蛋白质还原糖脂肪的鉴定实验课件

甲乙液 等量混合，现配先用，
切勿将甲液、乙液分别加 切不可分开滴加，或者久置后
入苹果组织样液中进行检 才用。
测。
4. 试管放在盛有50-65℃温 最好用试管夹夹住试管上 水的大烧杯中，加热约2分 部，使试管底部不触及烧
钟，观察到溶液颜色：浅蓝 杯底部，试管口不朝向实 色 → 棕色 → 砖红色（沉 验者。 淀）
防止试管内的溶液冲出试管， 造成烫伤；甲、乙液混合保存
时生成Cu ( OH ) 2在70~90℃
下分解成黑色CuO和水；
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.实验步骤 （1）制备组织样液（教师制备） （2）鉴定样液
先在试管中加入 2mL组织样液
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注意观察整
水浴煮沸
个实验过程
2分钟
中，溶液颜
色的变
化！！！
再加入 2mL刚 配制的 斐林试 剂
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（２）脂肪的鉴定 （需要显微镜） 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
操作方法
注意问题
（3）蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应（肽 键）。
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（一）生物组织中可溶性还原糖的鉴定
1.实验原理
当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液 与质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合 后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2悬浊液。 Cu(OH)2与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性 还原糖共热，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。 因此，利用该反应，可证明样液中含可溶 性还原糖。
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1、实验原理：
（1）斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化 为：由蓝色变成砖红色(沉淀)。斐林试剂只 能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能 鉴定非还原性糖。葡萄糖、麦芽糖、果糖是 还原糖。
（2）苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色， 苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。
体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。
（１）可溶性还原糖糖的鉴定 5、方法步骤： 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
（水浴加
操 作 方 热法）
注意问题
Fra Baidu bibliotek解释
1. 制备组织样液。
苹果或梨组织液必须临时 因苹果多酚氧化酶含量高，组
（去皮、切块、研磨、过滤）制备
织液很易被氧化成褐色，将产
生的颜色掩盖。
2. 取1支试管，向试管内注 入2mL组织样液。
3. 向试管内注入1mL新制
的斐林试剂，振荡。
应将组成斐林试剂的甲液、 斐林试剂很不稳定，甲乙液分
乙液分别配制，使用前才 别加入时可能与组织样液发生
将甲、乙液等量混匀成斐 反应无Cu ( OH ) 2生成。
林试剂；
3、实验选材（1、材料应富含相关物质，使现象更加 明显；2、材料本身应无色，以免对结果产生干扰） （1）做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色 为白色的植物组织，如苹果、梨，也可用白萝卜替代。（因为 组织的颜色较浅，易于观察。） （2）做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花 生种子为最好，实验前一般要浸泡3～4小时。 （3）做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆(可用 豆浆替代）或鸡蛋清。
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（二）生物组织中蛋白质的鉴定
1 实验原理 在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲
（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu 2+作用， 形成紫色的络合物，这个反应叫做双 缩脲反应。
由于蛋白质分子中含有很多与双缩 脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可 与双缩脲试剂发生颜色反应。
丹Ⅳ染液，染色1分钟。
间久了，把脂肪全部溶解
了，观察不到脂肪粒
用吸水纸吸去薄片周围染液，用 50%酒精洗去浮色，再用吸水 纸吸去酒精。
酒精用于洗去浮色，不洗去 浮色，会影响对橘黄色脂 肪滴的观察。同时，酒精 是脂溶性溶剂，可将花生 细胞中的脂肪颗粒溶解成 油滴。
用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴 上1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片。
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试剂配制 A液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）
双缩脲试剂 B液（0.01g/mL的硫酸铜溶液）
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2、实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
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4、实验试剂
斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和 乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、
苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、
双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液 B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）、
滴上清水可防止盖盖玻片时 产生气泡。
低倍镜下找到花生子叶薄片的最 装片不宜久放。 薄处，可看到细胞中有染成橘 黄色或红色圆形小颗粒。
时间一长，油滴会溶解在乙 醇中。
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实验步骤
（1）切片制作
解释
花生种子浸泡、去皮、切下一些 子叶薄片，将薄片放在载玻片 的水滴中，用吸水纸吸去装片 中的水。
干种子要浸泡3~4小 因为浸泡时间短，不易切片， 时，新花生的浸 浸泡时间过长，组织较软， 泡时间可缩短。 切下的薄片不易成形。切 片要尽可能薄些，便于观 察。
在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏 染色时间不宜过长。 苏丹Ⅲ中含有酒精，染色时
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
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试剂配制 甲液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）
斐林试剂 乙液（0.05g/mL的硫酸铜溶液）
甲液乙液等量混合，现用现配， 切不可分开滴加，或者久置后 才用。