分子生物学实验室安全常识
实验一分子生物学实验室的安全规范,常规仪器设备及有关操作,常.
实验一分子生物学实验室的安全规范,常规仪器设备及有关操作,常.实验一分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作【实验目的】(1了解实验室规则与安全;(2了解分子生物学实验室的常规仪器、设备、耗材;枪头,离心管的灭菌(3掌握本实验所用仪器的功能和使用方法,尤其是移液枪的使用。
(4学会常用溶液的配置。
【实验原理】生物技术实验不可避免地需要与各种有毒化学药品、废气废液以及病原微生物等打交道,所以安全工作是实验工作中的重中之重。
忽视生物安全可导致实验室工作人员的感染,有毒物质的泄漏可造成严重后果,因此实验室生物安全问题已越来越受关注,并且已成为全世界共同关注的问题。
溶液的配置和用具的灭菌是实验的第一步,也是很实验成功与否很关键的一步。
【实验器具、药品试剂】一、实验器具1L 蓝盖瓶4个,500mL 蓝盖瓶1个,精细天平,1L量筒2个,500mL 量筒2个, 1L 烧杯2个,移液枪2套,高压灭菌锅, 白色枪头1袋,黄色枪头1袋,蓝色枪头1袋,枪头盒3种各5个,离心管3种规格各1袋,铝饭盒,PH试纸二、药品试剂Tris,HCl,NaCl,EDTA,NaOH,ddH2O,无水乙醇【实验内容】一、实验室常见事故分析及若干安全管理对策二、常规仪器设备的使用(一温度控制系统:冰箱,液氮罐,培养箱,水浴锅,烘箱(二水的净化装置:蒸馏水皿,离子交换器,超纯水(三菌消毒设备:蒸汽消毒锅,紫外线、75%乙醇、0.1%SDS(消毒剂,滤器滤膜, 煮沸消毒(四计量系统:称量系统,液体体积的度量,pH值测量,OD值测量,(五离心机:普通离心机,高速离心机,超速离心机,台式超速离心机(六电泳系统:(七PCR仪:电泳装置,电泳槽装置,(八凝胶成像分析系统:(九干燥设备:真空加热干燥箱,电泳凝胶干燥箱,液氮冷冻干燥,真空泵(十其他:微波炉,制冰机,磁力搅拌器,Tip头、Eppendorf管,常规的玻璃或塑料器皿(十一移液器的使用三、常用储液的配置1.1 L 灭菌双蒸水2.1 L 1 M Tris HCl pH 8.0取121.1 g Tris加入到700 ml H2O中,用HCl调PH值到8.0 (大约需要50 ml HCl,定容到1 L。
医学生物化学与分子生物学实验室的生物安全管理对策
医学生物化学与分子生物学实验室的生物安全管理对策医学生物化学与分子生物学实验室是进行医学研究的重要场所，为保障实验室人员的生命安全和实验室中的生物安全，必须严格执行生物安全管理对策。
以下是医学生物化学与分子生物学实验室的生物安全管理对策的相关内容。
一、安全意识培养1.加强安全责任意识：实验室人员必须认识到生物安全管理对策是保障自身安全的重要举措，应牢记安全责任，自觉遵守实验室的生物安全管理制度。
2.提高安全意识教育：实验室负责人应定期举办安全培训会议或安全知识讲座，提高实验室人员对生物安全的认识和应对突发事故的能力。
二、生物安全管理制度1.制定生物安全管理制度：实验室负责人应制定生物安全管理制度，明确实验室人员的安全责任和操作规程，确保实验室的工作按照安全程序进行。
2.建立生物安全管理规范：制定实验室生物安全管理规范，包括有关实验操作的规定、事故应急预案、废弃物处理等，确保实验室操作符合安全要求。
三、实验室装备安全1.购置安全设备：实验室负责人应购置符合安全标准的实验设备，如生物安全柜、防护眼镜、防护手套等防护装备，确保实验操作时的人身安全。
2.保养安全设备：实验室工作人员应定期检查维护安全设备，确保其正常使用和有效防护，发现问题应及时修理或更换。
四、实验操作安全1.严格操作规程：实验室人员必须严格遵守实验操作规程，合理安排实验步骤，减少潜在的安全风险。
2.加强个人防护：实验室人员在进行实验操作时，必须佩戴个人防护装备，如实验室服、口罩、防护手套等，防止实验物质对人体的伤害。
五、废弃物处理安全1.分类储存废弃物：实验室人员应将废弃物进行分类储存，区分有害废弃物和普通废弃物，并按照相关规定进行处理。
2.定期清理废弃物：实验室负责人应制定废弃物清理计划，确保废弃物得到及时清理和安全处理，避免污染实验环境。
六、突发事故处理1.建立应急预案：实验室负责人应建立生物安全事故应急预案，包括联系医疗机构的紧急联系方式、应急救援人员名单、医疗急救设备的存放位置等，以备突发事故时的紧急处理。
分子生物学实验：安全与仪器使用
分子生物学实验安全
紫外线辐射的危害和防护
在实验室里常用的紫外光源包括 手提式紫外灯和紫外透射仪、凝胶成像系统 。 只能通过吸收有害波长的滤片或安全玻璃片才能观察。在紫外光下操作时要戴合适的预防性手 套。应佩戴具有紫外线防护功能的护目镜和/或防护面罩，并遮蔽暴露的皮肤。
建议：使用荧光染料，切胶在Dark reader上操作。
分子生物学实验安全
化学试剂的安全使用
DTT 二硫苏糖醇
很强的还原剂，散发难闻的气味。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危 害健康。当使用固体或高浓度储存液时，戴手套和护目镜，在通风橱中 操作。 PMSF 苯甲基磺酰氟 一种高强度毒性的胆碱酯酶抑制剂。它对呼吸道黏膜、眼睛和皮肤有非常 大的破坏性。可因吸入、咽下或皮肤吸收而致命。戴合适的手套和安全眼镜， 始终在化学通风橱里使用。在接触到的情况下，要立即用大量的水冲洗眼睛或 皮肤，已污染的工作服作为有害废物处理。 Triton X-100 引起严重的眼睛刺激和灼伤。可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴合适 的手套和护目镜。
分子生物学实验安全
化学试剂的安全使用
过硫酸铵 (NH4)2S2O8 对黏膜和上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性。吸入可致命 。操作时戴合适的手套、安全眼镜和防护服。始终在通风橱里操作， 操作完后彻底洗手。 叠氮钠（NaN3） 毒性非常大。它阻断细胞色素电子运送系统。含有叠氮钠的溶液要 标记清楚。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴合适的手套和安 全护目镜，操作时要格外小心。 吉姆萨（Giemsa） 染料咽下可致命或引起眼睛失明，通过吸入和皮肤吸收是有毒的。 其可能的危险是不可逆的效应。戴合适的手套和安全护目镜。在化学通 风橱里操作，不要吸入其粉末。
Dark Reader 荧光透射仪 (Transilluminators) 的特点 : 1.Dark Reader 使用新的无毒 DNA 染料 : SYBR Green, SYBR Gold等, 避免了Ethidium Bromide (EB) 染料对人体的伤害。 2.Dark Reader使用 可见光 （400-500 nm）,没有UV（紫外线），将其对人体的伤害降低 至零。同时，大大降低了 对DNA样本的损伤，克隆DNA的效率将成百倍的提高。 3.灵敏度高，远远高于UV检测仪。 4.适 用染料范围广；荧光素 （fluorescein）, AttoPhos, GelStar, Vistra Green, SYPRO Orange, red-shifted GFP variants等都可使用。对于Rhodamines, Ethidium Bromide(EB)等激发光大于500 nm的染料亦 可适用；可以广泛用于DNA、RNA 以及蛋白质的检测。 5.Dark Reader同时提供琥珀色镜片的观 察眼镜（AG16），供切割凝胶时使用。 紫外照射消毒后由于空气中臭氧富集，不宜立即开始工作，应在停止紫外照射30 min后开始 工作，有条件的实验室，可安装无臭氧紫外灯。 超净工作台中进行紫外照射消毒后，也应用强风进行吹扫后再进行工作，以免臭氧危害身 体健康。
分子生物学实验室常用的有毒试剂及其防护措施
分子生物学实验室常用的有毒试剂及其防护措施分子生物学实验室是一种高度敏感的环境，需要使用许多有毒试剂。
这些试剂在正确使用的情况下可以帮助研究人员获得精确的实验结果，但如果不小心接触到这些试剂，可能会对人体造成严重的伤害。
因此，在实验室中正确地使用和防护这些有毒试剂是非常重要的。
以下是分子生物学实验室常用的有毒试剂及其防护措施：1. 乙醛乙醛是一种常用的固定剂，可以用于固定细胞和组织。
但是，乙醛是一种有毒的气体，可以刺激眼睛和呼吸系统。
因此，在使用乙醛时必须戴上防护眼镜和呼吸面罩，并确保实验室通风良好。
2. 氯仿氯仿是一种有机溶剂，可以用于DNA提取和PCR反应。
但是，氯仿是一种易燃的液体，可以刺激眼睛和呼吸系统。
因此，在使用氯仿时必须戴上防护眼镜和呼吸面罩，并远离火源。
3. 氨基甲酸盐氨基甲酸盐是一种缓冲液，可以用于DNA电泳。
但是，氨基甲酸盐是一种有毒的粉末，可以刺激眼睛和呼吸系统。
因此，在使用氨基甲酸盐时必须戴上防护眼镜和呼吸面罩，并确保实验室通风良好。
4. 氰化物氰化物是一种有毒的化学物质，可以用于RNA提取和蛋白质电泳。
但是，氰化物是一种非常危险的物质，可以导致中毒和死亡。
因此，在使用氰化物时必须戴上全面罩和防护手套，并确保实验室通风良好。
5. 乙酰胆碱酯酶抑制剂乙酰胆碱酯酶抑制剂是一种用于研究神经传递的化学物质。
但是，这种化学物质可以导致中毒和死亡。
因此，在使用乙酰胆碱酯酶抑制剂时必须戴上全面罩和防护手套，并确保实验室通风良好。
6. 氧化铊氧化铊是一种用于研究DNA和RNA的化学物质。
但是，这种化学物质可以导致中毒和死亡。
因此，在使用氧化铊时必须戴上全面罩和防护手套，并确保实验室通风良好。
7. 氟化物氟化物是一种用于研究DNA和RNA的化学物质。
但是，这种化学物质可以导致中毒和死亡。
因此，在使用氟化物时必须戴上全面罩和防护手套，并确保实验室通风良好。
在使用这些有毒试剂时，应该遵循以下安全措施：1. 戴上防护装备：戴上适当的防护眼镜、呼吸面罩、全面罩和防护手套等装备，以避免接触到有毒试剂。
分子生物学技术的使用注意事项
分子生物学技术的使用注意事项随着人类对生物学的认识不断深入，分子生物学技术也得到了广泛应用。
这些技术为我们研究细胞、基因和蛋白质的结构与功能提供了有力的工具。
然而，分子生物学技术的使用需要非常慎重，因为错误的应用可能导致严重的后果。
在进行任何分子生物学实验之前，研究人员应该遵循一系列的注意事项，以确保实验的准确性和安全性。
本文将针对分子生物学技术的使用注意事项进行详细讲解。
首先，准确的实验设计是确保实验成功的关键。
在进行实验之前，研究人员应该对实验目的、方法和预期结果有清晰的了解。
他们应该仔细选择合适的试剂和仪器，并根据实验的要求进行合理的样品准备。
此外，研究人员还应该制定实验的控制组和实验组，以确保实验结果的可比性和可靠性。
其次，实验操作时的实验室安全是至关重要的。
研究人员应该正确佩戴个人防护装备，包括实验室外套、手套、护目镜等，并遵守实验室的安全操作规程。
分子生物学实验通常涉及到对生物材料（如细胞、核酸和蛋白质）的处理，这些材料可能存在潜在的危险，例如病原微生物或有害化学物质。
因此，研究人员在进行实验时必须严格控制实验室环境，避免与其他实验室成员或实验室周围的环境发生交叉污染。
在分子生物学实验中，实验对照组的设置和样品处理的规范也是非常重要的。
实验对照组是用于比较实验组结果的参照标准，帮助我们确定实验数据的可靠性和解释实验结果。
而样品处理的规范则要求研究人员在每个实验步骤中严格遵循相同的操作过程，以减小实验误差的可能性。
此外，在进行分子生物学实验时，需要严格控制实验试剂的质量和纯度，以确保实验结果的可靠性。
选择符合标准的实验试剂供应商是非常重要的。
实验数据的分析与解读也需要谨慎对待。
研究人员应该使用合适的统计方法分析实验数据，并据此作出准确的结论。
在解释实验结果时，研究人员应该考虑实验操作过程中的潜在误差，并确定实验结果的可重复性和可靠性。
此外，研究人员应该对实验结果进行充分的讨论，提出合理的解释和假设，并指出可能的局限性和不确定性。
分子生物学学院实验室安全责任体系
分子生物学学院实验室安全责任体系
背景
为了保障分子生物学学院实验室内的安全，防范实验室内可能出现的危险事件，制定本实验室安全责任体系。
职责
实验室主任
实验室主任是实验室的责任人，负责设计实验室的安全制度，制定安全操作规程、实验室安全管理制度和应急预案，组织实验室安全教育和培训，在实验室进行安全检查和风险评估，并对实验室的安全工作负主要责任。
实验室管理员
实验室管理员是实验室的安全监督责任人，负责实验室的日常安全管理，做好实验室安全设备的维护、管理和检验，对实验室管
理、操作人员进行安全监督和指导，及时处理实验室安全事故和紧急情况。
实验室工作者
实验室工作者应当参加安全教育和培训，并按实验室安全制度和操作规程进行操作。
在实验过程中，必须严格遵守相关规定，正确使用实验室器材及试剂，保持实验室干净整洁，及时向管理员汇报安全隐患和事故。
应急预案
万一发生安全事故，在保证人身安全的前提下，实验室工作者应立即报告实验室管理员，控制现场，尽量避免事故扩大，根据应急预案及时采取措施，保护实验设备和环境安全，同时尽快报告上级主管部门。
结论
分子生物学学院实验室安全责任体系的实施，有助于明确各个管理层级的责任，加强实验室安全教育和培训，提高实验室管理人员和实验工作者的安全管理意识，形成安全意识广泛参与、责任均衡分担的安全保障体系，充分保障实验室人员和设备的安全。
生物实验室安全常识(一)2024
生物实验室安全常识（一）引言：生物实验室作为研究和实验的重要场所，对于实验人员的安全是至关重要的。
掌握生物实验室的安全常识，可以降低实验过程中的风险，并保护实验人员的健康和安全。
本文将介绍生物实验室安全的重要性，并分为五个大点详细阐述实验室安全相关的内容。
一、个人防护措施1.佩戴实验室必备的个人防护装备，如实验服、手套、眼镜和口罩等。
2.正确佩戴个人防护装备，确保穿戴合适并密封，避免物质和生物体进入身体。
3.注意个人卫生，及时洗手并遵守实验室使用的消毒程序。
二、实验室设备和仪器的使用1.熟悉并掌握实验室设备和仪器的正确使用方法，如离心机、显微镜等。
2.合理设置和调整实验室设备和仪器的参数，确保安全操作和准确的实验结果。
3.遵循实验仪器的维护和清洁指南，并定期进行检查和维修。
三、化学品的安全管理1.熟悉实验室使用的化学品性质和安全操作方法，包括化学品的储存、使用和处置等。
2.正确使用和配制浓度适宜的化学试剂，并遵守实验室的化学品标识。
3.注意化学品的相容性，避免不安全的混合和反应。
四、生物实验的安全措施1.严格遵守实验室的生物安全操作规范，包括生物材料的处理、处置和消毒等。
2.采取必要的生物安全措施，如生物安全柜、防护罩等，保障实验人员的安全。
3.遵循生物实验的伦理要求，确保对实验材料和动物的正确处理。
五、应急处理和事故处理1.熟悉实验室的紧急撤离计划和应急处理流程，掌握应急设备的使用方法。
2.及时向实验室管理人员报告实验过程中发生的安全事故或意外情况。
3.参与实验室定期的应急演练，提升应急处理能力。
总结：生物实验室安全常识的掌握对于实验人员的安全至关重要。
个人防护措施、实验室设备和仪器的使用、化学品的安全管理、生物实验的安全措施以及应急处理和事故处理等方面的注意事项都是确保实验人员健康和安全的重要因素。
通过遵守安全操作规范和参与安全培训，可以提高实验室的安全性，保护实验人员免受潜在的危害。
分子生物学实验室安全常识与废弃物处理方法32页PPT
61、奢侈是舒适的，否则就不是奢侈 。——CocoCha nel 62、少而好学，如日出之阳；壮而好学 ，如日 中之光 ；志而 好学， 如炳烛 之光。 ——刘 向 63、三军可夺帅也，匹夫不可夺志也。 ——孔 丘 64、人生就是学校。在那里，与其说好 的教师 是幸福 ，不如 说好的 教师是 不幸。 ——海 贝尔 65、接受挑战，就可以享受胜利的喜悦 。——杰纳勒 尔·乔治·S·巴顿
分子生物学实验室安全常识与废弃物处 理方法
56、极端的法规，就是极端的不公。 ——西 塞罗 57、法律一旦成为人们的需要，拉斯 58、法律规定的惩罚不是为了私人的 利益， 而是为 了公共 的利益 ；一部 分靠有 害的强 制，一 部分靠 榜样的 效力。 ——格 老秀斯 59、假如没有法律他们会更快乐的话 ，那么 法律作 为一件 无用之 物自己 就会消 灭。— —洛克
谢谢！
分子生物学实验室安全操作规范
分子生物学实验室安全操作规范分子生物学实验室是进行生物大分子制备和分析常用技术、蛋白质与核酸的提取与分离、PCR技术、分子杂交与印迹技术、分子克隆技术、外源基因转移技术、蛋白质表达技术、分子标记技术、分子改造技术、测序及人工合成技术、基因组学技术、蛋白质组学技术、生物芯片技术、生物信息学技术、RNA研究技术和电泳检测等的场所，所有进入实验室的工作人员均应遵守必要的操作规范，现在就让未名雷蒙特带您来了解一下:1. 配制有毒挥发性溶液必须在通风橱内进行。
2. 使用实验室仪器设备要严格遵守操作规程，认真填写仪器设备使用记录。
使用精密贵重仪器设备，必须预约，并由专门负责的工作人员上机操作。
3. 实验室产生的工作废液及有毒有害物质，应在安全负责人的指导下妥善处理。
4. 在进行凝胶成像时，必须用保鲜膜把胶包好或用保鲜膜将胶和透照台隔开，确保不污染成像系统。
5. 实验过程中必须穿着工作服。
进行有毒、有害、有刺激性物质或有腐蚀性物质操作时，应戴好防护手套。
6. 由于实验过程中使用溴化乙锭(EB)、丙烯酰胺等有害物质，所有与此有关的操作必须带手套，在特定区域内完成，严禁将接触过此类物质的手套或其他杂物带出工作区。
7. 实验人员未经许可，不得随意动用专用实验的物品。
不得私自配制实验室各房门、抽屉、柜子钥匙，不得私自在实验室内安装其它设备。
8. 爱护仪器设备，节约实验材料，仪器设备如有损坏，要及时报告登记。
如发生意外事故，应立即采取必要措施，并及时报告实验室负责人、值班人员和报警。
9. 实验完毕后做好整理工作，关闭电源、水源、气源和门窗。
10. 工作结束后，清理使用过的台面及区域, 保持整洁。
实验室要保持安静、卫生，严禁在室内吸烟、饮食，严禁随地吐痰、大声喧哗。
分子生物学整体服务安全操作及保养规程
分子生物学整体服务安全操作及保养规程一、前言分子生物学已经成为生命科学的重要组成部分，它可以从分子水平研究生命现象。
随着生命科学技术的不断进步，分子生物学实验已经成为生物科学研究的重要工具。
为保障实验室成员的健康、安全，减少实验操作的风险，本文介绍分子生物学整体服务的操作规程及保养规程，以期营造安全、健康的实验环境。
二、操作规程2.1 实验前准备在进行分子生物学实验之前，应先对实验室进行设备、环境的检查和保养，并确保每位实验人员均已经过培训并掌握相关操作技能。
2.2 实验操作在进行实验操作时，应注意以下几点：1.实验人员应掌握操作技能，严格按照实验操作手册进行操作。
2.操作过程中应佩戴适当的个人防护装备，如手套、防护眼镜等。
3.实验液体应密闭保存，并放于防止温度波动、震动和碰撞的设备内。
4.实验完成后及时清洗设备、工具，并将废液、废料正确处理。
2.3 废弃物处理废弃物应按照实验室废弃物管理规定进行处理，确保其不会对环境和人员造成伤害。
2.4 突发事件处理发生突发事件时，应立刻采取应急措施，并及时上报实验室主管或安全负责人，以确保实验室人员的人身安全和实验室设备的完好。
三、保养规程3.1 器材维护为确保分子生物学实验的结果准确可靠，必须保证分子生物学实验室的器材处于良好状态，操作正确、精度稳定。
器材应定期检查和维护，加强日常保养。
3.2 实验环境维护分子生物学实验室的环境对实验结果有很大的影响。
因此，实验环境应定期维护，包括对温度、湿度、洁净度等方面的检查，以确保实验室环境符合要求。
3.3 实验室消毒在实验室中，消毒工作也非常重要。
实验室中的工作区域、器具和仪器每次使用后都应进行消毒处理，包括实验台面、温度恒定仪、离心机等设备。
四、总结分子生物学实验是现代生命科学研究的重要手段，但也是一项高风险实验。
为了保障实验室人员的人身安全和保护实验室设备的完好，每位实验室人员应掌握相关操作技能、严格遵守实验规程，并加强实验室的保养与管理。
分子生物学试验室安全常识共32页文档
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
分子生物学试验室安全常识
11、不为五斗米折腰。 12、芳菊开林耀，青松冠Байду номын сангаас列。怀此 贞秀姿 ，卓为 霜下杰 。
13、归去来兮，田蜀将芜胡不归。 14、酒能祛百虑，菊为制颓龄。 15、春蚕收长丝，秋熟靡王税。
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分子生物学实验注意事项
分子生物学实验注意事项l. 实验前应做好试剂的配置、用品灭菌等准备工作。
配置各种试剂，必须要使用重蒸水。
2. 使用后的器皿必须认真清洗干净，洗完后还要用重蒸水冲洗三次。
3. 凡是可以进行灭菌的试剂与用具都必须要经过高压蒸汽灭菌后进行使用，防止其他杂质或酶对DNA、RNA 或蛋白质的降解。
4. 凡操作所用的一切塑料器具(Eppendorf 管、吸嘴等)，在使用前都应装入盒子和瓶子中灭菌，且装盒或装瓶过程中都应采用镊子，或戴上一次性手套进行操作，不能直接用手去拿，严防手上杂酶污染。
5. 对于Eeppendorf 管、吸嘴与非玻璃离心管等只能湿热灭菌，然后放置在50°C 箱中烘干后使用。
6. 实验中加入任何试剂后应注意样品的混匀，保温等反应后的样品也应离心一下后再进行下步的实验。
7. 限制性内切酶等工具酶保存于50%的甘油中，-20°C 可以长期保存。
应自始至终将酶保持在零度以下，取酶时不能用手指接触储存酶的部分。
在需要加酶的时候将酶从冰箱中取出，放在冰盒里，用完后立即放回冰箱。
8. 微量移液器的使用：微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器。
其装有直接读数容量计，读数由三位拨号数字组成，在移液器容量范围内能连续调节，从上(最大数)到下(最小数)读取。
移液器的型号即是其最大容量值。
按钮向下压以及放的动作、速度要缓慢平稳。
9. 电子天平使用：1) 注意在天平的最大称量范围内使用。
2) 天平应放在无振动、无空气对流处，使用前须先调节水平泡至中央位置。
3) 使用后应保持仪器的洁净。
10. 微波炉内不可使用金属容器以及空载。
11. 配制药品取试剂时，所用的钥匙不能混用，否则会造成药品污染。
12. 实验过程中应做好每个样品的标记工作，如样品的名称、保存的时间．且一般在Eeppendorf 管上用记号笔作标记时，应在两处重复做好标记。
实验琼脂糖凝胶电泳检测DNA【实验目的】通过本实验学习琼脂糖凝胶电泳检测DNA 的方法和技术。
医学生物化学与分子生物学实验室的生物安全管理对策
医学生物化学与分子生物学实验室的生物安全管理对策医学生物化学与分子生物学实验室是进行高风险实验的场所，因此必须严格遵守生物安全管理对策，以确保实验室的安全性和防范潜在的生物危害。
下面是医学生物化学与分子生物学实验室的生物安全管理对策：1. 实验室建设：实验室应该设立在封闭的空间内，具备必要的安全设施，如防护栏、安全柜、洗消设备等。
实验室的空气流通应良好，有适当的通风和排气系统，以便及时排除生成的有害气体和微生物。
2. 人员培训：实验室人员必须接受相关的生物安全培训，了解基本的生物安全知识、操作规程和事故应急措施。
培训应包括实验室操作流程、个人防护措施以及生物事故的处理和报告方法。
3. 实验操作规程：实验室应制定详细的实验操作规程，明确每个步骤的操作要求和安全注意事项。
操作时应佩戴适当的个人防护装备，如实验服、手套、口罩等，并遵守严格的操作规范。
4. 废物处理：实验室内产生的废物应及时进行处理。
涉及到生物危害的废物要进行适当的消毒处理，确保它们不会对环境和人体造成危害。
实验室应建立废物分类和储存的制度，并定期进行废物处理和清理。
5. 风险评估和管理：实验室在进行高风险实验前要进行详细的风险评估和分析，确定潜在的危险因素和安全控制措施。
对于具有较高风险的实验，需在专业人员的指导下进行。
6. 安全检查和监控：实验室应定期进行安全检查和监控，确保设备和设施的正常运行，并及时发现和处理潜在的安全隐患。
实验室应有相应的安全监控设备，如摄像头、报警系统等，以提高实验室的安全保障能力。
7. 事故应急措施：实验室应建立完善的事故应急预案，包括事故报告、人员疏散、急救措施和事故调查等。
实验室人员应清楚掌握应急电话号码和联系人，能够及时有效地处理突发事故，以减少事故对人员和设备的伤害。
8. 定期培训和演练：实验室应定期进行生物安全培训和应急演练，提高实验人员的安全意识和应急处理能力。
演练可以模拟实际事故情况，让人员熟悉应急程序和应对方法。
分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作
分子克隆
总结词
分子克隆是一种将外源DNA片段插入到载体DNA中，并在宿主细胞中进行复制 和表达的过程。
详细描述
分子克隆的基本步骤包括载体DNA的制备、限制性酶切、连接、转化和筛选等。 所需的仪器设备包括研磨仪、离心机、PCR仪和电泳仪等。
基因表达分析
总结词
基因表达分析是一种检测特定基因在 不同条件下的表达水平的技术。
凝胶电泳仪利用电场作用驱动带电分子在凝胶介质中移动，从而实现分离。通过染色或放射自 显影等技术，可以检测到分子的大小、数量等信息。凝胶电泳仪广泛应用于分子物学实验室中用于观察细胞和组织的常规仪 器设备。
显微镜通过光学系统将样品放大并呈现于观察者眼前，可观 察细胞形态、结构以及染色后的染色体等。根据不同的观察 需求，可以选择光学显微镜、荧光显微镜、倒置显微镜等不 同类型的显微镜。
实验人员在实验过程中应穿戴个人防护装备，如 实验服、护目镜、手套等，以防止化学品和生物 危害物质的侵入。
03 废弃物处理
实验产生的废弃物应按照规定进行分类处理，避 免对环境和人体造成危害。
02
常规仪器设备
离心机
离心机是分子生物学实验室中常用的设备之一，主要用 于分离和纯化各种生物样品。
离心机通过高速旋转产生离心力，使样品中的不同组分 因质量不同而沉降到离心管的底部，从而实现分离和纯 化。常见的离心机有高速离心机和超速离心机，分别适 用于不同质量和转速的样品。
PCR仪
PCR仪是分子生物学实验室中必不可少的设备， 用于进行聚合酶链式反应（PCR），扩增特定的 DNA片段。
PCR仪通过控制温度和时间，实现DNA的变性、 退火和延伸等反应过程，最终得到大量所需的 DNA片段。PCR仪具有高精度和高自动化的特点 ，提高了实验的准确性和可重复性。
分子生物学实验室工作常识
分子生物学实验室工作常识支原体污染支原体污染的鉴别。
一个非常困难，但却无处不在的问题！支原体是最小的能自我复制的微生物，它约0.3μm, 在倒置显微镜下一般看不到。
这些细菌没有细胞壁，对通常使用的抗生素不敏感。
研究者们通常不知道他们的细胞感染了支原体，直到细胞的活性降低或者不能发挥正常的功能才发现。
怀疑有支原体污染，如果没有特殊染色的帮助，或者细胞受到严重的污染明显能观察到，唯一解决的方法是停止实验。
检查和处理支原体污染的唯一办法是常规筛选细胞去除污染，这是一种简单的方法。
防止支原体污染。
只使用没有支原体污染的培养基和血清。
大多数公司的产品都能达到这个要求。
只要没有支原体污染的细胞。
如果是定购，这个要求容易达到。
但如果是从一个研究者那里得到细胞，这个要求很难满足。
直接询问细胞是否进行过支原体污染检查。
常规筛选是一项繁琐的工作。
用细胞做短期实验的研究者和实验室人员都不愿费事去筛选细胞。
他们或许永远不知道：不能增加抗一个细胞表面蛋白抗体的效价或者不能有效表达一个蛋白的原因是应为他们使用了支原体污染的细胞。
支原体污染的筛选。
如果细胞的完整性对你非常重要，每4-6星期常规筛选细胞。
有许多这样的方法：支原体的荧光染色是最容易、最廉价、最常用的筛选方法。
如果你的实验室在进行凝胶和PCR 实验，用支原体的特异性引物进行PCR 检测或许是最容易的方法。
你可以制备自己的引物，或者从公司定购它们（和合适的对照）。
把样品寄到可以进行支原体检测的公司。
公司会提供邮递递送服务，但是没有你自己做得快（尽管这样更容易些，但是费用更高。
）如果你发现了支原体污染，那么你非常幸运！最好的办法是把细胞扔掉，重新解冻细胞。
你或许会忽略被支原体污染的细胞。
有一些处理支原体培养物的方法，但是这些方法很困难，只应该用于那些不可替代的细胞。
最好的办法是与生产除去支原体试剂盒的公司联系，ICN 和Boehringer-Mannheim 有好的试剂盒。
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强神经毒性，防止误吸，操作时快速，存放时密封。
TEMED
分子生物学实验安全常识
❖ 1.3 化学试剂的安全使用
DTT 二硫苏糖醇
很强的还原剂，散发难闻的气味。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。当使用固体 或高浓度储存液时，戴手套和护目镜，在通风橱中操作。
分子生物学实验安全常识
❖ 1.4 微生物的危害及处理
❖重组核酸技术和生物安全
❖采用遗传工程技术人为设计出更多带有新型遗传物质的生物，既涉及到有生命活性的载体自身对 实验室人员的生物安全，还存在大量投放于环境后的生物污染问题——此类问题造成的影响更是深 远而不易觉察。
❖ 当考虑要构建或使用遗传修饰生物时，对实验室工作的危害度评估可能比从事遗传学正常生物（ 未修饰）工作的危害度评估更为重要，不能仅凭经验或未经验证的文献来评估此类生物的潜在危害 。
PMSF 苯甲基磺酰氟
一种高强度毒性的胆碱酯酶抑制剂。它对呼吸道黏膜、眼睛和皮肤有非常大的破坏性。可因吸入 、咽下或皮肤吸收而致命。戴合适的手套和安全眼镜，始终在化学通风橱里使用。在接触到的情况下 ，要立即用大量的水冲洗眼睛或皮肤，已污染的工作服作为有害废物处理。
Triton X-100 引起严重的眼睛刺激和灼伤。可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴合适的手套和护目镜。
例如：构建转基因动物常用的逆转录病毒载体，重组将外源基因转入体内的同时，伴随有致病性增 强的过程。
必须经过验证明确所必需的生物安全级别，并对供体生物的特性、将要转移的核酸序列的性质 、受体生物的特性以及环境特性做一综合评估，才能确定遗传修饰生物体所要求的生物安全水平， 并做到安全操作目标基因。
分子生物学实验安全常识
分子生物学实验安全常识
❖ 1.4 微生物的危害及处理
第三类病原微生物是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物 或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且 具备有效治疗和预防措施的微生物。
高致病性动物病原微生物是指来源于动物的、《动物病原微生物分类名录》 中规定的第一类、第二类病原微生物。
分子生物学实验室安全常识
内容介绍
1. 分子生物学实验安全常识 2. 1.1 分子生物学实验室的基本要求 3. 1.2 实验室电、气、水、火 4. 1.3 化学试剂的安全使用 5. 1.4 微生物的危害及处理 6. 1.5 放射性物质的安全使用 7. 1.6 紫外线辐射的危害及防护 8. 1.7 废弃物的处理
节
约
分子生物学实验安全常识
❖ 1.2 实验室电、气、水、火
➢搬运：搬运或转动钢瓶时，不得用手执着开关阀移动。 ➢使用：按气瓶的类别选用减压器，安装时螺扣应拧紧，并检漏。
开启钢瓶：逆时针方向为开；先开总阀，后开减压阀。 关闭钢瓶：顺时针方向为关；先关总阀，后关减压阀。 气嘴保护：用死扳手夹紧气嘴后再开总阀。 ➢安全：气瓶内的气体不可用尽。 惰性气体：应剩余0.05MPa以上压力的气体。 可燃气体：应剩余0.2Mpa以上压力的气体。 氢 气：应剩余2.0MPa以上压力的气体。 ➢存放：分类分处存放 直立放置时要稳妥；气瓶要远离热源；避免曝晒和强烈振动； 一般实验室内存放气瓶量不得超过两瓶。 氢气瓶和氧气瓶不能同存一处。
生物安全
我国实验室生物安全法规
世界大多国家都是以致病微生物的危害 ✓✓✓✓✓✓《《《《《中病中中中中华原华华华华人微人人人人民生民民民民共物共共共共和实和和和和国验国国国国卫室传传国进生生染染境出行物病病卫境业安防防生动标全治治检植准管法法疫物《理 实 法 检》 微条 施 疫》 生例 办 法物法和》 》生》物医学实验室生物程 防 B安 A应SB安护 生度全LS全-等 L物进防3-通3级 安行、护、用。全分B水AS准我防类BL平S则-国护，4L;》以一-水形表4般平A成示表B以。不实示SBL同验动-S1的室物L、-实的实1A、验相验BSB室应室LS安生的-L2-全物相、2 、 ✓《实验室生物安全通用要求》 ✓《动物病原微生物菌（毒）种保藏管理办法》 ✓《高致病性动物病原微生物实验室生物安全管理审批办法》
• 沉着、冷静 • 易燃固体、易燃气体、易燃液体和带电物体着火时，可用
火 干粉灭火器灭火 ； • 导线或电器着火时，应先断电，再用干粉灭火器灭火。 切不可用泡沫灭火器，此灭火器导电。 • 衣服着火时，应尽快地脱掉衣服，并用水灭火。或就地滚动， 切忌外跑。 防火：火灾不能预期、不能杜绝、只能预防 • 消除火灾隐患（电、火、气、试剂） • 备逃生四件宝（灭火器、绳、手电筒、防毒面具）
分子生物学实验安全常识
❖ 1.3 化学试剂的安全使用
RNA酶的强抑制剂，一种潜在的致癌物质。操作时 戴口罩，在通风橱中进行。沾到手上立即冲洗，废液通 过废液道排泄。
DEPC
(Diethylprocarbonate) (二乙基焦碳酸酯)
CHCl3（Chloroform，氯仿）
常用于DNA和RNA提取，对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有强烈的刺激作用和腐蚀性， 易损害肝和肾。操作时戴手套在通风橱里进行，废液收集后埋入地下。
分子生物学实验安全常识
❖ 1.3 化学试剂的安全使用
总原则： 药品状态定口径，瓶塞取决酸碱性； 受热见光易分解，存放低温棕色瓶； 特殊试剂特殊放，互不反应要记清。
标 识：自配试剂应贴标签，并注明化合物名称、浓 度、配制日期，以及配制人姓名。
分子生物学实验安全常识
❖ 1.3 化学试剂的安全使用
➢易燃易爆 化学试剂：一般将闪点在25℃以下的化学试剂列入易燃化学试剂，它们多是极易挥发的 液体，遇明火即可燃烧。 ➢有毒 化学试剂：以较小剂量进入人体而导致疾病或死亡的才被划为有毒物质。 ➢腐蚀性 化学试剂：化学试剂碰到皮肤、粘膜、眼、呼吸器官都有及时清洗，如各种酸和碱、溴、 苯酚等。 ➢强氧化性 化学试剂：包括过氧化物和含有强氧化能力的含氧酸及其盐，如硝酸铵、高氯酸及其盐、 重铬酸及其盐等。 ➢放射性 化学试剂：同位素示踪技术的发展，广泛应用于生物化学与分子生物学。由于其特殊性， 该种试剂不得带入公共实验室，在各自实验室进行专项管理或者由学院进行统一管理。 ➢不相容 化学试剂：一些化学试剂在储存和操作过程中不能与其他物质接触，否则就发生爆炸，这 些化学试剂称为不相容化学试剂。如：叠氮化物通常用作溶液中的抗菌剂，由于轻微碰撞就可能造 成叠氮化铜的爆炸，因此不能与铜接触（如污水管及管道设施）。
2. 分子生物学功能实验室使用注意事项
分子生物学实验安全常识
❖ 1.1 分子生物学实验室的基本要求
Hale Waihona Puke ➢遵守《公共平台管理办法》 ➢遵守《公共平台通行证管理办法》 ➢遵守《公共平台安全管理制度》 ➢遵守《公共平台有偿使用管理办法》 ➢遵守《公共平台检查制度及违规处罚条例》
分子生物学实验安全常识 ❖ 1.2 实验室电、气、水、火
吉姆萨（Giemsa）
染料咽下可致命或引起眼睛失明，通过吸入和皮肤吸收是有毒的。其可能的危险是不可 逆的效应。戴合适的手套和安全护目镜。在化学通风橱里操作，不要吸入其粉末。
分子生物学实验安全常识
❖ 1.4 微生物的危害及处理
重点任务：实验室感染的控制、实验室对周围环境影响的控 制以及实验室和感染性实验材料的管理控制。
Acrylamide（丙烯酰胺）
DNA测序、SSR及蛋白质分离等技术中作电泳支持物，具神经毒性，聚合后毒性消失。操 作时戴手套在通风橱内进行，聚合后的聚丙烯酰胺凝胶没有毒性，可随普通垃圾一起扔掉，千 万不要倒入下水道.。
分子生物学实验安全常识
❖ 1.3 化学试剂的安全使用 DMSO（二甲亚砜）
是一种既溶于水又溶于有机溶剂的非质子极性溶剂，常用作细胞的冻存液和配制AS。 皮肤沾上之后用大量的水洗及1%~5%稀氨水洗涤。
气！
分子生物学实验安全常识 ❖ 1.2 实验室电、气、水、火
水！
➢上 水：水龙头或水管漏水时，应及时向实验室负责人报告，以便及时维修。
➢下 水：水池内不得倒入培养基、琼脂糖胶等凝胶物质；清洗废液缸时请注意将其中 的固体物质倒入到垃圾桶后才能冲洗，特别是tip和eppendorf管。下水道排水不畅时， 应及时向实验室负责人报告，以便及时疏通。
分子生物学实验安全常识
❖ 1.4 微生物的危害及处理
动物病原微生物分类名录（2005年农业部令第53 号）
第三类：
✓多种动物共患病病原微生物：低致病性流感病毒、伪狂犬病病毒、破伤风梭菌、气肿疽梭 菌、结核分支杆菌、副结核分支杆菌、致病性大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、致病性链球 菌、李氏杆菌、产气荚膜梭菌、嗜水气单胞菌、肉毒梭状芽孢杆菌、腐败梭菌和其他致病性 梭菌、鹦鹉热衣原体、放线菌、钩端螺旋体。 ✓水生动物病病原微生物：流行性造血器官坏死病毒、传染性造血器官坏死病毒、马苏大麻 哈鱼病毒、病毒性出血性败血症病毒、锦鲤疱疹病毒、斑点叉尾鮰病毒、病毒性脑病和视网 膜病毒、传染性胰脏坏死病毒、真鲷虹彩病毒、白鲟虹彩病毒、中肠腺坏死杆状病毒、传染 性皮下和造血器官坏死病毒、核多角体杆状病毒、虾产卵死亡综合症病毒、鳖鳃腺炎病毒、 Taura综合症病毒、对虾白斑综合症病毒、黄头病病毒、草鱼出血病毒、鲤春病毒血症病毒 、鲍球形病毒、鲑鱼传染性贫血病毒。
险
业人员进行维修、改造。
➢检查：如遇线路老化或损坏应及时地更换。
➢触电：断电或绝缘脱离 急救
➢电灯：进入实验室，有需要时打开电源开关、排气扇；离开实验室时若无人请关闭电 灯及排气扇。
➢空调：进入实验室，有需要时可打开空调，温度不得低于27℃；每天下班时实验室负
责人将关闭空调。若在非上班时间内打开空调，离开时请关闭！
电！
➢ 连线：仪器连线必须使用带有接地的三根线的护套线，不可使用普通的塑料绞线。电 话线可用普通的塑料绞线。严禁私拉乱扯。