151211-山东省细胞免疫抗肿瘤治疗业内自律性规范

山东省细胞免疫抗肿瘤治疗业内自律性规范（山东省生物医学工程学会干细胞与再生医学专业委员会免疫细胞治疗学组2015年4月23日通过）为了保证细胞免疫抗肿瘤治疗的健康、有序的发展，保证医疗安全，为肿瘤病人提供一种安全、有效的治疗方法，根据国家药品监督管理局颁布的《人体细胞治疗研究和制剂质量控制技术指导原则》和《药品GMP认证检查评定标准》的有关规定，并考虑到多数从事细胞治疗单位现有的条件，按照循序渐进的原则，使我省细胞免疫抗肿瘤治疗领域各项工作逐步走向规范，特制定《山东省细胞免疫抗肿瘤治疗业内自律性规范》，简称《规范》。

一、适用范围本《规范》是山东省细胞免疫抗肿瘤治疗领域业内自律性文件，适用于山东省从事细胞免疫抗肿瘤治疗、并且承认本规范的医疗机构和生物技术企业。

细胞免疫抗肿瘤治疗是指应用人的自体、同种异体或异种（非人体）的与免疫有关的体细胞，经体外操作后回输（或植入）人体的抗肿瘤治疗方法，包括树突状细胞（DC）、抗原致敏的树突状细胞（APDC）、淋巴因子激活的杀伤细胞（CIK、DCIK、LAK、CD3AK、TAK）、肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）、体外致敏的杀伤细胞（IVS、TCL）等，其他未包括的细胞免疫抗肿瘤治疗参照执行。

本规范设定两个要求：基本要求和更高要求。

基本要求是指我们目前必须具备条件，更高要求是指今后需要不断改进要达到的最终条件。

二、人员配备要求1、临床人员要求①细胞免疫治疗临床科主任（负责人）要求：基本要求：从事细胞免疫抗肿瘤治疗临床主要负责人须具备副高或以上职称，工作责任心强，具备2年以上从事细胞免疫抗肿瘤治疗的临床工作经验、具备较系统的临床免疫学知识，具有处理细胞免疫治疗过程中可能出现的各种不良反应的能力和相应的细胞免疫抗肿瘤治疗知识，能指导下级医师从事免疫细胞治疗工作；细胞免疫治疗临床负责人担负着培训其他参与此项目的临床医师的职责，并及时与实验室负责人协商，协调病人的治疗方案。

更高要求：在具备基本要求的基础上，经过较系统的免疫细胞治疗培训，具备系统的临床免疫学知识，掌握一定的基础免疫学知识，了解实验室细胞制备流程和方法，掌握细胞免疫抗肿瘤治疗与其他疗法联合治疗方案的制定原则，具备临床科研能力。

②细胞免疫治疗临床医师要求：基本要求：从事此项目临床治疗的医师必须具备本科或本科以上学历，须具有基本的免疫治疗知识，经过各单位组织的基本培训，掌握免疫治疗过程中不良反应的处理方法和急救方法。

更高要求：在具备基本要求的基础上，临床免疫治疗的医师经过系统专业培训，具备较为系统的临床免疫学知识，并能解释免疫治疗中出现的临床现象。

2、实验室人员要求①实验室技术人员要求：基本要求：具备大学（专）本科或以上学历，具有医学或生物学实验室学习或工作经历，具备一定的基础免疫学知识，经免疫细胞培养培训1个月以上，能识别培养细胞中是否存在微生物污染，会观察细胞生长状态。

能正确履行其职责的实验室技术人员。

更高要求：具备医学检验系大学（专）本科学历，或具备细胞培养1年以上学习经历的研究生学历，再经3个月以上免疫细胞制备培训或实习，或具有不少于50例实验性免疫细胞制备经验，方可独立操作。

②实验室主任（负责人）要求：基本要求：具备副高级或以上职称、具备较系统的基础免疫学知识，并具有2年以上从事细胞免疫抗肿瘤治疗的实验室工作经验，能够指导实验室技术人员工作，具备解决在免疫细胞培养过程中出现的复杂问题，对本规范的实施、实验室安全和制备的免疫细胞的质量负责。

承担与临床科室沟通的职责。

更高要求：在基本要求的基础上，具备系统的基础免疫学知识和临床免疫学知识，了解细胞治疗的临床流程，具备基本的基础科研能力，有一定的临床科研知识。

具备相关疾病的基本的临床知识。

能及时掌握国内外最新的细胞免疫治疗的最新动态。

③其他人员要求：基本要求：从事质量检验的工作人员以及其他需要进入洁净实验室（GMP实验室）的工作人员（包括维修、辅助人员）应在实验室技术人员的指导下，按照进入洁净实验室的流程进入实验室，应具备一定的微生物学基础和洁净作业等方面的知识。

更高要求：在基本要求的基础上，经过一定的洁净实验室工作培训，掌握微生物学知识，培训有记录。

④单位职责：各单位应建有对各级员工进行本规范和专业技术、岗位操作知识、安全知识等方面的培训制度、培训计划和培训档案，并按照有关规定定期检查，有检查记录。

三、材料和设备配备要求1.试剂和耗材准入基本要求：用于临床治疗的细胞悬液制备所需试剂和器械均必须经食品药品监督管理部门审批，具有临床应用的许可证，即注射到病人体内的配制细胞悬液所用液体和添加剂必须使用国药准字号药品，接触细胞悬液的包装材料必须具备医疗设备注册证。

一次性耗材禁止重复使用。

用于细胞分离、纯化和培养的试剂和耗材以及各种添加剂，均应该符合药品生产企业使用的试剂和耗材的质量标准，每批耗材和试剂均需要有出产厂家的质量检测报告，报告需长期保存。

所使用的试剂和耗材以及它们的质检报告均要建立登记制度，保证材料来源的可追溯性。

更高要求：在基本要求的前提下，所有的试剂和耗材均有食品药品监督管理部门颁发的注册证书。

2.耗材和试剂存放基本要求：耗材应按品种、规格、批号分别存放，库房干燥、洁净，物品名称标签和进货日期标识清楚，库房存放的物品必须有外包装，洁净实验室存放的物品不得带有外包装，可以有内包装。

对培养液和试剂等对温度、湿度或其他条件有特殊要求的试剂和材料应按规定条件贮存。

库房存储的物品出入记录清楚，定期盘点。

更高要求：库房要求恒温、自动除湿、有空气净化系统。

3.试剂和耗材使用：基本要求：培养基、培养基添加成分和能接触到培养液的用品必须符合国家药品监督管理局2003年3月20日颁布的《人体细胞治疗研究和制剂质量控制技术指导原则》标准。

可以使用异种血清，推荐使用病人自体血清或血浆。

更高要求：商业来源的培养基，应由厂商提供全部培养基成分资料和质量检测报告。

采用无血清培养液、可添加病人自体血清或自体血浆，尽量避免使用内酰胺类抗生素。

4、设备配备要求基本要求：各种细胞制备设备均安放在符合GMP标准的洁净实验室内，主要包括：CO2培养箱、超净工作台、大容量水平离心机、倒置显微镜、加样枪等以及配套设备。

检测设备可按临床实验室环境安放，检测设备包括：流式细胞仪。

储存设备：细胞储存用超低温冰箱（-80℃），试剂和培养液储存冰箱等。

如果较远距离运输（运输时间半小时以上），需要用保温箱（4-15℃）。

储存设备应安放于较为洁净的环境中，检测设备应有独立的房间。

更高要求：除了满足基本要求外，细胞制备设备中CO培养箱，推荐使用具备自动消2毒、带有空气过滤功能的培养箱，操作台推荐使用生物安全柜，离心机推荐使用无碳刷、大容量恒温水平离心机，倒置显微镜应带有图像采集系统。

检测设备流式细胞仪外，可配备ELI-SPOT检测设备，可根据需要配备部分用于科研设备。

储存设备中推荐使用液氮箱，超低温冰箱（-80℃）和试剂和培养液储存冰箱应带有温度自动记录系统，并且配有备用冰箱。

细胞运输用保温箱（4-15℃）推荐使用车载冰箱。

细胞冻存降温应配备程控降温仪。

如果使用组织或细胞制备肿瘤抗原应配备非接触式细胞超声破碎仪。

根据需要可配备纯水系统。

四、细胞制备环境要求1、细胞采集要求基本要求：细胞采集应在细胞采集室或治疗室中进行，采集环境需要按照治疗室的规定按期消毒，并进行无菌检测。

采集的细胞量要达到能制备出临床所需细胞数量的要求，以DC细胞为主的治疗必须使用血细胞分离机。

病人的体质能耐受细胞采集全过程。

采集室具备抢救车和简易急救设备。

有左心衰症状的病人慎用血细胞分离机。

更高要求：如果病人身体状况允许，应使用血细胞分离机采集病人外周血中单个核细胞。

采集数量：单个核细胞数不低于1×109,单核细胞数不低于2×108。

如果病人经多次化疗或放疗，应适当增加细胞采集数量。

2.细胞制备环境要求：基本要求：采集的细胞进一步处理需要在达到国家GMP标准的洁净实验室中进行，设备和物品摆放、储存必须符合国家GMP的规定。

洁净实验室内需配备百级净化超净工作台或生物安全柜，细胞培养的各种暴露性操作应在超净工作台或生物安全柜中操作。

提倡一个病人的样本两人独立操作。

操作间设置简单，无死角。

人和物的通道分离。

所有使用的物品均不能产生粉尘和纤维脱落，洁净实验室墙壁无粉尘。

进入洁净实验室的物品尽可能保持无菌。

洁净实验室定期消毒，空气过滤器定期更换，并进行空气微生物培养，有记录。

细胞培养箱应放置在万级或万级以上的净化级别环境中。

更高要求：GMP实验室废弃物品通过专用通道，经消毒后离开洁净实验室。

人员进入和离开通道分离。

每两周检测一次空气微生物。

每半年检测一次实验室净化级别，要保持实验室洁净度不低于万级，有记录。

实验室有摄像监控。

3.洁净实验室衣物穿戴要求基本要求：洁净实验室使用的无菌服制作材料要求耐高温、无脱落纤维或粉尘、不产生静电。

将这种材料制成连体衣，包含帽子、上衣、裤子和袜子4部分为一体。

衣服每周高温消毒一次。

进入洁净实验室衣物穿戴程序依次为：换鞋、消毒手和前臂、戴一次性口罩和帽子、穿无菌猴服、再次换鞋、戴无粉尘无菌手套，进入实验室。

头发需全部包进帽子里，不得外露。

所用拖鞋每1—2周消毒液浸泡消毒一次。

更高要求：要求进出实验室前先洗澡，换实验室内衣，然后，再按照上述流程进入实验室。

无菌猴服使用完毕后放入臭氧消毒柜（或其他消毒柜）中消毒，备下次使用。

4.具有感染性样本来源的免疫细胞制备基本要求：需使用单独的净化区域。

若无单独的净化区域，需操作完毕后，彻底消毒，然后再进行其他病人治疗。

更高要求：感染样本处理需要有独立的洁净实验室，独立的空气净化系统，专用生物安全柜，生物安全柜气体外排，不进入循环。

5.洁净实验室检测：基本要求：每半个月应监测洁净实验室、操作台和培养箱的微生物数，怀疑有污染随时检测，彻底清除污染后必须检测合格后方能使用。

更高要求：各实验室之间、不同洁净度的区域之间有空气压差检测装置，并有记录。

6.实验室微生物检测方法：直径10cm的培养皿暴露在操作台内1小时，不应有微生物存在；暴露在细胞培养箱中和洁净实验室内3小时，微生物数不能大于1个菌落，不能有致病菌和霉菌存在。

每次检测要有记录。

五、治疗所用细胞来源1.如果条件允许，尽可能采用病人自体细胞进行免疫治疗。

不得采用异种细胞。

2.如果采用同种异体细胞，则需要说明供体的年龄、性别，供体必须符合国家对献血员的要求，并提供测试的方法及符合条件的依据。

供体必须经过检验证明HBV抗原、抗HCV、抗HIV-1/2、梅毒抗体、细菌、霉菌均为阴性，必要时需说明供体的既往病史、家族史等临床资料。

还必须对供体做HLA-I类和II类分型检查，并证明与受体（病人）相匹配，同时提供检测方法和依据。