大豆抗原蛋白与仔猪过敏性腹泻

酶素
子
抗 植 寡单 原
蛋 酸 糖宁 白
抗
维 生
其
素
因他
子
（热敏性） （热稳定性）
大豆抗原蛋白
大豆抗原蛋白是由 Duke等（1934）首次发现 —— 婴儿过敏 Castimapoolas和Ekenstam（1969）从大豆中分离出4种抗原
蛋白:
大豆球蛋白（glycinin） -伴大豆球蛋白（-conglycinin） -伴大豆球蛋白（-conglycinin） -伴大豆球蛋白（ -conglycinin）
1.零不良寡糖； 2. 蛋白含量高，配方空间大；
1、相对SPC粗蛋白含量略低 （CP50%)
1.抗原的去除不稳定，仍有部 分抗原； 2.适口性差； 3.性价比不好；
膨化大豆
1.脂肪利用率高； 2.适口性好；
1.抗原蛋白未完全去除； 2.不良寡糖未去除；
酶解（
1.抗原大部分降解；
HP3000） 2.零不良寡糖；
谢谢观赏！
2020/11/5
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大豆抗原蛋白与仔猪过敏性腹泻
内容提要
1. 仔猪腹泻与产生原因 2. 日粮致敏性腹泻与大豆抗原蛋白 3. 大豆抗原蛋白的消除 4. 大豆抗原蛋白的分析检测
仔猪腹泻发生的原因
1. 传染性病因 2. 1.1 病毒性腹泻 3. 传染性胃肠炎、轮状病毒感染 4. 1.2 细菌性腹泻 5. 仔猪黄痢、仔猪白痢、仔猪副伤寒、仔猪
——Kinney等，2001
但研究表明，大豆β-conglycinin含量的减少， 将伴随着glycinin含量的增加。 而glycinin同样是一种 抗原蛋白
不同加工工艺大豆蛋白比较
品名
优势
劣势
微生物发酵 法（勃乐）
有机溶剂萃 取法（SPC ）
1、零抗原、零不良寡糖； 2、含有发酵产生的约7％乳酸(HPLC法)； 3、浓郁发酵香味，多吃10%； 4、消化率高（体外消化率＞96％）； 5、代谢产物丰富，改善肠道微环境；
红痢
2. 免疫系统因素
8 被动免疫（母乳） 6 免 疫 力 4
2
主动免疫
12
3
4
5
6 7 周龄
3. 应激因素 3.1 温度骤变 皮下脂肪薄，被毛稀少：保温能力差；糖原水平低，
产热能力不足，因此仔猪对冷相当敏感
3.2 断奶应激
8 被动免疫（母乳）
6 免
疫 力
断奶
4
2
主动免疫
12
3
4
5
6 7 周龄
发
发
发
发
发
发
粕酵
酵
酵
酵
酵
酵
对
豆
豆
豆
豆
豆
豆
照
粕
粕
粕
粕
粕
粕
1
2
3
4
5
6
以单抗为介质的ELISA（定量）
结语
热处理是应用较为广泛的日粮抗原消除方法，但对于热 稳定性高，热加工不足以有效地灭活的抗营养因子，人们必 须要不断地研究新的方法加以消除。
微生物发酵是目前改善大豆及其制品营养价值和饲喂价 值，减少仔猪致敏性腹泻的有效途径！
4. 饲料（营养）因素 5. 4.1 营养消化不良
胃酸分泌不足，消化酶活性不高 母乳→ 饲料
4. 饲料（营养）因素 5. 4.2 日粮抗原过敏
日粮抗原蛋白过敏 ——导致仔猪腹泻的一个重要因素
仔猪日粮抗原蛋白的来源
植物性饲料
大豆 大豆制品
大豆中含多种抗营养因子
大豆抗营养因子
蛋
白 酶
脲凝
抑
集
制 因
大豆抗原蛋白的消除
微生物发酵 外源酶水解 基因工程技术 有机溶剂萃取 多种措施结合
微生物发酵
抗原活性降低
微生物发酵
大豆抗原蛋白
寡肽 生物活性肽
微生物发酵工艺：
生产工艺：
稳定的好，才是真正的好！
发酵过程控制
酵母菌
乳酸菌 PH值
α-半乳糖苷酶
降解
不良寡糖
温度 水分 ……
枯草芽孢
酸性蛋白酶
降解
大豆抗原
0%
2%
4%
8%
SEM
282.75 326.61
1.16
263.72 237.39 222.39
325.17 318.89 304.08
1.23
1.34
1.41
12.83 15.69
0.06
372.41 423.10
1.14
338.82 320.38 291.29
412.02 396.20 381.48
十二指肠 空ห้องสมุดไป่ตู้ 回肠
0%
10.53 10.93 10.25
日粮中添加 2%或 4% 的glycinin可显著增加仔 猪空肠、回肠内组胺的释 放量。
Glycinin水平
2%
4%
8%
21.09 20.10 19.97
20.15 17.76 14.54
17.17 17.08 10.89
SEM P-值
2.60
0.05
2.01 0.04
1.93 0.01
孙鹏等，2008
大豆抗原蛋白与仔猪断奶腹泻
饲喂含与不含大豆抗原蛋白的仔猪腹泻情况（Miller，1994）
大豆抗原蛋白与仔猪生长性能
500 450 400 350 300 250 200 150 100
50 0
ADG4
ADG8
ADFI4 ADFI8
大豆抗原蛋白
使仔猪在断奶
豆 后第一周生长
粕
组 速度明显下降
奶
粉 组
(P<0.05)
Li等（1990，1991）
纯样品
Glycinin对仔猪（24-28日龄）生长性能影响
0-6 天 ADG, g/d ADFI, g/d F:G, g/g 0-10 天 ADG, g/d ADFI, g/d F:G, g/g
Glycinin水平
豆粕生物发酵的优势
大豆蛋白在进入动物体内之前降解为小分子 蛋白，提高蛋白质的利用率； 降低大豆抗原蛋白的抗原活性； 降解不良寡糖（棉籽糖、水苏糖）； 产生有益代谢产物（乳酸>3%）； 具有发酵香味，提高适口性和采食量；
大豆基因工程改良
据报道，三亚基的抗原活性： > > ’
❖β-conglycininα´-亚基对大鼠肠道超微结构的影响
❖ Glycinin 由6个酸性多肽和6个碱性多肽组成的 大分子蛋白（360 kDa）
占大豆总球蛋白的40%（李德发，2003）
酸性多肽
碱性多肽
Glycinin 晶体结构
❖-Conglycinin是大豆中的一种主要贮藏蛋白
仔猪对glycinin的过敏反应
孙鹏等，2008
Glycinin对仔猪小肠内肥大细胞数量及组 胺含量的影响
正常组：上皮细胞 微绒毛结构清晰
试验组：上皮细胞 微绒毛结构模糊
——郭鹏飞（2007）
结果表明，β-conglycinin的α´-亚 基同样有较强的致过敏活性。
基因敲除（沉默）
Transgenic Soybean Seeds
’
RNA Gel Blot Shows Conglycinin Cosuppression
pigs
➢大豆抗原蛋白通过诱发幼龄动物的过敏反应，影响机体 消化系统和免疫功能，导致腹泻，最后抑制动物生长 ➢减少豆粕用量是减轻断奶仔猪过敏反应的有效措施 ➢正确的饲喂制度 ➢ 免疫耐受的产生需要一定时间（断奶后7-10d） ➢ 教槽料应持续用到断奶后10天
在使用前，对大豆抗原蛋白进行消除是提升 大豆及其制品质量，避免仔猪腹泻的关键。
1. 性价比不好；
因此 生物发酵技术 是目前降低大豆抗原蛋白的最佳
方法
发酵豆粕的质量差异及 大豆抗原蛋白的含量检测
SDS-PAGE （定性） 抗血清测定（特异性问题） 高效液相色谱分析（设备、前处理问题） 以抗大豆β-conglycinin单克隆抗体为介质 的
免疫学检测方法
电泳图谱
Marker 豆
1.22
1.24
1.31
16.13 23.65
0.04
Glycinin
0.02 0.73 0.04
0.02 0.63 0.003
P-值 Linear
Quad
0.002
0.88
0.30
0.67
0.004
0.97
0.002
0.89
0.20
0.94
0.004
0.90
孙鹏等（2008）
β-conglycinin对断奶仔猪（38日龄）生长性能 的影响