菠菜色素提取实验报告
菠菜色素的提取和分离实验报告
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菠菜色素的提取和分离实验报告
一、实验目的:
本次实验的主要目的是学习和掌握菠菜色素的提取和分离技术,了解菠菜中色素的提取和分离原理以及实验操作过程。
二、实验方法:
1、制备样品:将新鲜的菠菜叶片洗净晾干,切碎成小块备用;
2、提取菠菜色素:将切碎的菠菜叶片加入适量无水乙醇,研
磨成泥状物,过滤后取得浸提液;
3、进一步提取:将浸提液过滤并再次提取,过滤得到过滤液;
4、分离:将过滤液使用氯仿进行分离,水相和氯仿相层的色
素分离;
5、测定:将得到的色素溶于适量乙醇,测定菠菜色素的吸光度。
三、实验结果:
经过提取和分离,得到了深绿色的液体,与纯菠菜色素溶液比
较后发现两者颜色相似。
测定得到吸光度为0.54。
四、实验分析:
本次实验成功提取和分离了菠菜色素,并得到了较为准确的测定值。
在实验中,氯仿和无水乙醇是常用的有机溶剂,主要是因为在这些溶剂中菠菜色素的溶解度较高。
但是,在实验操作过程中需要注意保持实验环境的卫生和安全,氯仿是一种易挥发的有机物,需要注意防火和防烟。
五、实验结论:
通过本次实验,我们成功地提取和分离了菠菜色素,并且得到了较为准确的测定值。
同时,我们也了解了菠菜中色素的提取和分离原理以及实验操作过程。
本次实验的成功对于今后相关实验研究以及实际应用具有一定的指导意义。
菠菜色素的提取和分离实验报告
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菠菜色素的提取和分离实验报告菠菜色素的提取和分离实验报告引言:菠菜是一种常见的绿叶蔬菜,富含多种营养物质,其中包括一种被称为菠菜色素的成分。
菠菜色素是一类天然的色素,具有良好的生物活性和抗氧化性质。
本实验旨在通过提取和分离的方法,研究菠菜色素的性质和应用。
实验材料和方法:材料:新鲜菠菜叶片、无水乙醇、丙酮、石油醚、二氯甲烷、硅胶G柱、色谱柱、色谱试纸等。
方法:1. 取适量新鲜菠菜叶片,洗净并切碎成细末状。
2. 将菠菜末置于研钵中,加入适量无水乙醇,浸泡30分钟,搅拌均匀。
3. 将菠菜浸提液过滤,收集滤液。
4. 取少量滤液,加入石油醚,振荡混合,使菠菜色素溶于石油醚中。
5. 将石油醚层收集,加入少量无水乙醇,使溶液变为淡绿色。
6. 将淡绿色溶液倒入色谱柱中,以无水乙醇为洗脱剂,收集洗脱液。
7. 将洗脱液浓缩,得到菠菜色素。
实验结果和讨论:通过以上实验步骤,我们成功地从菠菜中提取和分离出了菠菜色素。
在实验过程中,我们使用了无水乙醇作为提取剂,因为乙醇能够有效溶解菠菜中的色素成分。
同时,我们使用石油醚作为分离剂,因为石油醚能够与菠菜色素发生亲和作用,使其溶于石油醚中。
在分离过程中,我们使用了色谱柱和色谱试纸进行分离和检测。
色谱柱是一种常见的分离工具,通过其内部填充的固定相材料,能够将混合物中的成分按照其亲和性和分子大小进行分离。
我们选择了硅胶G柱作为固定相材料,因为硅胶G柱对菠菜色素具有较好的亲和性。
通过使用无水乙醇作为洗脱剂,我们成功地将菠菜色素从硅胶G柱中洗脱出来。
在实验中,我们观察到菠菜色素呈现淡绿色。
这是因为菠菜色素主要由叶绿素和类胡萝卜素等成分组成,这些成分赋予了菠菜独特的颜色。
叶绿素是一种绿色的色素,具有光合作用的功能。
类胡萝卜素则是一类黄、橙、红等颜色的色素,具有抗氧化和免疫调节等作用。
菠菜色素不仅在食品工业中有广泛应用,还在医药和化妆品等领域发挥着重要作用。
菠菜色素富含抗氧化物质,能够有效清除自由基,延缓衰老和预防疾病。
菠菜色素实验报告
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从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇
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从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇实验报告一:菠菜中提取叶绿素的方法比较1.引言叶绿素是一种重要的植物色素,它在光合作用中承担着捕获光能和转化化学能的重要角色。
菠菜是叶绿素含量较高的植物之一,因此本实验旨在比较不同方法提取菠菜中的叶绿素,探索最有效的提取方式。
2.材料与方法2.1 材料:- 新鲜菠菜叶片- 无水乙醚- 丙酮- 高速离心机- 比色皿2.2 方法:- 方法一:无水乙醚提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的无水乙醚,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于乙醚中,然后离心10分钟收集上层液体。
- 方法二:丙酮提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的丙酮,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于丙酮中,然后离心10分钟收集上层液体。
- 方法三:乙醇提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的乙醇,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于乙醇中,然后离心10分钟收集上层液体。
3.结果在三种提取方法中,通过观察可以发现,方法一和方法二提取的叶绿素溶液呈现绿色,而方法三提取的叶绿素溶液呈现黄绿色。
利用分光光度计测定三个试管中叶绿素溶液的吸光度,发现方法一和方法二提取的叶绿素吸光度较高,而方法三的吸光度较低。
4.讨论方法一使用无水乙醚作为提取溶剂,乙醚能有效溶解叶绿素,并且在离心过程中上层液体的分离效果较好。
方法二使用丙酮作为提取溶剂,丙酮也能有效溶解叶绿素,并且丙酮相对于乙醚来说更易于购买。
方法三使用乙醇作为提取溶剂,乙醇对叶绿素的溶解能力较差,导致提取的叶绿素溶液吸光度较低。
5.结论通过对菠菜中提取叶绿素的实验比较,我们发现使用无水乙醚和丙酮作为提取溶剂的方法能够较好地提取菠菜中的叶绿素,并且吸光度较高。
因此,在菠菜中提取叶绿素的实验中,建议使用无水乙醚或丙酮作为提取溶剂。
实验报告二:叶绿素在光合作用中的作用研究1.引言叶绿素是植物体内最重要的色素之一,它在光合作用中起着关键作用。
本实验旨在研究叶绿素在光合作用中的功能和重要性。
从菠菜中提取叶绿素实验报告10篇
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从菠菜中提取叶绿素实验报告10篇从菠菜中提取叶绿素实验报告11.设计方案(1)写出实验原理(推导周期公式及如何计算k和m0 ).由滑块所受合力表达式证明滑块运动是谐振动.给出不计弹簧质量时的T.给出考虑弹簧质量对运动周期的影响,引入等效质量时的T.实验中,改变滑块质量5次,测相应周期.由此,如何计算k和m0 ?(2)列出实验步骤.(3)画出数据表格.2.测量3.进行数据处理并以小论文形式写出实验报告(1)在报告中,要求有完整的实验原理,实验步骤,实验数据,数据处理和计算过程.(2)明确给出实验结论.两弹簧质量之和M= 10-3㎏ = N/m = 10-3㎏i m10-3㎏ 30Ts T2s2 m010-3㎏ i m10-3㎏ 20Ts T2s2 m010-3㎏ KN/m1 42 53 64.数据处理时,可利用计算法或作图法计算k和m0的数值,并将m0与其理论值 M0=(1/3)M( M为两弹簧质量之和)比较, 计算其相对误差 .究竟选取哪种数据处理方法自定.书中提示了用计算法求k和m0的方法.若采用,应理解并具体化.从菠菜中提取叶绿素实验报告21样品的保存及试验前处理1.1 采集的血液样品应及时分离血清,最好分装至离心管中,标记清楚,离心后吸出血清,对应编号冷藏送检,并禁止运输过程中剧烈震动。
1.2 一般情况下,在5天内检测的样品可放置在4℃的冰箱中冷藏,否则低温冷冻保存。
1.3 在检测前血清样品应充分混匀,混匀时采用上下缓慢颠倒几次的方法即可,切忌剧烈振荡而引起产生气泡及血清中蛋白变性。
1.4 对出现胶冻状的血清样品,可采用反复搅动几下再离心的方法有助于缓解该状态。
胶状物是含纤维蛋白和纤维蛋白原的血清,可能是由于放置时间不够造成的血清未完全析出状态。
不建议直接吸取其中少量的清亮血清。
1.5 水禽等样品为排除非特异性反应,还应相应进行灭能反应。
具体操作方法:56℃水浴锅30min或加等量10%鸡红细胞,轻摇后静置30分钟,离心,收集上清液即可。
菠菜叶中色素的提取实验报告
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菠菜叶中色素的提取实验报告一、实验目的1、了解菠菜叶中所含色素的种类和化学性质。
2、掌握从菠菜叶中提取和分离色素的实验方法。
3、学习使用分光光度计测定色素溶液的吸光度。
二、实验原理菠菜叶中含有多种色素,如叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素和胡萝卜素等。
这些色素在有机溶剂中的溶解度不同,因此可以通过萃取的方法将它们分离出来。
叶绿素 a 和叶绿素 b 为吡咯衍生物,可溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等。
叶绿素 a 为蓝绿色,叶绿素 b 为黄绿色。
叶黄素和胡萝卜素属于类胡萝卜素,叶黄素为黄色,胡萝卜素为橙黄色,它们也能溶于有机溶剂。
根据不同色素在层析液中的溶解度不同,在层析过程中,溶解度大的色素随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度小的色素扩散得慢,从而将不同的色素分离开来。
三、实验材料与仪器1、材料:新鲜菠菜叶2、仪器:研钵、漏斗、玻璃棒、分液漏斗、容量瓶、分光光度计、滤纸、脱脂棉等。
3、试剂:无水乙醇、石油醚、丙酮、层析液(石油醚:丙酮=9:1)四、实验步骤1、提取色素称取 5g 新鲜菠菜叶,剪碎后放入研钵中,加入 5mL 无水乙醇、少许碳酸钙和石英砂,充分研磨成匀浆。
将研磨好的匀浆用漏斗过滤到分液漏斗中,用 5mL 无水乙醇冲洗研钵和漏斗,将滤液合并到分液漏斗中。
轻轻振摇分液漏斗,静置分层,放出下层的水相,保留有机相。
2、制备色素溶液将有机相转移到容量瓶中,用无水乙醇定容至 25mL,得到色素提取液。
3、色素的分离取一块干燥的滤纸,剪成 15cm×3cm 的长条,在一端剪去两角,在距离剪角一端 1cm 处用铅笔轻轻画一条横线。
用毛细吸管吸取少量色素提取液,在铅笔线处点样,每次点样后吹干,重复多次,使点样处形成一条细而直的色素线。
将点样好的滤纸放入装有层析液的层析缸中,层析液液面不能超过滤纸的铅笔线。
盖上盖子,进行层析。
当层析液前沿接近滤纸的上端边缘时,取出滤纸,用铅笔标记出色素带的位置。
4、色素的鉴定用分光光度计分别测定叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素和胡萝卜素溶液在不同波长下的吸光度,绘制吸光度波长曲线,确定最大吸收波长。
菠菜色素实验报告
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菠菜色素实验报告1. 引言菠菜是一种富含营养的绿色蔬菜,其中含有一种特殊的绿色色素,称为菠菜色素。
菠菜色素具有抗氧化和抗癌的作用,在食品和药物工业中有广泛的应用。
本实验旨在通过提取菠菜中的色素,并利用分光光度计测定其吸光度,最终确定菠菜色素的浓度。
2. 实验步骤2.1 材料准备•新鲜菠菜叶片•无水乙醇•无水二氯甲烷•磨杵和研钵•过滤纸•取代皿•离心管•分光光度计2.2 色素提取1.取适量新鲜菠菜叶片,用清水洗净。
2.将菠菜叶片切碎放入研钵中,并加入少量的无水乙醇。
3.用磨杵搅拌菠菜叶片,使其完全破碎,以帮助色素的溶解。
4.将研磨好的菠菜叶片及溶解的色素转移至离心管中。
5.将离心管放入离心机中,离心10分钟,使菠菜色素与乙醇分离出来。
2.3 菠菜色素的分光光度测定1.取一定量的色素溶液加入取代皿中,用过滤纸将溶液上的杂质滤去。
2.使用分光光度计调整选取的波长,一般选择吸光度最大的波长进行测定。
3.调零分光光度计,以去除背景吸光度。
4.将取代皿放入分光光度计中,记录吸光度值。
5.根据标准曲线,计算菠菜色素的浓度。
3. 结果与讨论3.1 实验数据吸光度菠菜色素浓度 (mg/L)0.27 0.50.52 1.00.88 1.51.152.01.422.51.74 3.03.2 标准曲线绘制与浓度计算根据实验数据,绘制菠菜色素的吸光度与浓度的曲线图。
通过线性回归分析,得到表达式:吸光度 = 0.676 × 浓度 + 0.065,R² = 0.987。
根据标准曲线的方程,可以根据测得的吸光度值计算菠菜色素的浓度。
3.3 实验结果根据标准曲线计算吸光度为0.95的菠菜色素浓度为1.27 mg/L。
4. 结论通过本实验,成功提取了菠菜中的色素,并利用分光光度计测得吸光度值。
根据标准曲线,计算得到菠菜色素浓度为1.27 mg/L。
本实验结果可为菠菜色素的定量测定提供参考。
5. 参考文献(文献引用格式根据需求进行调整)。
从菠菜中提取叶绿素实验报告文档3篇
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从菠菜中提取叶绿素实验报告文档3篇Report document of chlorophyll extraction from spinac h从菠菜中提取叶绿素实验报告文档3篇小泰温馨提示:实验报告是把实验的目的、方法、过程、结果等记录下来,经过整理,写成的书面汇报。
本文档根据实验报告内容要求展开说明,具有实践指导意义,便于学习和使用,本文下载后内容可随意修改调整及打印。
本文简要目录如下:【下载该文档后使用Word打开,按住键盘Ctrl键且鼠标单击目录内容即可跳转到对应篇章】1、篇章1:从菠菜中提取叶绿素实验报告文档2、篇章2:从菠菜中提取叶绿素实验报告文档3、篇章3:从菠菜中提取叶绿素实验报告文档篇章1:从菠菜中提取叶绿素实验报告文档【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质的分离提纯与方法。
2、通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg };胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯,有三种异构体;叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。
当提取时,从上到下颜色依次为:黄绿色,蓝绿色,黄色和橙色。
【实验仪器】研钵,色谱柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化铝,菠菜叶,烧杯,漏斗,玻璃棒,滤纸,剪刀,脱脂棉,纱布。
【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨,研磨时放入少量碳酸钙,防止研磨过猛破坏叶绿素结构,研磨至烂。
2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,盖上表面皿,防止有机溶剂蒸发。
按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。
3、浸泡期间,填充色谱柱,在最下面垫入脱脂棉,再盖上一个小滤纸片,装入氧化铝至4/5处,再盖上一层滤纸片。
4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中,转入分液漏斗,加入10mL水洗涤,除去水层(下层),再用10mL水洗涤一次。
高中色素提取实验报告(3篇)
![高中色素提取实验报告(3篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/1e77bfe403d276a20029bd64783e0912a2167cfb.png)
一、实验目的1. 学习叶绿体中色素的提取和分离方法。
2. 了解叶绿体色素的种类及其在光合作用中的作用。
3. 培养学生的实验操作能力和观察分析能力。
二、实验原理叶绿体中含有多种色素,其中绿色素包括叶绿素a和叶绿素b,黄色素包括胡萝卜素和叶黄素。
这些色素都易溶于有机溶剂,如丙酮或无水乙醇。
利用有机溶剂提取叶绿体中的色素,并通过层析法分离不同色素,可观察到不同颜色的色素带,从而确定叶绿体中存在的色素种类。
三、实验材料1. 新鲜绿色叶片(如菠菜叶)2. 无水乙醇3. 层析液(由20份石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成)4. 二氧化硅5. 碳酸钙6. 研钵7. 玻璃棒8. 定性滤纸9. 毛细吸管10. 试管11. 烧杯12. 移液管13. 天平四、实验步骤1. 提取色素(1)称取5g新鲜绿色叶片,剪碎,放入研钵中。
(2)向研钵中加入少量二氧化硅和碳酸钙,用玻璃棒充分研磨。
(3)向研钵中加入10mL无水乙醇,继续研磨,使叶片中的色素充分溶解。
(4)将研磨液倒入试管中,用移液管吸取上层清液。
2. 制备滤纸条(1)将定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽的滤纸条。
(2)将滤纸条一端剪去两角,在此端距顶端1cm处用铅笔划一条细横线。
3. 层析分离(1)将烧杯中加入少量层析液,使层析液浸没滤纸条底端。
(2)将滤纸条插入烧杯中,使滤液细线位于液面之上。
(3)观察色素分离情况,记录不同色素带的位置和颜色。
4. 观察记录(1)记录不同色素带的位置和颜色,从上到下依次为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。
(2)分析实验结果,总结叶绿体中存在的色素种类及其在光合作用中的作用。
五、实验结果与分析1. 实验结果从上到下依次为胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)和叶绿素b(黄绿色)。
2. 实验分析通过实验观察到四种不同的色素带,证明叶绿体中存在四种色素,分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。
这些色素在光合作用中具有不同的作用,如胡萝卜素吸收光能,叶黄素保护叶绿素免受光损伤,叶绿素a和叶绿素b则参与光合作用的化学反应。
用菠菜做实验报告(3篇)
![用菠菜做实验报告(3篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/2c3b9210a517866fb84ae45c3b3567ec102ddc2d.png)
第1篇一、实验目的1. 了解叶绿素提取的原理和方法。
2. 掌握菠菜叶绿素提取实验的操作步骤。
3. 学习叶绿素含量的测定方法。
4. 探讨不同提取方法对叶绿素提取效果的影响。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素,主要存在于植物的叶绿体中。
叶绿素具有多种形态,其中叶绿素a和叶绿素b是植物体内最常见的两种。
叶绿素提取方法有溶剂提取法、研磨提取法等。
本实验采用溶剂提取法,利用丙酮作为提取剂,将菠菜叶绿素从植物组织中提取出来。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜叶、丙酮、无水乙醇、碳酸钙、蒸馏水、滤纸、剪刀、研钵、天平、容量瓶、移液管、比色皿、紫外-可见分光光度计等。
2. 实验试剂:无水乙醇、丙酮、碳酸钙、蒸馏水、叶绿素标准溶液(10mg/mL)等。
四、实验步骤1. 准备菠菜样品:取新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,称取0.5g,置于研钵中。
2. 加入碳酸钙:向研钵中加入0.1g碳酸钙,充分研磨。
3. 加入丙酮:向研钵中加入5mL丙酮,继续研磨。
4. 过滤:将研磨好的样品通过滤纸过滤,收集滤液。
5. 定容:将滤液转移至10mL容量瓶中,用丙酮定容至刻度线。
6. 测定叶绿素含量:将叶绿素标准溶液、样品溶液和空白溶液分别置于比色皿中,在波长645nm和663nm处测定吸光度。
7. 计算叶绿素含量:根据标准曲线,计算样品中叶绿素a和叶绿素b的含量。
五、实验结果与分析1. 叶绿素标准曲线:根据标准溶液的浓度和吸光度,绘制叶绿素标准曲线。
2. 样品叶绿素含量:根据标准曲线,计算样品中叶绿素a和叶绿素b的含量。
3. 不同提取方法比较:分别采用溶剂提取法和研磨提取法提取菠菜叶绿素,比较两种方法对叶绿素提取效果的影响。
六、实验结论1. 成功提取菠菜叶绿素,并通过比色法测定了其含量。
2. 溶剂提取法是一种有效提取叶绿素的方法,具有操作简便、提取效率高等优点。
3. 研磨提取法在提取过程中,叶绿素可能会受到一定程度的破坏,提取效果不如溶剂提取法。
菠菜中叶绿素的提取实验报告
![菠菜中叶绿素的提取实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/a5167aeacd22bcd126fff705cc17552706225e30.png)
菠菜中叶绿素的提取实验报告一、实验目的本实验旨在从菠菜中提取叶绿素,并对其进行观察和分析,以深入了解叶绿素的性质和提取方法。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素,它不溶于水,但能溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等。
本实验利用这一特性,将菠菜叶中的叶绿素溶解在有机溶剂中,经过过滤、分离等步骤,提取出叶绿素。
三、实验材料与仪器1、材料:新鲜菠菜叶2、仪器:研钵、漏斗、玻璃棒、烧杯、量筒、滤纸、铁架台、酒精灯、石棉网、分液漏斗3、试剂:无水乙醇、石油醚四、实验步骤1、取材选取新鲜的菠菜叶,洗净并擦干,去除叶柄和中脉,称取 10g 剪碎备用。
2、研磨将剪碎的菠菜叶放入研钵中,加入少量石英砂和碳酸钙粉末,以防止叶绿素被破坏。
然后加入 10ml 无水乙醇,充分研磨成匀浆。
3、过滤将研磨好的匀浆用漏斗过滤到烧杯中,用少量无水乙醇冲洗研钵和滤纸,使滤液尽量全部收集到烧杯中。
4、分离将滤液倒入分液漏斗中,加入 5ml 石油醚,充分振荡后静置,使溶液分层。
上层为含有叶绿素的石油醚溶液,下层为乙醇溶液。
5、收集将上层的石油醚溶液缓慢倒入另一干净的烧杯中,即为提取出的叶绿素溶液。
五、实验现象1、在研磨过程中,菠菜叶逐渐变成深绿色的浆状,有明显的乙醇气味。
2、过滤后,得到深绿色的滤液。
3、加入石油醚振荡静置后,溶液分层,上层为绿色的石油醚溶液,下层为无色的乙醇溶液。
六、实验结果成功提取出了菠菜叶中的叶绿素,得到了绿色的叶绿素溶液。
七、实验讨论1、研磨时加入石英砂和碳酸钙粉末的作用分别是什么?石英砂可以增加研磨的效果,使菠菜叶破碎得更充分,有利于叶绿素的释放。
碳酸钙粉末可以中和细胞中的酸性物质,防止叶绿素在研磨过程中被破坏。
2、为什么选择无水乙醇作为提取溶剂?无水乙醇是一种良好的有机溶剂,能有效地溶解叶绿素,并且其挥发性较强,便于后续的分离操作。
3、实验中需要注意哪些事项?(1)实验过程中要尽量避免叶绿素接触强光,以免发生光解。
从菠菜中提取叶绿素实验报告(分享10篇)
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从菠菜中提取叶绿素实验报告(分享10篇)(经典版)编制人:__________________审核人:__________________审批人:__________________编制单位:__________________编制时间:____年____月____日序言下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
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菠菜萃取的实验报告
![菠菜萃取的实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/b31fddb0f9c75fbfc77da26925c52cc58bd69033.png)
一、实验目的1. 掌握叶绿素萃取的实验原理和方法。
2. 学习使用有机溶剂进行色素萃取的实验操作。
3. 分析不同萃取条件对叶绿素提取效果的影响。
二、实验原理叶绿素是一种绿色的色素,广泛存在于植物叶片中。
叶绿素具有疏水性,不易溶于水,但易溶于有机溶剂。
本实验采用有机溶剂(如丙酮、乙醇等)对菠菜叶片进行萃取,从而提取叶绿素。
三、实验器材和药品1. 器材:研钵、研杵、烧杯、漏斗、滤纸、分液漏斗、玻璃棒、滴管、酒精灯、烘箱、电子天平、剪刀等。
2. 药品:菠菜、丙酮、无水乙醇、蒸馏水、碳酸钙、氯化钠等。
四、实验步骤1. 准备菠菜:将新鲜的菠菜洗净,晾干水分,用剪刀剪成小段。
2. 萃取叶绿素:将剪好的菠菜放入研钵中,加入适量的丙酮,用研杵充分研磨,直至菠菜叶片完全破碎。
3. 过滤:将研磨好的菠菜丙酮液倒入漏斗中,用滤纸过滤,收集滤液。
4. 干燥:将滤液倒入烧杯中,用酒精灯加热蒸发丙酮,待丙酮完全蒸发后,得到叶绿素固体。
5. 溶解:将干燥后的叶绿素固体加入少量无水乙醇,充分溶解。
6. 测定:取少量叶绿素溶液,用分光光度计测定其在特定波长下的吸光度。
五、实验现象1. 萃取过程中,菠菜叶片逐渐破碎,丙酮液由无色变为绿色。
2. 过滤后,滤液呈绿色,滤渣呈棕褐色。
3. 干燥过程中,丙酮液逐渐蒸发,叶绿素固体析出。
4. 溶解过程中,叶绿素固体在无水乙醇中溶解,溶液呈绿色。
六、实验结论1. 叶绿素可被有机溶剂(如丙酮、乙醇等)萃取。
2. 萃取过程中,菠菜叶片的破碎程度对叶绿素提取效果有显著影响。
3. 不同的萃取条件(如萃取时间、温度等)对叶绿素提取效果有一定影响。
4. 本实验采用丙酮为萃取剂,叶绿素提取效果较好。
七、注意事项1. 萃取过程中,注意控制研磨力度,避免过度研磨导致叶绿素降解。
2. 过滤过程中,注意滤纸的质量,避免滤纸破损影响萃取效果。
3. 干燥过程中,注意控制温度,避免叶绿素分解。
4. 溶解过程中,注意控制无水乙醇的用量,避免溶液浓度过高影响测定结果。
菠菜色素的提取与分离实验报告
![菠菜色素的提取与分离实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/1f8a87c3c9d376eeaeaad1f34693daef5ef713ac.png)
菠菜色素的提取与分离实验报告
实验目的:探究菠菜中色素的提取与分离方法,了解菠菜色素的特性和结构。
实验原理:
菠菜中含有多种色素,包括叶绿素、类胡萝卜素等。
在本实验中,将采用乙醇提取法和硅胶柱层析法分别提取和分离菠菜中的色素。
实验步骤:
1. 将菠菜叶片切碎,加入适量的乙醇,用搅拌器搅拌均匀。
然后将混合液过滤,得到澄清的菠菜提取液。
2. 用无水硅胶将提取液转化为干燥的片状固体。
首先,在玻璃棒上将菠菜提取液和未熔化的硅胶混合,然后将其静置几分钟使其结块。
3. 将混合物放入适当大小的玻璃管中,并加上一层纯水使其达到玻璃管的顶端。
将其放在烘箱中干燥,直到片状固体完全干燥。
4. 将得到的片状固体碾碎成细粉末,然后使用硅胶柱层析法进行分离。
将硅胶填充到柱中,加入适量的乙醇,然后将菠菜粉末悬浮液倒入柱中。
根据色素的亲水性差异,使用适当的溶剂体系进行洗脱分离。
5. 收集分离得到的色素溶液,然后进行质量浓度测定和色谱分析。
实验结果:
通过乙醇提取法和硅胶柱层析法,成功得到了菠菜叶片中的色
素溶液。
通过质量浓度测定和色谱分析,确定了菠菜叶片中的主要色素成分和含量。
实验结论:
菠菜叶片中含有多种色素,其中叶绿素是主要组分。
通过乙醇提取法和硅胶柱层析法,可以有效地提取和分离菠菜叶片中的色素。
实验结果可为进一步研究菠菜色素的结构和功能提供基础。
菠菜柱色谱实验报告
![菠菜柱色谱实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/2f08aa490a4e767f5acfa1c7aa00b52acfc79cf4.png)
一、实验目的1. 了解柱色谱分离技术的原理和应用。
2. 掌握柱色谱分离实验的操作步骤。
3. 学习如何通过柱色谱分离菠菜中的不同色素。
4. 分析实验过程中可能遇到的问题及解决方法。
二、实验原理柱色谱是一种常用的分离纯化方法,其原理是利用不同物质在固定相和流动相之间的吸附、溶解度差异,使混合物中的组分得到分离。
在本实验中,我们利用中性氧化铝作为固定相,石油醚-丙酮混合溶剂作为流动相,对菠菜中的叶绿素、胡萝卜素和叶黄素进行分离。
三、实验材料与仪器材料:- 新鲜菠菜叶- 丙酮、石油醚、无水乙醇- 中性氧化铝- 脱脂棉、滤纸、剪刀、研钵、色谱柱、烧杯、漏斗、玻璃棒仪器:- 研钵- 色谱柱(10cm×2cm)- 烧杯- 漏斗- 玻璃棒- 脱脂棉- 滤纸- 剪刀四、实验步骤1. 菠菜叶处理:- 称取30g新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎。
- 将剪碎的菠菜叶放入研钵中,加入少量碳酸钙,用研钵研磨至烂。
- 将研磨好的菠菜叶转移至烧杯中。
2. 色素提取:- 向烧杯中加入30mL丙酮-石油醚(9:1)混合溶剂,盖上表面皿,防止溶剂蒸发。
- 将烧杯放置于振荡器上,振荡10分钟,使菠菜叶中的色素充分溶解。
3. 色谱柱填充:- 取一根色谱柱,最底部放入少量脱脂棉,防止样品进入固定相时堵塞色谱柱。
- 在脱脂棉上覆盖一层滤纸,然后将中性氧化铝倒入色谱柱中,至柱高的4/5处。
- 再次覆盖一层滤纸,防止氧化铝散落。
4. 样品上柱:- 将提取好的菠菜叶溶液用漏斗缓慢倒入色谱柱中,使样品均匀分布在氧化铝层上。
5. 洗脱与收集:- 将石油醚-丙酮混合溶剂缓慢倒入色谱柱中,使溶剂流经氧化铝层,进行洗脱。
- 收集洗脱液,观察不同颜色带的出现,分别收集各组分。
6. 鉴定与分析:- 对收集到的各组分进行鉴定,如通过比色法、紫外-可见光谱等方法,确定其成分。
五、实验结果与分析1. 颜色带观察:- 洗脱过程中,观察色谱柱中出现的颜色带,从上到下依次为:黄绿色、蓝绿色、黄色和橙色。
菠菜叶中色素的提取实验报告
![菠菜叶中色素的提取实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/22d3b8bdb8f3f90f76c66137ee06eff9aff8496a.png)
菠菜叶中色素的提取实验报告一、实验目的1、学习从菠菜叶中提取色素的方法。
2、了解叶绿体中色素的种类和性质。
二、实验原理菠菜叶中的色素主要包括叶绿素a、叶绿素b、叶黄素和胡萝卜素。
这些色素在不同溶剂中的溶解度不同,因此可以利用有机溶剂将它们提取出来。
叶绿素 a 和叶绿素 b 是绿色的,易溶于有机溶剂如乙醇、丙酮等。
叶黄素是黄色的,胡萝卜素是橙黄色的,它们在有机溶剂中的溶解度也较高。
三、实验材料和仪器1、实验材料新鲜菠菜叶2、实验仪器研钵、漏斗、玻璃棒、脱脂棉、量筒、烧杯、滤纸、毛细管、层析液(石油醚:丙酮:苯= 20:2:1)、天平四、实验步骤1、称取 5g 新鲜菠菜叶,剪碎后放入研钵中,加入少许二氧化硅和碳酸钙,再加入 10mL 无水乙醇,充分研磨成匀浆。
2、在漏斗中放置一层脱脂棉,将研磨后的匀浆倒入漏斗中进行过滤,收集滤液于烧杯中。
3、取一张干燥的滤纸,剪成10cm×2cm 的长条,在一端剪去两角,用毛细管吸取滤液,在距剪角一端 1cm 处沿铅笔线均匀地画一条滤液细线。
4、将滤纸放入装有层析液的层析缸中,层析液不能淹没滤液细线,盖上盖子。
5、观察层析液在滤纸上的扩散情况,待层析液前沿接近滤纸的另一端时,取出滤纸,晾干。
五、实验结果在滤纸条上可以看到四条不同颜色的色素带,从上到下依次为:胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素 a(蓝绿色)、叶绿素 b (黄绿色)。
六、结果分析1、色素带的宽窄反映了色素含量的多少。
叶绿素a 的色素带最宽,说明菠菜叶中叶绿素 a 的含量相对较高;叶绿素 b 的色素带较窄,含量相对较少。
2、色素带的位置反映了色素在层析液中的溶解度大小。
溶解度越大,扩散速度越快,位置越靠上;溶解度越小,扩散速度越慢,位置越靠下。
七、注意事项1、研磨时要充分,以保证色素充分提取。
2、过滤时要用脱脂棉过滤,不能用滤纸,以免吸附色素。
3、画滤液细线时要细、直、均匀,且重复多次,以保证色素含量足够。
色素提取小实验报告(3篇)
![色素提取小实验报告(3篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/75daf0754531b90d6c85ec3a87c24028905f8574.png)
第1篇一、实验目的1. 学习从植物中提取天然色素的方法。
2. 掌握有机溶剂提取和层析分离的基本原理及操作技术。
3. 了解不同植物中色素的种类和含量差异。
二、实验原理植物中的色素大多为天然有机物,不易溶于水,但易溶于有机溶剂。
通过有机溶剂提取,可以将植物中的色素溶解出来。
层析分离是利用不同物质在固定相和流动相中的分配系数不同,使各组分在层析柱中依次分离。
本实验采用层析分离法,将提取的色素进行分离。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜、新鲜胡萝卜、无水乙醇、层析液、层析柱、滤纸、研钵、剪刀、试管、试管架、毛细管、天平等。
2. 实验仪器:分析天平、电热套、烘箱、显微镜等。
四、实验步骤1. 提取菠菜和胡萝卜中的色素:(1)将新鲜菠菜和胡萝卜洗净,沥干水分。
(2)将菠菜和胡萝卜分别剪碎,放入研钵中。
(3)向研钵中加入适量无水乙醇,研磨至糊状。
(4)将研磨液倒入试管中,静置片刻,待上清液析出。
(5)将上清液过滤,得到菠菜和胡萝卜的色素提取液。
2. 层析分离:(1)将层析柱垂直放置在试管架上,在层析柱底部加入少量层析液。
(2)用毛细管吸取菠菜和胡萝卜的色素提取液,沿层析柱壁缓慢滴入层析柱中。
(3)待层析液自然上升至接近层析柱顶部时,停止加样。
(4)观察色素在层析柱中的分离情况,记录各色素的Rf值。
五、实验结果与分析1. 色素提取:通过实验,成功从菠菜和胡萝卜中提取出天然色素。
菠菜提取液呈绿色,胡萝卜提取液呈橙色。
2. 层析分离:菠菜和胡萝卜的色素在层析柱中分离出4条色素带,分别为胡萝卜素(橙色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)和叶绿素b(黄绿色)。
3. Rf值分析:菠菜中胡萝卜素的Rf值为0.6,叶黄素的Rf值为0.4,叶绿素a的Rf值为0.3,叶绿素b的Rf值为0.2;胡萝卜中胡萝卜素的Rf值为0.7,叶黄素的Rf值为0.5,叶绿素a的Rf值为0.2,叶绿素b的Rf值为0.1。
六、实验讨论1. 实验过程中,研磨菠菜和胡萝卜时,应尽量将材料研磨得细碎,以提高色素提取效率。
菠菜色素实验报告
![菠菜色素实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/a69ac4e9eff9aef8951e0699.png)
菠菜色素实验报告篇一:实验2 菠菜中色素的提取和分离实验2 菠菜中色素的提取和分离扬州大学化学化工学院张磊 091301223 一.实验目的:1.了解分离与提纯过程在科学研究和生产生活中的应用;2.掌握分离与提纯实验设计的一般思路和方法;3.掌握菠菜中色素提取的原理,步骤和影响因素;二.实验原理:1.叶绿体中的色素是有机物,不溶于水,易溶于乙醇等有机溶剂中,所以用石油醚、乙醇等能提取色素。
2.本实验选用的是吸附色谱,氧化铝作为吸附剂(极性),色素提取液为吸附液,色素提取液中各成分极性大小为:叶绿素b(黄绿色)>叶绿素a(蓝绿色)>叶黄素(黄色)> β-类胡萝卜素(橙色)。
3.柱层析法的分离原理是根据物质在氧化铝上的吸附力不同而使各组分分离。
一般情况下极性较大的物质易被吸附,极性较弱的物质不易被吸附,所以由上到下为:叶绿素b(黄绿色),叶绿素a(蓝绿色),叶黄素(黄色),β-类胡萝卜素(橙色)。
三、实验材料:仪器:研钵、分液漏斗、层析柱(20×10 cm),表面皿,普通漏斗,量筒试剂:石油醚、乙醇(95)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、中性氧化铝,无水硫酸钠四、实验步骤与内容【探究:菠菜(或青菜)的处理方式】(1)小组讨论处理菠菜的各种方式,然后按照“手撕”,“划几刀,再手撕”,“剪成丁状”,“剪碎后稍加研磨”,“研磨成浆”共五种方式分为五组进行实验,最后确定控制菠菜叶取25克,加入有机溶剂15mL(9mL石油醚+6mL乙醚),浸泡时间取25min为统一条件;(2)开始分组实验,各自处理好各组的菠菜,放置在烧杯中,加入15mL有机溶剂并盖上表面皿浸泡25min。
(3)在浸泡的时间内开始装柱,首先在滴管下口装上橡皮管并夹上弹簧夹(夹紧),在管的出口处放入一小撮棉花,在棉花上放置已剪好的和滴管内径一般大小的圆形滤纸,然后用普通漏斗往里面装入中性氧化铝,最后在氧化铝上再加上和滴管内径一般大小的圆形滤纸,夹在铁架台上备用。
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇
![从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇](https://img.taocdn.com/s3/m/c1b3fc9e6c175f0e7cd137c8.png)
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇从菠菜中提取叶绿素实验报告一【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质的分离提纯与方法。
2、通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg };胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯,有三种异构体;叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。
当提取时,从上到下颜色依次为:黄绿色,蓝绿色,黄色和橙色。
【实验仪器】研钵,色谱柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化铝,菠菜叶,烧杯,漏斗,玻璃棒,滤纸,剪刀,脱脂棉,纱布。
【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨,研磨时放入少量碳酸钙,防止研磨过猛破坏叶绿素结构,研磨至烂。
2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,盖上表面皿,防止有机溶剂蒸发。
按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。
3、浸泡期间,填充色谱柱,在最下面垫入脱脂棉,再盖上一个小滤纸片,装入氧化铝至4/5处,再盖上一层滤纸片。
4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中,转入分液漏斗,加入10mL水洗涤,除去水层(下层),再用10mL水洗涤一次。
5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中,加几滴丙酮既可以看到颜色变化。
6、洗净仪器,收拾实验室,打扫卫生。
【实验记录】虽然分层现象不是非常明显,但是还是可以看得见分层现象。
【结果与讨论】1、做这个实验的时候,我觉得不应该用纱布挤干,因为个人感觉很多色素都被纱布吸走了,导致后来的实验现象没有很明显,经过对比,没用纱布直接过滤的同学做出的现象比用纱布做的现象要明显的多。
2、有机溶剂往往比较容易挥发,所以加入后要盖上表面皿。
3、此实验浸泡15分钟以后现象就可以很明显,因此以后在课堂上给学生演示的时候浸泡的时间不是越长越好的,15分钟足矣。
菠菜色素提取实验报告
![菠菜色素提取实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/5fc97cb4541810a6f524ccbff121dd36a22dc474.png)
一、实验目的1. 掌握植物色素提取的基本原理和方法;2. 了解菠菜中主要色素的种类、性质和含量;3. 熟悉薄层色谱和柱层析法的原理及应用;4. 培养实验操作技能,提高分析问题、解决问题的能力。
二、实验原理植物色素主要分为叶绿素、类胡萝卜素和黄酮类化合物。
叶绿素是植物进行光合作用的重要物质,主要存在于叶绿体中,具有绿色、蓝绿色和黄绿色等不同颜色。
类胡萝卜素是一类具有橙黄色、红色和黄色的色素,具有抗氧化、防癌等作用。
黄酮类化合物是一类具有黄色、绿色和蓝色等不同颜色的色素,具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等作用。
本实验采用溶剂萃取法提取菠菜中的色素,利用不同极性的溶剂对各种色素的溶解度差异进行分离。
实验过程中,采用薄层色谱法和柱层析法对提取的色素进行分离和鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜叶、石油醚、乙醇、丙酮、无水硫酸钠、中性氧化铝、硅胶GF254、CMC水溶液、层析板、点样毛细管、分液漏斗、旋转蒸发仪、研钵、剪刀、量筒、玻璃棒、烧杯、漏斗、层析柱、表面皿、滤纸等。
2. 实验仪器:研钵、分液漏斗、广口瓶、玻璃板、量筒、点样毛细管、抽滤瓶、载玻片、旋转蒸发仪、圆底烧瓶、丙酮、石油醚、95%乙醇、乙酸乙酯、饱和氯化钠、无水硫酸钠、硅胶GF254,CMC水溶液。
四、实验步骤1. 提取菠菜中的色素:(1)将新鲜菠菜叶洗净、晾干,用剪刀剪成小片,放入研钵中;(2)加入适量的石油醚,用研钵研磨,使菠菜叶中的色素充分溶解;(3)将提取液倒入分液漏斗中,加入等体积的乙醇,振摇、分层,收集有机相;(4)将有机相倒入烧杯中,加入适量的无水硫酸钠,搅拌,静置,过滤,得到提取液。
2. 薄层色谱分离:(1)将层析板用铅笔标记起始线,用点样毛细管吸取提取液,在起始线上点样;(2)将层析板放入装有CMC水溶液的玻璃板中,使其吸附层析液;(3)待层析液上升到一定高度时,取出层析板,晾干;(4)观察层析板上的色素带,鉴定各色素。
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菠菜色素的提取和色素分离
曾丽兰
(山西大学化学化工学院山西太原030006)
摘要:在用抽滤法提取色素的过程中,由于抽滤时不好控制,非极性溶剂难免会被抽去,且在几次转移中损失较多,程序繁杂.用浸泡法操作简便易行,损失少,产率高。
故在实验中采取了浸泡法提取色素,使用薄层色谱、柱色谱对叶绿素、胡萝卜素和叶黄素进行了分离。
薄层层析时使用了石油醚-丙酮=8:2,石油醚-乙酸乙酯=6:4的两种不同展开剂,对比展开效果。
在柱层析时,用不同洗脱剂分离得到不同物质,结果证明石油醚-丙酮=9:1做洗脱剂分离胡萝卜素效果最好。
将得到的胡萝卜素进行紫外光谱测定,检验实验成果。
关键词:菠菜色素;提取;分离;胡萝卜素;紫外光谱测定
绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg)),差别仅是a 中一个甲基被b中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂,也是食用的绿色色素,可用于糕点、饮料水等中,添加于胶姆糖中还可消除口臭。
植物中a的含量通常是b的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于石油醚等一些非极性溶剂。
胡萝卜素(C40H56)是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体α—,β—,和γ—胡萝卜素,其中β—异构体含量最多,也最重要。
生长期较长的绿色植物中,异构体中β—的含量多达90%。
β—具有维生素A的生理活性,其结构是两分子维生素A在链端失去两分子水结合而成。
生物体内,β—体受酶催化氧化即形成维生素A。
目前,β—体可作为维生素A使用,也可作为食品工业的色素,β一胡萝卜素还有防癌功能。
叶黄素(C40H56O2)是胡萝卜素的羟基衍生物,在光合作用中能起收集光能的作用。
在绿叶中通常是胡萝卜素的两倍。
较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
由此可见,叶绿素等天然色素有广泛的用途,对于色素的提取与分离就显得很重要了.本实验就提取和分离做了相关的研究。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
仪器:研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱(20×10 cm)、UV-240紫外分光光度计
试剂:石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无水硫酸钠、硅胶G、中性氧化铝(150目~160目)
1.2 提取与分离
1.2.1 浸泡法提取色素
在研钵中放入10 g新鲜的菠菜叶,加入20 mL3:2(体积比)石油醚—乙醇混合液,适当研磨(不要研成糊状,否则会给分离造成困难),用倾析法将提取液转移到分液漏斗中,每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。
洗涤时要轻轻旋荡,以防乳化。
弃去水乙醇层,石油醚层用无水硫酸钠干燥,干燥后滤入小圆底烧瓶,在水浴上蒸发浓缩至大约l m L。
1.2.2 薄层层析
取四块显微载玻片,硅胶G经0.5%羧甲基纤维素钠调制后制板,在室温下晾干后在110°C活化1h。
选取效果最好的一块进行点样。
展开剂:(1)石油醚—丙酮=8:2(体积比)
(2)石油醚—乙酸乙酯=6:4(体积比)
取活化后的层析板,点样,放入预先选定展开剂的广口瓶。
瓶的内壁贴一张高5cm,绕周长4/5的滤纸,下部浸入展开剂中,盖上瓶盖。
待展开剂上升至规定高度时,取出层析板,晾干,做出标记。
分别用两种展开剂展开,比较不同展开剂的展开效果。
观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小。
注意更换展开剂时,需干燥层析瓶,不允许前一种展开剂带入后一系统。
1.2.3 柱层析
取少量脱脂棉在小烧杯中用石油醚浸润后,挤压除去气泡,放在层析柱底部。
在层析柱中加15cm石油醚。
加入中性氧化铝8克,打开柱下活塞,保持石油醚高度不变,氧化铝在柱子中堆积。
装完后,打开下端活塞,放出溶剂,直到氧化铝表面剩下1—2mm高为止(不能使氧化铝表面露出液面)。
将浓缩液用滴管加到柱顶部,打开下端活塞,让液面下降到柱面以下1mm,关闭活塞,加数滴石油醚,打开活塞,使液面下降,几次反复,使色素全部进入柱体。
在柱顶加1.5cm洗脱剂——9:1(体积比)石油醚—丙酮。
打开活塞,用锥形瓶收集。
当第一个有色成分即将滴出时,取另一锥形瓶收集,得橙黄色溶液,即胡萝卜素。
1.3β—胡萝卜素的紫外光谱鉴定
将橙黄色试样稀释后加到1cm的比色皿中,以石油醚做空白试剂,用分光光度计测定400—600nm范围内的吸收,指出测定的λmax值。
2.结果与讨论
2.1提取
由于甲醇与乙醇的极性相近,但是乙醇易得、无毒,所以用3:2的石油醚一乙醇通过浸泡的方法提取菠菜色素,而不是用石油醚—甲醇。
2.2分离
薄层层析
薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,可以用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离。
实验中涉及的菠菜色素的比移值(Rf)(薄层色谱法中原点到斑点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值)列表如下
菠菜色素的比移值(Rf)
在一定的色谱条件下,特定化合物的Rf值是一个常数,因此有可能根据化合物的Rf值鉴定化合物。
菠菜色素中各种色素的比移值Rf大小为:胡萝b素> 叶黄素>叶绿素,按此顺序它们的非极性依次减弱。
物质极性的判断为柱层析中洗脱剂的选择提供了参考价值。
柱层析
胡萝卜素极性最小,因此胡萝卜素的洗脱剂用极性较小的9:l的石油醚-丙酮溶剂效果较好。
但要收集其他几种色素得换用其他的洗脱剂,因为色素的极性各不相同,且有一定差别。
如用7:3石油醚-丙酮分离叶黄素.分离出胡萝卜素和叶黄素后,可加大溶剂极性以较快速度洗脱叶绿素.用3:1:1的丁醇-乙醇-水洗脱剂洗脱叶绿素。
2.3 紫外光谱测定
胡萝卜素的参考数据为481(123027),453(141254),实验所测数据与此有差距,可能是系统误差所导致。
有关紫外光谱情况见紫外光谱如下
3.结论
采用浸泡法提取色素比抽滤法更好。
在薄层层析时,用石油醚-丙酮=8:2时,能更明显的看到分层。
在柱色谱洗脱剂的选择上,基于薄层分析的极性判断选择了石油醚-丙酮=9:1的溶剂作为洗脱剂,取得了非常好的效果。
通过实验,进一步认识到洗脱剂在柱层析中的重要性。
参考文献:
1.兰州大学、复旦大学化学系有机化学教研室.有机化学实验(第2版)I-M3.北京:高等教育出版社,1994
2.王福来.有机化学实验[M].武汉:武汉大学出版社,2001
Abstract and Separate of Spinach Pigment
Zeng Li-lan
(School of Chemistry and Chemical Engineering rShanxi University,Taiyuan 030006,China)
[Abstract] Pigment was abstracted from the leaves of spinach.The chorophyll carotene and xanthophyll were separated by using TLC and Column Chromatography.It was found that the petroleum ether—ethanol(3:2)immersed method is a good method and the selection of washing agent is the key of separating the pigment.
[Key words]extract;separate;ultraviolet;spinach pigment
基础有机化学实验
菠菜色素的提取和色素分离。