胎牛血清小牛血清新生牛血清之间的区别保存及用法
动物细胞培养的一些问题
细胞培养的一些问题1. 液体培养基的保存是冷藏好？还是冷冻好？要冷藏！！因为液体培养基经冷冻后再经溶化时，其溶液的pH值会发生改变，溶液往往变碱，某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。
故液体培养基一定要存放在冷藏箱中，通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月~ 一年。
2. 液体培养基中谷氨酰胺的作用，及使用方法。
几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求，细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。
所以，各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。
谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置-20 ◦C冰冻保存，用前加入培养基中。
加有谷氨酰胺的液体培养基4 ◦C冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。
基础医学细胞中心在其服务项目中配制分装了高浓度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支）。
每支1ml的谷氨酰胺加到99ml完全培养基中，其终浓度为2mM/ml培养基。
包装为粉红色，-24◦C保存。
3.培养用液pH对细胞生长的影响由于，大多数细胞适宜pH为7.2~7.4，偏离此范围对细胞将产生有害的影响。
各种细胞对pH的要求也不完全相同，原代培养细胞一般对pH变动耐受差，无限细胞系耐受力强。
但总体来说，细胞耐酸性比耐碱性强一些，偏酸环境中更利于细胞生长。
因此，我们在配制培养用液时，可把液体的pH稍微调得偏酸一些。
液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时，溶液的pH还会向上浮动0.2左右。
4.常用培养基及培养用液的渗透压范围培养基名称渗透压范围（mOSM）DMEM（高糖）315 ~ 350DMEM（低糖）270 ~ 330RPMI-1640 260 ~ 290MEM-EBSS 280 ~ 310MEM-NEAA 280 ~ 310McCoy5a 280 ~ 310MEM-a 280 ~ 310M—199 275 ~ 305IMDM 270 ~ 300DMEM/F-12 280 ~ 310F—10 270 ~ 300F—12 275 ~ 300培养基名称渗透压范围（mOSM）L—15 280 ~ 320D-Hanks 280 ~ 300Hanks 280 ~ 300PBS 275 ~ 3005.细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗？不见得！因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。
细胞培养知识
细胞培养基础知识细胞培养基本条件1、合适的细胞培养基合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一，培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质，而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。
2、优质血清目前，大多数合成培养基都需要添加血清。
血清是细胞培养液中最重要的成分之一，含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分。
3、无菌无毒细胞培养环境无菌无毒的操作环境和培养环境是保证细胞在体外培养成功的首要条件。
在体外培养的细胞由于缺乏对微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒物质污染，或者自身代谢物质积累，可导致细胞中毒死亡。
因此，在体外培养细胞时，必须保持细胞生存环境无菌无毒，及时清除细胞代谢产物。
4、恒定的细胞生长温度维持培养细胞旺盛生长，必须有恒定适宜的温度。
5、合适的气体环境气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一，所需气体主要有氧气和二氧化碳。
细胞培养基种类与基本成分细胞培养基的种类很多，按其来源分为合成培养基和天然培养基（目前使用的培养基绝大部分是合成培养基），按其物质状态分为干粉培养基和液体培养基两类。
干粉培养基需由实验者自己配制并灭菌，液体培养基由专业商家提供，用户可直接使用，非常方便。
1、合成培养基的主要成分有：氨基酸、碳水化合物、无机盐、维生素及其它辅助物质：氨基酸氨基酸是组成蛋白质的基本单位。
不同种类的细胞对氨基酸的要求各异，但有几种氨基酸细胞自身不能合成，必须依靠培养液提供，这几种氨基酸称为必需氨基酸。
其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。
因此，各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。
但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培养液内。
已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2 周以上时，还应重新加入原来量的谷氨酰胺。
碳水化合物碳水化合物是细胞生长主要能量来源，其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。
主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸等。
牛血清使用说明
牛血清使用说明本使用说明适用于下列产品系列：胎牛血清(FBS) 、新生牛血清和小牛血清产品介绍动物细胞离体培养需要营养丰富的培养基。
动物血清通常添加在合成培养基里用于促进动物细胞的正常生长。
血清是一种天然的促进细胞生长营养物质，它含有极为丰富、并且生物利用率很高的蛋白质、氨基酸、脂肪、生长引子、维生素、激素、蛋白酶抑制因子以及各种无机微量元素。
这些成分可有效地促进细胞的生长。
目前普遍使用的血清种类有胎牛血清(FBS)、新生牛血清、马血清、猪血清和人血清。
根据血清应用范围和采集后加工方法的不同，每类动物血清又可制备成不同的血清产品类型，用于各种动物和人细胞的培养。
然而，胎牛血清(FBS)被广泛认为是最适于细胞培养的动物血清，补充所必需的营养成分。
主要是因为FBS富含平衡的天然生长因子和较低γ球蛋白。
除此之外，FBS还可以防止细胞由于pH变化、重金属离子、内毒素和蛋白酶而引起对细胞的损害。
贮存方法麦迪捷生产的血清是分装在无菌的塑料瓶内，之后冰冻保存。
在运输过程中仍保持在冰冻状态。
如将血清存放在-10到-40o C度的在冰柜里，可连续保存数年，对血清的植板率没有明显的影响。
血清不应存放在无霜冰箱里。
反复冰冻融化过程会使血清中的某些物质沉淀，降低血清的使用效果。
不适当的贮存将迅速降低血清制品的有效成分和稳定性。
解冻方法血清从冰箱取出后应慢慢地解冻。
最好在4o C低温冰箱里放置一天或直到完全融化为止。
如果时间不允许低温解冻, 可参考以下解冻方法：1. 将血清从冰箱里取出后，在室温下放置15-20分钟。
2. 然后将血清放置在37o C水浴槽里。
过高温度会导致血清出现浑浊现象。
不要让水淹没装有血清的瓶子。
3. 每隔5分钟左右适当摇晃瓶子，直到完全地解冻为止。
血清解冻后要立即使用。
解冻的血清可以在2-8o C条件下存放达2个星期。
为了避免多次解冻/融化血清和长期冷藏,我们建议将没有用完的血清立即分装，然后再冰冻保存，方便以后使用。
胎牛血清
培养基与hyclone胎牛血清(2009-06-10 14:16)转载标签：hyclone胎牛血清培养基琼脂愈伤高氏杂谈分类：hyclone胎牛血清培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。
有的培养基还含有抗菌素和色素。
按所用原料不同，可分为两类：应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的，称为天然培养基；应用化学药品配成并标明成分的，称为合成培养基或综合培养基。
化学试剂中的培养基，大多为合成培养基。
由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。
培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。
一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在2~6。
C的冰箱内。
常见培养基有：1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克，蛋白胨1.0克，氯化钠0.5克，琼脂1.5克，水100毫升在烧杯内加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。
待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失阅读┆评论┆转载┆收藏查看全文>>武汉Invitrogen MEM 代理(2009-06-06 16:18)转载标签：科技培养基血清细胞培养剂型武汉invitrogenmem代理杂谈分类：武汉InvitrogenMEM代理Invitrogen是全球领先的生命技术公司，公司创立于1987年，总部位于美国加利福尼亚州卡尔斯巴德。
主要为全球从事生命科学研究的学术、政府研究机构、医药和生物技术公司提供生物技术产品和服务。
而我们是Invitrogen MEM 代理公司。
Invitrogen将研发力量集中在包括功能基因组、蛋白组学、生物信息学和细胞生物学等生命科学研究领域内的突破性创新，向全球各主要实验室提供在研究中所需要的新技术、新产品及服务。
牛血清分类有哪些？
牛血清分类有哪些？
血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
【胎牛血清】（Foetal Bovine Serum，简称FBS）：是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。
此时胎牛各脏器正处生长分化阶段，血中含有丰富的生长发育因子，非常适合各种细胞的培养，一旦胚胎发育完全这些因子自动消失。
因此8个月胎龄以上的牛胚胎，已接近足月，不能作为胎牛血清的原料来使用。
【新生牛血清】（Newborn Calf Serum，简称NBCS）：采自出生一天~一周内的新生牛；
【小牛血清】（Calf Serum）：采自出生10－30天的小牛；
【成牛血清】（Adult Bovine Serum，简称ABS）：采自成年牛收全血后分离得到血清。
所有血清出厂前均应经过严格质控，并附详细《检测报告》。
本生详解—胎牛血清要怎么用才能有理想效果-
本生详解—胎牛血清要怎么用才能有理想效果?本生详解—胎牛血清要怎么用才能有理想效果?胎牛血清是一种常见的细胞培养基添加剂，可以提供生长因子、细胞黏附蛋白、酶等多种必需物质，促进细胞生长和增殖。
在使用时，提醒：需要掌握以下几个方面的使用方法。
1、正确储存胎牛血清这是一种易变质、易受污染的生物制品，需要在储存和使用过程中注意保持其质量和纯度。
储存时应放置于-20℃以下的冰箱中，避免热量和湿度影响其质量。
使用前应先将血清缓慢解冻，并进行消毒处理，以确保其纯度和质量。
2、正确添加在细胞培养基中添加血清时，需要根据细胞类型和培养基配方等因素，选择正确的添加量和添加时间。
添加量一般为10%~20%，添加时间一般为细胞接种后的24小时左右。
过多或过少的添加量会影响细胞生长，导致细胞凋亡或分化。
3、选择适当的胎牛血清在使用时，需要选择适当的血清类型和来源。
不同的血清来源和类型具有不同的物理性质和生化成分，对不同的细胞类型和培养条件有不同的适应性。
因此，在选择血清时需要根据实际需要选择合适的类型和来源，以确保细胞生长的质量和效果。
4、注意血清的批次问题这是一种生物制品，其纯度和成分可能存在一定的波动，不同批次之间可能存在差异。
因此，在使用血清时需要注意批次问题，尽量在同一批次中使用，以避免批次间的差异对细胞生长的影响。
5、注意血清的卫生问题在使用时需要注意卫生问题。
使用前应先进行消毒处理，避免污染。
在使用过程中，需要保持卫生环境，避免细菌和病毒的污染。
同时，尽量避免使用过期的血清，避免影响细胞生长效果。
胎牛血清是一种常用的细胞培养基添加剂，使用方法非常重要。
在使用时，需要注意储存、添加、选择、批次、卫生和价格等方面的问题，以保证其质量和纯度，同时确保细胞生长的效果和卫生环境的卫生。
胎牛血清 BUNSEN本生公司产品种类已超过万种，正广泛应用于科研院校、中心实验室、分子生物学等科研域。
公司丰富的产品既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。
从不同种类的动物血液中提取血清有何不同？
从不同种类的动物血液中提取血清有何不同？
一、血清的组成
1. 血清是血液中不含凝固因子的部分，主要是由水、溶解蛋白质、矿物质和营养物质组成。
- 血清与血浆的区别
血浆是未凝结的血液，含有血浆蛋白、电解质等成分，而血清是血浆在凝结后去除了凝固因子的部分。
- 血清的提取方法
通过离心法将血液分离成血浆和血细胞，再将血浆在适当条件下沉淀凝固因子得到血清。
二、不同动物血清的特点
1.人类血清
人类血清中含有大量的蛋白质和抗体，被广泛应用于临床检验和医学研究领域。
2.牛血清
牛血清中含有丰富的免疫球蛋白和生长因子，常被用作细胞培养和生物制剂生产中的添加剂。
3.兔血清
兔血清中的抗体含量高，因此常被用于免疫学实验和抗原检测。
三、血清的应用领域
1.生化检验
血清中的蛋白质、酶类和代谢产物的含量可反映机体的健康状况，因此在生化检验中应用广泛。
2.药物检测
血清中的药物浓度可用于监测药物的治疗效果，以及调整用药剂量。
3.病毒检测
血清中的抗体和抗原可以用于检测病毒感染和疫苗免疫效果。
4.免疫学实验
血清中的抗体对免疫学研究具有重要作用，可用于抗原检测、免
疫印迹和免疫沉淀等实验。
四、提取血清的注意事项
1.血清的保存
血清应在冰箱中冷藏保存，避免暴露在高温下，以保持其完整性。
2.血清的使用
血清在使用前应注意防止受到污染，以免影响实验结果的准确性。
3.血清的临床应用
在临床应用中，应注意患者是否对血清成分过敏，避免引起不良反应。
细胞培养血清使用方法
细胞培养血清使用方法一、细胞培养血清的选择1.获取合适的细胞培养血清：在选择细胞培养血清时，应根据细胞类型和培养需求来选择适合的血清种类。
常见的细胞培养血清包括胎牛血清(FBS)、小牛血清(CS)、羊血清(GS)等。
2.质量检测：在使用细胞培养血清前，应进行必要的质量检测。
常见的检测项目包括细胞毒性检测、内毒素检测、抗体检测等，以确保细胞培养血清的质量符合要求。
二、细胞培养血清的保存与预处理1.储存温度：细胞培养血清应保持在-20℃以下的低温环境中保存，避免冻融过程中引起的细胞因子等成分的损失。
2.解冻方法：在使用前，需要将细胞培养血清从冷冻状态解冻。
解冻时应将血清瓶或管直接放入37℃的水浴中，待完全解冻后再使用。
避免频繁冻融对细胞培养血清质量造成影响。
3.灭菌处理：为防止细胞培养血清中的微生物污染细胞培养系统，使用前应对血清进行灭菌处理。
常见的方法有过滤灭菌和紫外线灭菌等。
三、细胞培养血清的使用方法1.添加量：在培养基中添加适量的细胞培养血清，通常按照5%-20%的比例添加，视细胞类型、生长阶段和实验要求而定。
同时，将血清的添加量逐渐减少，有助于维持细胞类型和稳定细胞表型。
2.血清浓度试验：在初始阶段的细胞培养中，可以进行不同浓度细胞培养血清的试验，以确定最适合细胞生长和增殖的血清浓度。
3.细胞分配与传代：在细胞传代过程中，应根据细胞的生长情况和实验要求，精确计算和添加细胞培养血清的量。
通常情况下，传代时应先将细胞离心，去除老化的细胞和细胞碎片，再将新鲜培养基补充到细胞中，继续传代和培养。
四、细胞培养血清的注意事项1.避免重复冻融：频繁冻融对细胞培养血清质量会有影响，因此在使用前需要根据实验需求，将血清储存和使用合理安排，避免过多的冻融过程。
2.避免污染：在使用细胞培养血清时，应注意防止污染对细胞培养的影响。
避免细菌、真菌和其他微生物的污染，同时在操作过程中注意无菌操作，避免引入外源性污染。
3.使用正常生长因子替代：部分细胞类型在一定条件下可以使用无血清培养基进行培养，无血清培养基中含有正常生长因子的替代物，能够促进细胞的生长和增殖。
血清使用的注意事项
一、关于血清使用的几点建议：1、血清必须贮存-20℃，如存放于4℃，请勿超过两周，对于某些单位一次无法用完一瓶，可在无菌条件下将其40-45ml分装于无菌50ml离心管中(或血清瓶中)，由于血清解冻时体积会增加10％，必须预留此膨胀体积的空间，否则易发生污染或容器冻裂的情形。
2、一般公司所提供的血清一般为100ml和500ml装量，因此建议在使用中宜采取逐步解冻的方法解冻血清：-20℃→4℃冰箱或冷库溶解24小时→室温下全溶后再分装，一般以50 ml无菌离心管中分装40-45ml。
使用过程中要特别注意，必须规则地将血清摇晃均匀，小心勿造成气泡，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。
勿直接由-20℃放置至37℃环境下解冻，因为温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而产生沉淀。
3、血清的灭活(heat-inactivation)一般是指56℃，30分钟水浴加热已完全解冻的血清，加热过程中必须规则地摇晃均匀。
此处理的目的是使血清中的补体成分(complement)去活化。
但是，经过灭活处理的血清会因而造成沉淀的显著增多，且会影响血清的品质。
所以，有的公司所生的细胞培养用牛血清不做灭活处理，由客户自行选择。
而诊断试剂用血清在除菌过滤前进行过灭活处理。
4、在使用血清的时候，勿将血清留置于37℃太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分会因而受到破坏，影响血清的品质。
5、一般我们在使用过程中是先过滤培养基，再加血清，勿直接过滤血清。
6、血清的沉淀物：(1)凝絮物：其产生的原因有多种，但普遍的原因是血清中的脂蛋白(lipoprotein)变形及解冻后血清中存在的纤维蛋白(fibrin)造成，这些凝絮沉淀物不会影响血清本身的品质。
除非必须，如果您想减少这些沉淀物，建议可用离心3000rpm，5min去除，或离心后取上清液加入培养基中一起除菌过滤。
(2)显微镜下观察“小黑点”，通常经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著增多。
牛血清[可修改版ppt]
![牛血清[可修改版ppt]](https://img.taocdn.com/s3/m/65b50a42ccbff121dd36837f.png)
加入4.5ml MEM培养液，细胞数 为多少？
思考2：
Cell增殖： 如果加入4.5ml MEM培养液计数 40万/ml。实际上是
否可以进行细胞增殖实验？ 细胞增殖条件： Sp2/0骨髓瘤细胞 ：细胞计数30万~50万/ml 其中0.5ml用于细胞计数，3ml传代，1ml进行实验。 实际操作是否符合药典相关规定？
总结 牛血清在细胞培养中的主要作用
（1）促进细胞生长 （2）促进细胞贴壁 （3）保护细胞
牛血清的重要意义
牛血清是医药生物技术产品中重要的原材料，它对细胞 的生长繁殖发挥着重要甚至是难以替代的作用。而细胞 培养在医药领域具有特殊的作用和价值，比如基因工程 药物或疫苗等在研究生产过程中很多是通过细胞培养来 实现的。由此看出，细胞培养是细胞研究特别是疫苗生 产的基础条件，而要做到监控生物制品成品，牛血清的 质量又成为关键。
牛血清
一．牛血清简介
定义 分类 制备 成分 功能
新生牛血清定义
新生牛血清分类
胎牛血清 新生牛血清 小牛血清 成牛血清
新生牛血清的制备方法
出生14h内未进食的新生牛采全血 自然凝集后去除红细胞分离得到血清 0.45um滤膜过滤去除纤维蛋白等 0.22um滤膜除菌 100nm微孔滤膜三次过滤精制
牛血清的成分
蛋白质 多肽 血小板 激素
胰岛素促进细胞分裂 类胰岛素生长因子 促生长激素 促细胞增殖 氢化可的松 促细胞贴附和增殖
牛血清的功能
牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰 富的细胞生长必须的营养成份，具有极为重要的功能。
1.提供维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有 或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。
兽医实验室血清留存管理制度及流程
兽医实验室血清留存管理制度及流程兽医实验室血清留存管理制度及流程一、制度概述兽医实验室血清留存管理制度旨在规范兽医实验室血清留存的操作流程，确保血清资源的安全保管和有效利用。
二、留存管理流程1. 血清收取：实验室工作人员根据实验需要，从动物体内采集血液样本，确保采样操作符合相关规范。
2. 样本处理：收集的血液样本需进行离心、分离血清，并按照标准方法进行处理和储存。
确保血清样本的纯净度和活性。
3. 样本标识：每个血清样本需标明标本编号、动物种类、采集日期等信息，并记录在相应的样本登记表中。
4. 血清存储：将处理好的血清样本储存在专用的冷冻冰箱或冷冻柜中，并按照不同种类、采集日期等划分存放区域，确保血清留存的有序性。
5. 血清留存期：血清样本的留存期根据实验需要和法规要求确定，需明确留存期限并进行相应的标识。
6. 血清更新：在血清留存期限到期或者样本质量受损时，需要进行血清更新。
更新过程中，需先将旧血清样本予以销毁，然后根据新的样本处理流程收集、分离和储存新血清样本。
7. 血清利用：在研究实验中，当需要使用留存的血清样本时，需按照相关程序进行申请和审批，并及时记录血清样本的使用情况和数量。
8. 血清销毁：在血清留存期限到期或者样本质量受损时，需要及时销毁血清样本。
销毁过程应严格按照相关规范和法规进行，防止血清样本造成环境和生物安全风险。
三、责任分工1. 实验室主管：负责制定和完善兽医实验室血清留存管理制度，并监督各项管理流程的执行情况。
2. 实验室技术人员：负责血清的采集、处理、储存和更新等操作，确保操作符合标准流程。
同时，对血清样本进行及时记录和管理。
3. 实验室管理员：负责血清样本的存储和整理工作，确保血清留存的有序性和安全性。
4. 质量管理人员：负责对血清留存管理制度和流程进行监督和评估，及时发现和纠正存在的问题。
以上为兽医实验室血清留存管理制度及流程的基本概述，具体实施细节应根据实验室规模和需求进行调整和完善。
血清使用说明解冻灭活分装
血清使用说明胎牛血清与小牛血清某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小牛血清即可。
储存条件血清一般储存于－20℃，同时应避免反复冻融。
若存放于4℃时，请勿超过一个月。
血清中絮状沉淀的处理沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白，这是正常特性，不会影响产品性质。
离心血清（400g，1-2分钟）或简单的让其沉淀在瓶子底部，将血清小心的转移到另一个无菌瓶里。
大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。
一般不建议采用过滤的方法除去沉淀，因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤。
使用浓度一般为5－20％，最常用是10％。
过多血清容易使培养中的细胞发生变化，特别是一些二倍体的无限细胞系，迅速生长之后容易发生恶性转化。
解冻方法血清从冰箱取出后应慢慢地解冻。
最好在4℃低温冰箱里放置一天或直到完全融化为止。
如果时间不允许低温解冻, 可参考以下解冻方法：1. 将血清从冰箱里取出后，在室温下放置15-20分钟。
2. 然后将血清放置在37℃水浴槽里。
过高温度会导致血清出现浑浊现象。
不要让水淹没装有血清的瓶子。
3. 每隔5分钟左右适当摇晃瓶子，直到完全地解冻为止。
热灭活方法加热可以灭活补体系统。
激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。
在免疫学研究，培养细胞、平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。
若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。
血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。
1. 用上述描述的方法将血清在低温冰箱或室温下解冻。
2. 在血清解冻时，将一个容器装入适量的水，用于模拟装有血清瓶子在热处理过程中检测瓶内水的温度。
容器大小、质地和装水的量最好与装血清的瓶子相同或相似。
3. 待血清彻底解冻时，将含有血清的瓶子放在预热的56℃水浴里，不要将含有血清的瓶子让水淹没或接近瓶子的盖子，以免导致污染。
4. 在开始加热处理时，要及时使用温度计测定模拟瓶内水的温度。
细胞培养复习题
细胞培养（动物细胞培养）：动物细胞培养是指将动物活体体内取出的组织用机械或消化的方法分散成单细胞悬液，然后放在类似于体内生存环境的体外环境中，进行孵育培养，使其生存、生长并维持其结构与功能的方法。
组织培养：从生物体内取出活的组织（多只组织块）在体外进行培养的方法。
有时泛指所有的体外培养。
器官培养：是将活体内的器官（一般是胚胎器官）、器官的一部分或器官原基在体外进行培养的方法。
合成培养基：根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的、配方恒定的培养基。
无血清培养基：由基础培养基和替代血清的补充因子（生长因子和激素、结合蛋白等）组成。
完全培养基：在合成培养基里添加血清后的培养基。
接触抑制：体外培养的细胞在贴附底物上连接成片、相互接触后失去运动的现象。
无限细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。
去分化（脱分化）：细胞在体外不可逆地失去原有特性。
注意：去分化不意味分化能力完全丧失！在适当调节信号刺激下仍能表现出分化特性。
但分化能力会随培养时间延长而逐渐丧失。
不适应：各种分化细胞，在体外培养时逐渐失去各自的形态与功能特征，表现出某种趋同性。
原因：培养条件变化使分化发生阻抑细胞分裂指数（MI）：是指细胞群中每1000个细胞中的分裂相数量细胞群体倍增时间：是指培养物中细胞数量翻倍的时间。
原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。
培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。
传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。
1）体外培养细胞，其生长方式主要有贴壁生长和悬浮生长两种，分别称为贴壁细胞和悬浮细胞。
2）一般可将贴壁细胞生长的体外培养细胞大体分为成纤维细胞型、上皮细胞型、游走细胞型、多行细胞型四种类型，最常见的为前两种。
3）体外培养细胞的主要生长特点：①贴附生长②接触抑制③密度依赖性培养细胞分化状态的变化：①去分化（脱分化）②不适应1、细胞培养的基本要求有哪些和工作方法要求：1）培养前准备2）操作间消毒3）洗手和着装4）火焰消毒培养前的准备的基本要求：培养基的选择和无菌配制动物细胞培养用液的类型、配制和无菌处理方法：1）操作程序规范2）试剂设备专人负责3）培养用品定点存放2、平衡盐溶液（BBS）：（1）成分：无机盐和葡萄糖，少量酚红。
牛血清使用说明范文
牛血清使用说明范文牛血清是从奶牛血液中提取并经过多道纯化和过滤处理得到的纯净蛋白质溶液，具有丰富的营养物质和生物活性成分，被广泛应用于医疗、生物研究、工业生产等领域。
以下是牛血清的使用说明。
一、储存与保管1.储存温度：牛血清最适宜的储存温度为-20℃或以下。
在此温度下储存，可以有效保持蛋白质的活性和稳定性。
2.储存方式：将牛血清保存在干燥、阴凉的地方，远离阳光直射和高温环境。
应避免频繁反复冷冻和融化，以免对蛋白质造成损伤。
3.包装完好：使用前应检查牛血清包装是否完好，如有破损或渗漏现象应停止使用。
二、使用前准备1.澄清处理：打开牛血清瓶后，应该轻轻摇晃或轻轻转动瓶子，使澄清透明的牛血清完全悬浮。
2.操作环境：在无菌条件下操作，避免任何可能导致污染的情况。
建议在无菌操作台上进行操作，并确保所有仪器和工具已经过严格的清洁和消毒。
三、常见应用领域及使用方法1.细胞培养牛血清常常用于细胞培养中，提供必需的营养物质和生长因子，促进细胞生长和繁殖。
（1）细胞培养基配制：按照细胞培养基配方准确称取细胞培养基粉末，加入适量的牛血清搅拌均匀，最后加入适量的抗生素，经过滤净化即可使用。
（2）细胞传代：将细胞培养物转移到新鲜的培养基中，适量添加牛血清，使细胞继续生长和传代。
2.蛋白质纯化（1）酚（树脂）胶柱层析：将经过预处理的样品加入酚胶柱中，牛血清可以用作洗脱缓冲液，帮助背景蛋白的有效清除。
（2）亲和层析：使用具有特异亲和性的树脂或沉淀剂，结合特定的蛋白质分别和目标蛋白质或其他附属物之间的相互作用，牛血清可以用作洗脱缓冲液或用于阻断非特异性结合。
3.抗感染治疗牛血清具有丰富的免疫球蛋白和抗体，可以用于抗感染治疗。
（1）抗菌和抗病毒：将牛血清溶液直接注射或局部涂抹于感染部位。
要根据具体病原体的类型和感染程度来确定用药方法和剂量。
（2）免疫治疗：将牛血清免疫球蛋白注射到患者体内，使机体产生抗体，增强免疫力。
用于治疗一些传染性疾病和免疫系统功能低下的患者。
胎牛血清是什么？胎牛血清详细介绍
胎⽜⾎清是什么？胎⽜⾎清详细介绍
在细胞培养体系中，⾎清是唯⼀不属于⼈⼯合成的成分，同时也让⾎清成分成为细胞培养体系中最⼤的不确定因素，因此，如何选择合适的⾎清是细胞培养得好坏的决定性因素之⼀。
根据采⾎时机的不同，⽜⾎清可分为胎⽜⾎清（Fetal Bovine Serum，FBS）、新⽣⽜⾎清和⼩⽜⾎清，我们细胞培养中⼀般使⽤的是胎⽜⾎清，也是最为“⼲净”、营养最为丰富的⾎清。
胎⽜⾎清是在母⽜怀孕3-8个⽉时，通过胎⽜⼼脏穿刺采⾎获得新鲜的胎⽜全⾎，经⾃然层析、离⼼后收集得到去除⾎细胞、纤维蛋⽩等成分的淡黄⾊透明上清液体，并在⽣产过程使⽤多级⾼置流膜过滤技术和三级0.1µm终端微滤⽅法处理⽽获取的⾎清。
相⽐于新⽣⽜和⼩⽜⾎清，胎⽜⾎清中所含的抗体、补体等对细胞有伤害的成分最少，因此对于⼀些较“脆弱”的细胞如⼲细胞、原代细胞，⼀定要使⽤优质的胎⽜⾎清进⾏培养。
新生牛血清安全操作及保养规程
新生牛血清安全操作及保养规程背景及介绍新生牛血清是来源于新生牛的血液中，通过多道无菌处理过程而制得的血清制品。
新生牛血清在细胞培养、生物制药、生命科研等领域得到了广泛应用。
由于新生牛血清的生产过程复杂，且用途具有广泛性和特殊性，因此在使用和操作过程中，需要遵循一定的操作规程，以确保用户的安全和产品质量。
本文将介绍新生牛血清的安全操作规程及保养方法，旨在为用户提供操作便利、安全、高效、稳定的使用流程。
安全操作规程1. 存储及运输新生牛血清应保存于-20℃以下，避免阳光直射和高温环境中。
运输过程中要采取相应措施，保障产品的质量和稳定性。
在运输过程中要注意避免急剧或反复冻融的情况发生，避免产品受到振荡和剧烈震动。
对于开封的新生牛血清，应当及时使用，或者分装后冷冻保存，尽快使用。
若出现明显的凝固或碎片，建议不要使用。
2. 环境及设备在使用新生牛血清的实验室环境和设备上应进行彻底的清洁和消毒，保证操作区域和设备处于无菌状态。
操作环境要保持干燥、清洁，避免灰尘和异物进入实验室。
操作设备也要定期保养、清洁、消毒，以防止交叉污染。
3. 操作流程在使用新生牛血清时，要遵守操作规程和技术要求，如手部消毒、穿戴防护用品、使用干净的器具等。
同时，要遵循标准的操作流程，避免不必要的污染。
使用新生牛血清前，需先进行热处理，热处理温度和时间依据产品说明书或技术要求确定。
热处理过程中，要确保温度和时间的均匀性、准确性，以避免血清的活性受到损伤。
使用新生牛血清时，应采取一次性使用的器具，以避免器具重复使用和交叉污染。
操作过程中不应振荡、摇晃或冻融，以避免血清的活性丢失。
4. 废弃物处理在使用新生牛血清后，要妥善处理废弃物。
废弃物包括器具、耗材和残余物，都应分类存放和妥善处理，以避免污染和交叉感染。
需要注意保护环境和生态，避免废弃物对环境造成污染。
保养方法为保证新生牛血清的质量和稳定性，需要在存储和运输过程中注意以下几点：1.保存温度：新生牛血清应保存在-20℃以下的冷藏条件下，避免受到高温和光照的影响。
胎牛血清和新生牛血清的区别是什么？
胎牛血清和新生牛血清的区别是什么？
血清是一种纯天然培养基，含有细胞生长繁殖所需的多种营养成分，如蛋白质、多肽等，多用于细胞培养、生物制品及诊断试剂的生产。
血清的主要成分是蛋白质，血清的组成成分与含量常常与供血动物性别、年龄、生理条件和营养条件有关。
那么，胎牛血清和新生牛血清的区别是什么？现在我们一起来看看。
胎牛血清和新生牛血清的区别是什么？
取血年龄不同：牛血清按照牛取血时间或牛龄可进行区分。
胎牛血清（Foetal Bovine Serum，简称FBS）指的是取自未出生，母牛剖腹得来的胎牛。
国产胎牛血清（并无明确定义，但通常以此称）的指的是出生4-6小时，且未进行哺乳（unsuckled）进食的牛，有时还称作国产新生牛。
新生牛血清（Newborn Calf Serum，简称NBCS）指的是出生14天-3个月进行取血的牛。
成年牛血清（Adult Bovine Serum，简称ABS）指的是取血时牛龄通常超过12个月的牛。
以上取血牛龄的差异主要是受当地国家畜牧业的发展及法规限制影响，因为牛血多为畜牧业副产业，并未有专门为取血而养的牛。
组分与比例不同：这几种不同牛龄血清所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组分与比例不同。
常规来说，年龄越小的牛血清，细胞培养效果越好。
胎牛血清培养效果好于新生牛，且因为胎牛未进食过母乳，所以IgG含量低。
用途与用法不同：根据细胞所需生长条件可确定。
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胎牛血清小牛血清新生牛血清之间的区别保存
及用法
文稿归稿存档编号：[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-
胎牛血清，小牛血清，新生牛血清之间的区别，保存及用法
1、来源不同：
胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。
组份与比例不同：两者所含的促细胞生长
细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同，
用途与用法不同：某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小
牛血清即可，使用浓度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。
血清保存和使用须注意：血清应保存在-5℃至-20℃，若存放
在4℃不可超过一个月。
解冻血清时，应先将血清至于2-8℃冰箱，并
经常摇匀使之溶解，然后至室温放置使之升温，绝对不可将冷冻的血清
直接放入37℃水浴或者温箱中，如放在37℃解冻，颜色加深，粘稠度也会增加，血清在解冻和热灭活后，应按用量分装并于-20℃保存，避免反复冻融。
2、胎牛血清，小牛血清和新生牛血清三种之间的区别：
这三种血清的成份，总体没有什么明显差别，只是有一些成分与其生存环境有关，如上述有人说的抗体很少等。
此外，因生长发育的需要，
有些成分在小牛出生后会发生一些变化。
不过还没有搞清楚它与其它的
血清之间的差别。
有一点可以肯定，胎牛血清中的部分功能蛋白与小牛
血清中的含量有差别。
3、最为重要的一点是：
胎牛本身生活在一个洁净环境当中，其血清与外界隔绝，只要生产工艺科学规范，其质量肯定要比后两者好。
4、根据牛出生时间和血清采制分离方法分为：
（1）胎牛血清：八月龄胎牛心脏穿刺取血;
（2）新生牛血清：出生12-24小时新生牛静脉采血;又可细分为：a.高级新生牛血清：采血后静置自然析出的血清;b.标准新生牛血清：c.经离心分离的血清;d.普通新生牛血清：融血或微融血的血清;
（3）小牛血清：出生三月龄小牛动脉采血分离血清;
血清是血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。
血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
对血清的成分和作用的研究虽有很大进展，但仍存在一些问题。
胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。
一般选用血清种类可以根据ATCC及实验需要来选择
其实，除了一些比较娇贵的细胞，如干细胞之类的，其余的大部分细胞培养，用国产的足以!而且四季青之类的口碑也颇好，性能也比较稳定，所以很多实验室都在用。
抛开法好一点的文章来说，这是个明智的选择。
如果想做好文章，那就要和国际接轨了，烧一点钱，影响因子提高点，也值啊。