凝集素实验

实验报告

课程：免疫学院（系）：专业班级：姓名：

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题目: 凝集素实验_______________________

【实验目的】

1.熟悉玻版凝集实验和试管凝集实验的操作技术

2.掌握凝集反应阴性和阳性结果的判定

【实验原理】

细菌等颗粒性抗原与特异性抗体结合后，再有电解质的的情况下，会出现肉眼可见的凝集块，称为凝集反应。直接凝集反应可分为玻片凝集和试管凝集。凝集实验是疾病诊断以及体内抗体水平测定的常用方法

【实验分类】

凝集实验可根据抗原的性质、反应的方式可分为直接凝集实验（简称凝集实验）和间接凝集实验。直接凝集实验分为试管法以及玻片法，间接凝集实验分为间接凝集实验和反向间接凝集实验。

【实验器材】

虎红平板凝集抗原、被检血清、清洁脱脂玻片、0.1ml吸管或微量加样器、混合棒以及牙签。

【RBPT实验】

实验原理：该试验又称为班氏孟加拉红平板凝集试验。由于所用的抗原是酸性（pH 3.6-3.9）带色的抗原，该抗原与被检血清作用时能抑制血清中的IgM类抗体的凝集活性、检查出的抗体是IgG类，因此提高了该项反应的特异性。

实验方法：在玻片上加0.03mL阳性和阴性血清，然后加入虎红平板抗原0.03mL，充分混匀，在1-3分钟内观察结果。

结果判定：有二种方法，第一种是，出现可见的凝集反应就判为阳性；

另一种用“+”表示凝集程度按下列标准用加号记录反应强度：

++++：出现大的凝聚片或小的粒状物，液体完全透明，100%凝集

+++：有明显的凝聚片，液体几乎完全透明，75%凝集

++：有可见的凝集片，液体不甚透明，50%凝集

+：液体混浊，只有少量粒状物，25%凝集

-：液体均匀混浊

【试管凝集实验】

实验原理：在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。

实验试剂:试管凝集抗原被检血清 0.5%的石碳酸生理盐水吸管试管试管架孵箱

实验步骤：1.加入抗原:先以0.5%石碳酸生理盐水将抗原原液做适当稀释（一般是作1:40稀释，取1ml抗原加入39ml石碳酸生理盐水）,

2.5支小试管，待检样品（样品1-40ul，样品2-20ul，样品3-10ul），阳性样品20ul，阴性样品20ul。每管加1:40抗原2ml。

3.然后将试验管和对照管充分混匀后，放于37℃温箱中20-22小时后取出，在室温下放置2个小时，以比浊管为标准判定结果。

实验结果：

【思考题】

1.何为凝集试验？有哪些类型？

答：细菌等颗粒性抗原与特异性抗体结合后，在有电解质的情况下，会出现肉眼可见的凝集块，称为凝集反应。运用凝集反应测定人体内的疾病感染情况称为凝集反应。

2.影响凝集试验的因素有哪些？

答：抗原的种类，电解质的选择，溶液的pH值，实验时的温度