丹参中丹参素的提取工艺优化研究

药
基金项目： 国 家 自 然 科 学 基 金 项 目 （ 81274176，81202636， 水回流提取 0． 5 h，提取两次，合并提取液浓缩至半，加入
782
81473587） ； 浙江省自然科学基金项目（ LＲ16H270001） ； 浙江省中医药科技计划项目（ 2016ZZ010）
95 % 乙醇到 50% 浓度，冷置过滤。回收溶剂至干，用 95% 乙醇 6 mL 加热重溶，残渣用 2 mL 95% 乙醇再溶解一次，弃
疗冠心病及心绞痛等方面具有较好的疗效，对由羟自由基、 Fisher） ； 丹参： （ 购自浙江中医药大学中药饮片有限公司，
超氧阴离子及亚硝酸根引发的各种反应有较好的抑制作 经鉴定唇形科丹参 Salvia miltiorrhiza Bge 的 根 及 根 茎，批
用，对肝细胞有一定的保护作用，具有抑制血小板聚集及降 号： 140410） ； 丹参素对照品（ 上海源叶生物科技有限公司，
关键词：丹参； 丹参素； 提取工艺； 正交实验
中图分类号：Ｒ284． 1
文献标志码：A
文章编号：1673-7717（ 2016） 04-0782-03
Study on Extraction Process Optimization of Tanshinol in Salvia Miltiorrhiza
2． 1． 3 测定波长的选择 取 0． 08 mg / mL 的丹参素钠对 照品溶液和供试品溶液，以甲醇为空白溶液，于 200 ～ 400
第 34 卷 第 4 期 2016 年4 月
中华中医药学刊
CHINESE AＲCHIVES OF TＲADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol． 34 No． 4 Apr． 2 0 1 6
丹参中丹参素的提取工艺优化研究
范红晶，刘晨敏，杨洁红，周惠芬，万海同，张宇燕
（ 浙江中医药大学，浙江 杭州 310053）
摘 要：目的： 采用单因素实验、正交实验等方法筛选丹参中的丹参素的提取工艺条件。方法： 采用紫外分光光度
法建立丹参中丹参素含量测定的方法，以丹参素为指标成分，在对多种提取工艺（ 传统水煎法、乙醇回流法、超声波法、
nm 波长处进行紫外扫描，结果在 287 nm 处有一明显的吸 收峰，故把 287 nm 作为测定波长。 2． 1． 4 标准曲线的绘制 精密吸取 0． 08 mg / mL 丹参素 对照品溶液 1、2、3、4 及 5 mL，分别置于 10 mL 容量瓶中， 用甲醇 定 容，得 到 浓 度 分 别 为 0． 008、0． 001 6、0． 024、 0． 032、0． 04 mg / mL 的溶液，以甲醇为空白溶液，于 287 nm 处分别测定其吸光度。根据以上数据以溶液浓度 C 为横 坐标，以吸光度 A 为纵坐标绘制标准曲线，进行线性回归 分析，得到丹参素的标准曲线为 y = 19． 763x + 0． 002 3，r = 0． 999 8，因此线性关系良好。 2． 1． 5 精密度试验 精密吸取丹参素溶液，连续进样 6 次，测其吸光度，计算 ＲSD = 0． 13% ，精密度良好。 2． 1． 6 稳定性试验 精密吸取供试品丹参素溶液，分别在 0、2、4、6、8、10 h 后分别于 287 nm 处测定其吸光度，计算供 试品 ＲSD = 0． 16% ，稳定性良好。 2． 1． 7 重复性试验 取同一批丹参药材平行制备供试品 溶液 5 份，按同一提取工艺流程在同一条件下操作和测定 其吸 光 度，根 据 回 归 方 程 计 算 丹 参 素 的 含 量，其 ＲSD = 0． 29% ，重复性较好。 2． 1． 8 回收率试验 精密称取已知丹参素含量的丹参药 材样品 5 份，每份精密加入丹参素钠对照品适量，依次制备 加样回收供试品溶液，于 287 nm 处分别测定其吸光度，结 果平均回收率为 98． 732% ，ＲSD = 1． 90% ，回收率较好。 2． 2 丹参素提取方法的选择
中 华
提取工艺（ 传统水煎法、乙醇回流法、超声波法、水提醇沉 法） ［8 － 10］的比较，以丹参素为指标，通过单因素实验、正交
mg，置 25 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得对照 品溶液。
中
医
收稿日期：2015 － 12 － 23
2． 1． 2 供试品溶液的制备 称取 3 g 丹参粉，加入 24 mL
水提醇沉法） 的优选，在此基础上，通过单因素实验、正交实验等对丹参素的提取工艺进行优化。结果： 水提醇沉法提取
丹参中丹参素的提取率较高，优选出的最佳工艺为： 加水量 8 倍，提取时间 90 min，浓缩体积 1 ∶ 1． 5，乙醇浓度 70% 。结
论： 优化的丹参素提取工艺，为丹参素的进一步开发和利用提供了一定的理论和实验基础。
第 34 卷 第 4 期 2016 年4 月
中华中医药学刊
CHINESE AＲCHIVES OF TＲADITIONAL CHINESEpr． 2 0 1 6
DOI： 10． 13193 / j． issn． 1673-7717． 2016． 04． 003
表 1 不同提取方法对丹参素提取率的影响
提取方法
提取率（ mg /3 g） 平均值（ mg /3 g）
传统水煎法 乙醇回流法 超声波提取法 水提醇沉法
26． 99 26． 94 27． 06 24． 71 23． 16 22． 69 11． 86 14． 24 17． 04 27． 47 27． 56 27． 59
26． 83 23． 52 14． 38 27． 54
结果见表 1，显示传统水煎法与水提醇沉法得到的丹 参提取率无显著性差异，由于传统水煎煮法杂质较多，只能
提取多糖蛋白质等有效成分，表明水提醇沉法提取丹参素 的含量均高于 传 统 水 煎 煮 法，且 工 艺 试 验 周 期 短，省 时 节 能，因此选水提醇沉法开展丹参素提取工艺研究。 2． 3 丹参素提取工艺的单因素试验 2． 3． 1 加水量对丹参素提取率的影响 准确称取 3 g 粉 碎成中粉的丹参 5 份，在提取时间为 1 h，醇沉浓缩体积比 为 1 ∶ 1． 5，乙醇浓度为 50% 的条件下分析加水量分别为 6、 8、10、12、14 倍时丹参素的提取率，结果见图 1。结果表明， 随着加水量的 增 加，丹 参 素 的 含 量 逐 步 增 加，当 溶 剂 用 量 12 倍是变缓。
低血液黏稠度保护，提高心肌缺氧能力，保护心肌等作用， 纯度鉴定为 98% ，批号： 20140417） 。
应用前景广阔。
2 方法与结果
丹参素水溶性较好，性质较丹参中其他水溶性的大分 2． 1 丹参素含量测定方法的建立
子酚酸稳定，并且在体内可以被快速吸收。本文通过多种 2． 1． 1 对照品溶液的制备 精密称取丹参素标准品约 2
FAN Hongjing，LIU Chenmin，YANG Jiehong，ZHOU Huifen，ZHANG Yuyan
（ Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou 310053，Zhejiang，China）
Abstract： Objective： To optimize the extraction process of Tanshinol in Salvia Miltiorrhiza by single factor experiment and orthogonal methods． Methods： Ultraviolet Spectrophotometric method was used to establish methods of content determination of Tanshinol in Salvia． And Tanshinol as index components，several extraction methods for Salvia Miltiorrhiza （ water decoction，alcohol reflux，ultrasonic extraction and water precipitated by ethanol） were selected，on this basis，through the methodology of verification，single factor experiment and orthogonal methods，we studied the extraction process of Tanshinol by determining Tanshinol of Salvia Miltiorrhiza． Ｒesults： Water precipitated by ethanol method had higher rate of extraction of Tanshinol from Salvia． The best optimization process of Tanshinol extraction was as follows： water addition 8 times，extraction time 90 min，concentrated volume 1： 1． 5，ethyl acetate concentration 70% ． Conclusion： This experiment adopts the methods of single factor experiment and orthogonal experiment to optimize the extraction technology of Tanshinol，providing a certain theoretical and experimental basis for the further development and utilization of Tanshinol．
经、清心除烦等功效，是常用的活血化瘀中药。丹参素是丹 1 仪器与试剂