D measurement function and high-speed scanning capability of the F-7000.
日立F-7000荧光分光光度计的使用
日立F-7000焚光分光光度计的规格见表1。
项目 灵敏度 最小样品量
表 1 F-7000的规格*
噪 音 ：背 景 噪 音 ：峰
内容
S / N 15,000#1 以上 8 0 0 以 上 #2
液 体 仅 需 〇.6 m L (采 用 标 准 1 0 m m 比 色 池 样 品 池 ） 粉 末 样 品 1 0 p L (采 用 微 量 粉 末 夹 具 ）
光度类型 光源
单色光比例控制 150 W 氙 灯 ，自 动 除 臭 氧
波长测定范围 (激 发 波 长 和 发 射 波 长 ）
2 0 0 至 750 n m ，且 为 零 阶 光 (采 用 选 装 检 测 器 可 扩 展 至 900 nm )
波长扫描速度 工 作 温 度 /湿度 F L Solution 程 序
分 为 3 0 、6 0 、2 40、1200、2400、12000、30000、60000 n m / m i n 温 度 〜 35°C
湿 度 〜 80% 标准软件
* 1:激 发 波 长 为 350 n m ，狭 缝 10 n m ，响 应 4 s * 2:激 发 波 长 为 350 rnn，狭 缝 5 n m ，响 应 2 s
基金项 目 ：广 东 省 研 究 生 教 育 创 新 计 划 项 目 （2017JG X M -M S0 4 ) ; 广 东 省 功 能 分 子 工 程 重 点 实 验 室 资 助 课 题 （2017kf0 5 ) 。
2018年第 4 期
分析仪器 Analytical Instrumentation
光经单色器(滤光片）处理后特定波长的光照射到样 品池中，激发样品中的荧光物质而发出荧光，荧光经 过 滤 过 和 反 射 后 ，光 信 号 被 光 电 倍 增 管 放 大 后 ，然后 以图或数字的形式在控制软件上显示出来（图 2)。
操作指南荧光分光光度计使用方法说明书
操作指南荧光分光光度计使用方法说明书一、简介荧光分光光度计是一种用于测量荧光物质的仪器，可用于快速、准确地分析和检测样品中的荧光强度。
本说明书将详细介绍荧光分光光度计的使用方法，以及操作步骤和注意事项。
二、仪器准备1. 根据实验需要，选择适当的荧光分光光度计，并确保其完好无损。
2. 将荧光分光光度计放置在平稳的台面上，并接通电源。
3. 检查仪器的各个部件是否干净，如有污物或尘埃应及时清理。
三、样品制备1. 根据实验要求，选择合适的样品进行测量。
2. 准备样品溶液，确保其浓度适中，以免超出荧光分光光度计的检测范围。
3. 将样品置于透明的石英或玻璃样品池中，并确保其表面光滑，无气泡和杂质。
四、仪器设置1. 打开荧光分光光度计，并启动相关软件。
2. 选择适当的检测波长范围，并设置荧光激发波长和荧光发射波长。
3. 对于荧光强度的测量，可以选择适当的增益和积分时间。
4. 确保荧光分光光度计的设置与所需测量结果一致。
五、测量操作1. 将样品池放置在仪器的样品舱中，并确保其固定。
2. 启动测量程序，等待荧光分光光度计自动调零，并进行基线校准。
3. 点击“开始测量”按钮，荧光分光光度计将开始对样品进行荧光强度的测量。
4. 在测量过程中，避免移动或震动荧光分光光度计，以免影响测量结果的准确性。
5. 测量完成后，保存并导出测量结果，同时进行数据分析和处理。
六、注意事项1. 使用荧光分光光度计时，应注意仪器的安全操作规范，避免误操作和事故发生。
2. 在进行测量前，确保仪器已经预热至稳定状态，并检查仪器的各项参数是否正常。
3. 使用前应按照仪器说明书正确安装和更换相关部件，确保仪器正常运行。
4. 在放置样品池时，要注意不要碰撞到仪器或其他物体，以免破坏样品池和仪器。
5. 维护仪器的干净卫生，避免污物或尘埃对测量结果的影响，定期清洁仪器的各个部件。
6. 使用后进行仪器的关机和断电操作，并妥善保管仪器和相关配件，以免损坏或丢失。
荧光分光光度计原理和使用方法
荧光分光光度计原理和使用方法
荧光分光光度计是一种用于分析荧光的仪器，它可以测量物质吸收荧光时产生的发光强度。
其基本原理是将样品在特定波长下激发，使其发生荧光，然后通过荧光的发射波长来确定样品的化学成分和浓度。
荧光分光光度计的使用方法如下：
1. 准备样品：准备好需要分析的样品溶液，并将其置于荧光分光光度计的样品池中。
2. 设置激发波长：根据样品的特性和需要分析的化学物质，选择适当的激发波长。
3. 设置荧光检测波长：根据需要分析的物质和荧光特性，选择适当的荧光检测波长。
4. 调整荧光分光光度计参数：根据荧光信号强度和需要分析的物质，调整荧光分光光度计的增益、滤波器等参数。
5. 测量荧光信号：启动荧光分光光度计，测量样品的荧光信号强度。
6. 分析荧光信号：根据荧光信号的强度和波长，分析样品的化学成分和浓度。
荧光分光光度计应用广泛，可以用于分析生物分子、环境污染物、食品添加剂等多种化学物质。
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荧光分光光度计操作步骤
荧光分光光度计操作步骤荧光分光光度计是一种用于分析化学荧光光谱的仪器。
它能够测量物质在特定激发波长下的荧光发射光谱，并可对荧光强度进行定量测量。
其操作步骤如下：一、仪器检查步骤1. 仪器打开：先将仪器上的电源打开。
打开久了需要30秒的时间，在此期间，显示界面上应该看到一行高亮的文字，“Warming up”，说明仪器正在升温，不要操作仪器，待升温结束后进行操作。
步骤2. 清洁：待升温结束后，检查仪器是否有灰尘，如有，应用精细纤维布将荧光分光光度计的探头进行清理。
步骤3. 稳固水平：检查仪器是否水平，如不水平，请调整仪器位置，确保仪器稳固水平。
二、準备工作步骤1. 真空：将样品、荧光探针、所用电极等全部准备妥当，在开始操作前，应首先开启荧光分光光度计上的真空泵，让仪器完全真空，否则将导致读数不太正。
步骤2. 取得标准曲线：按照实验的要求取得标准曲线。
标准曲线可以测定出样品浓度与荧光强度之间的关系，用于后续分析测量。
三、参数设置步骤1. 激发波长与发射波长：根据荧光产生物的性质，分别设置荧光激发波长和测量荧光发射波长。
这两个参数是荧光分光光度计测量荧光的关键参数之一。
步骤2. 光强度：设置荧光激发光强度与荧光发射光强度。
荧光分光光度计使用激发光束与测量光束。
光强度参数设置直接影响荧光测量的灵敏度。
若荧光发射信号偏低，需增加激发光束和测量光束的光强度，并重新调节参数。
四、样品检测步骤1. 加样：准备好测量的样品，按照实验操作要求将样品加入荧光探针中。
同时将电极接入到样品，以确保仪器能够顺利读取信号。
步骤2. 调节波长：根据实验要求测量荧光信号，依照实验操作步骤逐渐调节荧光分光光度计上的荧光探头的激发波长和发射波长。
逐渐改变荧光激发波长和荧光发射波长，寻找到荧光信号最大的点，并记录下相应的值。
步骤3. 进行测量：找到荧光信号最大的波长后，可以将荧光光度计上的样品罩盖，开始正式测量，记录下样品的荧光信号强度。
F-7000&F-4600简要操作
一、开机：
1、先开电脑，再打开主机电源，Xe LAMP 绿色指示灯亮，然后 RUN 绿色指示灯，此时再 运行 FL Solution 软件； 2、关机，选退出 FL Solution 软件，并在退出时出现的对话框中选择“Close the lamp, then close the monitor window(熄灭灯，然后关闭窗口)”,此时 Xe 灯被熄灭，继续保持 主机电源开启约 10 分钟，待 Xe 灯冷却后再关闭主机电源。
（纵轴标尺上限值）---- 一般样品预扫描后仪器自动赋值。 （纵轴标尺上限值）----- 根据需要赋值。 一般选定，便于后期处理。
*Open data processing window after data acquisition（测量后打开数据处理窗口） *Print report after data acquisition （数据采集后自动打印）--- 一般不选定 *Overlay（重叠光谱图）-----可将光谱图重叠在监视画面上但重复扫描不可设定
查看报告
寻峰，通过修改阈值来定义峰； 对曲线进行平滑处理； 对曲线进行求导处理； 对两个数据进行加、减、乘、除处理； 计算峰面积及指定波长范围内的平均值； 取消以上对曲线的处理。
三、光度计法模式（定量）
1、 同样点击 “Method” 图标进入 Analysis Method 对话框， 在 General 项中的 Measurement 项中选择“Photometry”，其余各项可按需要填写；
3、在 Instrument 项：
*Data mode
(数据方式)------ Fluorescence Luminescence
（荧光采集） （发光采集）
日立f-7000型荧光分光光度计的调试及应用
ｍｅｄｉｃｉｎｅ， ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ ｓｃｉｅｎｃｅ， ｌｉｆｅ ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ ｓｏ ｏｎ． Ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｆｉｅｌｄｓ ｈａｖｅ ａ ｗｉｄｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ａｐｐｌｉ⁃
ａｒｅ ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ ｉｎ ｄｅｔａｉｌ ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｔｅｃｈｎｉｃａｌ ｓｕｐｐｏｒｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ｕｓｅｒｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ； ａｎａｌｙｓｉｓ ｍｅｔｈｏｄ； ｄｅｂｕｇｇｉｎｇ
日立 Ｆ － ７０００ 型荧光分光光度计是用来扫描荧
定量分析，又可以推断出在不同的环境下分子的构
谱扫描
［１］
。 目前，荧光分析法在生物化学、化学、药
品分析、食品检验、地理、冶金、医药、环境科学、生命
科学等领域都有着广泛的应用 ［２ －４ ］ 。
１ 仪器配置
仪器型号：Ｈｉｔａｃｈｉ Ｆ － ７０００ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ Ｓｐｅｃｔｒｏ⁃
ｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ。 配件：荧光比色皿 （ 石英材质， 有 Ｇ 的
一面朝某一固定方向） 、滤光片（ 激发波长 ＜滤光片
上数值＜发射波长） 。
２ 调试方法
插上电源后打开仪器开关（ ＰＯＷＥＲ → ＯＮ） ，风
扇开始正常运转，５ｓ 后氙灯自动点亮（ Ｘｅ ＬＡＭＰ ） ，
３ 分析方法
该仪器主 要 包 含 ５ 种 分 析 方 法， 即 波 长 扫 描
（ Ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｓｃａｎ） 、时间扫描（ Ｔｉｍｅ ｓｃａｎ） 、光度值法
荧光分光光度计测试步骤 光度计如何操作
荧光分光光度计测试步骤光度计如何操作如何正确使用荧光分光光度计来进行测试呢？以下为您详述：荧光分光光度计测试步骤（一）样品准备 1.液体样品依据用户供应的技术指标，检查浓度范围是否合适，假如如何正确使用荧光分光光度计来进行测试呢？以下为您详述：荧光分光光度计测试步骤（一）样品准备1.液体样品依据用户供应的技术指标，检查浓度范围是否合适，假如需要稀释，则要考虑所需溶剂类型和稀释倍数。
2.固体样品均匀粉末、片状或具有光滑平面的块状样品，均可直接测定。
（二）操作步骤1.开机：接通电源，打开主机开关，点燃（打开）光源后，依据说明书要求启动计算机。
2.检测前准备：参照仪器说明书，在20天内至少进行一次激发校准和发射校准，检测前仪器应预热。
3.工作条件的选择：环境温度应在20℃±5℃；相对湿度不大于70%；电源稳定，无磁场、电场干扰。
依据样品的特性及荧光强度，选择合适的仪器工作条件（如狭缝、PM增益、响应时间等）。
4.基本测定（1）荧光激发光谱测定设置仪器参数，扫描发射波长，找到maxλem，以此为发射波长，记录发射强度作为激发波长的函数，便得到激发光谱。
（2）荧光发射光谱测定设置仪器参数，扫描激发波长，找到maxλex，以此为激发波长，记录发射强度与发射波长间的函数关系，便得到荧光发射光谱。
（3）差谱测定设置仪器参数，选择合适的工作方式，测定背景溶液的发射光谱并储存起来，在确定的工作方式下，扫描样品溶液的发射波长，得到当时的光度值和储存的背景值之间的差示值，即差谱。
（4）峰面积积分选择适当的工作方式，对样品溶液进行积分操作，即得到峰面积积分。
（5）荧光强度选择合适的测量参数，设置λex、λem，接受定点读数或扫描方式，即可测得所选波优点的荧光强度。
（6）定量测定配制一系列已知浓度的标准溶液，在确定的测定条件下，设置λex、λem，依照由稀至浓的次序，测定标准溶液的荧光强度，绘制荧光强度—浓度的工作曲线，不更改仪器参数测定未知溶液的荧光强度，由工作曲线即可求出未知溶液的浓度。
F-7000荧光分光光度计操作规程
F-7000荧光分光光度计基本操作规程1、开机顺序（1）开启计算机。
（2）开启仪器主机电源。
按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）。
同时，观察主机正面面板右侧的Xe LAMP 和RUN指示灯依次亮起来，都显示绿色。
2、打开运行软件。
（1）双击桌面图标（FL Solution 2.1 for F-7000）。
主机自行初始化，扫描界面自动进入。
（2）初始化结束后，须预热15-20分钟，按界面提示选择操作方式。
3、关机顺序（逆开机顺序实施操作）：（1）关闭运行软件FL Solution 2.1 for F-7000。
（2）关闭仪器主机电源。
（3）关闭计算机。
注意事项（1）注意开机顺序。
步骤1-（2）若是未先开主机，则程序会抓取不到主机讯号。
（2）注意关机顺序。
（3）为延长仪器使用寿命，扫描速度、负高压、狭缝的设置一般不宜选在高档。
（4）关机后必须半小时（等氙灯温度降下）方可重新开机。
F-7000荧光分光光度计使用操作步骤1、开机：（1）开启计算机。
（2）开启仪器主机电源。
按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）。
同时，观察主机正面面板右侧的Xe LAMP 和RUN指示灯依次亮起来，都显示绿色。
2、计算机进入Windows XP视窗后，打开运行软件（如图1）。
（1）双击桌面图标（FL Solution 2.1 for F-7000）。
主机自行初始化，扫描界面自动进入。
（2）初始化结束后，须预热15-20分钟，按界面提示选择操作方式。
图1 FL Solution 2.1扫描界面3、测试模式的选择：波长扫描（wavelength scan）（1）点击扫描界面右侧“Method”。
（2）在“General”选项中的“Measurement”选择“wavelength scan”测量模式，如图2。
图2 Method--“General”选项的界面（3）在“Instrument”选项中设置仪器参数和扫描参数，如图3。
分光光度计的操作步骤
分光光度计的操作步骤1.打开仪器电源：先将分光光度计通电打开，确认仪器的电源开关必须处于“关”状态。
2.预热测量室：一般情况下，分光光度计需要在电源打开后预热。
在预热时，应关闭测量室顶部的光源，这样可以减少样品室内温度的波动。
预热时间通常为15-20分钟。
3.校准仪器：为了确保测量的准确性，需要对仪器进行校准。
校准可以通过使用标准样品，根据所测定的吸光度值和已知浓度之间的关系进行。
4.设置所需的波长：根据需要测量的物质的最大吸收峰位，选择相应的波长。
通常分光光度计上有一个波长选择器。
5.设置石英比色皿：将所需的样品装入石英比色皿中，并且保持表面平整和清洁。
确保液面平整，避免产生气泡对测量结果的影响。
6.定位样品架：将样品架放置在仪器上，确保石英比色皿正确定位。
7.调节参照光线：参照光线用于确认样品光线在入射光源前没有透射过程，通常采用空白试液（即没有任何吸光物质的溶液）进行校准。
8.测量吸光度：在完成所有前置操作后，即可开始测量。
按下“测量”按钮，然后采集所需的数据。
分光光度计会测量由样品吸收的特定波长上的光量，记录吸光度值。
9.记录和分析数据：根据测量所得的吸光度值，可以计算样品中组分的浓度。
在进行计算时，应考虑校准曲线以及所采集的空白试液的吸光度值。
10.清洁和关闭仪器：在完成测量后，应将测量用的石英比色皿彻底清洗，并将仪器关闭。
同时，注意清洁仪器的其他部分，以保持仪器的运行和使用寿命。
总之，分光光度计操作的关键步骤包括打开电源、预热测量室、校准仪器、设置波长、装载样品、调节参照光线、测量吸光度，记录和分析数据，清洁和关闭仪器。
通过正确的操作，我们可以使用分光光度计准确测量溶液中吸光物质的浓度。
荧光分光计的使用步骤流程
荧光分光计的使用步骤流程1. 准备工作- 清洁仪器：使用干净的纸巾和乙醇清洁样品槽，确保样品槽干净无污染。
- 打开仪器：按下电源开关，等待仪器启动并进行预热。
- 准备样品：根据实验需求准备好荧光样品，并将其放置在样品槽中。
2. 设置仪器参数- 波长选择：根据实验需求选择适当的激发波长和发射波长。
- 时间积分：设置合适的时间积分，以确保信号的稳定和准确性。
- 温度控制：如果实验需要进行温度控制，设置合适的温度。
3. 执行测量- 零点校正：将空样品（只包含溶剂）放入样品槽中，进行零点校正。
- 添加样品：将待测样品加入样品槽中，确保样品数量适量，以避免混杂和误差。
- 开始测量：点击仪器上的“开始”按钮，启动荧光分光计进行测量。
- 记录数据：记录测得的荧光强度数值，并记录下实验条件和样品信息。
4. 分析数据- 数据处理：根据实验需求，对测得的荧光强度数据进行处理（如计算平均值、标准差等）。
- 绘制图表：根据处理后的数据，使用数据分析软件或绘图工具，绘制荧光图谱和曲线。
- 解释结果：根据实验目的和已有知识，对结果进行解释和分析，并得出结论。
5. 清洁仪器- 关闭仪器：实验操作结束后，按下电源开关，关闭仪器。
- 清洁样品槽：使用纸巾和乙醇清洁样品槽，确保无残留污染。
- 整理仪器：将仪器周围的杂物清理干净，确保仪器周围整洁。
6. 结束步骤- 保存数据：将实验数据保存在合适的位置，以备后续分析或报告使用。
- 撤除样品：将样品从样品槽中取出，并妥善存放或处理。
- 关闭实验室设备：关闭相关实验室设备，确保安全。
- 整理工作台：清理工作台，归置实验用品，确保整洁。
以上就是荧光分光计的使用步骤流程，希望能对您有所帮助，祝实验顺利！。
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- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
• ！！Attention：Data Start/End需与 “Instrument”选项中设置一致，否则所得 到的数据点会逐渐减少，而无法作图。
（4）参数设置好后，点击“确定”。
4、设置文件存储路径
（1）点击扫描界面右侧“Sample”
图4。
，如
图4 Sample选项的界面
• （2）样品命名“Sample name”。
F-7000荧光分光光度计使用操作步骤
1、开机： （1）开启计算机。 （2）开启仪器主机电源。按下仪器主机 左侧面板下方的黑色按钮（POWER）。 同时，观察主机正面面板右侧的Xe LAMP 和RUN指示灯依次亮起来，都显示绿色。
2、计算机进入Windows XP视窗后，打开运 行软件（如图1）。 • （1）双击桌面图标 （FL Solution 2.1 for F-7000）。主机自行初 始化，扫描界面自动进入。 • （2）初始化结束后，须预热15-20分钟，按 界面提示选择操作方式。
(3)在“Instrument”选项中设置仪器参数和扫描参 数，如图3。
图3 Method--- “Instrument”选项设置界 面
主要参数选项包括：
– 选择扫描模式“Scan Mode”： Emission/Excitation/Synchronous（发射光谱、 激发光谱和同步荧光）。 – 选择数据模式“Data Mode”：
• （3）选中“□Auto File”， 打√。可以自动保存 原始文件和TXT格式文本文档数据。 • （4）参数设置好后，点击“OK”。
5、扫描测试
（1）打开盖子，放入待测样品后，盖上盖子。（请 勿用力）。
（2）点击扫描界面右侧“Measure” 捷键F4），窗口在线出现扫描谱图。
（或快
6、数据处理
图6 关闭运行软件
• （2）约十分钟后，关闭仪器主机电源，即按下仪 器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）。 （目的是仅让风扇工作，使Xe灯室散热）。
•
（3）关闭计算机。
寻找激发波长的方法
测试前，激发波长未知，可以按照以下步骤寻找激发波长。
• 1. 首先在发射光谱设置中输入一个激发光波长数 值，如300 nm，设置发射光谱范围，通常起始值 大于激发波长，小于激发波长的二倍，得到一个 发射光谱，得到一个或几个发射波长的峰值 • 2. 重新在激发光谱中设置，输入步骤一中得到的 发射波长，设置激发光谱范围，通常起始值大于 发射波长的一半，小于发射波长，得到激发波长 的峰值 • 3. 按照步骤二的过程，将几个发射波长都输入， 得到几个激发波长 • 4. 重复步骤一的过程，输入步骤二，三中得到的 激发波长，观察发射光谱的峰形，确定发射光谱。
• ！！Attention：激发光终止与起始波长差不 小于10nm。
– 选择扫描速度“Scan Speed”（通常选 240nm/min）。 – 选择激发/发射狭缝（EX/EM Slit）。 – 选择光电倍增管负高压“PMT Voltage”（一 般选700V）。 – 选择仪器响应时间“Response”（一般选 Auto）。 – 选择光闸控制“□Shutter Control”打√，以使 仪器在光谱扫描时自动开启，而其他时间关闭。 – 选择“Report”设定输出数据信息、仪器采集 数据的步长（通常选0.2nm）及输出数据的起 始和终止波长（Data Start/End）。
图1 FL Solution 2.1扫描界面
3、测试模式的选择：波长扫描（wavelength scan）
• (1) 点击扫描界面右侧“Method”
。
• (2) 在“General”选项中的“Measurement”选 择“wavelength scan”测量模式，如图2。
图2 Method--“General”选项的界面
Fluorescence/Phosphprescence/Luminescence(荧光测 量、磷光测量、化学发光)。
– 设定波长扫描范围。
• 扫描荧光激发光谱(Excitation)：需设定激发光的起始/ 终止波长（EX Start/End WL）和荧光发射波长（EM WL）; • 扫描荧光发射光谱(Emission)：需设定发射光的起始/ 终止波长（EM Start/End WL）和荧光激发波长（EX WL）; • 扫描同步荧光（Synchronous）：需设定激发光的起 始/终止波长（EX Start/End WL）窗口，如图5。 • （2）选择“Trace” 操作。 • （3）上传数据。 ，进行读数并寻峰等
图5 扫描谱图窗口
3、关机顺序（逆开机顺序实施操作）：
• （1）关闭运行软件FL Solution 2.1 for F-7000， 弹出窗口，如图6。 • （2）选中“○Close the lamp，then close the monitor windows？”，打“⊙”。 • （3）点击“Yes”。窗口自动关闭。同时，观察 主机正面面板右侧的Xe LAMP指示灯暗下来，而 RUN指示灯仍显示绿色。