抗磷脂抗体谱
抗磷脂抗体检测方法
抗磷脂抗体检测方法
抗磷脂抗体检测方法是用于检测人体血清中是否存在抗磷脂抗体（APA），这是一类自身免疫抗体，与磷脂类物质结合而产生。
以下是几种常见的抗磷脂抗体检测方法：
1.免疫酶联免疫吸附试验（ELISA）：ELISA是一种常用的检测方法，在抗磷脂抗体检测中也广泛应用。
该方法将标准化的抗磷脂抗原固定在微孔板上，然后通过加入待测血清样本，观察是否有抗磷脂抗体与抗原发生特异性结合。
结果可以通过酶标记的二抗或底物染色来定量或定性分析。
2.凝集试验：抗磷脂抗体可与磷脂类物质结合形成凝集，因此凝集试验也是一种常见的抗磷脂抗体检测方法。
这种方法通常通过向抗原和血清混合后进行观察，观察是否有凝集形成。
3.血浆高灵敏度C反应蛋白（hs-CRP）：hs-CRP是一种炎症标志物，但高水平的hs-CRP也可能与抗磷脂抗体的存在相关。
因此，测量血浆中的hs-CRP水平也可以作为抗磷脂抗体的间接指标。
抗心磷脂抗体综合征
概念
抗磷脂综合征（anti-phospholipid syndrome, APS）是指由 抗磷脂抗体（APL抗体）引起的一组临床征象的总称，主要 表现为血栓形成，习惯性流产，血小板减少等。在同一患者 可仅有上述一种表现，也可同时有多种表现。
由于抗心磷脂抗体（ACL抗体）的特异性更强，与上述临床 表现关系更密切，因而也称为抗心磷脂综合征（anticardiolipin syndrome, ACS)。
实验室标准
1 狼疮抗凝物
2 抗心磷脂抗体
3 抗 β2 糖蛋白 I 抗体
以上三项抗磷脂抗体至少每项发现2次阳性， 2 次间隔至少12 周
发病原因及机制
遗传因素
某些基因变异可增加患抗心 磷脂抗体综合征的风险
免疫因素
免疫系统异常导致抗心磷脂抗体产生，进而引 起血栓形成等病理过程
环境因素
感染、某些药物、理化因素等可 诱发抗心磷脂抗体综合征
血栓形成 血小板减少
3次或3次以上不明原因＜10周的胚胎 丢失
20周后胎儿在子宫内死亡
羊水少、FGR、脐动脉血流舒张期断流、 胎心监护异常
20周以后，血压高班尿蛋白阳性，或无 蛋白尿，但血小板减少、肾功能受损、 肺水肿
下肢静脉血栓
轻度50×109/L-150×109/L 重度＜50×109/L
治疗原则
发病机制
抗心磷脂抗体与内皮细胞、血小板等结合，导致血管 壁炎症、血栓形成等病理改变
发病机制
绒毛外滋养 细胞未能重 建螺旋动脉
胎盘缺血、 缺氧、损伤
子痫前期 FGR 死胎
母体流入胎 盘的血流减 少、中断
影响胎儿营 养输送
凝血是抗磷脂综合征的重要机制
抗磷脂 抗体
2020抗磷脂综合征诊断与治疗(系列八)(三)抗磷脂综合征实验室检查
2020抗磷脂综合征诊断与治疗（系列八）（三）抗磷脂综合征实验室检查2016年我国复发性流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）诊治专家共识将复发性流产定义为：3次或3次以上在妊娠28周之前的胎儿丢失。
但大多数专家认为，连续发生2次流产即应重视并予评估，因其再次出现流产的风险与3次者相近。
2017年欧洲人类生殖与胚胎学会（ESHRE）的最新定义：反复妊娠丢失（recurrent pregnancy loss，RPL）又称反复自然流产（recurrent spontaneous abortion，RSA），是指2次或2次以上孕周在24周之前的妊娠丢失。
反复流产发病原因众多，既可能是单一因素、也可能是混杂的多因素。
反复流产病因主要包括遗传因素（夫妻染色体异常2%-5%）、生殖道解剖结构异常（7%）、内分泌紊乱（8%-12%）、生殖道感染（4%）、免疫及血栓性疾病等因素（50%-60%），其他还有男性因素、环境因素、精神因素、药物因素、不良生活习惯、营养状况及不明原因反复流产（unexplained recur-rent spontaneouse abortion，URSA）。
不明原因反复流产中约80%与免疫学因素相关。
反复流产的诊断为排除性诊断，病因检查和治疗费用较高。
中国地域辽阔，经济发展不平衡，对反复流产患者病因检查和保胎用药应遵循因地制宜、量力而行、规范检查和适度治疗的原则。
根据不良孕产史、流产次数、经济条件、检查技术、酌情选择检查项目，尽可能做到病因清楚，诊断准确。
孕后根据既往流产病史、流产病因，孕后阴道超声、绒毛膜促性腺激素（HCG）、孕酮（P）、雌二醇（E2）、免疫和凝血等检查，横向及纵向综合分析，准确判断胚胎发育情况，恰当选择保胎药物，力争做到精准检查、精准诊断、精准用药、精准保胎。
为了推广普及反复流产与精准保胎事业，规范反复流产病因检查、诊断和治疗，我将反复流产与精准保胎理论知识按临床需要编排为以下篇章，供同行参考使用。
(完整版)抗磷脂抗体与抗磷脂综合征
稀释蛇毒凝血时间(dRVVT)
稀释凝血酶原时间(dPT)
➢ 通过纠正试验确诊：若有LA，缺乏血小板正常血清不能纠正凝血时间
，只有加入过量磷脂或血小板溶解物后，延长的APTT可被纠正。这里 要排除其他原因引起的凝血异常，如肝素、Ⅷ因子复合物等。
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狼疮抗凝物的检测
➢
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抗心磷脂抗体（ACL）Fra bibliotek➢ 最先发现的抗磷脂自身抗体之一，和血小板减少有明显相关性，ACL
➢ 1907年，先天性梅毒胎儿的肝脏提取物作为抗原检测梅毒抗体 ➢ 1941年，发现心磷脂及抗心磷脂抗体（ACL） ➢ “梅毒血清反应生物学假阳性（BFP-STS）” ➢ 1950年，慢性BFP人群自身免疫病发生率高 ➢ 1957年，在BFP（+）SLE患者血浆中发现：狼疮抗凝物（LA） ➢ 后证明其是一种免疫球蛋白：靶向前凝血酶活性复合物中磷脂 ➢ 1983年，LA能与其他带负电荷的磷脂结合，称之为抗磷脂抗体（APL） ➢ 1986年，Hughes命名：与之有关的疾病则称为抗磷脂综合征（APS） ➢ 1990年，APS患者的ACL识别血浆中的一种磷脂结合蛋白…β2-GPⅠ ➢ 在SLE和APS中，β2-GPI可显著增加ACL和心磷脂的结合强度 ➢ 1999年，第八届APL国际研讨会会后发表了APS的初步诊断标准(札幌标准) ➢ 2006年，悉尼国际血栓止血学会（ISTH）会议修订了APS分类诊断标准
神经精神症状（偏头痛、舞蹈病、癫痫、吉兰巴雷综合征）
➢ 病源病因分类：
原发性APS：家族聚集，危险因素有吸烟、口服避孕药等 是10-15%血栓性疾病和1/3青年人群中风的原因
继发性APS：SLE 30-40% RA 恶性APS：广泛血栓形成、多器官功能衰竭甚至死亡、起病隐匿
抗磷脂抗体综合征(APS)PPT课件
Autoimmunity Reviews 11 (2012) 25808–295
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aspirin or daily treatment with prophylactic doses low-dose aspirin; optimal management
of heparin plus low-dose aspirin; optimal
uncertain
management uncertain
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①溶血性尿毒症综合征(HUS)：起病较急，多见于儿童，在夏季多发，一般与产生志贺毒素的大肠杆菌感 染有关，在数日内出现贫血、黄疸、皮肤和黏膜出血、血小板减少及急性肾衰竭。 ②TTP：起病较隐匿，常见于成人，在短时间内出现贫血、黄疸、皮肤和黏膜出血，严重者可出现颅内出 血，血小板减少，多数伴有发热和神经系统受累症状，可表现为精神异常，严重者可出现癫痫样发作、 抽搐、瘫痪及昏迷等，肾损伤较HUS轻。 ③HELLP综合征：以溶血、肝酶水平升高和血小板减少为特点，是妊娠期高血压疾病的严重并发症，多数 发生在产前。临床表现为乏力、右上腹疼痛及恶心呕吐，体重骤增，脉压增宽。
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Who? Where？ What？ When? How？
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Proposed Management for Women With aPL Antibodies
Feature
APS with prior fetal death or recurrent pregnancy loss
the isotype and titre in the solid phase tests (1B).
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体内促凝，体外抗凝？
抗磷脂抗体(aPL)谱质控品产品技术要求博粹医学
抗磷脂抗体（aPL）谱质控品2.性能指标2.1外观产品各型号组成应齐全；产品外包装应完整，无破损；质控品为澄清黄色或淡黄色，无颗粒沉淀或絮状不溶性杂质；说明书和质量检查报告字迹清晰完整；标签等打码印字应正确、清晰、牢固。
2.2装量1）规格100μL /支的产品，装量要求不低于110μL /支；2）规格500μL /支的产品，装量要求不低于530μL /支。
2.3溯源赋值程序2.3.1溯源赋值依据1）抗β2-GPⅠIgG抗体质控品（QC131-1L，QC131-5L，QC131-1M，Q C131-5M）：选用磷脂国际大会推荐标准札幌标准品HCAL作为溯源赋值依据。
2）抗心磷脂IgG抗体质控品（QC132-1L，QC132-5L，QC132-1M，QC132-5M）：选用磷脂国际大会推荐标准札幌标准品HCAL作为溯源赋值依据。
3）抗β2-GPⅠIgM抗体质控品（QC133-1L，QC133-5L，QC133-1M，QC133-5M）：选用磷脂国际大会推荐标准札幌标准品EY2C9作为溯源赋值依据。
4）抗心磷脂IgM抗体质控品（QC134-1L，QC134-5L，QC134-1M，QC134-5M）：选用磷脂国际大会推荐标准札幌标准品EY2C9作为溯源赋值依据。
2.3.2溯源赋值方法提供溯源赋值的程序性文件和至少一个批次溯源赋值过程的记录。
（详见附录A）2.3.3赋值准确度2.3.3.1QC13-A 赋值准确度12.3.3.2QC13-B 赋值准确度2.3.3.3QC13-C 赋值准确度2.3.3.4QC13-D 赋值准确度22.3.3.5单支包装规格赋值准确度单支包装规格赋值准确度见“2.3.3.1 QC13-A赋值准确度”。
2.4均一性2.4.1瓶间均一性同批号质控品进行瓶间均一性检测，瓶间均一性CV%≤10%。
2.4.2瓶内均一性同批号质控品进行瓶内均一性检测，瓶内均一性CV%≤10%。
2.5生物安全性产品的HBsAg、HIV(1+2)抗体、HCV 抗体、TP 抗体检测结果应为阴性。
抗磷脂抗体综合征-PPT
❖ 抗β2GPⅠ抗体的存在增加了SLE 患者患血栓的危险
SLE 不伴血栓症 SLE伴血栓症
抗β2GPⅠ抗体阳性率（％） 17 88
——Gómez-Pacheco L, Villa AR, Drenkard C,et al. Serum anti-beta2-glycoprotein-I and anticardiolip in antibodies during thrombosis in systemic lupus erythematosus patients. Am J Med.1999,106:417-23.
❖ aβ2-GPⅠ
❖ 其他抗体意义尚未明确:凝血酶原，钙依赖性膜磷脂结合蛋白Ⅴ，磷脂酰丝氨 酸，磷脂酰乙醇胺，磷脂酰肌醇
aPL的阳性率
正常人群
随年龄和病程阳性率增加
SLE
LAC: 11-30% aCL: 24-86%
初发中风
难治性流产
2 - 12 % 30 - 40 % 10 - 26 %
15 %
APS的临床表现
反复动静脉血栓形成
➢ 静脉闭塞：深静脉血栓 肺栓塞 ➢ 动脉闭塞：最常见中风和短暂性脑缺血（TIA）
妊娠并发症
➢ 难治性流产：APS是引起90%难治性流产的原因 ➢ 胎盘功能不全、早发型子痫 ➢ IUGR——胎儿宫内发育迟缓
血小板减少 精神神经症状 aCL或LA持续阳性
APS的非特异性临床症状
❖ 药物性:
酚噻嗪类,普鲁卡因，奎尼丁，苯妥英，肼屈嗪
aPL实验室检查的适应症
❖ 自发性静脉血栓
❖ 频发性心动过速（即使存在其他危险因素）
❖ 50岁以下人群中风或周围动脉闭塞事件
❖ 所有的 SLE 患者
抗磷脂抗体谱六项
抗磷脂抗体谱六项
抗磷脂抗体谱是一种检测自身免疫疾病中的一组抗体的检测项目。
这些抗体通常与抗磷脂抗体综合症（Antiphospholipid Antibody Syndrome，APS）有关，这是一种自身免疫疾病，患者体内产生抗磷脂抗体，可能导致血栓形成和其他血管问题。
抗磷脂抗体谱六项通常包括以下六个抗体的检测：
1.抗基底膜抗体（Anti-Basal Ganglia Antibodies，ABA）：这是
一种抗体，可能与自身免疫性疾病，特别是运动神经元疾病有
关。
2.抗磷脂抗体IgG：抗磷脂抗体是一类抗磷脂脂质的抗体，包括
IgG和IgM两种类型。
3.抗磷脂抗体IgM：IgM型抗磷脂抗体也是与抗磷脂抗体综合症
相关的抗体类型。
4.抗磷脂抗体抗凝物质：这是一种可能影响血液凝结和抗凝的抗
体。
5.抗磷脂抗体抗β2糖蛋白I：与抗磷脂抗体综合症相关的另一
种抗体。
6.抗磷脂抗体抗β2糖蛋白IgM：IgM型的抗β2糖蛋白I抗体。
这六项抗体的检测有助于评估患者是否存在抗磷脂抗体综合症，并帮助医生制定相应的治疗方案。
这些抗体检测通常在风湿免疫学或免疫学领域的实验室进行。
如果您或您身边的人需要进行这方面的检测，建议咨询医生以获取详细的建议和解释。
抗磷脂抗体与认知障碍完整版
抗磷脂抗体与认知障碍完整版什么是抗磷脂抗体抗磷脂抗体（aPLs）为一组能识别各种磷脂抗原的异质性自身抗体，其靶抗原为磷脂、磷脂结合蛋白，以及磷脂-磷脂结合蛋白复合物。
对于aPLs 最初认识来源于上世纪建立的梅毒血清学检测，通过这一方法人们发现系统性红斑狼患者血清能够与从先天性梅毒胎儿肝脏乙醇提取物中抗原发生反应，这种抗原最终被证实为心磷脂。
aPLs 正常生理状态下通常不会产生，但在某些情况下，身体会错误地产生对抗自身磷脂抗体，导致免疫系统攻击自身细胞和组织，2006 年制定的国际抗磷脂综合征(APS) 分类及诊断共识将抗心磷脂抗体（aCL）、抗β2 糖蛋白I 型抗体（β2-GPI）以及狼疮抗凝物（LA）等实验室检测作为临床诊断APS 的重要指标。
APS 与认知障碍aPLs 作为目前已被广泛接受的静脉和动脉血栓形成危险因素，但在一般人群以及原发性和继发性抗磷脂综合征(APS) 患者中，aPL 与认知功能障碍二者关系尚未得到广泛关注及研究。
近年国外研究表明，一般人群中抗心磷脂(aCL)IgG 阳性率为 5.9% -31.1%，而在认知功能下降或影像学发现神经系统改变的受试者中，aCL 滴度升高明显，血管性痴呆患者aPL 患病率为6.0-56.6%。
在原发性和继发性APS 患者中，高达60% 患者存在严重的认知功能障碍，其中33.3% 为系统性红斑狼疮, 22.2% 为非aPL 的系统性红斑狼疮患者。
血管性痴呆（VaD）患者aPL 的患病率从6% 到56.6% 不等。
两项横断面研究中，aCL 滴度显著升高。
一项研究发现，6% 的痴呆患者中，可以发现高滴度aCL; 有趣的是，这些患者中的大多数被诊断为AD，最近的一项荟萃分析报告，与对照组相比，痴呆患者中aCL 的患病率显著增高，aCL 的风险随着年龄和痴呆类型(血管性与阿尔茨海默性痴呆) 的增加而增加，此外，APS 患者也有多种MRI 表现，近50% 的患者在MRI 表现为无症状性脑梗死。
抗磷脂抗体谱六项
抗磷脂抗体谱六项抗磷脂抗体谱六项是一种常用的免疫学检测方法，用于评估某些自身免疫性疾病的发生风险。
本文将介绍抗磷脂抗体谱六项的概念、检测方法、临床意义以及相关疾病的诊断及治疗。
概念抗磷脂抗体谱六项是指一种血清学检测项目，用来检测人体内是否存在磷脂抗体。
磷脂抗体是自身免疫性疾病中常见的一类抗体，它们与磷脂类物质结合，形成免疫复合物，导致炎症反应和血液凝固功能障碍。
检测方法抗磷脂抗体谱六项的检测一般采用酶联免疫吸附法（ELISA）或荧光抗体法（FIA）等技术进行。
通过这些方法，可以检测出各种不同类型的磷脂抗体，如抗心磷脂抗体（aCL）、抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体（anti-β2-GP1）、抗磷脂类抗体（aPL）等。
临床意义抗磷脂抗体谱六项的检测结果与多种自身免疫性疾病的发生及严重程度相关。
临床上常见的与抗磷脂抗体相关的疾病包括抗磷脂综合征、系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等。
通过检测抗磷脂抗体，可以评估患者发生这些疾病的风险，并进行早期干预和治疗。
相关疾病的诊断及治疗抗磷脂抗体谱六项的检测可以帮助医生对相应的疾病进行诊断和评估。
例如，在抗磷脂综合征的诊断过程中，除了临床症状和其他检测指标外，阳性的抗磷脂抗体结果是确诊该疾病的重要依据之一。
对于已经确诊为抗磷脂抗体相关疾病的患者，及早的干预治疗十分重要。
治疗的目标是控制患者的病情进展，减轻症状，并预防相关并发症的发生。
具体的治疗方案可能包括抗炎药物、抗凝血药物、免疫抑制剂等。
治疗应根据患者的具体情况进行个体化选择，并定期随访和评估疗效。
总结抗磷脂抗体谱六项是一种用于评估自身免疫性疾病风险的重要检测方法。
通过检测不同类型的磷脂抗体，可以帮助医生进行相应疾病的早期诊断和治疗。
患者在接受检测和治疗的过程中应密切配合医生的建议，并定期进行随访，以确保疾病得到有效控制。
然而，需要注意的是，抗磷脂抗体谱六项检测结果只是诊断疾病的一个指标，综合临床症状、其他辅助检查结果以及医生的综合判断是确诊疾病的基础。
抗磷脂抗体总结
抗磷脂抗体总结抗磷脂抗体（Antiphospholipid Antibodies, aPL）是一组能与多种含有磷脂结构的抗原物质发生免疫反应的抗体。
自20世纪50年代被发现以来，抗磷脂抗体在医学领域引起了广泛关注。
这类抗体与一系列临床表现相关，统称为抗磷脂综合征（Antiphospholipid Syndrome, APS），这是一种以血栓形成、血小板减少、习惯性自发性流产等为特点的自身免疫性疾病。
本文将对抗磷脂抗体的基本概念、分类、检测方法、临床意义及研究进展进行详细总结。
一、基本概念与分类（一）基本概念抗磷脂抗体是指能与磷脂成分及其结合蛋白发生反应的免疫球蛋白。
磷脂是构成细胞膜的主要成分之一，具有维持细胞结构和功能的重要作用。
当机体产生针对磷脂的抗体时，可能导致细胞膜损伤，进而引发一系列病理生理变化。
（二）分类根据与磷脂结合的特异性，抗磷脂抗体可分为两大类：一类是针对心磷脂（Cardiolipin, CL）和其他带负电荷磷脂的抗体，称为抗心磷脂抗体（Anticardiolipin Antibodies, aCL）；另一类是针对磷脂结合蛋白的抗体，如抗β2-糖蛋白I抗体（Anti-β2-Glycoprotein I Antibodies, anti-β2GPI）。
其中，抗心磷脂抗体是最早发现和研究最为深入的抗磷脂抗体。
二、检测方法（一）实验室检测1. 酶联免疫吸附试验（ELISA）：这是目前最常用的抗磷脂抗体检测方法，具有灵敏度高、特异性好的优点。
通过酶标记的抗人免疫球蛋白与样本中的抗磷脂抗体结合，形成抗原-抗体-酶复合物，进而通过底物显色反应判断抗体水平。
2. 凝集试验：利用磷脂抗原与抗磷脂抗体结合后形成的复合物能激活补体，导致红细胞凝集的原理进行检测。
但此方法操作繁琐，且易受补体活性影响，现已较少使用。
3. 固相放射免疫试验（SPRIA）：利用放射性同位素标记的抗人免疫球蛋白与样本中的抗磷脂抗体结合，通过测定放射性强度判断抗体水平。
抗磷脂抗体谱李萍
抗体： LA血栓综合征：引起静脉血栓 aCL血栓综合征：引起动脉血栓 混合型
¾ 是10-15%血栓性疾病和1/3年轻人群中风的原因
APS的临床表现
反复动静脉血栓形成
• 静脉闭塞：深静脉血栓 肺栓塞 • 动脉闭塞：最常见中风和短暂性脑缺血（TIA）
妊娠并发症
¾ 3次以上连续流产的女性
II-III期正常形态胎儿流产 早期重症先兆子痫 严重胎盘功能不全
普通产检孕妇不需要筛查
aCL
¾ 以牛心肌的乙醇浸出液提取酸性磷脂，用放射免疫或 ELISA测定
¾ 常规aCL检测的抗体包括：
1. 不依赖于β2-GPⅠ的aCL 2. 依赖于β2-GPⅠ的aCL 3. 针对其他磷脂结合蛋白的aCL（凝血酶原、蛋白S和蛋白C等）
aPL的认识历程
¾ 1907年 Wassermann建立梅毒诊断方法 ¾ 1941年 Pangborn 发现心磷脂，发现梅毒血清反应生物学假阳性（ biological false
positive serological test for syphilis, BFP-STS） ¾ 1950年 Moore等发现慢性BFP-STS人群自身免疫性疾病患病率高 ¾ 1952年 Conley和Hertman在BFP-STS 阳性SLE患者血浆中发现有一种特异的抗 凝
¾ 特异性 IgG>IgM>>IgA
¾ SLE50-60%，SSc23%，SS15%，MCTD10%
¾ 自身免疫性疾病 高滴度IgG型aCL， β2–GPⅠ依赖
¾ 非自身免疫性疾病 低滴度IgM型aCL， 非β2–GPⅠ依赖
β2 糖蛋白-Ⅰ(β2-GPⅠ)
¾ 50KD ，血浆中浓度大约200ug/ml ¾ 补体调节蛋白超家族 ¾ 磷脂结合蛋白，可结合多种带负电荷磷
2022抗磷脂综合征诊疗规范(全文)
2022抗磷脂综合征诊疗规范(全文)摘要抗磷脂综合征是一种以反复血管性血栓事件、复发性自然流产、血小板减少等为主要临床表现，伴抗磷脂抗体持续中、高滴度阳性的自身免疫病，其临床表现复杂多样，全身各个系统均可受累。
随着相关研究的不断深入，对抗磷脂综合征的认识与诊治理念已发生显著改变。
现结合临床中的常见问题，借鉴国内外诊治经验和指南的基础上，中华医学会风湿病学分会制定了本规范，旨在规范抗磷脂综合征的诊断方法、风险评估及治疗方案，提高临床医师的认识与理解，从而实现早期诊断、早期干预，最终改善患者预后。
抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome , APS )是一种以反复血管性血栓事件、复发性自然流产、血小板减少等为主要临床表现，伴有抗磷脂抗体谱(antiphospholipid antibodies , aPLs )持续中、高滴度阳性的自身免疫病。
通常分为原发性APS和继发性APS ,后者多继发于系统性红斑狼疮(SLE )、干燥综合征等结缔组织病。
APS 临床表现复杂多样，全身各个系统均可受累，最突出的表现为血管性血栓形成。
APS病因未明，病理特点为非炎性、节段性、阻塞性血管病变。
实际上APS并不少见，有研究显示,年龄小于45岁的不明原因卒中患者中25%的患者aPLs阳性，反复静脉血栓事件患者中14%的患者aPLs阳性，反复妊娠丢失的女性患者中15%~20%的患者aPLs阳性。
由于临床医师对该类疾病认识不足APS的平均延误诊断时间约为2.9 年。
APS通常女性多见，女：男为9 ： 1 ,好发于中青年，原发性APS 与继发于结缔组织病的APS在发病年龄、临床特点等方面无显著差异。
在既往十余年里，随着相关研究不断深入拓展，对APS的认识和诊治理念已发生显著改变。
现结合临床中的常见问题，借鉴国内外诊治经验和指南的基础上，制定了本规范，旨在规范APS的诊断方法、血栓及病理妊娠风险评估与治疗方案，提高临床医师的认识与理解，从而实现早期诊断、早期干预，最终改善患者预后。
第20章-抗磷脂抗体和抗磷脂抗体综合征193-203
第二十章抗磷脂抗体和抗磷脂抗体综合征北京协和医院张奉春磷脂是指分子中含有醇、脂肪酸和磷酸基团的一类化合物。
人体内的磷脂主要是含有甘油醇的甘油磷脂，包括心磷脂，磷脂酰丝氨酸，磷脂酰胆固醇，磷脂酰乙醇胺等组成。
抗磷脂抗体（antiphospholipid antibody，aPLA）是一族针对带负电荷磷脂或带负电荷磷脂与蛋白复合物的异质性抗体。
一些aPLA在体外可以使磷脂依赖的凝血试验时间延长，故可采用凝固法检测，所检测的aPLA称为狼疮抗凝物（1upus anticoagulant，LA）。
抗磷脂抗体综合征（antiphospholipidsyndrome，APS），是一组与抗磷脂抗体有关的自身免疫性疾病，典型的临床表现有动脉静脉血栓、血小板减少以及习惯性流产。
APS患者血中检出aPLA是确立APS诊断的必要条件。
临床上应用最广泛的是抗心磷脂抗体（anticardiolipin antibody，aCLA）和LA。
第一节历史回顾1907年Wassermann将患有先天性梅毒胎儿的肝脏提取物作为抗原检测梅毒患者血清中的抗体，1941年Pangborn证实这种抗原是一种磷脂，将其命名为心磷脂。
后来发现有许多梅毒血清反应阳性的人并没有梅毒，故称此现象为“梅毒血清反应生物学假阳性（BFP-STS）”，与感染性疾病有关者称“急性BFP-STS”，“慢性BFP-STS”指BFP-STS在血中持续存在数月或数年。
1950年Moore等人发现慢性BFP-STS人群中自身免疫性疾病的患病率很高，其中系统性红斑狼疮（SLE）尤为突出，高达33％～44％。
1957年Conley 和Hertman报道了2例BFP-STS阳性SLE患者，在其血浆中发现了一种特异的抗凝物质，Mueller等人也观察到类似的现象，这种抗凝物质也存在于一些非SLE患者中，尽管如此Feinstein和Rapaport仍将此物质命名为狼疮抗凝物（LA）。
抗磷脂抗体检测新指南
1.样本要求: 血清：建议用无溶血和无脂样本，避免样本过热（56℃以上30分钟）。
血浆：厂商需详细说明样本类型，包括使用的抗凝剂。
样本中血小板含量应小于10000/ul。
使用血浆时要考虑抗凝剂所致的稀释作用。
2.aCL及抗β2GP1亚型测定: IgM型及IgG型aCL及抗β2GP1抗体均需测定。
当其它测定均阴性但仍怀疑APS时，需测定IgA型aCL及β2GP1。
3.抗原: aCL：应使用心磷脂+（牛或人）-β2GP1。
抗β2GP1：应使用人源性β2GP1，测定时使用负电荷（高结合力或γ-照射）板。
4.结果定量: aCL：需测定GPL/GML单位，建立范围（低度、中度和高度阳性）。
抗β2GP1：暂无通用的测定单位，建议建立国际或通用测量单位。
5. 标准: 厂商及实验者需选择可靠的标准来准备再次校准（多克隆或单克隆）。
采用已发表的操作步骤，参照首次标准来对比和验证所建议的再次校准。
如有可能，应使用患者的血清进一步确定测定系统的一致性程度。
更重要的是，产品及质控标准应遵从FDA的最佳良好操作规范（GMP, Good Manufacturing Practices）指南或等效的质量保证程序。
需有从推荐标准到任何再次校准的描绘记录。
6. 校准曲线: 需有多点校准、正确的统计拟合及计算方法。
每检测一次，均应有校准曲线。
当测量读数与期望值之间的相关系数小于0.90，不能使用该校准曲线。
7. 精确度: ELISA中，CV（变异系数）应小于0.10。
需多层面（包括低~中滴度阳性界值）评估精确度。
对于商业试剂盒，产品操作手册上应标明预期精度。
8.阳性/阴性对照: 每做一次测定时，至少需一个阳性对照，以监测两次测定间的差异。
理论上，阳性对照值应在试剂盒的低~中滴度界值范围内，以获得推荐的精度值。
阳性对照值还应在测定的线性范围内。
同样，每做一次测定时，需一个阴性对照，阴性对照值应低于界值。
当阴性/阳性对照值落在所设立的范围外时，本次测定应作废。
抗心磷脂抗体
抗心磷脂抗体抗心磷脂是pangborn 1941 年从牛的心肌中分离出来的一种含有抗原性的磷脂，并加以命名，其在哺乳动物心肌中含量最高，每个心磷脂分子包含4 个不饱和的脂肪酸，极易氧化。
抗磷脂综合征(anti-phospholipid syndrome,APS)是指由抗磷脂抗体(APL 抗体)引发的一组临床征象的总称，重要体现为血栓形成，习惯性流产，血小板减少等。
在同一患者可仅有上述一种体现，也可同时有多个体现。
APS 是一种本身免疫性疾病，现在公认的诊疗原则是病人含有下列临床特点之一:全身各脏器动、静脉血栓:复发性流产;胎儿死亡以及由于胎儿宫内窘迫提前分娩致新生儿死亡;本身免疫性血小板减少，上述临床体现同时伴有病人血清中出现 APL 涉及抗心磷脂抗体(ACA)和狼疮凝血因子(LA)。
在临床上由于抗心磷脂抗体的特异性更强，与上述临床体现关系更亲密，因而也称为抗心磷脂综合征(anti-cardiolipin syndrome,ACS)。
APL 是一组对机体带磷脂负电荷的蛋白复合物产生的特异性本身抗体，机体内某些血浆蛋白如β2 糖蛋白(β2-GPI)的分子上带有 ACA 的抗原决定簇，ACA 与β2-GPI 结合后能识别带负电荷的磷脂复合物，并使β2-GPI 的表面构造发生变化而出现被 ACA 识别的表位，β2-GPI 含有克制凝血酶原、克制二磷酸腺苷(ADP)等引发的血小板聚集及其表面生成凝血酶、并阻滞磷脂依赖性凝血反映，当 ACA 与其反映后易形成血栓。
因此，当 ACL 结合到细胞上通过蛋白上的结合磷脂诱发促凝活性，磷脂在 APS 栓塞的发生机理中起到系统性红斑狼疮(SLE)中出现这种综合征时称为继发性抗磷脂综合征，而在非 SLE 患者中出现者称为原发性磷脂综合征。
本综合征涉及血栓栓塞(特别累及中枢神经系统血管),血小板减少和伴有自体免疫性抗磷脂膜构造抗体的流产.体外凝血指标检查成果延长.其作用机制可能涉及抗体诱导的血小板被激活和过敏产生富含磷脂酰丝氨酸的促凝物质表面和血小板减少症.ACA 是抗磷脂抗体(antiphospholipikantibodies，APA)的成分之一。
抗磷脂抗体
原发性APS的分类标准（1988，Asherson）
临床表现：①静脉血栓；②动脉血栓； ③习惯性流产；④血小板减少 实验室指标: ①IgG APL（中/高水平） ②IgM APL（中/高水平） ③LA阳性 诊断条件：①满足1条临床指标加1条实验室 指标 ②APL阳性2次，其间隔 >3个月 ③随访5年以排除SLE或其他疾病
SLE伴有血栓形成的病人中常有LA/ACL（+） 但有LA/ACL（+）者并非都发生血栓形成
妊娠失败
可发生在妊娠的任何阶段 常出现于妊娠的第2、3阶段
流产：妊28周前妊娠终止，胎儿不足1000克
在APS的瓣膜切片上可见瓣膜内皮下有 ACL和抗C3抗体沉积 Lupus 1996,Jun;5(3):196 Clin Exp Rheumatol 1999,Jan-Feb;17(1):99
Alarcon-Segovia 等对APS的诊断标准（1989）
肯定的诊断 1．有2个或2个以上的下列临床表现： （1）复发性自发性流产 （2）静脉血栓 （3）动脉闭塞 （4）下肢溃疡 （5）网状青斑 （6）溶血性贫血 （7）血小板减少 2．伴有高水平的APL抗体（IgG和IgM，>5SD) 可能的诊断 1个临床表现和高滴度的APL，或≥2种临床 表现和低滴度的APL抗体（IgG和IgM, 2-5SD)
ACL与非风湿病的
Leder AN, etal : APS induced by HIV (Lupus,
2001,10(5):370)
Ordi-RosJ: 243例HCV感染患者: 3.3%ACL
恶性肿瘤: 髓系白血病 68%, 低/中滴度阳性
(Lossos IS, Am J Hematol, 1998,57(2):139) -------ACL与血栓形成等临床表现无关
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APS的临床表现 师分会 • 动静脉血栓
颈内静脉血栓形成
科医 • 静脉闭塞：深静脉血栓 肺栓塞
疫 • 动脉闭塞：最常见中风和短暂性脑缺血（TIA） 风湿免 • 妊娠并发症
阴性
阳性
阳性
阴性
12周后复查
无APS/血清学 阴性的APS
阳性 诊断APS
无APS/血清学 诊断APS 阴性的APS
aPL检测的注意事项医师分会 • 异质性抗体，多种aPL之间会发 疫科 生交叉反应
• 高滴度、IgG型、多种aPL同时 存在与APS 的相关性高
师协会风湿免 4
医 LA
(7.5%)
β2GP1
中国医师协抗会磷风脂湿抗免体疫谱科医师分会
北京协和医院风湿免疫科
中国医师协会20风14张年湿蜀3 免月澜1疫5日科医师分会
中国医师协会风湿免疫科医师分会 概述 • 磷脂： 分子中含有醇、脂肪酸和磷酸基团的一类化合物，包括心 磷脂、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰胆固醇和磷脂酰乙醇胺等。 是血小板以及其他血细胞细胞膜的脂质双分子层的主要成 分。
国内质控回报结果统计
抗磷脂抗体检测中存在的挑战
中• 国缺乏医适合师每个协实验会室自风身的湿参考免范围疫科医师分会
中国医师协会风湿免疫科医师分会 因此每个实验室应该结合本实验室使用的试剂，仪器 在健康人群的基础上建立适合本实验室的cut-off值。 B Montaruli1, E De Luna etc. Lupus (2012) 21, 799–801
抗磷脂抗体检测策略
中国医师协会风湿免疫科医师分会 APS疑似病例
aCL, aβ2-GPI IgG, IgM/LAC或抗磷脂抗体谱筛查
阴性
其他抗磷脂抗体 Prothrombin、 Annexin V、
抗磷脂抗体谱
阳性
临界值
12周后复查
Laminin
临界值
中国医师协会风湿免疫科医师分会 阳性 流产风险升高
中国医师协会风湿免疫科医师分会 • 试验条件对检测结果的影响 温度：随温度增高，检出率下降，最优温度为25°C 摇床：孵育过程中使用摇床震荡可提高检出率 离子强度（样本稀释）：随离子强度增高，检出率下降 类风湿因子的干扰
中国医师协会风湿免疫科医师分会 抗磷脂抗体检测中存在的挑战 • aPL与相关疾病认识有限 IgA型aPLs的临床价值？ 其他aPLs的临床价值？ 扩大aPLs的筛查，减少不典型症状患者的漏诊？
1941年 发
1954年 首次
1983年
1990年 证 2006年
现梅毒血清 报道凝血时间
抗心磷脂 实凝血酶
β2–GPⅠ
1976 1983 1984 1985 1986 1987 1988 1989 1990 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013
国际血栓和止血协会狼疮抗凝物/磷脂依赖性抗体学术分会建议标准检测步骤：
筛选试验
混合试验
中国医师协会风湿免疫科医师分会 异常 APTT 正常
不能纠正
乏血小板血浆
过量磷脂或血小板
纠正 确证LA
纠正
不能纠正
dRVVT
正常 排除LA
凝血因子或其他 凝血抑制物检测
其他凝血抑制物检测
LA的检测应采用两种方法，包括筛选试验 和确证试验，并在此的基础上进行纠正试验
瓣膜损伤
协会 • 难治性流产：APS是引起90%难治性流产的原因
医师 • 胎盘功能不全、早发型子痫
布加氏综合症
中国 • IUGR——胎儿宫内发育迟缓
中风 肺栓塞 肾脏微血管病
• 血小板减少
异常妊娠
• 神经系统症状
中国医师协会风湿免疫科医师分会 • 偏头痛、舞蹈病、癫痫、吉兰巴雷综合征
• 血清aPL持续阳性
中国医师协会风湿免疫科医师分会 • 抗磷脂抗体，Antiphospholipid antibodies (aPLs)： 一组针对带负电荷磷脂或带负电荷磷脂与蛋白复合物的异 质性抗体。 ¾ 多数的抗磷脂抗体都不与磷脂直接反应
¾ 多数抗磷脂抗体识别的是磷脂结合蛋白 β2–GPI、凝血酶原等
aPLs的认识历程
¾中到高滴度（>40 GPL或MPL，
妊娠异常 一次或多次
或滴度>99%可信限） ¾ ≥ 2次
中国医师协会风湿免疫科医师分会 a) 不明原因胎儿死亡 ≥10周 b) 子痫、先兆子痫或胎盘功能不全 所致胎儿早产 ≤34周
¾ 间隔12周
c) ≥3次不明原因连续自发流产 ＜10 周
确诊APS: 1 项临床指标 + 1项实验室指标
aPL实验室检查的适应症
中国医师协会风湿免疫科医师分会 • 所有的 SLE 患者,监测血栓及高凝状态 • 3次以上连续流产的女性
II-III期正常形态胎儿流产 早期重症先兆子痫
普通产检孕妇不需要筛查
严重胎盘功能不全
• 自发性静脉血栓及反复发作者
中国医师协会风湿免疫科医师分会 • 频发性心动过速（即使存在其他危险因素） • 50岁以下人群中风或周围动脉闭塞事件 • 无其它危险因素的年龄较大的动脉栓塞者
中• 国不同医实验抗师室磷，协不脂同抗会方体法风学检间湿测的中检免测存一疫在致的性科差挑异医战较师大 分会
中国医师协会风湿免疫科医师分会 变异系数 LA dRVVT aCL
< 10-20 % 40-200 %
结果来自RCPA Haematology QAP
E. Favaloro, International journal of laboratory hematology (2013) 35, 269-74.
血小板凝集 血管收缩
血小板活化
TxA2
血小板聚集
aPLs的临床意义 师分会 • 原发性抗磷脂综合征 疫科医 • 继发性抗磷脂综合征
湿免 自身免疫性疾病 会风 SLE；RA；SS；硬皮病；血管炎；糖尿病；克罗恩病 国医师协 • 50% APS患者合并SLE 中• 40% SLE患者aPLs阳性，10-20% 合并APS
• 正常人
低滴度aPLs 10%； 中－高滴度aPLs 1%
中国医师协会风湿免疫科医师分会 抗磷脂抗体综合征 (APS) • 一组由APL介导的，以动静脉血栓形成为特征的非器官特异的自身免 疫性疾病，又称休氏综合征（Hughes’s syndrome）。
• 病源病因分类： • 原发性APS • 继发性APS SLE 10‐20% RA
中国医师协会风湿免疫科医师分会 2 (10.5%)
0 M
1 (5.3%)
16 (21.9%) 0 (50%)
5 (15.6%) M
实验数据来自本实验室
中国医师协会风湿免疫科医师分会 中国医师协会风湿免疫科医师分会
抗磷脂抗体检测中存在的挑战
中国医师协会风湿免疫科医师分会 • 亟需进一步规范实验操作 • 外部质控品的使用： 国际标准品（HCAL、EY2C9） 实验室自制质控品（阳性混和血清，阳性值位于标准曲线上升区临界 值附近)
中国医师协会风湿免疫科医师分会 • 抗蛋白S抗体 (Anti-PS) • 抗蛋白C抗体 (Anti-PC) • 抗钙依赖性膜磷脂结合蛋白V抗体 (Anti-Annexin V) ……
狼疮抗凝物 LA 医师分会 • 具有体外抗凝活性的一组异质性抗体 免疫科 • 靶抗原：血浆蛋白阴离子磷脂 会风湿 • 主要由抗β2–GPⅠ抗体和aPT引起 中国医师协 • LA 与血栓形成、病态妊娠以及SLE患者中血栓症的相关性强于aCL
中国医师协会风湿免疫科医师分会 抗磷脂抗体谱 • 抗心磷脂抗体 (Anti-cardiolipin antibody, aCL) • 抗β2–糖蛋白Ⅰ抗体 (aβ2–GPⅠ) • 狼疮抗凝物 (Lupus anticoagulant, LA) • 抗凝血酶原抗体 (Anti-prothrombin antibody, aPT) • 抗磷脂酰丝氨酸抗体 (Anti-phosphatidylserine)
惯 性
对滋养层的细胞毒性
流
产
胎盘组
织
血
栓
aPLs
形
IgG类抗体作用于 胚胎血管内皮细胞
炎症反应
胎盘组织
胎盘抗凝蛋白
胎盘局部抗凝能力
成
内皮细
胞
凝血级联系统
抗凝
蛋白C、蛋白S、
纤溶
中国医师协会风湿免疫科医师分会 PGl2
粘附分子受体 组织因子
血栓调解蛋白、抗 凝血酶 III、 β2GPⅠ
血小板凝集 血管舒张
凝血因子异常; 其他凝血抑制物
中国医师协会风湿免疫科医师分会 抗心磷脂抗体，aCL
• 常规aCL检测的抗体包括
•
依赖于β2-GPⅠ的aCL
•
不依赖于β2-GPⅠ的aCL
• 针对其他磷脂结合蛋白的aCL
（凝血酶原、蛋白S和蛋白C等） 自身免疫性疾病 高滴度IgG型aCL β2–GPⅠ依赖
中国医师协会风湿免疫科医师分会 非自身免疫性疾病低滴度IgM型aCL 非β2–GPⅠ依赖
中国医师协会风湿免疫科医师分会 反应的靶抗 延长与异常妊
抗体检测 原是aPL的 抗体检测
原为心磷脂 娠相关
方法建立 另一靶抗
被纳入诊
原
断标准
600
500
400
300
200
100
0
De Laat B et al. Nat Clin Pract Rheumatol. 2008.