家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的

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在体实验
实验步骤
麻醉和固定：称重，计算麻药计量（4ml/kg的25%氨基甲酸 乙酯），耳缘静脉麻醉，鉴别后固定于兔台上。
腹部手术：腹部剪毛、自剑突下沿腹部正中线切开腹壁 （10cm）。打开腹腔，暴露胃肠道并寻找小肠。用皮钳夹 住两侧腹壁并提起形成皮兜。
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实验结果分析
• 加入HCl溶液可见小肠平滑肌收缩的幅度减小，基线下移， 频率较慢。 可能是氢离子与钙有竞争作用，氢离子增加，使钙与肠 肌细胞的钙调素（Ca-M）结合少，而使肠肌细胞的收缩力 下降。
➢ 加入氢氧化钠：小肠平滑肌收缩的幅度增大，基线上移。 氢氧离子中和氢离子，从而削弱了氢离子与钙离子的竞
家兔小肠平滑肌实验 小肠运动形式的观察
主讲教师：郑衍芳 王明晓 技术支持：蔡仕宁
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离体组织灌流方法(了解)
保证离体器官存活的条件：
1.温度 2.营养 3.PH 4.酸碱度 5.渗透压 …..
目前的离体灌流组织应用：
1. 家兔
离体小肠
2. 大鼠、小鼠
离体子宫
3. 大鼠
离体动脉条
4.豚鼠
离体气管条
指肠段的平滑肌？
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实验结果分析
25℃
NA Ach HCl NaOH
正 常
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钙氯 化
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实验结果分析
加入乙酰胆碱，可见收缩的幅度上升，基线抬高，频率加快。 消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是钙内流，
ACh--M受体结合，使钙通道开放，使肌浆中的钙升高，进 而激活肌纤蛋白-肌凝蛋白-ATP系统，使平滑肌收缩，肌 张力增加。故乙酰胆碱对小肠运动有加强作用。
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实验原理和背景知识
紧张性收缩 小小肠肠运的动运受动到形神式经和分蠕体节动液运的动调节
➢ 体液调节:胃肠激移素行如性胃复泌合素运、动缩（胆M囊M素C、）促胰液素等
➢ 神经调节:
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实验目的
学习哺乳动物类离体小肠平滑肌的制备方法。 观察某些因素（温度、pH值、药物）对小肠平滑肌
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实验结果分析
加入去甲肾上腺素可见收缩的幅度小，基线下移，频率较慢。 消化道平滑肌细胞上有α β两种受体，NA可作用于α
受体，使肌膜及肌质网上的钾离子通道开放，钾的外流增 加，使膜发生超极化，肠肌兴奋性下降，肌张力下降。同 时，NA还作用于β受体，使肠肌膜细胞中的cAMP合成增 加，肌膜及肌质网上钙外流增加，也使肌张力下降。
取出肠段置于室温台氏液中轻轻漂洗，去除当肠内容物，将肠管分 成数段，每段长2-3cm，两端各用系好线的蛙心夹夹住。
将离体平滑肌连接于设定温度好温度（38℃）恒温平滑肌槽、张立 换能器（书图7-1,p121）上。打开电脑和生物信号采集系统。
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张力换能器
浴槽 蛙心夹
小肠段
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观察项目
离体实验： 乙酰胆碱的作用：浴槽内加入0.001%的乙酰胆碱溶液2-4滴，
观察平滑肌的反应（观察后立即冲洗和更换台氏液）。 去甲肾上腺素的作用：浴槽内加入0.001%的去甲肾上腺素溶
液2-4滴，观察平滑肌的反应（观察后立即冲洗和更换台 氏液）。 观察温度的影响：分别加入室温台式液、25℃台式液，观察 平滑肌的反应。
5.蟾蜍、蛙、大鼠 离体心脏
………...
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实验原理
消化道平滑肌的一般生理特性： 收缩迟缓：舒缩运动≥ 20S/次。 富有伸展性：伸长可达原来长度2—3倍。 紧张性：常保持一种微弱的持续收缩状态。 节律性收缩：离体后于合适环境中仍能节律性收缩。 对电刺激不敏感，对化学、机械等刺激敏感。
小肠平滑肌也具有上述生理特性。
争作用，使钙调素与钙离子结合数量增多所至。
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实验结果分析
加入氯化钙溶液可见小肠平滑肌收缩的幅度增加，基线抬高， 频率加快。
观察：①正常小肠的运动形式；②局部滴加乙酰胆碱后小肠 的运动形式；③局部滴加去甲肾上腺素后小肠的运动形式。
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离体实验
实验方法
家兔一只，处死后迅速行腹部手术。
找出胃幽门与十二指肠交界处，由此取长20—30cm的肠管，不留肠 系膜。
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注意事项
1.实验过程中必须保证标本的供氧(通气)及浴槽内台氏液的恒温(38℃)。 2.灌流浴槽内的液面高度应保持恒定。 3.放大器零点调好后不要再移动旋钮，以免影响基线。 上述各药液加入的量系参考数据，效果不明显者可以添加。 4.每次实验效果明显后立即放掉含药液的台氏液，并冲洗多次，以免平滑肌
舒缩活动的影响。 观察哺乳动物小肠的运动形式以及神经和某些药物
对其运动的影响。 掌握消化道平滑肌的一般生理特性。
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实验材料
动物：家兔 药品：25%氨基甲酸乙酯、台氏液、1mol/L 盐酸溶液、
1mol/L NaOH溶液、0.001%乙酰胆碱溶液、 0.001%去甲肾上腺素溶液、1%氯化钙溶液 器材：恒温平滑肌实验装置、生物信号采集系统、张力换 能器、计算机、兔台及手术器械
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离体小肠收缩曲线代表意义
收缩曲线：---上升支 舒张曲线：---下降支 基线上移：紧张性升高 基线下降：紧张性下降 幅度增加：收缩力增强 幅度减低：收缩力减弱 波峰间距：代表收缩频率
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实验步骤
离体实验： 观察离体小肠平滑肌的正常波形 观察pH 值对小肠平滑肌的作用： 浴 槽 内 加 1mol/L HCI 溶 液 2-4 滴 ， 观 察 平 滑 肌 的 反 应 （观察后立即冲洗和更换台氏液）。
出现不可逆反应。 5.每项处理必须有处理标记。
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思考题
胃肠平滑肌有哪些运动形式以及生理特性 本实验药品对小肠平滑肌的作用效果及其机制。 取肠时为什么采用击昏家兔而不用在麻醉下进行? 要保持小肠平滑肌较好的活性，实验过程中要注意什么？ 制备小肠平滑肌标本时，为什么要取小肠上段，尤其是十二