20-丙型肝炎病毒实验活动风险评估报告

20-丙型肝炎病毒实验活动风险评估报告

丙型肝炎病毒实验活动风险评估报告

一、生物学特性

（一）种类和病毒分型

丙型肝炎病毒（Hepatitis Cvirus，HCV）引起的丙型肝炎曾被称为肠道外传播的非甲非乙型肝炎（PT-NANB）。病毒颗粒呈球形，有包膜，直径约55~65nm。基因组为单正链线状RNA，长度约为9.5kb。基因组由5'端非编码区（5'UTR）、编码区和3'端非编码区（3'UTR）组成。5'端非编码区是HCV基因组中最保守的序列，是设计诊断用PCR引用的首选部位。编码区仅含一个长的开放阅读框（ORF），编码一个大分子的多聚蛋白前体。该前体蛋白在病毒蛋白酶和宿主信号肽酶的作用下切割产生病毒的结构蛋白和非结构蛋白。病毒的结构蛋白包括核心蛋白C和包膜蛋白E1、E2。非结构蛋白包括NS2、NS3、NS4a、NS4b、NS5a和NS5b。对于3'端非编码区的功能尚不清楚，可能与病毒复制有一定关系。

根据HCV NS5区基因序列的同源性，可将HCV 分为6个基因型，11个亚型，即1a、1b、1c、2a、2b、2c、3a、3b、4a、5a、6a。其中，欧美流行株多为1a、1b、2a、2b和3a；中东地区以4a为主；亚洲包括我国以1b、2a和2b亚型较为多见。

（二）来源

1989年，美国学者Choo等应用了分子克隆技术在实验室感染PT-NANB的黑猩猩血浆中首次获得了病毒的cDNA克隆，测定了约70%的HCV基因序列，并利用这些基因表达的蛋白质为抗原，检测到PT-NANB病人血清中的特异性抗体。此后，又获得了来自PT-NANB患者血清的病毒全基因组序列，从而确定了PT-NANB的病原体，并将命名为丙型肝炎病毒。1991年，国际命名委员会将其归类为黄病毒科丙型肝炎病毒属。

（三）传染源

主要传染源为急、慢性患者和无症状HCV携带者。慢性患者和病毒携带者有更重要的传染源意义。

（四）传播途径

传播途径主要为输血及血制品传播。此外，亦可通过非输血隐性途径的微小创伤、性接触、家庭密切接触及母婴接触进行传播。

（五）易感性

人群对HCV普遍易感染，同性恋、静脉注射者及接受血液透析的患者为高危人群。

（六）潜伏期

急性感染丙型肝炎病毒1~3周，在外周血可检测到HCV RNA。通常，潜伏期为2~26周，平均50d；输血感染者的潜伏期较短，约为7~33d，平均19d。出现临床症状时，仅50%~70%患者的抗―HCV阳性，3个月后约90%患者的抗―HCV阳转。

（七）剂量一效应关系

目前，尚未见有HCV对人体准确感染剂量的报道。HCV的感染主要与暴露途径和感染方式密切相关。

（八）致病性

HCV感染引起的临床过程轻重不一，可表现为急性肝炎、慢性肝炎或无症状携带。HCV感染极易慢性化，40%~50%的丙肝患者的可转变成慢性肝炎，部分可发展成肝硬化肝癌。肝癌患者血中抗―HCV 阳性率高。

目前认为，HCV的致病机制与病毒的直接致病作用和免疫病理损伤有关。实验证明，丙型肝炎患者血清HCV-RNA的含量与血清丙氨酸转移酶的水平呈正相关，提示HCV的复制与肝细胞损伤有关，病毒在复制过程中可能直接损伤肝细胞。异常的细胞免疫反应是HCV另一重要的致病机制。

HCV感染后不能诱导有效的免疫保护反应。实验感染的黑猩猩恢复后，在用同一种病毒株攻击黑猩猩，黑猩猩几乎无力保护。

（九）变异性

我国已规定，必须对献血员进行抗―HCV检测，以减少HCV的感染和传播。对血制品亦需进行HCV检测以防污染。

⒉治疗措施

由于HCV免疫原性不强，且毒株易于变异，因此疫苗的研制较为困难。目前尚无疫苗用于特异性预防。对丙型肝炎尚缺乏特效药，已证明IFN-α对早期HCV有较高效率。目前HCV感染的首选治疗方案是IFN-α和利巴韦林（RBV）联合治疗。

二、实验室相关活动风险评估与控制

（一）实验室感染性因子的种类、来源和危害

⒈感染性因子的种类

本实验室可能的感染因子为HCV本身。

⒉感染性因子的来源

⑴用于HCV―抗体检测的血液样本。

⑵样本采集与检测过程中涉及的所有实验场所。

⑶实验室操作中可能产生的含病毒的气溶胶。

⒊感染性因子可能造成的危害

⑴被污染的实验器材、器皿等对实验室环境造成污染。

⑵实验室废弃物对环境造成污染。

⑶实验人员暴露后感染。

⑷实验室含病毒的气溶胶实验室环境造成污染。

（二）实验室常规活动过程中的风险评估与控制

⒈实验方法

⑴风险点识别若采用国家标准、行业标准之外的其他未经确定的实验方法，或在使用国家标准、行业标准之前未进行技术确认，操作时可能存在安全风险。

⑵风险控制措施尽量采用国家标准、行业标准或经过充分验证的实验方法；在使用新的或变更过的国家标准、行业标准之前，必须经过严格的技术确认。

⒉样本采集

⑴所用器材一次性采血针、真空采血管、消毒棉签及一次性利器盒。

⑵风险点识别

①采血过程中若被急性或者慢性丙肝患者的血液污染的皮肤、黏膜，或者被含有HCV的血液污染了的针头刺破皮肤，则被感染的可能性很大。

②血液标本溅洒可能造成人员或环境污染。

⑶风险控制措施采血前做好个人防护，穿戴防护服、口罩、帽子、手套；抽血前检查针管的密闭性，用过的针头直接放入利器盒内，禁止用手直接接触使用后的针头或将使用后的针头重新套上针头套；采血管用真空抗凝管，采好血后直立于试管架中，防止倒翻；消毒棉签等污染物放入医疗废弃物专用袋中，统一进行消毒处理。

⒊样本的包装和运输

⑴所用器材真空采血管、95千帕样品运输罐、B类标本运输箱（UN3373冷藏箱）、运送车辆。

⑵风险点识别若是用不合格包装进行运输、容器密封不严，则将不能安全有效的防止运输过程中包装容器意外破损，从而产生污染扩散的可能。

⑶风险控制措施严格按照生物安全的要求，采用三层容器包装。第一层采用真空采血管装样本，应密闭防渗漏；95千帕样品运输罐，可容纳并保护第一层容器，密封不易破碎、耐压力房渗漏且易消毒；第三层采用B类标本运输箱，要容纳并保护、固定第二层容器，且易于消毒。样本应由中心专车运回实验室。

⒋样本接收

⑴风险点识别如果在运输途中意外发生样本破裂、血液溢漏，也可能对样本接收人员造成污染。

⑵风险控制措样本直接送至实验室，由专业检验人员接收，接收样本前做好个人防护，穿戴防护服、帽子、口罩、双层乳胶手套。若有样本管意外破裂，则立即在生物安全柜内将尚存留的样本移