实验室生物安全讲(一)

意外事故处理标准操作程序及各种仪器设备 和实验标准操作程序等。
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第四节 生物安全法规
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一、国际组织和国外病原微生物实验室生物 安全相关法规和指南
1.《实验室生物安全手册》（WHO）
1988年第一版，1993第二版，2004年第三版 2.《微生物危险等级的分类》（欧洲经济共同体 EEC） 指令93/88 3.《微生物和生物医学实验室生物安全手册》 （美国） 1983年第一版，1993年第三版，1999年第四版； 4.《生物危害主要防护：生物安全柜的选择、安装和使用》 （美国）2000年第二版；
接种于实验动物体内的病原微生物，可通过呼吸、粪 便等途径排出体外。污染室内环境。试验人员防护或操 作不当可造成感染。
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第三节 实验室生物安全防护
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实验室生物安全防护： 为了避免实验室中有害的或有潜在危害的生物因子对 人、环境和社会造成危害和潜在危害而采取防护措施 和管理措施。 硬件：实验室设计建造、设备的配置和使用个人防护 装备。 软件：标准化的操作规程和严格的管理规程。 生物安全防护的目的：
1．离心机：可能造成实验室感染的有气溶胶、飞溅物和 离心管泄漏等。 2．组织匀浆器、粉碎器及研磨器：可能造成实验室感染的 有气溶胶、漏和容器破碎等。 3．超声波器具：气溶胶。
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4．真空冷冻干燥机及离心浓缩机：
气溶胶；直接接触污染。 5．培养搅拌器、振荡器和混匀器： 气溶胶；飞溅物；溢出物。 6．恒温水浴器和恒温震荡水浴器：微生物生成；气溶胶 7．厌氧罐： 爆裂，散布传染性物质。
装置；紧急冲洗装置；鞋套等。 (二) 二级屏障（ secondary barrier ） 是生物安全实验室和外部环境的隔离，也称二级隔离。是 一级屏障的外围设施。以防止实验室以外的人员被感染为目 的。 如：实验室的建筑、结构和装修、电气和自控、通风和净 化、给水排水和气体供应、消防和灭菌等。
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4. 缓冲间（ buffer room ）
设置在清洁区、半污染区和污染区相临两区之间的缓冲密 闭室，具有通风系统，其两个门具有互锁功能，且不能同时 处于开启状态。 5. 生物安全柜（biological safety cabinet, BSC） 是生物安全实验室中极为重要的设备，其主要原理是使安 全柜内保持负压，气流只能从外部进入安全柜，使柜内的病 原微生物不能溢出，从而保护工作人员；同时其循环风和排 风经过高效过滤器过滤，又能保护环境。
1886年郭霍第一次报告了一例霍乱病的实验室感染事件。 1951年美国统计的1342个实验室感染病例，涉及69种不同 的微生物。 1967德国马尔堡病毒实验室感染事件,37人感染，1/4死亡。 1979年4月，前苏联一实验室发生泄露事故，泄露出的炭疽 芽胞粉剂和爆炸释放出的大量毒雾，造成附近1000多人发 病，数百人死亡。 1993年美国CDC报告了17名实验室人员因职业接触感染 HIV。 SARS冠状病毒引起的实验室感染事件：2003年台湾一研究 人员在BSL-4实验室被感染；2003年新加坡一名博士后研究 生在实验室被感染；2004年北京一个国家级病毒病研究机 构，一名安徽医科大学研究生被感染。
全，实验室生物安全必须引起高度重视。
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第一章 实验室生物安全概述
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第一节 实验室生物安全的概念al harm）
（一）概念

广义的生物危害
是指各种生物因子对人、环境和社会造成的危害或
潜在危害。

狭义的生物危害 是指在实验室进行感染性致病因子的科学研究过程 中对实验室人员造成的危害和对环境的污染。
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卫生部颁布的配套文件
1．《人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活 动生物安全审批管理办法》
卫生部第50号令，2006年7月10日发布施行
2.《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样 本运输管理规定》
卫生部第45号令，2005年11月24日发布 2006年2月1日起施行
3.《人间传染的病原微生物名录》
实验室安全管理应根据各种实验室的专业特点及接触的有害因子进行 分类管理，采取不同的安全防护措施，但其与防火、防盗、防水等工 作是一个共性的任务。 疾病预防控制机构实验室的安全防护主要有： 放射（辐射）安全防护 化学物品安全防护 生物安全防护 动物安全防护


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历史上的实验室感染事件




据统计，从事病原微生物研究的工作人员发生实 验室感染的概率较普通人群高5~7倍。实验室感
染事件将不仅损害实验室工作人员的健康，给所
在单位和部门带来不利影响，甚至可造成疾病的 流行，危及广大群众的健康和生命安全，乃至妨 碍社会经济的发展以及和谐社会的建设，造成严 重的后果。

为此，防止实验室生物危害，保障公众健康和安
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（二）生物安全的相关术语
1. 有害生物因子（ biohazardous agents ） ： 是指那些能够对人、环境和社会造成危害作用 的生物因子，如病原微生物、来自高等动植物 的毒素和过敏原、来自微生物代谢产物的毒素 和过敏原、基因结构生物体等。 2. 危害废弃物（ hazardous waste ） ： 具有潜在生物危险、可燃、易燃、腐蚀、有毒、 放射和起破坏作用的对人、环境有害的一切废 弃物。
6. 个人防护装备（personal protective equipment, PPE）
人们在实验室进行科研活动过程中，为防御各种有害因子而 穿戴和配备的各种用品的总称。
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第二节 实验室感染的类型和来源
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一、实验室感染的类型
有三种类型：
1.气溶胶导致的实验室感染-------由于实验室中的病原微 生物可以以气溶胶的形式飘散在空气中，工作人员 吸入了这种污染的空气而造成感染。
5.《实验室生物安全指南》（加拿大） 1990年第一版，1996年第二版，2004年第三版
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二、我国病原微生物实验室生物安全相关法规和标准
1. 《中华人民共和国传染病防治法》 （2004年8月28日通过修订版, 2004年12月1日起施行 ） 2.《病原微生物实验室生物安全管理条例》 国务院424号令（2004年11月5日通过，2004年11月12日实施） 3.《医疗废物管理条例》 （2003年6月4日国务院第十次常务会议通过，2003年6月16日公布实行） 4.《中国医学微生物菌种保藏管理办法》 （１９８５年３月２３日卫生部） 5. GB 19489－2004《实验室－生物安全通用要求》 2004年10月1日施行。 6. WS 233-2002《微生物和生物医学实验室－生物安全通用准则》 2002年12月03日发布 2003年08月01日实施 7. GB 50346－2004《生物安全实验室建设技术规范》 2004年08月03日发布 2004年09月01日实施
二、规范化实验室管理-----软件
生物安全实验室相关制度及标准化的操作规程的 建立。
(一) 实验室管理规章制度：包括培训制度、准入制
度、健康监测报告制度、个人良好行为制度、 意外事故报告制度等。 (二) 标准操作程序：包括实验废弃物处置标准操 作程序、进出实验室标准程序、菌毒种使用
标准操作程序、实验室消毒标准操作程序、
卫科教发[2006]15号卫生部
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国务院生物安全管理条例
《条例》共7章，依次为：1、总则；2、病原微生物的 分类和管理；3、实验室的设立与管理；4、实验室感 染控制；5、监督管理；6、法律责任；7、附则。共 72条。 目的：加强实验室生物安全管理，保护实验室工作人
员和公众的健康。
适用范围：境内的实验室及其从事的实验活动的生物安
2.事故性感染------因为实验室人员操作过程中的疏忽， 使本来接触不到的病原微生物污染环境，直接或间 接感染实验室人员甚至危及周围环境。 3.人为破坏------有意播散生物制剂。
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二、实验室感染的来源
（一）标本
1. 检测标本：实验室标本；临床标本。
2. 菌毒种：一类；二类；三类；四类。
（二）仪器设备使用过程中产生的污染
全。实验活动：指实验室从事与病原微生物菌
（毒）种、样本有关的研究、教学、检测、诊断 等活动。
取，吹出时要轻缓，不要全部吹净，以免产生气
泡，形成气溶胶。 5. 开封：溢出。 要避免压力和气流的急剧变化。
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6. 离心：离心管套底垫要完好，使用匹配的管、套、离心
头，加盖。 7. 注射：做好个人防护，正确使用注射器。 8. 搬运：室内移动要避免滑落，移出室外要有坚实密闭的 外包装。
（四）实验动物
当研究各种对人或动物有致病或生命危险的病原微生 物或有害生物因子时，将可能产生的危险降到最低， 最大限度的保护人类健康和生态环境。
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一、实验室防护-----硬件 (一) 一级屏障（ primary barrier ） 是操作者和被操作对象之间的隔离，以防止操作人员被感 染为目的，也称一级隔离 。 如： 安全设备---生物安全柜 个体防护装备---防护服；手套；安全眼镜；呼吸防护
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与致病微生物接触就存在安全问题

1974年丹麦某医院临床生化实验室的工作人员体检
时发现肝炎发病率比普通人群高出7倍。

1976年英国某医学实验室的工作人员体检时发现结
核菌感染者比其他人群高5倍。 1978年英国报告一个商业洗衣房因清洗来自一Q热 实验室的衣裤时发生6例雇员和1例参观者感染。

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二、生物安全（biosafety）
（一）概念
1. 生物安全：是指防范、处理微生物及其毒素对人体危害的综合措施。
2. 实验室生物安全（Laboratory biosafety）：
是指以实验室为科研和工作场所时，避免危险生物因子 造成实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的