肌酐-(肌氨酸氧化酶法)试剂盒-新

肌酐测定标准操作程序

1. 摘要肌酐试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或尿液中肌酐的含量。

2. 适用范围

程序适用于AU5811 自动生化分析仪检测血清尿液中肌酐的浓度。

3. 职责

使用AU5811 自动生化分析仪进行测定CREA 浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4. 检测方法

上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酐（CREA试剂盒采用的是肌氨酸氧化酶法。

5. 原理

上海科华生物工程股份有限公司的肌酐（肌氨酸氧化酶法）试剂盒的测定原理如下：

肌酐H 2O肌酐氨基水解酶肌酸

肌酸H 2O肌酸脒基水解酶肌氨酸尿素

肌氨酸H2O O2肌氨酸氧化酶甘氨酸HCHO H 2O2

2出02 4氨基安替比林N-乙基-N 磺丙基-间甲苯胺过氧化物酶醌亚胺4出0

肌酐在肌酐氨基水解酶的作用下水解成肌酸，肌酸在肌酸脒基水解酶的作用下生成肌氨酸和尿素，其中产物肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成甘氨酸、过氧化氢和甲醛。最后过氧化氢在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和N-乙基-N-磺丙基-间甲苯胺反应生成红色化合物醌亚胺.

由于醌亚胺在波长546nm处有最大吸收峰，所以在一定底物浓度范围内,546nm处吸光度的变化值与样本中肌酐的含量成正比.

6. 仪器

AU5811 自动生化分析仪

7. 试剂

7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供

7.2 试剂瓶内主要成分：肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、

ESPMT、肌酐胺基水解酶、4-氨基安替比林

7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8 C，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为

12 个月。试剂不可冰冻。

7.4 试剂准备：试剂为即用式。

8. 标准品和质量控制

8.1 校准程序：使用科华公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。按照公司标准品使用要

求，并以9g/L 氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通

过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2 质控品：罗氏公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。每日在测定前做一次质控加试剂后做一次质控。该质控品为干粉包装，在2-8C冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml 去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30 分钟）后使用。

8.3 质控数据管理：按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。

8.4质控判断规则：按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》

8.5 室间质评：分别参加河北省室间质评，对回报的室间质评结果按《室间质量评价程序》进行处理。

9. 标本

9.1样本为新鲜无溶血现象的血清或24h尿液。24h尿液样本应按1：20用生理盐水进行机

外稀释；也可在仪器参数中选择尿液样本参数，让仪器自动稀释。样本于4C保存，可稳定7 天。

9.2 标本拒收：由实验室人员核收送来标本，如有溶血、已被污染、标识不清或与申请单不

符状况，一律要求重新留取标本。

9.3 标本处理：收集编号后离心获取血清/血浆以备检测使用。

10. 测定程序

10.1 分析参数：详见参数表。

10.2操作步骤：签收样本f离心f上机检测f审核报告f签发报告f标本保存。

10.3 获取结果：在AU5811 仪器上或AU5811 传送的中文系统电脑上查找相应结果。

10.4 结果报告：对检验后的结果进行审核，系统分析，判断结果的可报告性。可报告的结果

直接发报告，对不可报告结果进行复检后发报告。

11. 计算

标准品校准项目后，测定室内质控，质控结果符合质控要求后方可测定样本。无需手工计算，每个标本的结果自动打印

12. 废液处理

参阅检验科《安全手册》废液处理标准规程处理。

13. 操作性能

13.1可报告范围：本法对CREA检测范围为0~8840卩mol/L。

13.2特异性/干扰：当样品中VC< 1g /L,胆红素浓度w 684mg/L,血红蛋白浓度w 5.00g/L,

甘油三酯w 20mmol时对测定结果的影响可忽略。

13.3灵敏度：测定本试剂盒内所附标准液(265卩mol/l),其吸光度应在0.050〜0.20A之间。

13.4精密度：批内：CV w 6%。批间相对极差：w 6%。

14. 注意事项

14.1 试剂盒仅用于体外诊断。测定结果仅作为相关疾病的临床诊断依据。

14.2 血清等标本有些可能含有感染性成份,因此应以具有感染危险性而充分注意操作。

14.3 试剂盒中含有防腐剂叠氮钠,切勿吞咽,避免与皮肤及粘膜接触。如不慎接触, 应用大量

清水冲洗。如误服,应立即上医院诊治。

15. 参考值

血清和血浆：男：70〜115卩mol/L (0.8〜1.3mg/dl);

女: 44〜8011 mol/L (0.5〜0.9mg/dl);

24h 尿液：男：7000〜180001 mol/24h;

女：5300〜160001 mol/24h;

各实验室应建立自己的参考值范围。

16. 临床意义

本试剂盒适用于体外临床检验,用于测定人血清或尿液中肌酐的含量。

人体中的肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收,通过肾小管排泄,在肾脏疾病初期, 血清肌酐值通常不升高,直至肾脏实质性损害,血清肌酐值才增高。所以,血肌酐测定对诊断晚期肾脏病临床意义较大。

血清肌酐水平随人的年龄,体重和性别而变化。有时它在肌肉块少,恶病质的病人,截肢者和老年人中的水平较低。血清肌酐水平正常并不排除肾功能受损。

17. 支持性文件

17.1 AU5811 自动生化分析仪使用说明书。

17.2 AU5811 自动生化分析仪分析参数。

17.3 上海科华生物工程股份有限公司提供的试剂说明书。

18. 参考文献