过敏原检测

激发试验
过敏性疾病的四种诊断方法 Ps：体内和体外检测结果与过敏原提取物具有一定的相关性！
体内和体外检测方法比较
类别
体内
体外
方法
特点
皮肤针刺试验 （皮内试验点、刺试验或刺
痕试验） 斑贴试验 鼻粘膜激发试验（SNPT）
食物激发试验 （DBPCFC）
血清学检验
生物共振 生物芯片
强烈反应时容易互相混淆结果 价格便宜、快速。 患者痛苦，无法避免对于高过敏体质患者具有一定生命危险性 检测前需要停抗组胺等治疗药
清洗：step 3 x 5min 60 min 结合液
清洗：step 3 x 5min 10 min 底物温育
自动化判读或肉眼观察
采样要求
• 样本：人血清或者EDTA、肝素或柠檬酸抗凝血浆。 • 采血量：>300ul(血清或血浆最少100ul) • 样本不受药物、食物等因素的影响。
检测项目
结果报告
临床意义
不过敏 较敏感， 一般没有临床症状 较敏感，大量接触后 通常会有临床症状 通常具有临床症状 通常具有临床症状 非常高的抗体滴度
非常高的抗体滴度
过敏原体外检测常见问题及解答
Q1: 为何患者sIgE结果阳性与临床表现不符
结果解释：交叉反应与CCD
CCD（Crossreactive Carbohydrate Determinants）存在 于多种植物性或动物源性的过敏原中。由于结构的相似性导致 一些独特的交叉反应出现。
该技术对诊断的科学性及意义等还有待证实 容易受到人为信号的干扰，难以建立严格的标准，
价格昂贵，不便于推广
特异性IgE：检测原理
AP-酶结合物
sIgE 反应膜
显色反应 AP
酶反应物
过敏原提取物
60 min 过夜孵育 摇摆60 min 未稀释 1:11 稀释 未稀释 1ml 血清 100µl 血清 400µl 血清
结果解释：EAST分级
• 结果报告采用EAST分级，根据特异性IgE的浓度用0-6表示
类别 0 1
2 3 4 5 6
浓度[kU/l] <0.35
0.35-0.7
0.7-3.5 3.5-17.5 17.5-50 50-100
>100
sIgE水平 未检出 低
中 高 很高（+） 特高（++） 特高（+++）
过敏原的实验室检测
死亡之吻
一位20岁的年轻女性被送至Mayo诊所附属医院急诊科，该患者临床表现为： 口唇血管神经性水肿、咽喉肿痛、荨麻疹、腹部绞痛、恶心、哮喘、严重呼吸困 难和低血压（80/50mm Hg）。 这一系列的症状发生在该患者亲吻其男友之后。
超敏反应及过敏原
超敏反应是机体对某抗原初次应答后，再次接受相同抗原 刺激时，发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤 为主的特异性免疫应答。 导致超敏反应的物质被叫做过敏原或变应原。 天然过敏原种类很多，但大多是蛋白成份
过敏原 II
相关过敏原 ~5%
无关成分 ~95%
过敏原 III
• 蛋白或糖蛋白 • 低分子量，15 – 20 kDa • 多价
过敏原 (~5% 相关)
过敏原提取物
提取
过敏原提取物与固相结合
包被
体内及体外试验均会受到抗原提取物质量的影响
过敏原 (~5 % 相关)
过敏的诊断
既往史
过敏？
体内试验
体外诊断
超敏反应类型
Type I
Type II
Type III
Type IV
早期反应
细胞毒反应
IgE介导的肥大细胞脱 颗粒
Platzhalter
数分钟
IgG/IgM介导的红 细胞（主要）破坏
几小时至数天
花粉热
药物过敏
形成免疫复合物 持续的IgG/IgM 免疫复合物 r
几小时至数天
农民肺
细胞免疫反应
T细胞介导的 免疫反应
12小时至数周
接触性皮炎(Ni)
by Coombs and Gell (1963)
I 型超敏反应 致敏—激发—效应阶段
T细胞和B细胞接触过敏 原后活化
IgE与肥大细胞上 的IgE受体结合
B细胞释放IgE，产生 特异性IgE抗体
过敏原与膜结合IgE交联 释放介质
（组织胺）
过敏常见症状
湿疹、荨麻疹、紫癜
打喷嚏
鼻痒
咳嗽
鼻塞
支气管哮喘 清水样鼻涕
过敏性疾病发病率速增
卫生学推测
• 世界变态反应组织（WAO）统计，过敏性疾病总患病率高达22% • 中国有五亿多人患过敏性疾病，约37.4%
生活方式的改变
• 身体运动量的全面降低 (relation with obesity: Firincielli et al: Paeds Pulm 2005)
• 相应而生的营养学的改变 (Hark et al: Annals 2005)
接触的过敏原的增多
• 在乡村，环境中存在大量的过敏原 (如屋尘螨，蟑螂和链格孢霉)，因此 过敏的流行程度和IgE抗体的滴度均偏高
过敏性疾病发病率速增
“过敏进行曲” 描述过敏疾病一生中
的发展进程。（湿疹，
鼻窦炎，哮喘等等）
过敏原 I
吸入过敏原 食物过敏原 接触过敏原 输注过敏原
通过胃肠道吸收 (例如. 鱼、肉、蛋、 坚果和蔬菜等)
过敏原 I
吸入过敏原 食物过敏原 接触过敏原 输注过敏原 皮肤接触（例如：金属饰品、化妆品和生活日用品等）
过敏原 I
吸入过敏原 食物过敏原 接触过敏原 输注过敏原
直接输入体内 (例如：昆虫或动物的毒Biblioteka Baidu, 注射类药品等)
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过敏原 I
吸入过敏原 食物过敏原 接触过敏原 输注过敏原 空气中的吸入过敏原 (例如. 植物花粉, 动物毛发, 室内灰尘或虫螨等)
协和医院变态反应科王瑞琪在2011年全国变态反应大会中关于《二十万项次过敏 原特异性IgE检测结果分析》的报告中提示：吸入过敏比食物过敏原更加常见， 几乎为其的8倍。
斑贴试验主要是检测Ⅳ型变态反应，敏感程度不太高
患者试验过程较痛苦 无法避免对于高过敏体质患者具有一定生命危险性的问题 操作等较繁琐
食物过敏检测金标准 对于食物过敏反应严重的患者较危险 操作麻烦，需要病床观察 患者试验过程较痛苦
对患者来说使用安全，适合儿童，可避免强烈的皮肤反应 避免其它皮肤病造成的误判 使用方面，少量血清一次即可完成数十种过敏原的检测 适用于对食物过敏的患者，效应器官不在皮肤 适用于用抗组胺类或激素类治疗而不能停药者
典型含CCD结构的过敏原: • 植物花粉 • 植物性食物 • 植物乳胶 • 昆虫毒液
CCD通常不会导致临床症状的出现