项目十二尿液分析仪检验

影像式尿沉渣分析仪
• 结合了流式细胞分析 技术和粒子成像分析 技术 • 捕获所有颗粒的影像 并数字化 • 分析系统分类12种有 形成分 • 可以和全自动尿液分 析仪或其他设备组合 使用
• 组成 – 显微镜 – 高速摄像 – 数字相机 – 图像采集 – 电脑软件
• 参数 – 红细胞、白细胞、 白细胞簇、透明管 型、非分类的管型、 鳞状上皮细胞、非 鳞状上皮细胞、细 菌、酵母样菌、结 晶体、粘液丝、精 子
• 死亡白细胞， Fsc较弱而 FI强 • 白细胞前向散射光（FSC) 强,前向荧光（FI）弱， 急性感染；否则FSC弱， FI强慢性感染。 • 利用WBC-MFsc来判别白细 胞状态，结合白细胞定量 判断急性还是慢性感染:
• 当其WBC-MFsc≥73.3时,可初步诊 断为急性尿路感染;当其WBC-MFsc ≤ 38.1时,可初步诊断为慢性尿路 感染,并可指导临床用药 • 影响：上皮细胞、真菌、滴虫、脂 肪滴等，使白细胞增加
• 上皮细胞：均有细胞核,主要分布在 Fscw-Flw散点图左上角 • 管型：透明管型有极高的Fscw 和低 的FLW;病理性管型含有其他内容物， 有较高的Fscw和较高的FLW
FSCW
FSC
• 酵母细胞和精子：较高的FI， Fsc在红细胞和白细胞之间;酵母 的FSCW较精子的小,将其区分开 来
• 结晶出现在红细胞区域,草酸盐 更靠近FSC,尿酸盐和红细胞分不 清
FSCW
FSC
红细胞
• 80%的红细胞Fsc≦84ch,称为 非均一性血尿 • 80%的红细胞Fsc≥126ch,称 为均一性血尿 • 介于两者之间，混合性血尿 • 结晶、真菌、结晶增多影响 结果 • 血尿伴菌尿，尿渗量 ≤700mOsm/L,PH ≧7.0或放 置时间过长，导致改变
白细胞
• 存活的白细胞，Fsc较强 而FI弱
临床应用
方法学评价
• 不需离心尿样，自动 进样 • 所需标本量少 • 工作效率高， 50~100/h，并报告多 个参数，且可定量 • 采集信息量大，标本 9μl,相当于50个高倍镜 视野，粒子总数 0~4000，明显高于手 工镜检
• 有形成分不能确认， 需离心显微镜区分 • 应用时间短，经验不 足，未建立公认的参 考值 • 不能替代传统尿沉渣 • 操作程序统一，易于 标准化和质量控制
方法比较---尿干化学法
• 优点：①标本用量少；②
速度快；③项目多；④重 • 测定蛋白以白蛋白为主， 故不适于肾病患者 • 易受药物、外源性物质
复性好、⑤准确性高；⑥
适用大批量标本筛查 • 缺点 • 不能替代对病理性标本的 显微镜检查，对白细胞、 管型和结晶的检查属于间 接检查
或人为因素影响，出现
主要内容
• 干化学尿液分析仪试剂
带检测原理 • 干化学尿液分析仪检验 的干扰因素及质量控制 • 干化学尿液分析仪检验
的临床应用
历史回顾
• 16世纪：英国物理学家 Robert Boyle发明石蕊试 纸，用于测定溶液pH • 1937年：费格尔利用“蛋 白质误差（protein error）原理，首次发明
检测参数
• 8项:PH、PRO、GLU、 • 肾病四联试带：PH、 PRO、ERY、SG KET、BIL 、URO、
ERY、NIT • 9项：增加WBC • 10项：SG • 11项：Vit C • 糖尿病五联试带： PH 、PRO 、GLU、 KET 、SG • 肝病二联试带： BIL、URO
尿白细胞
6. 白细胞和红细胞≤10/μl、 亚硝酸盐和蛋白阴性，可 以使用干化学过筛而不进 行镜检
注意事项
• 只要完全符合以下条件的可不进行显微镜 检查。
1.白细胞结果为阴性 2.亚硝酸盐为阴性尿 3.蛋白为阴性 4.尿红细胞检查≤10/μl 5.排除药物及其它因素的干扰
尿中白细胞试带法与镜检结果比较
试带法白细胞（-）
的塑料片为支持体
与尿液所测定物质发生化学 反应
• 第三层是固有试剂的吸水层，
可使尿液均匀，快速地浸入， 并能抑制尿液流到相邻反应 区
干化学检测原理
• 不同型号尿干化学分析
仪使用配套的专用试带 • 各试剂模块与尿中被测 成分的反应呈现不同的 颜色变化，颜色的深浅
与尿中相应物质呈正比
• 空白块，固定块作用
• 荧光强度（FI):反映细 胞染色质强度 • 前向荧光脉冲宽度 （FLW）：主要反映染色 质长度 • 前向散射光强度（Fsc）： 成比例反映细胞大小 • 前向散射光脉冲宽度 （Fscw):反映细胞长度 • 定量参数 • WBC/μl、RBC/ μl 、 EC/ μl 、CAST/ μl 、 BACT/ μl 、 conductivity • 标记参数
世 • 1980年:具有自动进样，点 滴，试带传输和打印功能的 全自动尿干化学分析仪问世
历史回顾---中国
• 1966年：北京协和医院检验 科生产出12种用于测定尿液 中化学成分的试纸，包括尿 蛋白、尿糖、酮体、胆红素、 pH、潜血等项目 • 1980年，北京协和医院与美 国Ames公司签订双方协作计 划，首次从美国引进一批自
• 在碱性环境中不稳定，标本
要新鲜，及时测定，防止被 细菌破坏
• 只对左旋抗坏血酸反应 • PH>4.0时，内源性酚和巯基 化合物如半胱氨酸、硫代硫 酸钠使结果偏高
• 着重反映饮食VC含量，反映 体内VC营养状况，VC低见于 摄入不足或抗坏血酸病，长 期增高与结石形成有关 • 维生素C含量的高低对血红蛋 白、葡萄糖、胆红素、尿胆 原、亚硝酸盐及白细胞产生 负干扰 • 尤其注意酮体阳性，葡萄糖 阴性或葡萄糖干化学和班氏 结果不一致时
8项目半自动尿液干化学分析仪 中级医刊，1966年特刊
动化和半自动化检验设备
近代尿液分析仪
• 1985年，国内不少厂家如桂
林医疗电子仪器厂等引进日 本京都第一化学或日本荣研 化学的技术，生产8项的干 化学试带生产线
• 然后还引进了MA-4210等型 号的尿液分析仪
分 析 仪
MA-4210
尿 液 化 学
• 爱科来AUTION MAX AX-4280全自动尿干化学分析仪和iQ-200尿液有形 成分分析仪连接运行
尿干化学试带结构及组成
试带构成
• 第一层尼龙膜起保护作用， 防止大分子物质的污染 • 第二层绒制层，包括碘酸盐 层和试剂层，碘酸盐层可破 坏Vitc等干扰物质，试剂层 • 第四层选取尿液不浸润
注意事项
4. 尿液标本应新鲜，尿液在 膀胱时间过长，或标本存 储时间过长，引起白细胞 破坏，导致干化学阳性， 镜检阴性的假阳性出现 5. 综合酯酶、亚硝酸盐、镜 检、结合临床分析结果
• 镜检标准
– 肾科及泌尿系病人 – 以镜检作为诊断或疗效 依据的，如结石、结晶、 肿瘤 – 尿液外观异常时 – 依据医师指定要求做沉 渣镜检的标本。
• Path CAST、SRC、YLC、 X´TAL、SPERM等
• 红细胞、白细胞
• isomorphic RBC、 dysmorphic RBC、Non-
• 红细胞：FI极低,Fsc大小不均 • 白细胞：FI大, Fsc较红细胞大
• 细菌：FSC比白细胞和红细胞小,FI比 红细胞大,比白细胞小
• 中性粒细胞见于急性炎症
• 淋巴细胞、单核细胞见于肾 移植、慢性炎症、新月形肾 小球肾炎、抗癌药物引起的 间质性肾炎 • 嗜酸性细胞见于过敏性炎
物污染
Vit C
概述
• 人、灵长类和豚鼠不能合 成 • VC的阈值14mg/L • 模式
• 左旋抗坏血酸
• 左旋脱氢抗坏血酸 • 测定方法 • 同时测定：二硝基苯肼 比色法和高效液相色谱 法 • 测定左旋抗坏血酸：干 化学法和二氯靛酚蓝
试剂带要求
• 一定要在失效期内
• 避光、防潮、干燥保存 • 使用时一次只取出所需 要的试剂带，并立即盖 紧，多余试剂带不可放 回容器内 • 打开盖子后不能再放冰 箱
• 不可合并各瓶中的试
剂带。 • 不可触摸试剂带上各 反应检测块。
质量控制
• 操作严格、
规范、正确 • 2种浓度质控 液
临床应用
假阳性或假阴性
来自百度文库
• 亚硝酸盐只能检查出有
硝酸盐还原酶的细菌 • 多联试带保存和使用要 求高
筛查的目的
• 检出异常标本和排除健康标
本， • 特别是避免假阴性。 • 对假阳性可通过镜检进一步 排除
质量控制
• 标本必须新鲜，最好2小时内完成，过久影响结果 • 避免混入阴道分泌物混入尿标本，否则，引起白 细胞假阳性 • 了解病人饮食及用药情况
了测定尿蛋白的一种单颜 色反应，此发明奠定了以 后发展浸入即读（Dipand-Read）干化学试带的 基础
历史回顾
• 1956年：联合尿糖、蛋白、 pH等的多联试纸问世，从3-4 个项目组合到九十年代的尿 液10项干化学试带，已经达 到比较理想的境地 • 1970年起，用于判读尿试带 颜色变化的半自动化仪器问
镜检白细 胞（-）
试带法白细胞（+）
白细胞破坏、标本久置、 低渗尿、高pH尿、漏检 白细胞 （+）
正常标本
镜检白细 试带失效、高渗尿、抗 胞（+） 生素、错误识别：滴虫、
鳞状上皮裸核型，排斥 等
临床意义
• 白细胞增多主要见于泌尿系
炎症
• 肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎、 前列腺炎，肾小球肾炎
症、变态反应引起的泌尿 系炎症 • 急性肾小管坏死，可见 单核细胞减少或消失 • 女性生殖系统炎症分泌
学习目标
• 了解尿液干化学分析仪发展史、结构及检测
原理 • 掌握尿液干化学检验中各项目的原理、方法 • 重点掌握尿液干化学检验中的注意事项及临
床意义
• 掌握干化学检查过程中应注意的问题
现代尿液分析仪类型
• 干化学分析仪检验 • 全自动尿沉渣分析仪
• 流式细胞术分析仪
• 影像式尿沉渣
尿干化学试带测试原理、临床 应用级及质量控制
半胱氨酸
比色法测定VC
• 使用活性碳将抗坏血酸氧化成氧化型，与2，4-二 硝基苯肼结合成红色脎，脎溶解于硫酸，比色
尿干化学检测的原理
蛋白质（白蛋白） 葡萄糖 血液（血红蛋白） 尿胆原 胆红素 酮体（乙酰乙酸/丙酮） 亚硝酸盐（菌尿） 白细胞酯酶 pH 比密 肌酐 抗坏血酸 pH 指示剂（与指示剂非特异性结合） 葡萄糖氧化酶/过氧化物酶/色原 血红蛋白血红素的类过氧化物酶活性 Ehrlich 醛反应或与重氮盐的重氮反应 重氮盐的重氮反应 硝普盐反应（Legal 试验） Griess 试验检测亚硝酸盐（重氮染料） 吲哚酚酯酶活性（中性粒细胞和巨噬细胞） 两种指示剂染料 试带上多聚电解质和尿中溶质离子反应 与铜复合物氧化反应 吲哚染料还原反应
全自动尿沉渣分析仪
种类
• 流式细胞术尿沉渣分析仪
• 流式细胞术尿沉渣分析仪 • 流式细胞计数仪原理和 电阻抗相结合 • 影像式尿沉渣分析系统 • 流式细胞分析技术和粒 子成像分析技术
影像式尿沉渣分析仪
流式细胞术尿沉渣分析仪
• 光学检测系统 • 液压系统 • 电阻抗检测系 统 • 电子系统
参数
测定原理
• 模块成分 – 吲哚酚酯 – 重氮盐
• 粒细胞胞含有酯酶，先与 试纸带吲哚酚酯反应作用 生成吲哚酚，再与重氮盐 氧化缩合生成紫色缩合物
• 其颜色深浅与细胞多少呈
比例关系
注意事项
1. 本法主要检测粒细胞酯酶， 不与淋巴细胞反应 2. 尿中含福尔马林、呋喃坦啶、 大量胆红素可致假阳性 3. 高比重尿、高蛋白（5g/L)、 VC、尿中含头孢霉素、庆大 霉素、四环素以及硼酸、草 酸可致假阴性
• 进入上世纪90年代以后，尿 液干化学分析仪器和试带已 经扩展为10项至11项
近代尿液分析仪
Clinitek 500型半自动尿液干化学分析仪 •Roche 2400全自动尿液干化学分析系统
近代尿液分析仪
动 尿 液 干 化 学 分 析全 仪自 Clinitek Atlas 干迪 化瑞 学 分 析全 仪自 动 尿 液 H800
• 通过消化道需能吸收
• 通过尿液排出，其重吸收 机制和葡萄糖基本一致
• 摄入45mg/L,血液中6mg/L
检测原理
• 模块组成：2,6-二氯靛酚钠、中性红、亚甲基绿磷酸二氢 钠、磷酸氢二钠 • VC含有1，2-烯二醇，在酸性条件使氧化态粉红色2,6-二 氯靛酚还原为无色的2，6-二氯二对酚胺
注意事项
谢 谢