实验十-传出神经系统药物对离体家兔肠管平滑肌

传出神经系统药物对家兔离体肠管平滑肌的影响

实验目的

1、掌握离体平滑肌的实验方法。

2、观察传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用

教学时数2学时

实验原理

一、离体实验

1、所用组织：心脏、膀胱、子宫、气管、肺、肠等均可用于离体实验

2、特点：实验条件易于控制、操作简便、结果准确、节省时间，可进行大量

药物的筛选。

3、要求：离体实验需在一定生理环境下进行，模拟体内环境。

（1）温度：38±0.5℃

（2）通氧气：1－2气泡/s

（3）营养液：含有一定离子和葡萄糖的溶液，不同的组织所选用的营养液不同。

二、离体肠管实验

1、肠管的选择：根据实验目的的不同进行选择

（1）小肠：十二指肠、空肠、回肠

（2）自律性：频率较慢，起博点位于十二指肠，自律性自上而下渐弱。

（3）空肠多做定性实验，回肠多做定量实验

2、肠内受体及作用原理

（1）受体：家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。

（2）作用：α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张；M受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。

（3）药品对受体的作用：

1、氯化乙酰胆碱（Ach）：M受体激动剂，乙酰胆碱可兴奋M受体，使小肠收缩幅度

增加，蠕动加强。

2、阿托品(Atro)：M受体阻断药，为竞争性拮抗剂，单独用药对肠管无作用，可阻断

M受体，对抗乙酰胆碱的M样作用，使肠管收缩幅度降低。

3、肾上腺素(Ad)：α、β受体激动剂，可激活α、β受体（主要是β2受体），α、β

受体激动可产生与M受体激动相反的效应，表现为肠管舒张，小肠蠕动减弱。

4、氯化钙（Bacl2）：①Ba2+进入细胞与钙调蛋白结合，使平滑肌收缩，②Ba2+可使细

胞膜发生去极化。所以加入Bacl2肠管会发生强直性收缩，Bacl2并非作用于受体，所以阿托品不能对抗这一作用。

实验材料

1．动物：家兔

2．药品①5X10-4氯化乙酰胆碱

②0.5％硫酸阿托品

③0.1%盐酸肾上腺素

④20％BaCL2

3、器材：RM6240多媒体化生物信号记录分析系统、PC80586计算机、张

力传感器、保温式麦氏浴槽、超级恒温水浴、“L”型通气钩、高位吊瓶、量

筒、烧杯、培养器、氧气瓶、外科剪刀、眼科剪刀、眼科镊子、缝衣针、棉线、注射器、台式营养器。

实验方法

一、首先调试RM6240系统，使进入肌张力测定状态．

1．在主菜单中用鼠标选择<实验>中的<消化>，选择系统显示<平滑肌生理特性>。

2．在界面右侧控制参数区选择<张力>,〈选择3g〉,扫描速度1.0s/div,确定信号输入，选择〈通道2〉，在工具菜单选择快速归零（空载时钩上无任何东西）。

3．在主菜单中选择〈示波〉，进入示波状态。

4．在主菜单中工具栏选择〈网格切换〉对背景网格进行切换为细格，并在选项中选择波形颜色红色。

此时肌张力测试调试完毕。

二、调节仪器：

将超级恒温水浴温度调至38.5±0.5℃，向麦氏浴槽中加30ml台氏液，通

入氧气(1～2个气泡／秒)并制备家兔肠管标本。

三、正式试验：

将肠管标本两端用缝针各穿一线，一端打一空结(约lcm小套)，另一端穿

上长线打结，用眼科镊钳住空结固定于通气钩上，放入麦氏浴槽中，将另端长

线的尽端打一空结，挂在张力换能器的小钩上，调节换能器高度，使前负荷为1

g，稳定标本20分钟。

在主菜单下按键选择〈记录状态〉，先描记一段正常曲线，然后按下列顺序给药。

①向麦氏浴槽内加入5X10-4MAch0.2ml同时用标记框在屏幕上作给药标记，观察肠段反应。当反应最明显时，用暂停键，将计算机转入“示波状态”。用台氏液冲洗肠管3遍，稳定标本15分钟，加入下列药物。

②将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后，向麦氏浴槽中加

0．5％阿托品0．2ml并作标记，观察曲线变化，1分钟后加5X10-4MAch0．2ml

并标记，观察肠段反应。将计算机转入“示波状态“后，用台氏液冲洗肠管3

遍。稳定标本15分钟

③将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后向麦氏浴槽中加0．01

％Adr0.1ml并作标记，观察曲线变化。将计算机转入“示波状态”下冲洗肠管，稳定标本，加下列药物。

④将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后，向麦氏浴槽中加

20％BaCl2 0．2ml并作标记，观察曲线变化。

在主菜单下选择“结束实验”，激活工具栏，系统进入分析状态。

实验结果处理

在主菜单下分析项可选择区域测量、标记查询、开始反演、鼠标捕捉，测量后按工具栏中取消标志线，测出正常曲线，加Ach后，加阿托品回复后，加Adr 后加BaCl2后肠管的收缩张力，分别求出加Ach、Adr、BaCl2所引起的张力变化值及Atro对Ach拮抗的张力回缩值，以全班数据进行统计，作t检验，并判断各药的作用是否显著。

在主菜单下打印项进行打印模式设置，可倒入测量信息、学生实验、实验信息后，预览、打印。

注意事项

1、操作时应避免牵拉肠管，造成肠管活性不好。

2、肠管两端穿线采用十字交叉法，肠管不易扭曲，便于营养液的流通。

3、每次给药前均应冲洗肠管3次，中间间隔1分钟。

4、BaCl2可使肠管产生强直性收缩，不能恢复，所以最后加BaCl2。

5、给药时将药液直接加入药液，不要碰线，也不要碰壁