菠菜中色素的提取

学生姓名： 学号： 专业班级：

实验类型：□验证■综合□设计□创新 实验日期： 实验地点： 同组学生姓名： 指导教师： 实验成绩：

一．实验名称：菠菜中的色素提取、分离及鉴定 二．实验目的：

进一步熟悉和掌握薄层色谱的原理及应用；加强有机物分离提纯技术的训练。

三．实验原理：

薄层色谱是在玻片上涂布固体吸附剂，利用样品对固体吸附剂的吸附能力不同，选择对样品溶解（解附）能力不同的溶剂，将混合物各成分按照极性大小不同随溶剂前进速度不同而分开的方法。 应用：薄层色谱可以用来分离、鉴别化合物，也可以用于跟踪反应进程。 Rf 值与分子结构的关系

Rf =

溶剂移动的距离

溶质移动的距离

展开剂的极性越大，则极性物质的Rf 值比较大，而非极性物质的Rf 值就较小；反之，展开剂的极性越小，则极性物质的Rf 值较小，非极性物质的Rf 值则较大

四．仪器和试剂：

主要仪器：研钵、烧杯、分液漏斗、锥形瓶、毛细管、展开槽、硅胶板等

主要试剂：5g 菠菜、石油醚、乙醇、丙酮、饱和NaCl 溶液、硅胶G 、羧甲基纤维素、无水42SO Na . 五．试剂物理常数：

试剂及产物

化学式 熔点 溶解性 外观及性状

叶绿素a

C 55 H 72O 5N 4Mg

117～120℃ 溶于乙醇、乙醚、丙酮、氯仿、二

硫化碳和苯,不溶于石油醚 蜡状蓝黑色微小晶体 叶绿素b C 55H 7O 6N 4Mg

20～130℃ 溶于乙醇和乙醚，难溶于石油醚 蜡状蓝黑色微小晶体 叶黄素

25640O H C

183℃

溶于油性溶剂

以乙醚加甲醇精制，得

黄色穗状物,具金属光泽的结晶 胡萝卜素β

5640H C

181℃ 溶于乙醚、丙酮、苯、石油醚

红棕色结晶

学生姓名： 学号： 专业班级：

实验类型：□验证■综合□设计□创新 实验日期： 实验地点： 同组学生姓名： 指导教师： 实验成绩：

N N N

N

H 3C

CH

CH 2R

CH 2CH 3

CH 3H 3C O

CO 2CH 3

CH 2CH 2O

O

CH 3CH 3

CH 3

CH 3

CH 3

Mg

H 3C CH 3

R

CH 3

H 3C

R

H 3C

CH 3

CH 3CH 3

CH 3CH 3

叶绿素a 和叶绿素b 的结构 β-胡萝卜素和叶黄素的结构（β-胡萝卜素:R =H ，叶黄素: R = OH ） （叶绿素a ：R=CH 3， 叶绿素b ：R=CHO ）

六．实验流程

菠菜叶

碾磨

石油醚和乙醇混合物转移至分液漏斗溶液饱和NaCl 次水洗涤2浓缩干燥

色素混合物

薄层色谱分离分离脱附

色素

七．实验步骤

（1）叶绿素提取 在研钵中放入5 g 新鲜的菠菜叶，加入10 mL2：1(体积比)石油醚—乙醇混合液，适当研磨。用倾析法将提取液转移到分液漏斗中，向提取液中加入10mL 饱和 NaCl 溶液( 防止乳化）。用

水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。弃去水乙醇层，石油醚层用无水硫酸钠干燥，干燥后的液体倾至另一锥形瓶（如颜色太浅，可蒸发浓缩）。

（2）点样 用一内径1mm 的毛细管，吸取适量提取液，轻点在距薄板一端1cm 处平行点两点，两点距1cm 。若一次不够可点第二次，但点样斑点直径不超过2mm 。

（3）展开 将上述预制板小心放入预先加好选定展开剂石油醚-丙酮（2：1）的展开槽中，先加盖是缸内蒸汽饱和10min ，再将薄层板斜靠于槽内壁，样点不能浸没在展开剂中。用玻璃皿盖好，待展开剂上升至规定高度时，取出层析板在空气中晾干，用铅笔做出标记，进行观察并计算比移值。

八．实验结果

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实验类型：□验证■综合□设计□创新 实验日期： 实验地点： 同组学生姓名： 指导教师： 实验成绩：

板长7.5cm

由各组分的Rf 值的不同可以看出不同成分的极性。以硅胶板为吸附剂Rf 值越小，样品与固体吸附剂吸附越紧，即样品与固体吸附剂分子间作用力越大，说明样品极性越强或分子量越大。

由上表中的数据可看出胡萝卜素的极性最小，依次是叶绿素a ，叶绿素b ，叶黄素的极性最大，该结果符合实际结果。

九．实验小结：

通过本次实验我了解了薄层色谱在有机物分离中的应用，熟悉和掌握薄层色谱的原理及应用；加强有机物分离提纯技术的训练。了解了Rf 值在测定物质极性中的作用。在一定的色谱条件下，特定化合物的Rf 值是一个常数，因此有可能根据化合物的Rf 值鉴定化合物。

根据不同色素的极性不同我们可以用不同的溶剂去提取分离，如根据相似相溶原理，我们用极性较大的溶剂去提取胡萝卜素，用极性较小的溶剂去提取叶黄素等。

内容 距板一端距离 Rf 值 起始线

1.1cm

无 黄色（叶黄素和其他色素）

2.7cm 0.258

黄绿色（叶绿素b ） 3.2cm 0.339

蓝绿色（叶绿素a ） 3.4cm 0.371 灰色（脱镁叶绿素） 4.0cm 0.468 黄色（胡萝卜素） 6.5cm 0.871 溶剂前沿

7.3cm

无