血清总胆固醇(TCH)测定

授课对象：06级检验1-5班 课 时：2学时
血清总胆固醇（TCH ）测定
目 标：1.掌握酶法测血清TCH 的基本原理及注意事项。

2.熟练操作步骤。

3.了解TCH 测定的主要临床意义。

实验用品：总胆固醇酶试剂盒（3v ），，721型分光光度计，YZ-602稀释器，血
清等。

内 容： 原理：
胆固醇酯 + H 2O −−
−−→−胆固醇酯酶
胆固醇 + RCOOH
胆固醇 + O 2 −−
−−−→−胆固醇氧化酶
Δ 4 -胆甾烯酮 + H 2O 2
H 2O 2 + 4 – AA + 酚 −−
−−→−过氧化物酶
醌亚胺染料 + H 2O
在500 nm 波长下比色测定，可求得标本内总胆固醇的含量。

操作步骤：
加入物 R S B 血清（μl ） 15 — 标准液(μl) — 15 — 蒸馏水 — — 15 酶工作液(ml)
1.5
1.5
1.5
混匀，置37℃水浴6～10分钟。

以B 管校“0”，500 nm 波长比色，取A 值。

结果计算：
TCH (mmol/L) = A R / A S × 5.17
结果报告：
TCH：mmol/L
正常参考值： 2.33～5 .69mmol/L
临床意义：
TCH↑：常见于动脉粥样硬化等。

TCH↓：甲亢、严重贫血、急性感染等。

注意事项：
1.试剂与样品的用量可按其比例放大缩小，计算公式不变。

2.溶血标本胆红素引起正偏差，维生素C、谷胱甘肽、氟化物引起负偏差。

3.样品中的总胆固醇＞15.5mmol/L, 用生理盐水稀释后再重新测定，结果乘以稀释倍数。

课后小结：。