小鼠白介素6(IL-6)酶联免疫分析
白介素6化学发光
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白介素6化学发光白介素6(Interleukin-6,简称IL-6)是一种细胞因子,它在免疫系统中发挥着重要的调节作用。
除了免疫系统,IL-6还参与了多个生理和病理过程,包括炎症反应、细胞增殖、分化和存活等。
近年来,研究人员发现IL-6还具有化学发光的特性,这为生物医学研究和临床诊断提供了新的工具和方法。
化学发光是指在某些特定条件下,物质能够发出可见光或紫外光的现象。
通常情况下,化学发光需要通过外界能量激发物质,使其处于激发态,然后在返回基态的过程中释放出光子。
而IL-6的化学发光是通过特定的化学反应来实现的。
IL-6化学发光的原理是利用酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)的基本原理。
ELISA是一种常用的生化分析方法,用于定量检测特定蛋白质或其他生物分子在样品中的含量。
而IL-6化学发光ELISA则在传统的ELISA基础上进行了改进,使其能够发出可见光信号。
IL-6化学发光ELISA的具体步骤如下:首先,将含有待测IL-6的样品加入特定的试剂盒中,并与盒内的抗体结合。
然后,加入特定的底物,底物在酶的作用下发生化学反应,产生可见光。
最后,使用专用的发光仪器测量发出的光信号的强度,根据光信号的强弱来确定样品中IL-6的含量。
IL-6化学发光ELISA具有许多优点。
首先,它具有高灵敏度和高特异性,能够准确地检测到极低浓度的IL-6。
其次,它的操作简便,不需要复杂的仪器和昂贵的试剂,适用于大规模的样品检测。
此外,IL-6化学发光ELISA还可以同时检测多个样品,提高工作效率。
IL-6化学发光在生物医学研究和临床诊断中有着广泛的应用。
在生物医学研究中,IL-6化学发光可用于研究IL-6在免疫系统中的调节机制,以及其在炎症、肿瘤和自身免疫性疾病等疾病中的作用。
在临床诊断中,IL-6化学发光可用于早期诊断和监测炎症性疾病、肿瘤和感染等疾病的进展。
白介素6(IL—6)测定试剂(免疫荧光层析法)产品技术要求广州华澳生物科技
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产品名称白介素6(IL—6)测定试剂(免疫荧光层析法)型号、规格卡型:1人份/袋、5人份/盒、10人份/盒、20人份/盒。
结构及组成由白介素6(IL-6)测定试剂、芯片、IL-6稀释液组成。
其中白介素6(IL-6)测定试剂由试纸条和塑料壳组成,试纸条上主要成分有:a) 荧光物质标记的 IL-6 单克隆抗体;b) 羊抗鼠 IgG 多克隆抗体;c) IL-6 多克隆抗体。
IL-6稀释液成分为磷酸盐。
产品适用范围/预期用途本产品用于体外定量检测人血清样本中的白介素 6(Interleukin-6,IL-6)浓度,主要用于监测机体的免疫状态、炎症反应等。
2.1物理性状2.1.1夕卜观试剂内各组分包装完整,齐全,无破损污染,液体澄清、无渗漏,中文包装标签应清晰,准确、牢固。
2.1.2膜条宽度不小于2.50mm。
2.1.3液体移行速度不低于10mm/mino2.2线性取高值样本按比例稀释制作5个浓度的样品,浓度在(5 ~ 2000) pg/mL范围内,测量后釆用双对数方式拟合剂量-反应曲线,线性相关系数(r)不低于0.990o 2.3检出限不大于3.0 pg/mLo2.4准确度检测5、10、100、1000、2000pg/mL的白介素6 (IL-6)企业参考品,浓度W100.0 pg/mL时,相对偏差不大于±20%; 100V浓度W2000 pg/mL时,相对偏差不大于±15%。
2.5重复性随机抽取同一批试剂,检测10、100、1000 pg/mL的IL-6企业参考品,各浓度重复检测10次,其变异系数(CV)均W15%。
2.6批间差随机抽取三批试剂,检测10、100、1000mg/L的叱§企业餐■品,每批次对各浓度重复检测io次,其变异系数(cv)应均亏凶戚A宿環、(1 ★ S)。
小鼠白介素6试剂盒的实验原理和操作步骤
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小鼠白介素6试剂盒的实验原理和操作步骤实验原理:试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被白介素6(IL-6)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白介素6(IL-6)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
操作步骤:1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
注意事项1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。
所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。
使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。
在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。
温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。
任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
小鼠 IL-6 Elisa试剂盒
![小鼠 IL-6 Elisa试剂盒](https://img.taocdn.com/s3/m/a697c73b5a8102d276a22ffc.png)
2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;
Beijing BLKW Biotechnology Co., Ltd. Tel:010-57158602/52872342 blkwbio@
3.标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除;
4.请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。
Hirano, T. et al. (1986) Nature 324:73.
Beijing BLKW Biotechnology Co., Ltd. Tel:010-57158602/52872342 blkwbio@
ELISA Kit for the Quantitative Analysis of Mouse IL-6
Introduction
Interleukin 6 (IL-6) is a multifunctional protein that plays important roles in host defense, acute phase reactions, immune responses, hematopoiesis and differentiation of nervous system. The IL-6 gene product is a single chain protein with a molecular mass ranging from 21 to 28 kDa, depending on the cellular source.IL-6 proteins are expressed by variety of cells, such as T cells, macrophages, fibroblasts, hepatocytes, vascular endothelial cells. Since IL-6 plays a wide variety of biological functions, it is also known as interferonβ2 (IFN-β2), B cell stimulating factor-2 (BSF-2), hybridoma growth factor, hepatocyte stimulating factor, cytotoxic T-cell differentiation factor, or macrophage & granulocyte inducer (MGI-2A).
Elabscience
![Elabscience](https://img.taocdn.com/s3/m/918f50ae6394dd88d0d233d4b14e852458fb39f3.png)
(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)产品货号:E-UNEL-M0070产品规格:96T*5/96T*15Elabscience®未包被小鼠白介素6(IL-6)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Uncoated Mouse IL-6(Interleukin 6) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话************具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
用途该试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆样本中IL-6浓度。
试剂盒组成及保存试剂体积以实际发货版说明书为准。
相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
其他所需试剂ELISA辅助组分试剂盒(Ancillary Reagent Kit,货号:E-ELIR-K001):包含完成96T*5规格ELISA实验的全套辅助试剂。
或有其他实验需求,可单独购买以下辅助试剂产品:或自行配制指标通用性辅助试剂。
(注:下列配方均为各试剂的基础组分,可根据实验需求和实验结果对配方进行优化)●包被液:1xCBS●封闭液:1xPBS,保护性蛋白●洗涤液:3%Tris●样本稀释液:1xPBS, 保护性蛋白●抗体/酶结合物稀释液:1xPBS, 保护性蛋白●终止液:5%硫酸试验所需自备物品1.酶标仪(450 nm波长滤光片)2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL3.37℃恒温箱4.双蒸水或去离子水5.吸水纸6.加样槽样品收集方法(具体处理方法可参考官网:/List-detail-241.html) 1.血清:全血样品于室温放置1小时或2-8℃过夜后于2-8℃,1000×g离心20分钟,取上清即可检测。
不同方法学白介素6标准
![不同方法学白介素6标准](https://img.taocdn.com/s3/m/6f2ff52d9a6648d7c1c708a1284ac850ac020418.png)
不同方法学白介素6标准白介素6检测的不同方法学探讨白介素6(IL-6)是一种多功能细胞因子,在免疫调节、炎症反应以及多种疾病的发生和发展过程中起着重要作用。
因此,准确检测白介素6的含量对于基础研究和临床应用具有重要意义。
本文将探讨几种不同的白介素6检测方法,并分析其优缺点。
1. 酶联免疫吸附法(ELISA)酶联免疫吸附法是一种常用的检测白介素6的方法,其原理是利用酶标记的抗体与待测样本中的白介素6结合,形成酶-抗体-抗原复合物,然后通过底物显色反应来定量检测白介素6的含量。
这种方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点,适用于大批量样本的检测。
但是,ELISA方法也存在一些局限性,如操作过程中容易受到温度、时间等因素的影响,导致结果的不稳定性。
2. 放射免疫分析法(RIA)放射免疫分析法是一种利用放射性同位素标记的抗体来检测白介素6的方法。
这种方法具有灵敏度高、准确性好的特点,尤其适用于微量白介素6的检测。
然而,由于RIA方法涉及到放射性物质的操作和处理,对实验条件和操作人员的要求较高,且存在一定的安全隐患,因此在一般实验室中的应用受到一定限制。
3. 化学发光免疫分析法(CLIA)化学发光免疫分析法是一种基于化学发光原理来检测白介素6的方法。
该方法利用化学发光物质标记的抗体与白介素6结合后产生的化学发光信号进行定量检测。
CLIA方法具有灵敏度高、线性范围宽、操作简便等优点,且无需使用放射性物质,因此在实际应用中得到了广泛推广。
但是,CLIA方法的试剂成本相对较高,且发光信号的稳定性可能受到多种因素的影响。
4. 荧光免疫分析法(FIA)荧光免疫分析法是一种利用荧光标记的抗体来检测白介素6的方法。
该方法通过荧光信号的强弱来定量检测白介素6的含量,具有灵敏度高、特异性好的特点。
同时,FIA方法还可以实现多色荧光的同时检测,适用于复杂样本中多种细胞因子的同时测定。
但是,FIA方法需要专业的荧光检测设备,且荧光信号可能受到光漂白等因素的影响。
白介素6(IL-6)细胞因子,真的很神奇
![白介素6(IL-6)细胞因子,真的很神奇](https://img.taocdn.com/s3/m/ef131532580102020740be1e650e52ea5518ceb1.png)
⽩介素6(IL-6)细胞因⼦,真的很神奇⽩介素6 ( IL-6) 是⼀种多效细胞因⼦,通过调节免疫和炎症反应在宿主防御中发挥重要作⽤。
IL-6主要由巨噬细胞、T 淋巴细胞、B淋巴细胞产⽣,在机体发⽣炎症反应或感染时,病毒、内毒素、肿瘤坏死因⼦等多种细胞因⼦可诱导机体产⽣IL-6。
IL-6⽣物学作⽤主要体现在诱导B细胞分化产⽣免疫球蛋⽩,促进T细胞增殖⽣长,增强⾎细胞的分化及其抗瘤效应,促进⾻髓造⾎⼲细胞增殖等。
IL-6是细胞因⼦⽹络中的重要成员,在急性炎症反应中处于中⼼地位,IL-6产⽣后诱导产⽣C反应蛋⽩(CRP)和降钙素原(PCT)⽣成,与炎症性疾病及感染程度直接相关。
IL-6能更快的诊断早期炎症及预警脓毒症的发⽣。
另外,IL-6半衰期要短于CRP和PCT,能更快的反应抗⽣素治疗的效果,更好的反应患者的预后。
同时,IL-6可以作为细胞因⼦风暴中疾病严重程度和预后指标的⽣物标志物,其表达优于TNF-α和IL-1。
⼤量的研究结果表明IL-6是⼀种细胞因⼦风暴的合适靶分⼦。
(IL-6在机体中的反应)如果是想将研究IL-6,Abbkine的IL-6细胞因⼦可以考虑:【IL6】重组⼈⽩介素6,PRP100120;【IL6】重组⼩⿏⽩介素6,PRP100371细胞因⼦储存建议:冻⼲粉形式的细胞因⼦⾮常稳定,在-20 ℃ 或-80 ℃ 条件下可保存数年。
冻⼲粉在使⽤前需进⾏溶解,然后以液体形式加到培养基中。
溶解后的细胞因⼦在4℃仅能短期保存 (约 1周)。
如想长期保存,需要先配制成稀释液(其中必须含有载体蛋⽩,如 0.1% BSA,5%HSA,或 10% FBS),然后分装冻存于-20℃或-80℃。
⼀定要避免反复冻融,因每次冻融均会引起蛋⽩的部分失活。
SDS-PAGE分析结果:。
小鼠移植肝内白介素-6对移植肝功能恢复的影响
![小鼠移植肝内白介素-6对移植肝功能恢复的影响](https://img.taocdn.com/s3/m/56c5aa18a7c30c22590102020740be1e650ecca0.png)
图一,肝移植物功能恢复过程图解肝脏再生的转录调控正常肝细胞处于静息期,具有潜在再生的能力。
在切除、缺血再灌注及肝移植的条件下,表现再生活性。
处于静止期的肝细胞,立即转向快速增殖,在24—48小时内启动第一轮的DNA合成过程“4、“’。
在肝脏再生的复杂过程中,肝脏始终保持其它的功能相对稳定。
这其中当然有特殊类型的细胞和机制参与,目前尚未清楚上述问题的机制。
研究认为,细胞因子在再生早期转录因子的激活中起重要的作用。
参予的细胞因子有IL—l、IL一6,TNF—n;转录因子有核因子。
B和信号转导,转录因子激活剂3(STAT3)等““”’。
缺乏TNF受体l的转基因小鼠表现出明显的肝细胞复制缺陷,在肝切除后无明显的N卜。
B和STAT3的DNA激活的迹象“”。
在IL一6缺陷型的转基因小鼠的肝切除模型中STAT3的DNA结合活性消失,DNA复制的现象非常迟缓“5“’。
再生过程调控系统相当复杂,需要多种转录因子和基因产物的相互作用和准确协调。
细胞因子表达、转录因子激活在炎症反应早期出现的细胞因子,TNF—n,IL-6等,也出现在大鼠肝移植模型的早期损伤修复中。
因此这些细胞因子有双重的作用,既参予炎症反应,又参加再生反应。
应用大鼠肝移植模型,发现转录因子的激活和细胞因子IL-6、TNF—Q与冷缺血时间明显相关。
随冷缺血时间延长,IL一6、TNF—n的表达增强,持续表达至再灌注后72小时””。
其它参予的成分有NF。
B,C-jun,N一末端激酶(JNK)””。
以前认为STAT3参予细胞循环的激活,是否参予移植后的修复过中山大学博士学位论文:小鼠移植肝内白介素一6对移植肝功能恢复的影响正文复过程受多种因素影响。
移植物局部损伤和炎症也可引起更严重的免疫反应。
大鼠的肝移植模型证实移植后缺血再灌注损伤、免疫反应、组织修复过程相图二,肝脏的冷却血损伤和免疫反应互影响。
“3”,见图二。
另外观察到MHC—II类抗原,共刺激分子B7的表达增强””。
小鼠白细胞介素6IL-6酶联免疫检测
![小鼠白细胞介素6IL-6酶联免疫检测](https://img.taocdn.com/s3/m/710b64c83186bceb19e8bbe8.png)
小鼠白细胞介素6(IL-6)酶联免疫检测试剂盒使用说明书AE90247Mu使用前仔细阅读本说明书。
本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测小鼠白细胞介素6(IL-6),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
用途:用于小鼠血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素6(IL-6)测定。
工作原理本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中小鼠白细胞介素6(IL-6)水平。
向预先包被了小鼠白细胞介素6(IL-6)克隆抗体的酶标孔中加入小鼠白细胞介素6(IL-6),温育;温育后,加入生物素标记的抗IL-6抗体。
再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅与样品中小鼠白细胞介素6(IL-6)的浓度呈正相关。
试剂盒组成试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品:2400ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存链霉亲和素-HRP 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存生物素标记的抗0.5ml×1瓶 1 ml×1瓶2-8℃保存IL-6抗体显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存需要而未提供的试剂和器材1.37℃恒温箱。
2.标准规格酶标仪。
3.精密移液器及一次性吸头4.蒸馏水,5.一次性试管6.吸水纸注意事项1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
人白介素6(IL-6)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
![人白介素6(IL-6)酶联免疫分析试剂盒使用说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/d6a58f69b84ae45c3b358cbd.png)
人白介素6(IL-6)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围:15.6pg/ml-1000pg/ml最低检测限:3.9pg/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的人IL-6,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-6含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
概述白细胞介素或白介素(interleukin,IL)是一组细胞因子(分泌的信号分子)。
最早发现在白细胞中表达作为细胞间信号传递的手段。
实际上,白细胞介素可以由多种细胞产生。
免疫系统的功能,在很大程度上依赖于白细胞介素。
一些罕见的白细胞介素缺陷不足都常出现自身免疫性疾病或免疫缺陷。
IL-6是一种分子量为26kD的蛋白质,由184个氨基酸组成。
最初人们只发现其在白细胞中合成并在白细胞间发挥作用而命名。
随研究的不断进展,人们逐渐发现不仅激活的淋巴细胞、单核巨噬细胞可以合成和分泌IL-6,而且骨髓细胞和部分肿瘤细胞等也可以产生IL-6。
其作为一种机体在免疫应答中产生的重要介质,具有多种生物学活性。
IL-6是一种多效性细胞因子,能调节多种细胞功能,包括细胞增殖、细胞分化、免疫防御机制及血细胞生成等。
IL-6与多种肿瘤发生、发展关系密切,它通过干预细胞的黏附性和活动力、血栓形成、肿瘤特异性抗原的表达及肿瘤细胞的增殖,从而影响肿瘤的进展。
它还能调节多种细胞功能,包括细胞增殖、细胞分化、免疫防御机制及血细胞生成等。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗IL-6抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-6抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
IL-6酶联免疫吸附实验说明书
![IL-6酶联免疫吸附实验说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/97f1320bb7360b4c2e3f641c.png)
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Materials Provided
Please refer to the Certificate of Analysis (C of A) for components
Other Materials Needed
Buffers* – Wash Buffer: 1x PBS, 0.05% Tween-20 (or eBioscience ELISA Wash Buffer Powder, Cat. No. 00-0400) – Stop Solution: 1M H3PO4 (recommended) or 2N H2SO4 Pipettes Refrigerator Frost-free -20°C freezer ® 96-well plate (Corning Costar 9018 or NUNC Maxisorp ) NOTE: The use of ELISA plates which are not high affinity protein binding plates will result in suboptimal performance, e.g., low signal or inconsistent data. Do not use tissue culture plates or low protein absorption plates. Use only the Corning Costar 9018 or NUNC Maxisorp (Cat. No. 44-2404) 96-well plates 96-well ELISA plate reader (microplate spectrophotometer) ELISA plate washer (highly recommended)
白介素因子实验室检测方法
![白介素因子实验室检测方法](https://img.taocdn.com/s3/m/11934b095b8102d276a20029bd64783e08127d7e.png)
白介素因子实验室检测方法白介素因子是一类蛋白质,它在调节免疫系统、细胞信号传导以及控制炎症反应等方面起着重要的作用。
检测白介素因子的实验室方法可以帮助医生判断机体的免疫状态、炎症程度以及相关疾病的发展情况。
下面是关于白介素因子实验室检测的10条方法:1. 酶联免疫吸附法(ELISA):这是一种常用的检测白介素因子的方法。
它利用特异性抗体与目标蛋白结合,然后用酶标记的抗体进行检测,最后用染色剂检测酶的活性来确定目标蛋白的浓度。
2. 免疫荧光法:该方法利用荧光标记的特异性抗体与目标蛋白结合,然后通过荧光显微镜观察样本中的荧光信号,来确定目标蛋白的存在与否。
3. 电化学发光法(ECL):这是一种灵敏度高、重复性好的检测方法。
它利用酶标记的抗体与目标蛋白结合,在特定的底物存在下,通过电化学反应产生发光信号,从而确定目标蛋白的浓度。
4. 蛋白微阵列技术(Protein microarray):该技术将大量的目标蛋白固定在晶片上,然后用荧光标记的特异性抗体进行检测。
通过分析荧光信号的强度和位置,可以确定目标蛋白的存在与否及其浓度。
5. 质谱法(Mass Spectrometry):质谱法是一种高精度的分析方法,可以对目标蛋白的质量、结构和浓度进行准确测量。
可利用质谱法检测目标蛋白的分子量以及相关的修饰等信息。
6. 免疫印迹法(Western Blotting):该方法通过将蛋白样品进行电泳分离,然后转移到膜上,并利用特异性抗体进行检测。
通过测定荧光信号的强度,可以确定目标蛋白的存在与否及其浓度。
7. 流式细胞术(Flow cytometry):这是一种高通量的细胞分析技术。
通过对细胞进行染色和标记,利用流式细胞仪检测免疫细胞中白介素因子的存在与否,并可定量分析其浓度。
8. RNA表达分析:通过分析细胞中的RNA水平,可以了解细胞中白介素因子的表达情况。
这可以通过实时定量PCR等技术来实现。
9. 蛋白质互作分析:通过利用蛋白质互作技术,可以研究白介素因子与其他蛋白质的相互作用关系,从而深入了解白介素因子在细胞信号传导中的作用机制。
白介素-6(IL-6)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求普恩光德
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白介素-6(IL-6)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)
适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清中白介素-6(interleukin-6,IL-6)含量。
1.1 规格
96人份/盒
1.2 各组分主要组成成分
本试剂盒校准品可溯源至NIBSC/WHO IL-6 International Standard。
2.1外观
试剂盒应组分齐全,内外包装均应完整,标签清晰,液体试剂无渗漏。
2.2空白检出限
空白检出限浓度应不高于1.0pg/ml。
2.3线性范围
在[2~1500]pg/ml区间内,线性相关系数(r)应不低于0.9900。
2.4精密度
2.4.1重复性
变异系数CV应不超于10%。
2.4.2 批间差
变异系数CV应不超于15%。
2.5准确度
用NIBSC/WHO IL-6 International Standard标准品对试剂盒进行测试,相对偏差(B)应
不超过20%。
2.6质控品测定值
试剂盒内配备的质控品,其测定结果均值应在试剂盒质控品标识范围内。
2.7分析特异性/干扰
测定按表1所示规定浓度的IL-1α、血红蛋白、甘油三酯的样本,检测结果应不超过
6.4pg/ml。
表1:分析特异性/干扰物质及浓度列表
2.8稳定性
试剂盒在2~8℃储存条件下的有效期为8个月,试剂盒在规定的条件下保存至有效期
末,检验结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4.1、2.5、2.6规定。
临床检验白介素-6的临床应用
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临床检验白介素-6的临床应用临床检验白介素-6的临床应用一、介绍白介素-6(Interleukin-6,IL-6)是一种细胞因子,被广泛应用于临床检验中。
本文将详细介绍白介素-6的临床应用。
二、白介素-6的生理功能1.促进炎症反应:IL-6通过调节免疫细胞的活化作用,促进炎症反应的发生和发展。
2.促进组织修复:IL-6在组织损伤后的修复过程中起重要作用,促进细胞增生和再生。
3.调节代谢:IL-6参与调节能量代谢,影响脂质代谢、糖代谢等。
4.其他作用:IL-6还与肿瘤发生、骨代谢、纤维化等过程相关。
三、临床检验中的白介素-61.临床样本采集:白介素-6的检测常用血液样本,包括全血、血清和血浆。
2.检测方法:目前常用的检测方法有酶联免疫吸附法(ELISA)、放射免疫测定法(RIA)、流式细胞术等。
3.临床应用:a.炎症性疾病的诊断和监测:IL-6水平的变化可以反映炎症反应的程度和预后。
b.免疫功能评估:IL-6水平的检测可以评估机体的免疫功能状态。
c.肿瘤相关疾病的评估:IL-6与某些肿瘤的发生、发展和预后密切相关,可以作为肿瘤相关疾病的评估指标。
d.自身免疫性疾病的诊断和监测:IL-6与自身免疫性疾病的发生和发展有关,可以用于其诊断和监测。
e.其他临床应用:IL-6在心血管疾病、神经系统疾病、肝炎等方面也有一定的应用。
四、附件本文档涉及的附件请参见附件文件。
五、法律名词及注释1.细胞因子:促进或抑制生物体内干细胞或免疫细胞的增生、分化和功能的一类蛋白质。
2.ELISA:酶联免疫吸附测定法,一种通过酶的作用来检测目标物质的方法。
3.RIA:放射免疫测定法,一种通过放射性同位素标记来检测目标物质的方法。
注:本文档仅为示例文本,具体内容和格式请根据实际需求进行调整。
白介素6(IL-6)检测及临床意义
![白介素6(IL-6)检测及临床意义](https://img.taocdn.com/s3/m/e29bfaaac9d376eeaeaad1f34693daef5ff71354.png)
白介素6(IL-6)检测及临床意义
一、概述
1、白细胞介素-6(IL-6)主要由巨噬细胞、T细胞、B细胞和血管内皮细胞等多种细胞产生,几乎可由所有的基质细胞和免疫细胞产生。
2、IL-6水平的检测可反映患者的病情变化,但其缺乏疾病特异性,通过对IL-6水平的检测了解患者的病情和疗效。
二、检测方法
IL-6的检测方法有流式荧光法、化学发光法、ELISA双抗体夹心法等。
三、临床意义
(一)IL-6与感染
1、IL-6为来源广泛的正向调节因子,主要发挥促炎作用,正常机体血清IL-6水平处于低应答状态,其表达既受机体稳态控制,又可在炎症刺激后发生上调。
2、IL-6是炎症反应最早升高的标志物,是急性感染早期诊断的灵敏指标。
感染后1h开始升高,2h达峰值,升高水平
与感染严重程度呈正相关。
3、IL-6可以介导肝脏的急性期反应,诱导CRP和PCT分别在感染后2h和6h升高,填补PCT和CRP未升高前的空窗期口是体循环中半衰期最长的前炎症介质。
4、IL6鉴别感染与非感染的敏感性比PCT和CRP高,动态观察可用于感染严重程度、抗生素疗效及预后判断。
5、IL-6和PCT联合检测是感染早期诊断的“黄金搭档“。
(二)IL-6与肿瘤
IL-6在某些肿瘤中表达升高如浆细胞瘤、慢性淋巴细胞白血病、急性髓样白血病、多发性骨髓瘤、Lennert 淋巴瘤、霍奇金病、心脏黏液瘤和宫颈癌等,与肿瘤的发展变化以及治疗效果都密切相关。
(三)IL-6与其他疾病
IL-6 在多种疾病时均有明显改变,如冠心病、糖尿病、风湿性关节炎、缺血性脑血管病、器官移植排斥反应、椎间盘退变等炎症性疾病的发病相关。
白介素IL-6在疾病方面研究进展全新
![白介素IL-6在疾病方面研究进展全新](https://img.taocdn.com/s3/m/7e31dc1d8bd63186bdebbcc8.png)
白介素IL-6在疾病研究方面的研究概述白介素IL-6属于多效细胞因子,最初被指定为B细胞分化因子、干扰素β2、肝细胞刺激因子、细胞毒性T细胞分化因子和B细胞刺激因子-2,促进T细胞群体扩增和活化以及B 细胞分化,调节急性期反应,可以影响血管疾病、脂质代谢、胰岛素抵抗、线粒体活动、神经内分泌系统和神经心理行为的激素样属性。
此外,IL-6促进破骨细胞和血管生成的分化、角化细胞和肾小球膜细胞的增殖、以及骨髓瘤和浆细胞瘤细胞的生长。
IL-6几乎可以由所有的基质细胞和免疫系统细胞产生。
IL-6表达的主要激活因子是IL-1b和肿瘤坏死因子,当然,IL-6的合成还有其他途径促进,如Toll样受体、前列腺素、脂肪因子、应激反应和其他细胞因子。
IL-6的产生可通过微小RNA(例如let-7a)、RNA结合蛋白(例如Lin28B和Arid5a)、RNA酶(例如regnase-1)和昼夜节律控制因子如“时钟基因Per1”等进行调节。
人血清中IL-6的正常生理浓度相对较低(1-5pg/ml),在疾病环境中会迅速升高,在极端情况下,例如脑膜炎球菌性败血性休克,可达到ug/ml级别。
因此,IL-6在感染、自身免疫或癌症的情况下会快速诱导,大量表达,IL-6含量增加能更好地预测疾病。
IL-6还可以控制各种稳态功能,包括葡萄糖代谢、下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴,影响心情、疲劳、抑郁、以及造血。
白介素IL-6在传染性炎症的早期阶段,由受到Toll样受体刺激的单核细胞和巨噬细胞产生。
在非感染性炎症,如烧伤或外伤性损伤中,也可以由受到Toll样受体刺激的细胞产生。
这种急性IL-6表达通过刺激各种细胞群体在宿主防御中起着核心作用。
IL-6强烈诱导广谱的急性期蛋白,如C-反应蛋白(CRP)、血清淀粉样蛋白A(SAA)、纤维蛋白原、铁调素、触珠蛋白和抗胰凝乳蛋白酶,而减少白蛋白、细胞色素P450、纤连蛋白和转铁蛋白。
白介素IL-6控制B细胞和体液免疫(见下图)。
国赛生物白介素6(IL—6)测定试剂盒(化学发光免疫分析法) 产品技术要求
![国赛生物白介素6(IL—6)测定试剂盒(化学发光免疫分析法) 产品技术要求](https://img.taocdn.com/s3/m/b26ce7610b4c2e3f572763cf.png)
医疗器械产品技术要求编号:
白介素6(IL-6)测定试剂盒
(化学发光免疫分析法)
2. 性能指标
2.1 试剂条性能指标
2.1.1外观
试剂条中第7孔内组分为棕色含固体微粒的液体或含棕色固体沉淀的透明液体;第12孔内化学发光底物为透明液体;其余皆为无色透明液体,无悬浮物、无沉淀、无絮状物。
2.1.2 装量
溶液装量不少于标示值。
2.1.3 空白限
<1.5 pg/mL。
2.1.4 准确度
检测结果与标定浓度的相对偏差应在±10%以内。
2.1.5 线性范围
试剂盒在 3 pg/mL~5000 pg/mL区间内,其线性相关系数(r)应不小于0.9900。
2.1.6精密度
2.1.6.1 批内精密度
用同一批次的试剂盒,质控品测定结果的变异系数(CV)应不大于10.0%。
2.1.6.2批间精密度
在多个不同批次的试剂盒之间,质控品测定结果的变异系数(CV)应不大于15.0%。
2.2校准品性能指标
2.2.1外观
校准品为米白色粉状冻干块。
1
2.2.2准确性和溯源赋值程序检测
白介素6(IL-6)校准品,测试结果偏差应在±15%之内。
校准品的溯源及赋值程序文件见附录1。
2.2.3批内精密度
对同一批次10瓶校准品进行检测,检测批内精密度CV应≤15%。
2。
小鼠白介素6(IL-6)酶联免疫分析
![小鼠白介素6(IL-6)酶联免疫分析](https://img.taocdn.com/s3/m/37ce17aa3169a4517623a317.png)
小鼠白介素6(IL-6)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T0-8 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白介素6(IL-6)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白介素6(IL-6)水平。
用纯化的小鼠白介素6(IL-6)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白介素6(IL-6),再与HRP标记的白介素6(IL-6)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白介素6(IL-6)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠白介素6(IL-6)浓度。
试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
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小鼠白介素6(IL-6)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T
0-8 ng/L
使用目的:
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白介素6(IL-6)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白介素6(IL-6)水平。
用纯化的小鼠白介素6(IL-6)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白介素6(IL-6),再与HRP标记的白介素6(IL-6)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白介素6(IL-6)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠白介素6(IL-6)浓度。
试剂盒组成
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,
然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。