临床生化检验基础知识培训教材
生化检验技术基础课件
生化检验技术基础课件一、教学内容本节课我们将学习《生化检验技术基础》教材的第一章“生化检验概述”和第二章“常用生化检验技术”，详细内容将包括生化检验的基本概念、分类、应用范围，以及常用的生化检验技术，如光谱分析、色谱分析、酶联免疫吸附试验等。
二、教学目标1. 理解生化检验的基本概念、分类及应用范围。
2. 掌握常用的生化检验技术及其操作原理。
3. 能够运用所学知识进行简单的生化检验操作。
三、教学难点与重点教学难点：光谱分析、色谱分析等常用生化检验技术的操作原理。
教学重点：生化检验的基本概念、分类，以及常用生化检验技术的应用。
四、教具与学具准备1. 教具：PPT课件、实验设备、实验试剂。
2. 学具：笔记本、教材、实验服、手套等。
五、教学过程1. 导入：通过展示一组临床生化检验的图片，引起学生对生化检验的兴趣。
2. 理论讲解：（1）生化检验概述：讲解生化检验的基本概念、分类、应用范围。
（2）常用生化检验技术：详细讲解光谱分析、色谱分析、酶联免疫吸附试验等技术的原理。
3. 实践操作：（1）分组进行光谱分析实验，观察不同物质的光谱特征。
（2）进行色谱分析实验，了解色谱分析的分离原理。
4. 例题讲解：讲解光谱分析和色谱分析在实际检验中的应用案例。
5. 随堂练习：让学生结合教材，完成课后习题。
六、板书设计1. 生化检验概述基本概念分类应用范围2. 常用生化检验技术光谱分析色谱分析酶联免疫吸附试验七、作业设计1. 作业题目：（1）简述生化检验的基本概念、分类及应用范围。
（2）论述光谱分析和色谱分析的原理及操作步骤。
（3）结合实际案例，说明生化检验在临床诊断中的应用。
2. 答案：八、课后反思及拓展延伸1. 生化检验技术的发展趋势。
2. 生化检验在疾病诊断和治疗中的应用实例。
3. 探索新的生化检验技术，如微流控芯片、生物质谱等。
重点和难点解析一、教学内容1. 生化检验的基本概念、分类及应用范围。
2. 常用生化检验技术的原理及操作步骤。
临床生物化学与检测培训课件
慢性胰腺炎：部分患者增高，阳性率为68%。
▪ 胰腺癌
肿瘤压迫、阻塞胰腺管，血清ET浓度升高；
升高程度与肿瘤的部位和病变范围有关。
临床生物化学与检测
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胰蛋白酶原-2（trypsinogen）
▪ 胰蛋白酶的前体。主要有try-1和try-2两种形式， 胰腺中的浓度很高。
▪ 分子量相对较小，易于从肾小管漏出。肾小管对 try-2重吸收率比try-1低，故尿中try-2浓度较 高。
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小结
▪ 胰腺的内分泌和外分泌功能 ▪ 胰腺炎的病理变化 ▪ 胰腺病变的生化检验
➢ 外分泌功能评价 ➢ 消化酶的检测：AMY、LPS、ET、Try ➢ 炎症指标的检测：CRP
临床生物化学与检测
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病例分析
▪ 患者谭××，男，20岁，学生。昨晚会餐 后上腹部不适，今晨开始发烧，左上腹部 持续性钻痛、阵发性加剧。既往健康，无 胃病及肝胆疾病史。
临床生物化学与检测
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病例分析
思考题： 1. 分析上述实验室检查结果； 2. 结合临床资料及实验室检查结果，该患初
步诊断是什么？根据是什么？
临床生物化学与检测
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THANKS !
临床生物化学与检测
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胰液(pancreatic juice )：无色无臭带粘性的碱性液体。 pH7.8～8.4．分泌量约1～2L／d。
成分：水、电解质和各种消化酶。 ▪ 电解质：碳酸氢根较高，可达140mmol／L。 ▪ 消化酶：由腺泡细胞分泌
➢ 胰淀粉酶：水解淀粉及糖原。 ➢ 蛋白水解酶：内肽酶（胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性
促进酶的分泌和胆囊收缩。
临床生物化学与检测
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Section ２ 胰腺炎病理变化
临床生化检验基础-北京办培训(一)
全球信赖的迈瑞
A World Together
总蛋白 白蛋白 TSH 转铁蛋白 AST 肌酸激酶 总胆红素 钠 铁 胆碱酯酶 碱性磷酸酶 直接胆红素 甘油三酯 LDH 无机磷 钾 GGT 三碘甲状腺素 乳酸
血 清 与 肝 素 血 浆 的 差 异 （ 二 ）
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检测试剂
常用生化项目按化学性质分类：
酶 类 底物代谢类 无机离子类 特种蛋白类
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检测试剂
常用生化项目按临床性质分类：
肝功能 肾功能 血糖 血脂 心肌酶谱
胰腺炎 无机离子 痛风 中毒
前列腺疾病 免疫性疾病 免疫炎症反应
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全球信赖的迈瑞
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检测试剂
NAD+－NADH(NADP+－NADPH )指示系统 ： ALT为例： R1： NADH 、乳酸脱氢酶（LDH） R2： L-丙氨酸 、α-酮戊二酸
ALT
L-丙氨酸 +α-酮戊二酸 → 丙酮酸 + L-谷氨酸
LDH
丙酮酸 + NADH + H+ → L-乳酸 + NAD+ + H2O
钾
无机磷 总蛋白 氨 乳酸
+6.2％
+10.7％ -5.2％ +38％ +22％
细胞的溶解、特别是血小板
来自细胞的释放 纤维蛋白原的作用 血小板溶解、谷胺酰胺水解 细胞释放
除了血小板溶解外，有时候血清高钾因溶血与极度的白 细胞溶解有关（白细胞计数＞50 G/L）。考虑到血小板 对全血的影响，可以推算：血小板计数达 100 G/L ，即 平均使血清与血浆的钾含量差0.11 mmol/L。
【2024版】生化检验基础知识-PPT课件
2. 血液标本的采集
生化检验用的血液标本可来自于静脉、 动脉或毛细血管。静脉血是最常用的标本， 静脉穿刺是最常用的采血方法。毛细血管采 血主要用于儿童，血气分析多使用动脉血。
（1） 采血前准备
为了使实验室结果有效地用于临床，实验室 应了解在收集标本前和收集标本时，所有会 影响实验室的非患者内在疾病因素。采取各 种措施，提出对患者采集标本前以及采集时 的要求，称之为患者准备。
（2） 注意事项 收集尿液标本的容器必须清洁干燥， 最
好是一次性使用的容器。若容器反复使用， 则须用洗涤液和自来水清洗， 再用蒸馏水冲 洗。尿标本要防止混入月经血、阴道分泌物、 精液、前列腺液、粪便等异物。尿标本收集 后应 12 时内送检，以免细菌作用和化学成分 分解。若不能及时检验（如收集 24 小时尿 液），将标本置冰箱保存，若加入防腐剂， 保存效果更佳。
对不是因操作不当引起的溶血、脂血或胆红 素血，应在检验报告上注明，供医生参考。
尿液、脑脊液和胸腹水等标本常需离心，取 上清液进行分析
Байду номын сангаас
分离后的标本若不能及时检测或需保留以备 复查时，一般应放于4℃冰箱，某些检测项 目的标本存放于-20℃冰箱更稳定。标本存 放时需加塞，以免水分挥发而使标本浓缩。
3.尿液标本的采集
尿液标本的采集 （1） 采集方法 尿液标本有随机新鲜尿、定时尿及 24 小时尿， 根据检查项目选择标本的采集类型。定量生化分析 多收集 24 小时尿液， 24 小时尿标本采集方法如 下：
嘱病人在早晨 8 时排尿弃去，以后每次排尿均 收集于一大容器内，至次日早晨 8 时最后一次尿亦 收集于容器内。测量并记录 24 小时尿液总量，然 后混匀尿液，取适量尿液送检。
通常用量为0．5 ～1．0ml 浓盐酸／100 ml 尿液，适用于24 小时尿儿茶酚胺、秀草 扁桃酸（V M A）、17 －羟皮质类固醇和 17 －酮类固醇等定量测定。
临床生化检验基本知识PPT课件
选择适当采血工具和血管
国际认可的 采血顺序
发生于检验科以外的检验 前期误差率 是20.2%
适当的标本运送方法 标本注册及记录
发生于检验科内的检验 前期误差率 是37.1%
1检编验辑前版p处pt理
把标本离心
把标本分发到 不同检验仪14器
早在1997年，意大利著名检验专家 已做了检验前期误差的统计
急诊检验的误差 ：种类和发生率
编辑版ppt
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（三）检验系统管理要素
检测系统：完成一个检验项目测定所涉及的仪器、 试剂、校准品、质控品、消耗品、操作 程序、质控程序等的组合称为检测系统。
管理要素内容包括 1.仪器的安装、签收与校准 2.外部供应品 试剂盒 标准物质 消耗品 检测系统 完整性 持续有效性 3.室内比对（检测系统比对）
峰值期 低值期 6～10 0～4 2～4 20～24 8～12 23～3 2～4 12～14 6～18 2～24 4～6 18～20 14～18 2～4 14～16 23～1
增加幅度（%） 150～200 30～50 10～20 60～80 8～15
30～40 50～70 5～10
编辑版ppt
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口服阿斯匹林后对 血小板聚集、GMP-140、TXB2结果影响
*
85% 80% 62% 99% 97% 89% 100% 99% 96%
Ⅻ 活性 85 84 85 82 85 87 83 86 85 86 85 87
*
98% 100% 96% 102% 97% 101%
101% 100% 102%
二、检验中质量管理要素
环境管理要素 检验流程管理要素 检测系统管理要素 室内质控和室间质评（内容见第
临床生物化学检验 基本知识
1 第2章 临床生物化学检验基本知识
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第二章 临床生物化学检验基本知识
(六)室内质量控制
---质控方法选择
Westgard 多规则质量控制法应是室内质量控制的
首选方法，采用了六个质控规则来解释质控结果，其
单个规则（假失控概率小于 0.01 ）和联合的规则的假 失控概率都很低，对随机误差和系统误差均为敏感，
极大地提高了误差检出率。
全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验 （第二版）
第二章 临床生化检验基本知识
全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验 （第二版）
第二章 临床生物化学检验基本知识
主要内容
1
临床生物化学检验项目与工作流程
2
临床生物化学检验质量控制要素
3
临床生物化学实验室信息系统的管理
全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验 （第二版）
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都应有接受和验收程序，并进行登记和记录。
全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验 （第二版）
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第二章 临床生物化学检验基本知识
(六)室内质量控制
建立制度和标准操作规程 质控品的选择 质控方法选择 质控图的选择 失控后的处理及原因分析 检测数据的确认
检验数据的审核
全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验 （第二版） 26
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第二章 临床生物化学检验基本知识
(六)室内质量控制
---质控品的选择
质量可靠。
尽可能有与人血清一致的基质，以减少基质效应。
添加物尽可能纯，反应速率尽量与人血清一致。 应有两个或三个不同浓度，有利于在不同水平监测方 价格低廉。
法的性能。
临床常用生化检查培训课件
mmol/L 2.6 – 6.5
甘油三脂(TG) H 3.03
mmol/L 0.34 – 1.70
载脂蛋白A(APOA) 1.49
g/L 1.00 – 1.60
载脂蛋白B(APOB) 1.36
g/L 0.60 – 1.10
高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C) 1.36 mmol/L 1.00 – 2.20
空腹血糖(GLU－K) 5.53 mmol/L 餐后1h血糖(GLU－1) 9.10 mmol/L 餐后2h血糖(GLU－2) 5.10 mmol/L
3.9 – 6.1 7.8 – 11.1 <7.8
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2.低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）测定
【原理】LDL 是胆固醇的主要携带者，LDL 向组织及细
胞内运送胆固醇，直接促进动脉粥样硬化症的形成。
【参考值】 沉淀法：2.073.12mmol/L 【临床意义】LDL-C 与冠心病发病呈正相关. LDL≥3.64 mmol/L 为明显升高,是动脉粥样硬化的潜 在危险因素.
【本参文档考所值提供】的按信息G仅Hb供处参占，考总请之联用Hb系，网不的站能百或作分本为科人比学删计除依据。算，:请G勿H模bA仿1:；8如有10不%当之 GHbA1c:36%
电泳法:5.67.5% 微柱法:4.16.8% 比色法:1.41±0.11mmol/L 【临床意义】 1.糖尿病时, GHbA1 及 GHbA1c 值较正常升高 23 倍,在控制 糖尿病后 GHbA1 的下降要比血糖和尿糖晚 34 周,故 GHb 的水平可作为糖尿病长期控制的监控指标.另外, HbA1c 增高时氧解离困难,易引起组织缺氧. 2.GHb 对区别糖尿病性高血糖和应激性高血糖有价值。
临床常用的生物化学检查医学知识讲座培训课件
① 参与糖、脂类及氨基酸的代谢； ② 有些磷酸混合物（如磷酸腺苷等）亦是转运能量的物质；
③ 血中磷酸盐又是调节酸碱平衡的重要缓冲体系之一； ④ 是骨盐的主要成分，参与骨骼及牙齿的组成。
参考值：
成人：0.97～1.61mmol/L； 儿童：1.29～1.94mmol/L
13
临床意义
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五、肝功能检查
血清氨基转移酶：简称转氨酶，是一组催化氨基酸
与α-酮酸之间的氨基转移反应的酶类。
丙氨酸氨基转移酶(ALT)， 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)。
ALT主要分布：肝脏，其次骨骼肌、肾脏、心肌等组织中； AST主要分布：心肌，其次肝脏、骨骼肌和肾脏等组织中。
临床常用的生物化学检查医学知识讲座
临床常用的生物化学检查医学知识讲座
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总胆固醇(total cholesterol, TCHO)
成人≤5.17mmol/L为合适水平， 5.20～5.66mmol/L为边缘水平，≥5.69mmol/L为升高。
甘油三脂（TG）
0.56～1.70mmol/L； ≤1.70mmol/L为合适水平，＞1.70mmol/L为升高。
血、溶血性贫血、铁粒幼细胞性贫血、珠蛋白生成 障碍性贫血、白血病等。
降低：
缺铁性贫血、慢性炎症或感染等。
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总铁结合力（TIBC）
血液中的铁能与转铁蛋白结合，进行铁的转运。 正常情况下血清铁仅能与1/3的转铁蛋白结合。另2/3的转铁
蛋白未与铁结合。 总铁结合力（total iron binding capacity, TIBC）：凡
9
参考值
总钙: 2.25～2.58mmol/L； 离子钙:1.10～1.34mmol/L。 总钙: 低于2.25mmol/L为低血钙症，
临床常用的生物化学检查培训课件
糖耐量曲线低平：指空腹血糖水平降低，服糖后血糖上升不明显， 2小时后仍处于低水平。常见于胰岛B细胞瘤、甲亢、腺垂体功能减 退症及肾上腺皮质功能减退症等
延迟型糖耐量曲线：空腹血糖正常，提早出现峰值，且大于 11.1mmol/L,2小时血糖低于空腹血糖。
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症 ❖ C-肽真实反映实际胰岛素水平 ❖ GHb能确切地反映测定前6-8周的平均血糖
水平
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血清脂质和脂蛋白检测
一、脂质及脂蛋白测定概述
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(一) 血浆脂质主要组成
降低。 3、胰岛B细胞瘤术后，C-肽仍升高，提示肿瘤未完全被切除或
有复发。 肝硬化 血清C-肽升高，C-肽/胰岛素比值减低 糖尿病 存在胰岛素抗体时，只有用C-肽检测来了解胰岛
B细胞功能。
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四.血清糖化血红蛋白测定 (glycosylated homoglobin, GHb)
二、脂质和脂蛋白的检测
(一) 总胆固醇(total cholesterol, TC) (二) 甘油三酯(triglyceride, TG) (三) 高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein
cholesterol, HDL-C) (四) 低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein
血液中的CHOL只有10-12%是直接从食物中摄取，其余 80%主要由肝合成。
第二章临床生物化学检验基本知识PPT课件
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第二章 生物化学检验基本知识
（二）组合检验 2.提高诊断效率
• CK+肌红蛋白+肌钙蛋白，三项目组合可对 心肌梗死快速诊断。
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第二章 生物化学检验基本知识
（二）组合检验
3.快速了解某器官的多种功能 • 血清蛋白质+胆红素+丙氨酸氨基转移酶+天
门冬氨酸氨基转移酶，组成肝功能系列， 可以了解患肝脏蛋白质合成功能、胆红素 排泄和转化功能。如患者同时伴有肝损伤， 还可了解肝细胞损伤程度。
（二）组合检验
随机组合
固定组合
根据检验项目 目录随机选择
如GLU+GHb
根据临床需要选 择固定系列： 如肝功能、心功 能、血脂系列、 肾功能系列、以 及整合所有的生 化全套系列等。
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第二章 生物化学检验基本知识
（二）组合检验 1.提高诊断疾病敏感度 • γ-谷氨酰基转移酶+α-L岩藻糖苷酶+AFP系
第二章 生物化学检验基本知识
第二章 临床生物化学检验基本知识
1
第二章 生物化学检验基本知识
概述
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第二章 生物化学检验基本知识
教学目标与要求
掌握：临床生物化学检验工作流程 熟悉：生化报告单申请和报告方式 了解：实验室信息系统的意义
3
临床生化检验基础知识培训(doc 33页)
临床生化检验基础知识培训(doc 33页)部门： xxx时间： xxx整理范文，仅供参考，可下载自行编辑临床生化检验基础知识培训一、生化基础知识二、生化仪器基础知识三、部分生化项目的临床意义本文档仅供生化应用工程师参考阅览，更多专业知识请查阅后附参考文献。
肖自强2014-3-19一、生化基础知识1.1生化诊断试剂盒为由一定的化学品或者酶类组成的多成分混合试剂（Reagent），最终以水溶液的方式与待测物发生一系列化学或者生化反应，通过生成物或反应物中某物质的吸光度变化，测量待检测物中某种特定物质的含量。
1.2生化诊断试剂用于检测样本，包括：人体血清（主要）、血浆及尿液中的各种酶类和代谢产物，用于预测，诊断以及治疗监测，协助临床医生诊治疾病提供数据参考。
1.3按功能分为：肝功、血脂、肾功、心肌、代谢、免疫&风湿、离子&其他。
1.4试剂性能评价指标：1 试剂外观2批间差3准确度4精密度5线性（灵敏度）6抗干扰能力（特异性）7稳定性1.5试剂检测原理（朗伯比尔定律）：A=Kbc式中，A 为吸光度;K 为吸收系数，是与入射辐射的波长及吸收物质的性质有关的常数 ;b为液层厚度，单位为cm;c 为吸收物质的浓度。
当浓度的单位为 mol/L 时，K 的单位为L/mol·cm，称为摩尔吸收系数，通常用ε表示。
摩尔吸收系数ε表示物质对某一波长的辐射的吸收特性。
ε愈大，表示物质对某波长辐射的吸收力愈强，因而分光光度法测定的灵敏度就愈高.1.6理论值与实测值偏差的解释：实测值偏离了朗伯比尔定律。
偏离 Lambert-Beer定律的因素：1复合光对Beer 定律的偏离：吸收定律要求入射光为单色光，而分光光度计单色光的纯度主要决定于色散元件及光路设计，即使高精度的仪器，也得不到纯单色光，而是波长宽度的复合光，其结果导致偏离Lambert Beer 定律。
2杂散光的影响：杂散光(stray light) 是进入检测器待测波长以外的光。
2024年生化检验讲课课件
2024年生化检验讲课课件一、教学内容本次教学基于《生物化学检验》教材第十二章“临床生化检验项目与应用”，内容涵盖血糖、蛋白质、脂质、酶和电解质等常规生化指标的检测原理、方法及其临床意义。
二、教学目标1. 掌握临床生化检验的基本原理、方法及其在疾病诊断中的应用。
2. 能够运用所学知识，正确解读临床生化检验报告。
3. 培养学生的实际操作能力，提高其分析和解决问题的能力。
三、教学难点与重点重点：临床生化检验原理、方法及其临床应用。
难点：检验方法的操作细节、影响因素及结果解读。
四、教具与学具准备1. 教具：PPT课件、临床生化检验设备模型、实际检验报告单。
2. 学具：笔记本电脑、检验设备操作手册、检验试剂。
五、教学过程1. 实践情景引入：通过展示一份实际检验报告单，引发学生对生化检验的兴趣。
2. 理论讲解：（1）介绍临床生化检验的基本原理、方法及分类。
（2）详细讲解血糖、蛋白质、脂质、酶和电解质等检验指标的临床意义。
3. 例题讲解：结合具体案例，讲解检验指标异常的原因及诊断价值。
4. 随堂练习：分组讨论，让学生分析检验报告单，识别异常指标。
5. 实践操作演示：现场演示检验设备的操作流程，讲解注意事项。
6. 学生操作练习：分组进行实践操作，教师巡回指导。
六、板书设计1. 临床生化检验原理、方法及分类2. 重点检验指标：血糖、蛋白质、脂质、酶、电解质3. 检验报告单解读步骤4. 检验设备操作流程及注意事项七、作业设计1. 作业题目：（1）简述临床生化检验的基本原理和方法。
（2）分析一份检验报告单，指出异常指标并给出可能的原因。
2. 答案：（1）临床生化检验基本原理：利用生化分析方法检测生物体内各种化学成分的含量。
（2）异常指标分析：根据报告单数据，识别异常指标，结合理论知识给出可能的原因。
八、课后反思及拓展延伸1. 教学反思：关注学生对检验原理、方法的理解，及时解答学生疑问。
2. 拓展延伸：（1）引入新型生化检验技术，如液相色谱质谱联用技术等。
临床生化检验基本知识(实用课件)
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二、报告单发放形式
（一） 急诊检验 从标本接收 到报告发出 不超过2小时
（二） 常规检验 根据项目要求 一般3-4小时 ，最长不超2
天
（三） 特殊检验 标本因素 技术因素 疾病因素 法律因素 时间不定
（四） 危急值报告 指检验人员发现 危及患者生命的 极限值时要立即 电话报告
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• 2.年龄:人在不同的年龄阶段，其生理指标是不同的。新生儿红细胞 计数和血红蛋白含量比成人高很多，乳酸脱氢酶(LD)、苹果酸脱氢 酶(MD)、异柠檬酸脱氢酶(ICD)高于成人2～3倍。血液中碱性磷酸 酶含量提示成骨细胞活性，在青春期会达到一个高峰，活性从500 U/L左右升到750 U/L左右，18岁以后逐渐降到200 U/L以下。
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ⅴ 避免充血和血液浓缩 ⅵ 若病人正在进行静脉输液，不宜在输液同侧手臂采血；若女 性病人做了乳腺切除术，应在手术对侧手臂采血 ⅶ 采血的体位 ⅷ 采血时只能向外抽，决不能向静脉内推，以免注人空气，形 成气栓而造成严重后果。 ⅸ 晕血处理
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（2）动脉采血法
①部 位：
肱动脉、股动脉、桡动脉以及其它任何部位的动脉 都可以作为采血点，但多选择肱动脉和桡动脉
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5、饮食和药物的影响： （1）禁食各种烟、酒、饮料， （2）药物影响被测物浓度、影响检验方法，新药不断应用， 药物的影响不确定因素较多。除了急诊或其它特殊原因外， 一般主张空腹12小时以后取血。
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（三）标 本 采 集
渗出液、漏出液
标本：血液、尿液、脑脊液、胸水、腹水、浆膜腔积液等
腰椎、小脑延髓池、婴 儿时期的前囟门作侧脑 室穿刺
临床生化检验基本知识
第二章--生物化学检验基本知识PPT课件
2024/10/16
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二、生物化学检验报告单的发放
即使是临床医护人员能够通过“医院信息系统（HIS）”在医生 工作站直接读取检验结果的临床科室或医疗单位，实验室也 应该用电话向临床报告，这是考虑到临床一线医护人员可能 会忙于抢救而不能及时观察到检测结果需要提醒的缘故。
“危急值”报告不同于“急诊检验”报告，是两个完全不同
4．技术要求高的检测项目 检测系统本身的不稳定因素，影响检验结果可靠性的检
验项目，或者检测系统本身存在着影响检验质量的诸多人
为环节，对检验人员的理论和技能要求较高的检验项目。
（三）急诊生化检验
急诊检验是实验室为了配合临床对危、急、重症患者的诊 断和抢救而实施的一种特需检验。如血气分析、电解质、 淀粉酶、心肌标志物、血糖等。
2．标本难以获得的检测项目
某些检验项目的标本获得比较困难，或者因为标本数 量极少，对标本的处理和保存都不能按规定要求和程序 进行，甚至不能进行复检的检验项目。
2024/10/16
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一、生物化学检验的项目
3．发病率低或成本高的检测项目 由于某疾病的发病率很低造成标本数量过少或检验成 本过高的检验项目。
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第二节 生物化学检验的标本
一、标本的采集
生物化学检验最常用的标本是血液，其次是尿液，此外还有 脑脊液、浆膜腔积液、羊水等各种体液。 正确采集标本是获得准确、可靠检验结果的关键。
标本采集时应尽可能避免一切干扰因素，选择最佳的采集时 间，减少饮食和药物影响，减少昼夜节律带来的干扰。对于 有创伤性的操作，操作前应先与患者沟通建立互信，消除患 者的恐惧和紧张情绪。
剂及抗凝原理；尿液标本的采集方法；标本收检、分离、储存和转运；生物 化学检验项目类型；危急值、危急值报告的概念；检验报告单的发放方式。
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临床生化检验基础知识培训一、生化基础知识二、生化仪器基础知识三、部分生化项目的临床意义本文档仅供生化应用工程师参考阅览，更多专业知识请查阅后附参考文献。
肖自强2014-3-19一、生化基础知识1.1生化诊断试剂盒为由一定的化学品或者酶类组成的多成分混合试剂（Reagent），最终以水溶液的方式与待测物发生一系列化学或者生化反应，通过生成物或反应物中某物质的吸光度变化，测量待检测物中某种特定物质的含量。
1.2生化诊断试剂用于检测样本，包括：人体血清（主要）、血浆及尿液中的各种酶类和代谢产物，用于预测，诊断以及治疗监测，协助临床医生诊治疾病提供数据参考。
1.3按功能分为：肝功、血脂、肾功、心肌、代谢、免疫&风湿、离子&其他。
1.4试剂性能评价指标：1 试剂外观2批间差3准确度4精密度5线性（灵敏度）6抗干扰能力（特异性）7稳定性1.5试剂检测原理（朗伯比尔定律）：A=Kbc式中，A 为吸光度;K 为吸收系数，是与入射辐射的波长及吸收物质的性质有关的常数;b为液层厚度，单位为cm;c 为吸收物质的浓度。
当浓度的单位为mol/L 时，K 的单位为L/mol·cm，称为摩尔吸收系数，通常用ε表示。
摩尔吸收系数ε表示物质对某一波长的辐射的吸收特性。
ε愈大，表示物质对某波长辐射的吸收力愈强，因而分光光度法测定的灵敏度就愈高.1.6理论值与实测值偏差的解释：实测值偏离了朗伯比尔定律。
偏离Lambert-Beer定律的因素：1复合光对Beer 定律的偏离：吸收定律要求入射光为单色光，而分光光度计单色光的纯度主要决定于色散元件及光路设计，即使高精度的仪器，也得不到纯单色光，而是波长宽度的复合光，其结果导致偏离Lambert Beer 定律。
2杂散光的影响：杂散光(stray light) 是进入检测器待测波长以外的光。
主要来源于仪器色散元件表面的散射、单色器内壁尘埃等。
3狭缝宽度的影响：单色器设有进、出口狭缝，狭缝愈窄，单色光愈纯，吸光度增加，但辐射能减小，对弱吸收带的测量有一定影响。
定性分析时，为提高分辨能力常采用较小的狭缝，而定量分析时，在灵敏度允许的情况下，宜采用较大狭缝。
当出、入射狭缝宽度相等时，狭缝宽度引起的误差最小。
4非吸收作用引起的误差：1.散射效应：光吸收定律只适用于均匀的吸收体系，如待测溶液是混浊的，当光通过时，将产生散射效应。
其结果使光通过吸收物质的光程不固定，散射光的一部分和透射光一起进入检测器，导致偏离Beer 定律。
因此，免疫比浊法常用多点校准来做标准曲线。
2. 荧光效应：分子吸收辐射能后产生的激发态分子以重新发射辐射的方式回到基态而发射荧光。
由于多数显色体系荧光效应很小，而且荧光发射是各向同性，只有一部分沿透射光方向进入检测器，使测量吸光度偏低。
一般情况下，荧光效应对分光光度法产生的影响较小。
目前，多数光度计设有两个样品室，对有荧光试样可置于离检测器较远的样品室，或在光路中插入适当的滤光片以消除荧光效应。
5测定过程中产生的误差：化学反应引起的误差，人为的误差等，在此不作详细解释。
1.7生化测定方法：临床化学自动分析仪所涉及的测定方法包括终点测定法、连续监测法、固定时间法等。
1.8.1生化分析基本术语概述：1双波长：由主波长和副波长构成的两个波长，测定样品采用双波长可以消除对实验的影响。
主波长是指测定某物质时，生成的产物颜色对光吸收的特有波长。
副波长是指测定某物质时，为消除其他干扰物质在主波长造成测定干扰所设定的波长。
2反应杯空白：在特定波长下，光通过以蒸馏水或空气为反应体系所测得的吸光度值。
3试剂空白：在各特定波长下，光通过以蒸馏水或生理盐水为样品和相应测定项目试剂构成的反应体系所测得的吸光度值。
4样品空白：在各特定波长下，光通过以生物样品和相应测定项目不含有引起反应的一种或多种成分的试剂构成的反应体系所测得的吸光度值;或由生物样品和相应测定项目试剂构成的反应体系产生反应最初时间所测得的吸光度值。
5终点法：这是最常用的分析法。
因为该法常有标准液，因此又称比例终点法，是经过一定反应时间后，当反应达到平衡(终点)时做到的一点分析法。
一般是在一定温度下，试剂与样品经过一定反应时间，被送人比色系统，然后检测吸光度的变化，由微机系统处理计算和打印显示出结果。
其中又分一点终点和两点终点法。
6续监测法：也叫速率法，此法通过测定酶所催化的反应速度，间接计算出酶的含量，称酶活性测定法。
在酶促反应过程中，不是任何时期的反应速率都和酶浓度成正比。
当酶促反应刚一开始，底物处于过量状态，酶与底物开始结合，生成复合物(ES) ，底物浓度开始下降，此时产物尚未生成。
当复合物(ES)分解，生成产物(P) ，酶促反应速度急骤上升，经过很短的作用时间后，产物的生成量或底物的减少量与反应时间成线性关系，反应速度保持恒定不变，这一时期称为零级反应期。
随酶促反应继续进行，底物不断消耗，酶促反应条件逐渐变化，酶促反应速度逐渐减慢，产物生成或底物减少量的变化曲线遂趋平坦，这一时期称为一级反应期。
此时的反应速率常常不能准确反应酶的含量。
因此其测光点一般要求取在反应达到平衡前。
7两点速率法：两点速率法也叫固定时间法，对测定及标准采用两个时间点测定。
采用此方法的如肌酐（苦味酸法），目前多数自动分析仪还是用Jaffe 氏反应测肌酐，即肌酐能同碱性苦味酸盐生成红橙色化合物，这个反应特异性不高，因为维生素C 、丙酣酸、丙酣、葡萄糖、乙酷醋酸、果糖、氨基马尿酸、蛋白质及其他反应产物亦能与碱性苦位酸盐生成红色化合物，血清中的这些假肌酐约含25%。
但真性肌酐与苦味酸的反应为快反应，假肌酐为慢反应，因此测试时测试时间一般在样品与碱性苦味酸试剂混合后25 秒和1 分25 秒在500nm 处测吸光度变化。
两时间点的吸光度变化之差，则为特异反应肌酐浓度。
8普通免疫比浊与胶乳增强免疫比浊法：普通免疫比浊法是抗原与相应的抗体直接结合形成的免疫复合物，在反应液中具有一定的浊度，可由一般分光光度法进行透射比浊（transmission turbidimetry）测定，可用于某些蛋白质和药物浓度等的测定。
该法须做多点校准，再经非线性回归，求出抗原或抗体的含量。
胶乳增强免疫比浊法是将抗体吸附在大小适中、均匀一致的胶乳颗粒上，制成致敏的胶乳颗粒，当遇到相应抗原时，发生交联反应，形成抗原抗体复合物，胶乳颗粒发生凝集。
单个胶乳颗粒在入射光波长之内并不阻碍光线透过，两个及其两个以上胶乳颗粒凝聚时则使透过的光减少，其减少的程度与胶乳颗粒凝聚的程度呈正比，即与待测抗原量呈正比，由此可检测样本中的特定抗原含量。
该法比普通免疫比浊敏感度高，试剂稳定，个体免疫复合物对结果影响也小，因此结果稳定、可靠，特异性好，精确度高。
9参考物的量值溯源性:通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链,使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准,通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性。
10检测限：是指检测系统可检测出的最低分析物浓度。
又称分析灵敏度。
灵敏度与线性范围：灵敏度与线性范围有着紧密联系，这也是跟生化仪的性能有关。
灵敏度与线性范围的取舍就要根据其医学决定水平而定。
一般仪器能测的光密度值最大在35000。
假设谋项目的医学决定水平在0~100，如果1个单位浓度变化能引起仪器吸光度响应量为1000，那么它能测的浓度范围为0~35，可以看出，虽然其灵敏度很高，但在其检测范围没有达到其医学决定水平，即线性范围太窄。
相反，如果1个单位浓度变化能引起仪器吸光度响应量为100，那么它能测的浓度范围为0~350，这个线性范围是可以的。
因此，灵敏度与线性的评价，要根据其医学决定水平而定。
1.9常用校准方法：终点法或两点速率法，必须通过使用标准液，建立一条标准曲线；速率法，采用标准液校正可消除系统误差，也可直接输入Factor值。
校准类型：空白定标：以水做标准液，消除试剂本身对测试的干扰；（酶类）两点定标：以水作为零点，标准液作为另一点，建立标准曲线；（Y=AX+B）多点定标：两个以上的标准液建立一条标准曲线；（LOGIT-LOG ）1.10参考区间与医学决定水平：临床实验室检验结果对被检验者低正常还是异常，有何临床意义，如何用检验结果协助临床医生诊断和治疗，这就涉及到参考区间和医学决定水平了。
参考区间大多是采用正态分布的原理制定，以95%的分布区间（x±2s）即为参考区间的上、下限，少数用百分位数来制定参考区间。
不论采用什么方法，总有少数正常人的测定值落在异常范围内。
因此，假性结果是避免不了的。
当结果接近上限或下限时，不要轻易下正常或有病的结论，要根据被测者的其他表征综合判断或过一段时间复查后，再做分析。
医学决定水平是由Barnett于1968年首先提出的。
是指临床上必须采取措施时的检测水平。
决定性水平是一个阀值，高于该值或低于该值，应决定对患者采取适当的治疗措施。
医学决定水平可在疾病诊断中起着排除或确认的作用，对某些疾病进行分级或分类，或愈后做出估计，来提醒医生在临床上做出相应的处理方式。
医学决定水平与参考区间的区别在于，它不仅对健康人的数值进行研究，以决定健康人的范围，同时还对有关疾病的不同病情的数据进行研究，以定出不同的决定性限值，以引导医生采取不同的临床措施。
它的应用可以克服只使用参考范围的缺点，使一个检验结果对病人能起到提供诊断，处理依据的作用。
1.11酶法检测基本知识：酶是由活细胞产生并能在体内起催化作用的，一类特殊蛋白质。
体内几乎所有的代谢反应都是在不同的酶催化下进行的。
酶的催化效率高，对底物有严格的选择性，酶非常不稳定，酶浓度的变化是许多疾病的敏感指针，这是建立和发展诊断酶学的依据。
用酶作试剂(工具酶)测定非酶物质具有效率高、特异及易于实现自动分析的特点，是目前临床生化检验的主流方法。
1.11.1酶促反应速度的因素：包括:酶的浓度、底物的浓度、激活剂与抑制剂、pH和温度等。
在研究某一因素对酶促反应速度的影响时，反应系统中其他因素不变。
酶促反应中所指速度是初速度，因为这时的反应速度与酶浓度成正比，可以避免产物及其他因素对反应速度的影响。
在建立定量测定酶活性的方法时，需要研究酶促反应的速度及影响此速度的因素，通常称之为反应动力学。
1.11.2酶活力测定酶的含量很低，除免疫学方法外，不能直接测定其含量，只能测其催化反应过程中一定时间内物质变化的量，即酶促反应速率，或称酶的活力。
要保证只有待测酶的量影响反应速率，其他各种影响反应速率的因素都在严格控制之下，并保持各测定间的一致性。
(一)酶促反应的过程通过测定底物浓度的下降，或测定产物浓度的上升，可以追踪酶反应过程中底物转变为产物的过程。
通常多测定产物的形成，因为测定产物从零或者从低浓度的增加，比测定高浓度底物的下降更可靠。