小鼠睾丸与附睾的提取与位置
小鼠的基本实验操作
• 致死采血量：50～100ml
兔的一般实验操作
• 5、处死
•
•
空气栓色法
20～40ml空气，急性循环衰竭
• 6、解剖
腹腔：肝脏、胃、肠道、圆小囊、胰腺、脾脏、肾脏、 肾上腺、输尿管、膀胱；卵巢、输卵管、子宫；睾丸、附 睾、输精管。 胸腔：肺、心脏。胸腔纵隔。 颈部：甲状腺。颈部N：迷走、交感、减压N。
小鼠的基本实验操作
小鼠的基本实验操作
一、实验目的
通过实际操作，掌握小鼠的一般操作方法，包括小鼠 的抓取和固定、性别鉴定、编号、去毛、给药、采血、麻 醉、处死。
二、实验动物
KM小鼠4只（2雌2雄）
小鼠的基本实验操作
三、操作
1、抓取和固定
2、性别鉴定
雄性：阴囊；生殖器与肛门之间距离长，毛发密 雌性：生殖器与肛门之间距离短，毛发疏（无毛小沟）
小鼠皮肤移植试验、卵巢摘除术
近交系小鼠皮肤移植试验
• 一、动物
• KM小鼠2只（1雌1雄）
• 二、方法： • 尾-背植皮法
• 尾-尾植皮法
近交系小鼠皮肤移植试验
• 三、步骤
• 1、异体尾-背植皮法
• （1）麻醉 固定 • （2）受体小鼠，背部剪毛（1.5cm×1.5cm），酒精消毒， 去皮（0.3cm×0.3cm） • （3）供体小鼠，酒精消毒尾部，尾背部剪皮 （0.5cm×0.5cm） • （4）供体皮片覆盖受体背部方洞 • （5）1～3周后观察结果
• （3）尾静脉注射
小鼠的基本实验操作
• 6、采血
• （1）眼眶后静脉丛采血 （2）眼球摘除采血
小鼠睾丸支持细胞分离培养
小鼠睾丸支持细胞分离培养一、材料和器械：1、材料：小白鼠（18~ 20 日龄）1只2、配液：PBS 1L，高压灭菌细胞洗液：DMEM+双抗消化液：0 25% ( 质量分数) 胰蛋白酶，0 1%( 质量分数) 胶原酶细胞培养液：DMEM+10%FBS+双抗3、器械：镊子、手术剪、手术刀各3-4把，高压灭菌500mL烧杯2个，高压灭菌25 mL离心管、5 mL离心管各20个，高压灭菌酒精棉一瓶细胞培养皿若干冰块若干二、操作步骤：1、处死小鼠颈椎脱臼法处死；2、消毒置于含75% ( 体积分数) 乙醇平皿中浸泡2 min, 然后置于超净台上；3、取睾丸用中剪剪开下腹部皮肤, 眼科剪从下腹部附睾部剪断精索, 取出双侧睾丸, 放入含预冷细胞洗液的培养皿中；4、取实质修剪睾丸附带的精索。
剥除睾丸被膜, 将睾丸实质剪成约1 mm 1 mm 1 mm 碎块, 静置3~ 4 min；5、消化转入25mL 离心管中。
吸出上层细胞洗液, 每只睾丸加入1 5mL 37 预温的0 25% ( 质量分数) 胰蛋白酶，37 高速振荡消化15~ 20min, 直到残存的间质消化成粘液状, 可见成片断的曲细精管；6、终止消化加入入少许血清终止消化,；7、离心1000 r/ min离心5 min, 倾去上层胰酶。
加入DMEM/ F12 培养基重悬, 1000r/min 离心5min。
倾去上层培养液；8、再消化每只睾丸加入1 mL 37 预温的0 1%( 质量分数) 胶原酶, 37 低速缓慢振荡消化20~ 25min；9、铜网过滤取滤液800 r/ min 离心5min, 2 次去除胶原酶, 用培养液洗涤；10、接种往离心管加入细胞培养液5ml左右，吹打均匀，接种到两个30细胞培养皿中，补加培养液到培养皿1/3~1/2,培养皿标记显微观察后放入36CO2培养箱培养。
三、换液纯化，计数结果鉴定。
实验2-小鼠精子畸形试验-20121025
制
颈椎脱臼 处死小鼠 取双侧 附睾
片
3ml磷酸盐 剪碎附睾 缓冲液
擦镜纸 过滤
取悬液滴于 玻片上推片
甲醇固定5 分钟
伊红染色30分钟
（五）阅片
首先在低倍镜下选择背景清晰、精子分布 均匀、重叠较少的区域，然后在高倍镜下 观察结构完整的500个精子，计数其中畸 形的精子数。
五、结果分析与评价
精子畸形形态观察 无钩、香蕉形、无定形、双头、 胖头、 折尾、双尾 计算精子畸形的发生率（头部重叠或全部 重叠的精子、无尾精子不进行计数）。
注意鉴别制片过程中人为造成的精子损伤。
正常精子
胖头精子
双头精子
双尾精子
双尾精子
双尾精子
香蕉形精子
人类精子
Thanks!
四、操作步骤
（一）动物选择 （二）剂量与分组 （三）染毒与采样 （四）制片 （五）阅片
（四）制片
颈椎脱臼法处死小鼠，剪开腹腔，分离并摘取 双侧附睾，将附睾放入盛有约3ml磷酸盐缓冲液或 生理盐水的小平皿中，以眼科剪将附睾剪成小 块，用吸管将悬浮液轻轻吹打5～6次，静置3～ 5min，用四层擦镜纸滤除组织碎片，吸取此精子 悬液滴于清洁载玻片上，均匀推片，待玻片晾干 后用甲醇固定5min，干燥后（此时也可镜检观察 精子形态）再用1%的伊红醇溶液染色1～2h（或 30min），流水冲洗，晾干后镜检。
一、目的
精子畸形试验是检测受试化学毒物 能否破坏哺乳动物精子正常形态的 实验方法 通过该实验，学习和掌握小鼠精子 畸形试验的原理和步骤
二、原理
精子畸形是指精子的形状异常和异常精 子数量的增多; 生殖系统对化学毒物的作用十分敏感, 在其它系统还未出现毒性反应之前，生 殖系统可能已出现损害作用;
实验动物学实验报告大鼠,小鼠,小鼠的基本实验操作,大鼠的基本实验操作
实验一小鼠的基本实验操作一、实验目的:通过实际操作,掌握小鼠的一般操作方法,包括小鼠的抓拿、标记、给药(灌胃、腹腔注射、皮下、肌肉、尾静脉注射)、取血(眶后静脉丛,摘眼球)、脊椎脱臼法处死、大体解剖。
二、实验动物:昆明小鼠2只(1雌1雄)三、实验步骤1、抓取与固定,标记2、去毛3、给药:消化道、腹腔注射、尾静脉注射4、取血:眼眶后静脉丛、尾静脉、眼球摘除法、断头法5、麻醉:氯胺酮腹腔麻醉6、处死:脊椎脱臼法7、解剖:雄性:睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺(在膀胱下方,胶质状,透明)雌性:双角子宫、卵巢肾上腺、胆囊、甲状腺、胃、肝脏、脾、肺、肾、心脏、甲状腺四、实验结果1、抓取与固定标记:抓取:抓小鼠的尾根部固定:抓住小鼠的尾根部,让小鼠在粗糙平面上爬行,后拉尾跟部,右手的拇指与食指抓住小鼠两耳及其间的颈部皮肤,小指与无名指将尾巴固定在手掌面。
并标记: 2、灌胃法:左手抓取小鼠固定后,右手持特制灌胃针,沿一侧口角进针,紧贴咽后壁,头后仰以便伸直消化道,进针2/3后灌生理盐水0、5ml3、注射给药:腹腔注射:从下腹部的两侧进针 ,进针时针与腹部成45°。
进针后稍微晃动针,如无粘滞感则可注射药物尾静脉注射:一人固定小鼠,另一人用左手中指与拇指将尾拉直,食指托住尾部,在尾动脉位置进针注射0、5ml生理盐水。
注射完毕拔出针头,用无菌棉球压迫止血。
4、采血从眼角内侧0、5cm处进针眼球摘除法:左手抓取用固定小鼠,右手持弯头镊在眼球根部将眼球摘除,头朝下,眼眶内血迅速流出。
5、麻醉:0、5%氯胺酮腹腔麻醉:本小鼠重22g,按100mg/kg的药量给药,2分钟麻醉成功6、处死:脊椎脱臼法:按住头部,将尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死7、解剖:雄性:寻找到睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺雌性:双角子宫、卵巢 3、7、2 肾上腺:米粒大小胰腺:位于胃下方,类似于脂肪组织,浑浊状 3、7、4 ,胆囊:芝麻大小,浅绿色,半透明,甲状腺:紧贴环状软骨 ,另可解剖出胃、肝脏、脾、肺、肾、心脏。
实验一小鼠睾丸附睾及输精管精子采集运动能力检测与结构观察
实验用品
3. 实验动物： 选择60日龄以上，体重达到32-35g的昆明种 公鼠。
实验方法
1. 精子采集：
左手捏小鼠尾部，右手持镊子，或以图3-1所 示方法，以颈部脱臼法处死小鼠。使处死的小鼠 仰卧，用75%的酒精棉球消毒腹部开口部位被毛 及皮肤。剪开腹壁，暴露生殖系统。无菌分离睾 丸、附睾及输精管。在含培养液的表面皿中，用 眼科剪除去睾丸、附睾及输精管周围的系膜及脂 肪，并冲洗干净，以免血液或脂肪球混入液体妨 碍精子观察。
实验方法
采集附睾尾精子时，将其剪成几段。采集输精管 精子时，由于小鼠输精管非常细，不能直接冲洗 管腔，将输精管放入含有1ml培养液的表面皿内， 在实体显微镜下，用一只眼科异物针固定输精管， 用另一支异物针向相反方向纵向撕开输精管，精 子会浮游到培养液中。将大块输精管组织拨开， 用吸管连同精子吸出液体部分，装于乳动物的精子在睾丸内形成，并必须经过 在附睾内发生一系列形态、生理和生化方面的 变化而最终达到成熟，才能获得向前运动的能 力，这种向前运动能力的获得是精子受精能力 的重要指标。哺乳动物精子包括头部和尾部两 个主要部分，颈部介于头部和尾部之间，形成 头部和尾部的连接。精子头部主要由核组成，
实验目的
1. 认识雄性小鼠睾丸、附睾、输精管等 生殖器官结构及位置特点；
2.掌握小鼠睾丸、附睾及输精管精子采 集方法；
3.掌握血细胞计数板法精子计数和运动 能力检查的方法；
4.通过睾丸、附睾及输精管精子运动能 力检测，认识精子在睾丸产生后，在 附睾内成熟的过程；
实验目的
5. 掌握精子抹片方法； 6. 掌握染色法进行精子结构观察和顶体 结构观察的方法，认识精子的正常结构； 7. 使学生得到小鼠精子操作的基础训练。
实验方法
小鼠解剖实验报告总结(3篇)
第1篇一、实验目的本次实验旨在通过对小鼠进行解剖，了解小鼠的主要器官位置和结构，掌握解剖技巧，提高实验操作能力，为后续的生物学和医学研究打下基础。
二、实验材料与工具1. 实验动物：成年小鼠（体重约20-30g）2. 实验器材：解剖台、剪刀、镊子、解剖刀、解剖针、解剖剪、解剖显微镜、生理盐水、酒精、碘酒、棉球等三、实验步骤1. 实验动物准备：将小鼠置于解剖台上，用棉球蘸取适量的生理盐水湿润小鼠的皮肤，以便于解剖操作。
2. 解剖过程：（1）切开皮肤：用剪刀沿小鼠腹部正中线剪开皮肤，注意避免损伤内脏器官。
（2）暴露内脏：用镊子提起皮肤，显露内脏器官，包括心脏、肺、肝脏、胃、小肠、大肠、肾脏、膀胱、生殖器官等。
（3）解剖器官：用解剖刀和剪子依次解剖各个器官，观察其位置、形态和结构特点。
（4）记录数据：详细记录每个器官的位置、形态、大小等数据。
3. 实验结果分析：（1）心脏：心脏位于胸腔中央，呈红褐色，分为左右两个心房和两个心室，心脏壁由心肌组成。
（2）肺：肺位于胸腔两侧，呈粉红色，肺泡是肺的基本结构单位，肺泡壁与毛细血管壁紧密相连，有利于气体交换。
（3）肝脏：肝脏位于腹腔右上侧，呈红褐色，具有解毒、代谢和储存营养物质等功能。
（4）胃：胃位于腹腔左侧，呈粉红色，分为贲门、胃底、胃体和幽门，胃壁具有分泌胃酸和消化酶的功能。
（5）小肠：小肠位于腹腔中部，分为十二指肠、空肠和回肠，是消化吸收的主要场所。
（6）大肠：大肠位于腹腔右下方，分为盲肠、阑尾、结肠和直肠，主要吸收水分和电解质。
（7）肾脏：肾脏位于腹腔腰部，呈红褐色，具有过滤血液、生成尿液和调节体内水分和电解质平衡等功能。
（8）膀胱：膀胱位于腹腔底部，呈粉红色，是储存尿液的器官。
（9）生殖器官：雄性小鼠的生殖器官包括睾丸、附睾、阴茎等；雌性小鼠的生殖器官包括卵巢、输卵管、子宫和阴道等。
四、实验心得体会1. 解剖操作过程中，要熟练掌握解剖刀、剪子等工具的使用方法，注意操作规范，避免损伤内脏器官。
小鼠输精管结扎和简单精子操作
小鼠输精管结扎和简单精子操作121140052 王哲迪 174一、实验目的1、掌握小鼠手术的基本技巧2、学习雄性小鼠生殖系统特点3、练习显微操作技术二、实验结果及分析1、以腹部横切法剪开小鼠腹壁后，用镊子夹住脂肪垫将睾丸、附睾和输精管拉出切口。
实验时我们将下面图片中镊子夹着的地方剪掉了1cm。
但是在仔细观察过右边这个图后发现，我们错把附睾体当做了输精管。
我们剪掉的是附睾体，而不是输精管。
2、下面这张图片是小鼠腹壁缝合后的照片。
我们采取了方洁的打结方式。
在将睾丸放回腹腔的过程中，发现不管怎么推，都不能把睾丸推回阴囊，这给缝合带来了一定的难度。
缝合腹壁时一定要小心，因为缝合针很容易扎到皮肤和腹腔内的脏器。
3、下图为皮肤缝合后的照片，同样采用的是方结的打结方式。
皮肤相对于腹壁而言较容易缝合。
4、下图为在解剖镜下观察得到的照片。
可能由于角度问题，这张图片上只能分辨出脂肪体和睾丸，并不能看到附睾体和输精管。
取出睾丸时的操作也存在问题，并没有注意到输精管在哪里。
上面剪切输精管时也没有找对输精管，所以实验失败在没有观察到输精管。
脂肪体睾丸4、下图为在显微镜下观察精子得到的照片。
正如细线所指的，图中有着尖尖的头部和一条细长的尾巴的就是精子。
由于载玻片上有一些脂肪体残留的脂肪，所以在显微镜下会看到很多油花，影响精子的观察。
但是仔细看还是可以看到许多在快速无规则运动的精子。
精子三、备注1、本人在实验中操作的部分：对小鼠进行断颈处理切开腹壁夹出睾丸、附睾和脂肪体剪掉1cm输精管（其实剪掉的是附睾）部分缝合操作2、实验要求用乙醚麻醉小鼠，但是实验过程中发现用乙醚麻醉的方法并不好，小鼠经常会醒过来，而且用乙醚操作时间长了，实验人员出现头疼恶心等不适症状。
由于并不需要对小鼠进行回收，所以为了方便操作我们直接采取了断颈处理的方法。
睾丸
睾丸
主要内容：常见公畜睾丸的形态不 位置、组织结构及功能 基本要求：掌握睾丸的组织结构及 功能
一、形态与位置
形状：长卵圆形 睾丸下降：哺乳类的睾丸完成一定的发育 之后，由腹腔下降到阴囊。 隐睾：男婴出生后单侧或双侧睾丸未降至 阴囊而停留在其正常下降过程中的任何一 处。也就是说阴囊内没有睾丸或仅有一侧 有睾丸。
支持细胞 成熟后丌再分裂，数量恒定。 功能有： ①形成血睾屏障。为维持曲精细管内精子 生成的微环境的稳定性提供了重要保证。 ②具有分泌功能-雌激素睾丸液 ③对精子的支持、释放、营养和吞噬功能， 精子发生必须有支持细胞参不。 生精细胞包括精原细胞、初级精母细胞、次 级精母细胞、精子细织结构图
1、附睾管 2、附睾体 3、输精管 4、附睾尾 5、小叶 6、曲精细管 7、睾
丸网（纵隔） 8、睾丸 9、输出管 10、 输出小管 11、附睾头
二、组织构造
浆膜-白膜-睾丸纵隔-中隔-小叶（2~3条曲 精细管）-直精细管-睾丸网-睾丸输出管 （10~20）-附睾头 曲精细管 结缔组织纤维+基膜+生殖上皮 生殖上皮主要由支持细胞和生精细胞组成
试验六1、小鼠采精方法的研究
实验六、小鼠采精方法中国比较医学杂志CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVEMEDICINE2005年4月第15卷第2期April, 2005 Vol.15 No。
2郑新民,李聚学，魏雁，乔宪凤,周荆荣（湖北省农科院生物技术研究所，武汉430072小鼠是世界上研究最为详尽的哺乳类动物［1］.但是目前人们仍然是通过手术法从小鼠附睾中获取精子，国内外尚无小鼠非手术法采精的报道.手术法采精为众多的科学研究带来了不便：（1)手术法采精必须将雄鼠处死，分离其附睾和输精管来获取精子,过程繁琐，费时费工,且造成不必要的经济浪费［2]。
另外，从附睾中获取的精子由于缺少副性腺中的诸多有益成分，精子品质难以保证[3];（2）不利于小鼠生殖生理的研究,在医学上,人们都是通过“杀鸡取卵”式地宰杀大量的雄鼠来获取精子进行科研分析[4-6],不但造成了很大的经济浪费，而且增加了实验的误差和难度;(3)不利于某些动物模型的建立,例如，由于小鼠精子获取繁琐，人工授精技术不易建立，精子载体转基因技术尚无理想的动物模型,这极不利于该项研究的开展［7］。
由此可见,建立一种方便快速的小鼠非手术法采精技术对解决小鼠手术法采精中存在的问题、小鼠生殖生理的研究和建立某些小鼠动物模型都是很有意义的。
1 材料和方法1。
1 实验动物SPF级昆明小白鼠雄鼠,购自湖北省预防医学科学院。
合格证号为：SYXK(鄂）20035853。
1.2 小鼠假阴道抽吸器的制备小鼠假阴道的制作：取一段长约2 cm,内径8 mm的软质透明塑料管,在其内侧套上一层厚度约0.1 mm的胶膜,胶膜要求透明且有良好的弹性。
在塑料管中部钻一直径为2 mm的小孔,将一外径与小孔相当的硬质插管插入小孔中，深度与塑料管管壁厚度相当,小孔周围用强力胶水密封,向小管中轻轻吹入空气即可将塑料管内侧胶膜充起。
将制好的小鼠假阴道与胶头吸管相连,小鼠假阴道抽吸器即制作完毕。
1.3 电刺激采精仪的制备电刺激采精仪由电刺激发生器和直肠探子两部分组成。
实验动物学实验报告(大鼠,小鼠),小鼠的基本实验操作,大鼠的基本实验操作
实验一小鼠的基本实验操作一、实验目的:通过实际操作，掌握小鼠的一般操作方法，包括小鼠的抓拿、标记、给药(灌胃、腹腔注射、皮下、肌肉、尾静脉注射)、取血（眶后静脉丛，摘眼球)、脊椎脱臼法处死、大体解剖。
二、实验动物：昆明小鼠2只（1雌1雄)三、实验步骤1、抓取和固定,标记2、去毛3、给药：消化道、腹腔注射、尾静脉注射4、取血：眼眶后静脉丛、尾静脉、眼球摘除法、断头法5、麻醉：氯胺酮腹腔麻醉6、处死:脊椎脱臼法7、解剖：雄性：睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺（在膀胱下方，胶质状，透明）雌性:双角子宫、卵巢肾上腺、胆囊、甲状腺、胃、肝脏、脾、肺、肾、心脏、甲状腺四、实验结果1、抓取和固定标记：抓取：抓小鼠的尾根部固定:抓住小鼠的尾根部，让小鼠在粗糙平面上爬行，后拉尾跟部,右手的拇指和食指抓住小鼠两耳及其间的颈部皮肤,小指和无名指将尾巴固定在手掌面.并标记：2、灌胃法：左手抓取小鼠固定后，右手持特制灌胃针，沿一侧口角进针，紧贴咽后壁，头后仰以便伸直消化道，进针2/3后灌生理盐水0.5ml3、注射给药：腹腔注射：从下腹部的两侧进针 ,进针时针与腹部成45°.进针后稍微晃动针，如无粘滞感则可注射药物尾静脉注射：一人固定小鼠，另一人用左手中指和拇指将尾拉直，食指托住尾部,在尾动脉位置进针注射0.5ml生理盐水。
注射完毕拔出针头，用无菌棉球压迫止血.4、采血从眼角内侧0。
5cm处进针眼球摘除法：左手抓取用固定小鼠,右手持弯头镊在眼球根部将眼球摘除，头朝下，眼眶内血迅速流出。
5、麻醉:0.5％氯胺酮腹腔麻醉：本小鼠重22g，按100mg/kg的药量给药,2分钟麻醉成功6、处死:脊椎脱臼法：按住头部,将尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死7、解剖：雄性：寻找到睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺雌性：双角子宫、卵巢 3。
7.2 肾上腺：米粒大小胰腺：位于胃下方，类似于脂肪组织，浑浊状 3。
7。
4 ，胆囊：芝麻大小，浅绿色,半透明,甲状腺：紧贴环状软骨，另可解剖出胃、肝脏、脾、肺、肾、心脏。
protocol 实验
四、大鼠造模信息
1， 配药信息
2ug/kg/d 母液：称取 10mgBPA 溶于 1mlDAMSO 则 10ug/ul
子液：取 10ul 母液溶于 1mlDAMSO 则 1ug/ul ，30ul 分装，-20 度保存
2， 造模信息：
第一批：对照组三笼，实验组三笼，取点已经完成
第二批：对照组四笼，实验组三笼，信息如下：
10%APS
40μL
TEMED
4μL
8．倒去胶上 ddH2O，加浓缩胶至玻璃上缘 0.5cm 出，插上梳子，待胶凝固。
9．配制蛋白样品
蛋白
5×Loading Buffer
1×Loading Buffer
C6 10μL
2.5μL
0
MT2 5μL
5. 在胶面上方加入饱和正丁醇，压平液面，减少气泡。
6. 待胶凝固后，倒去正丁醇，用 ddH2O 洗 1~2 次，末次水不倒掉，防止配浓缩胶期间分离
胶干掉。
7. 配制 5%浓缩胶，配方如下：
30.8%AA
0.67mL
0.5M Tris（pH6.8） 500μL
ddH2O
2.7mL
10%SDS
40μL
9. 重新平衡： A 针筒吸入 5ml Buffer A, 连接柱子， 缓慢推入柱子， 柱子上面留液体保湿，进行下一次操作。 如果操作毕，则留 A 液于柱子顶端，盖上上下盖子，4 度储存。
10．超滤：5000g，4℃离心 1h（分两次）浓缩蛋白（3 KDa MWCO） 11．沉淀：按 1:3 体积加入沉淀液，-20℃过夜，次日 20000g，4℃离心 40min。吸干上 层沉淀液（注意沉淀液不能挥发得过干）。 12．复溶：加入 50μl 左右裂解液溶解蛋白。 13．Bradford 法测蛋白浓度。
雄性小鼠生殖相关解剖图谱
雄鼠的生殖器官包括睾丸、附睾、输精管、储精囊、凝固腺、前列腺、尿道球腺、包皮腺及阴茎。
睾丸：睾丸又称精巢，是产生精子的地方。
睾丸共有两个，幼年时睾丸藏存腹腔内，性成熟以后则下降到阴囊内，其表面为纤维性结缔组织，内部有无数的曲细精管，雄性间质组织产生精子，存在与睾丸的曲细精管内。
附睾：附睾又称精巢上体，由许多弯曲旋廻的细管组成，是接受并暂时贮存精子的地方。
附睾分头、体、尾三部分。
附睾头部与睾丸上部的精细管连接，体部在睾丸的一侧下行，尾部与输精管相连。
精子在通过附睾期间成熟。
成熟的有受精能力的精子通过与附睾相接的输精管，交配时射入雌鼠阴道。
输精管：输精管是精子通过的管道，它是由附睾尾部引出的毛细管在储精囊下面、膀胱的背侧汇合进入尿道。
成年小鼠的输精管存在无数的有受精能力的精子。
储精囊(精液腺)：储精囊呈半月状，形成多数锯齿分叶，内部储存营养精子的白色浓稠分泌物。
凝固腺：为精液腺内侧附着的半月弧形的半透明的器官，起着凝固精液腺所分泌的分泌液的作用，交配后，形成阴栓。
前列腺：前列腺分背叶和腹叶，背叶位于尿道的背侧，腹叶位于膀胱基部附近处尿道腹侧，它与尿道球腺及精液腺等分泌的液体稀释精液，而使精子更为活跃。
尿道球腺：为球状分泌腺，位于骨盆腔内尿道球的背上方。
包皮腺：小鼠的包皮腺较大，是存于阴茎近腹壁上皮间的瓜籽形的脂质分泌腺，开口于包皮内侧。
阴茎：公鼠交配器官，由阴茎体、龟头组成，不交配时保持于包皮内Hypothalamus 下丘脑 Optic chiasma 视交叉 pituitary stalk 垂体Optic chiasm 视神经交叉Adenohypophysis 腺（性）垂体（前叶） intermediate lobe （脑下）垂体中叶 neurohypophysis 垂体神经部。
间接免疫荧光方法检测小鼠睾丸和附睾组织Hsp70的表达
龙源期刊网
间接免疫荧光方法检测小鼠睾丸和附睾组织Ｈｓｐ７０的表达
作者：姜忠玲
来源：《湖北农业科学》2009年第03期
摘要：采用问接免疫荧光方法对小鼠睾丸和附睾组织Hsp70的表迭进行检测。
结果表明，小鼠睾丸组织Hsp70呈极强的表达(+++)，并且在各级生精细细胞及持细胞都呈极强表达；小鼠附睾头、附睾体、附睾尾的Hap70呈现极强表达(+++)，主要在附睾上皮细胞，而管腔内精子偶见阳性染色。
说明间接免疫荧光方法能够特异性、原位地检测小鼠睾丸和附睾组螺Hsp70的表达，而且操作简单。
适用于研究Hsp70在精子发生和成熟过程的作用。
关键词：小鼠；睾丸；附睾；Hsp70；间接免疫荧光。
小鼠睾丸输出管注射法建立转基因小鼠的试验研究
小鼠睾丸输出管注射法建立转基因小鼠的试验研究作者：王鹤曹文广来源：《天津农业科学》2013年第04期摘要：应用玻璃针将脂质体包裹的质粒pEGFP-C1通过睾丸输出管注射到4周龄昆明（KM）小白鼠睾丸曲精细管内。
共注射6只小鼠，其中一只注射后马上做石蜡切片观察转染液注射入曲细精管内的情况，其他5只继续饲养，1周后取1只小鼠培养睾丸的支持细胞，观察是否有荧光出现。
4周后，用PCR法检测剩余4只小鼠睾丸组织曲细精管基因组中的外源DNA，4只都显示为阳性。
表明用睾丸输出小管注射法将外源基因导入小鼠睾丸是一条简便可行的新途径。
关键词：小鼠；转基因；睾丸输出管注射法中图分类号：S865.1文献标识码：ADOI编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2013.04.008Construction of Transgenic Mice by Testicular Efferent Duct InjectionWANG He1，2， CAO Wen-guang2（1. College of Animal Science， Xinjiang Agriculture University， Urumqi， Xinjiang 830052， China； 2.Institute of Animal Science， Chinese Academy of Agricultural Sciences，Beijing 100193， China）Abstract： Using glass needle plasmid pEGFP-C1 liposome-encapsulated was injected into the testicular efferent of 4 weeks male KM mice. Do immediately after an injection of paraffin sections to obserne the transfection solution was injected into the seminiferous tules， remanent mouse to continue to raise， after a week， take one mouse cultivating testicular sertoli cells. After four weeks， exogenous DNA in the PCR method for detecting the remaining four mouse testis seminiferous tubules genome， all as positive. The result indicated that the data in this study to transgenic animals could be established by testicular efferent injection.Key words： mice；transgenic；testis efferent injection转基因动物在生命科学、医学、生物制药等领域有着广泛的研究和应用前景，因此，科学家们一直在探索一种更简便易行、经济实用而又高效的转基因方法。
小鼠睾丸组织分离分选
组织消化1.取小鼠睾丸组织，放入1xPBS中，剥去白膜组织，用镊子轻轻撕开；2.15ml离心管中加入6ml的消化体系：5.88ml DMEM + 120ul 胶原酶+ 3ulDNAase；3.37℃消化10min：其中消化5min时上下吹打10次，再继续消化5min；4.消化期间，配制胰酶消化体系：取15ml离心管，加入5.28ml DMEM + 600ul胰酶+ 120ul 胶原酶+ 3ul DNase, 37℃预热；5.消化完成的组织室温静置2分钟后期弃上清，加入预热后的胰酶消化液，上下吹打10次后，放入37℃培养12min；6.12min后，取出，上下吹打10次，继续消化12min；7.将消化后的组织加入2ml的血清，终止消化，100um滤网过滤；8.过滤后100g离心5min,弃上清，加入含10%FBS的DMEM，40um过滤，进行镜检；流式分选1.镜检后的单细胞悬液，根据细胞量进行染：Hochest浓度：6ug/million细胞（我们的Hochest浓度是10ug/ul），避光染色1h；2.100g离心5min，弃上清；3.加入2%FBS的1xPBS重悬细胞，进行上机分选，同时准备含10%FBS的DMEM培养基收集细胞；染色体铺展1.分选出的细胞，400g,4℃，离心5min，弃上清，1xPBS重悬，并转移到1.5ml的EP管中；2.400g,4℃，5min，弃上清；3.用染色体铺展的低渗Buffer重悬细胞，一般50ul重悬，室温放置30min；（低渗Buffer: 现用现配：250ul蔗糖溶液+150.15ul Tris+85ul柠檬酸钠溶液+50ulEDTA+2.5ulDTT+25ulPMSF, 补ddH20至5ml。
以上所有溶液均配制的储存液）4.准备多聚赖氨酸处理过的玻片，玻片用之前在多聚甲醛Buffer中浸润；（PFA Buffer: 现用现配：称0.1gPFA加入10ml水中，100℃加热溶解，冷却后加入38.137mg硼酸钠和20ul Tritonx-100）5.处理后的细胞，用20ul枪头轻轻吹打，滴加在浸润过PFA的玻片上，自然晾干5h以上；免疫荧光1.将玻片放入12孔板中，用含5%BSA的PBS封闭1h；2.弃封闭液，染1抗：1:200，染色1h, 350ul/孔，染色液：1xPBS即可；3.用含0.1%Triton 的1xPBS洗3遍，5min/次；4.染2抗，避光，室温1h, 二抗：1:1000, 350ul/孔（DAPI可在该步骤一起染，1:1000）；5.按上述同样步骤洗三遍6.封片：取普通载玻片，滴加7ul封片剂，将含有细胞的玻片压在上面，注意不要产生气泡；7；待晾干后进行荧光检测试剂及耗材的位置：所有的抗体在4℃均有分装用的消化的酶4℃分装用的也有，DNase在-20度染色体伸展Buffer：用的几个试剂存储液在实验台上50ml离心管中存储，DTT 和PMSF在-20度存储血清，培养基，1XPBS在4℃PFA粉末在4℃硼酸钠及Triton在实验台上抗淬灭剂在4℃包好的盖玻片在试验台抽屉中50ml离心管中，普通载玻片在实验台抽屉中。
家畜解剖生理 第七章 生殖系统
卵巢是一对实质性器官，表面为生殖上皮，卵巢内含皮质和 髓质，皮质部含有大量卵泡，如静止卵泡、生长卵泡、成熟卵 泡；有的卵巢上还有黄体，是维持动物妊娠的内分泌腺。
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二、输卵管：细而弯曲，从卵巢处伸延到子宫。 输卵管全长可分为漏斗部、壶腹部和峡部。输卵管前端具有
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八、哺乳动物雌性生殖器官 的比较：子宫、阴道以及输 卵管在胚胎期起源于一对管 道—缪勒氏管，在动物的进 化历程中由后向前发生不同 程度的融合而形成不同类型 的子宫：1 、双阴道双子宫型 2 、双子宫型 3 、对分子宫、 4 、双角子宫 5、 单子宫型
其中大鼠、小鼠、兔属于 双子宫类型，牛羊属于对分子 宫，猪、马、狗、猫、豚鼠均 属于双角子宫，人和灵长类属 于单子宫类型。
牛的副性腺
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马的副性腺
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猪的副性腺
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五、阴茎和包皮 1、 阴茎：为交配器官，呈圆柱状，从坐骨弓腹侧起始到包皮口, 可分 为阴茎根、阴茎体和阴茎头三部分。阴茎根是后端“V”分叉的部分，短， 末端牢固附着于坐骨弓腹侧面上,包括一对坐骨海绵体肌和一对阴茎脚。 阴茎体是两条阴茎脚合并而成的，包括背侧的阴茎海绵体和腹侧的雄性 尿道阴茎部。阴茎头主要由尿道海绵体和尿道突构成。
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二、输精管与精索： 1、输精管：为一细长的管道，起于附睾尾，抵止于膀胱颈后方 的尿道. 2、精索：为行走于腹股沟管内的一段锥状结构，起于睾丸头。
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精索的作用一方面可悬吊睾丸和附睾，还是供应睾丸和 附睾的血管、淋巴管和神经的通道；其内部包含有a、睾丸 动脉，b、睾丸静脉，c、淋巴管，d、交感神经和副交感神 经，e、分散的平滑肌（睾内提肌），f、输精管，j、固有 鞘膜。去势时（睾丸摘除术）必须将精索切断才能摘出睾丸 和附睾。精选可编辑ppt源自17精选可编辑ppt
实验6 小白鼠的外形和内部解剖
实验6 小白鼠的外形和内部解剖【目的与要求】学习和掌握重要实验动物－小白鼠的解剖技术，了解从其内部结构特点。
【材料与用品】小白鼠显微镜，解剖用具等。
【操作与观察】（一）小鼠的抓取与固定抓取方法习惯用右手者，首先用右手从笼盒内将小鼠尾中部或基部抓住(不可抓尾尖)，并提起或放在左手上，如图5-1。
也可用尖端带有橡皮的镊子夹住小鼠的尾巴。
抓取时需注意：过分用力，会便动物窒息或颈椎脱臼；用力过小，动物头部能反转来咬伤实验者的手。
因此实验者必须反复练习，熟练掌握。
固定方法(1)徒手固定：右手抓取小鼠尾，将小鼠放在笼盖(或表面粗糙的物体)上，轻轻向后拉鼠尾。
然后在小鼠向前挣脱时，用左手(熟练者也可用同一只手)拇指和食指抓住两耳和颈部皮肤，无名指、小指和手掌心夹住背部皮肤和尾部，并调整好动物在手中的姿势。
如图5-2，如图5-3。
习惯用左手者，操作时可调整左右手。
这类抓取方法多用于灌胃以及肌肉、腹腔和皮下注射等实验。
之所以将小鼠放在笼盖或表面粗糙的物体上，是因为啮齿类动物视野小、胆小，在栅栏上或不平的表面行动迟缓，便于捕捉。
因此，不宜在光滑的表面徒手抓取小鼠，那样会增加抓取的难度。
（2）固定板固定：小鼠麻醉后置小鼠固定板上，取仰卧位，用胶布缠粘四肢，再用针透过胶布扎在板上，从而将小鼠固定在小鼠固定板上。
此方法常用作心脏采血、解剖、外科手术等实验。
小鼠固定板可自制，取一块边长l5cm-2Ocm的泡沫板(也可用方木板)，板前方边缘扎1根针头或钉入I根钉子，以便由小鼠上腭切齿上牵一根线固定其头部。
在板左右边缘各扎人两根针或钉人2根钉子。
消毒后备用。
(3)固定架固定：让小鼠直接钻人固定架里，封好固定架的封口，露出尾巴。
此装置特别适用于小鼠尾静脉注射等。
(4)简易固定：进行尾静脉注射或抽血时，如果没有这些固定装置，也可采用一种简易的办法。
即倒放一个烧杯或其他容器，把小鼠扣在里面，只露出尾巴。
然后酒精擦拭，暴露血管，注射或采样。
小鼠发育生物学实验内容
小鼠发育生物学实验内容实验一：小鼠卵母细胞和精子的形态观察一、实验目的：掌握胚胎体外操作工具的制备、小鼠超数排卵方法以及小鼠精子和不同发育阶段观卵母细胞的收集方法，观察精子结构和运动状态，评估精子活力，观察卵母细胞结构，了解体外授精操作过程。
二、操作过程：1 胚胎体外操作工具制备在酒精喷灯上将玻璃管拉成直径1mm的细管，连上乳胶管即可。
2 小鼠的抓去与保定3 收集精子断颈处死公鼠，打开腹腔，找到睾丸和附睾，剪取附睾尾，剪碎，置1.5ml离心管底部，加0.5ml 生理盐水，置37度水浴锅20分钟，用吸管从离心管上部取50微升液体，置细胞计数板，观察精子结构、密度和活力。
精子活力计算公式：精子活力＝视野中直线运动的精子数/视野中总精子数4 收集卵母细胞成熟卵母细胞的收集：母鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素PMSG（每只10单位），48小时后再注射人类绒毛膜促性腺HCG（每只10单位），18小时后断颈处死母鼠，打开腹腔，剪下输卵管，用镊子刺破输卵管壶腹部，释放卵母细胞，用透明质酸酶溶液（10毫克/毫升生理盐水）处理卵母细胞以除去颗粒细胞，在实体显微镜下观察卵母细胞的结构。
未成熟卵母细胞的收集：断颈处死性成熟前母鼠，打开腹腔，剪取卵巢，加入1毫升盐水，用刀片或镊子捣碎卵巢，寻找生发泡状态的卵母细胞，观察卵母细胞结构。
5 体外授精将卵母细胞与精子共培养（微滴培养法）（演示）三、实验结果各种精子和卵子的形态绘图；精子活力；精子密度四、实验收获与体会，存在问题和改进意见。
实验二：小鼠早期不同发育阶段胚胎的收集、观察以及胚胎移植一、实验目的：掌握小鼠附植前胚胎收集方法，观察不同发育阶段小鼠胚胎的结构，认识小鼠早期胚胎形态学，并了解体内发育阶段与所处生殖器官位置的关系，了解小鼠胚胎移植的基本原理和操作过程。
二、操作过程：1 小鼠超数排卵程序中午12时腹腔注射PMSG，48小时后腹腔注射HCG并与公鼠合笼交配，次日清晨检查阴道栓，如果发现阴道栓则妊娠0.5天。