真空采血管及采血处理

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真空采血管在国内外的历史发展以及现状本世纪40年代初,真空采血技术被发明,它省略了抽拉针管和推血入试管等不必要的步骤,利用真空管中预先制造的真空自动吸血入管,很大程度上减少了溶血的可能。40年代美国BD公司率先推出商品真空型采血系统,其它医疗器械公司也先后推出自己的真空采血产品,至80年代,一种称为安全管盖(HEMOGARDTM)的全新管盖问世。安全管盖由套在真空管外的特殊塑料罩和新设计的橡胶管塞组成。二者结合在一起,减少了医疗工作者与管中内容物接触的可能,也减少了管盖拔出后内容物外溅的机会。塑料罩形成一个双井形凹陷结构,防止手指与管塞顶端及尾端残留血液的接触。这种带有安全管盖的真空采血管极大地减少了医疗工作者从采血到血样处理的全过程中沾染血样的可能,当年安全管盖荣获全美最佳工业设计大奖。真空采血系统由于其干净安全、简单可靠的特点已在世界范围内被广泛采用,并被NCCLS推荐,成为采血的标准器械。

真空采血管90年代中期开始在我国部分医院使用。目前,大多数大中城市中型以上的医院已普遍接受了真空采血方式。作为临床血液采集和检测的新方式,真空采血器是对传统采血、储血方式的一场革命。

1真空采血系统主要由三部分构成

1.双向无菌针头:一端连接真空管,另一端进行皮肤穿刺。由于双向无菌针头专为采血特别设计而成,与注射用针头不同,针尖斜面成15度,表面特殊润滑,更锋利、进针方便。一次静脉穿刺后,可以抽取单个或多个血样。

2.持针器:持针器内径13 mm。配合规格统一的采血管使用,一端连接双向针头,另一端接真空管。持针器可以重复使用.

3.真空管:真空采血管标准直径13 mm,长75 mm或100 mm,由高质量玻璃或塑料制成。虽然大小恒定,但由于管内真空度不同,可以抽取不同体积。管内含各种添加剂(抗凝剂和促凝剂等),无需自己配制、添加,减少了工序,方便、快捷;避免了自行配备添加剂的不准确,并且可以满足各种检验对血样的要求;新型PET材质的真空采血管避免了玻璃试管破损后血液外溢的不安全。

2真空采血管分类和制作原理

目前医院使用的真空采血管主要有以下几个类别:

1.无添加剂的干燥空管(白头管):采血管内壁均匀涂有防止挂壁的药剂(硅酮),避免血细胞附壁,防止离心时细胞破碎,释放细胞内物质至细胞外,影响试验结果。它利用血液自然凝固的原理使血液凝固,等血清自然析出后,离心使用。主要用于血清生化(肝功、肾功、心肌酶、淀粉酶等)、电解质(血清钾、钠、氯、钙、磷等)、甲状腺功能、药物检测、艾滋病检测、肿瘤标志物、血清免疫学。

2.促凝管(红头管):采血管内壁均匀涂有防止挂壁的硅酮,同时添加了

促凝剂,如凝血酶、蛇毒、硅石粉、硅碳素、纤维蛋白酶等,可使血液在10~30 min 凝固。促凝剂能激活纤维蛋白酶,使可溶性纤维蛋白变成不可溶性的纤维蛋白聚体,进而形成稳定的纤维蛋白凝块,如果想快点出结果时,可采用促凝管。一般用于急诊生化。

3.含有分离胶及促凝剂的采血管(黄头管):管壁经过硅化处理,并涂有促凝剂可加速血液的凝固,缩短检验时间。管内加有惰性分离胶,惰性分离胶是一种聚合高分子材料,不溶于水,具有抗氧化,耐高温,抗低温,高稳定性之特性,比重约在1.04~1.05。血清的比重在1.026~1.031 之间,红细胞的比重在1.092~1. 095 之间。离心时,分离胶液化移到管中央,介于血清或血浆与血液有形成分之间,离心完毕后,固化形成屏障,使血清或血浆与细胞完全分离,保证了血清化学成分的稳定,冷藏下48 h 无明显改变。惰性分离胶管内可加有肝素,可达到快速分离血浆的目的,样本又可较长时间保存。分离胶与PET管具有很好的亲和性,确实起到隔离作用。高品质分离胶在离心后血清中不产生油滴,因此不会堵塞机器。主要用于血清生化(肝功、肾功、心肌酶、淀粉酶等)、电解质(血清钾、钠、氯、钙、磷等)、甲状腺功能、药物检测、艾滋病检测、肿瘤标志物、血清免疫学。

4.管内含有抗凝剂的采血管:

(1)含有肝素钠或肝素锂的采血管(绿头管):肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖,分子量15000 ,因有硫酸基团,带有强大的负电荷,具有加强抗凝血酶灭活丝氨酸蛋白酶的作用,从而阻止凝血酶的形成,并有阻止血小板聚集等多种抗凝作用。肝素是一种极佳的抗凝剂,对血液成分干扰少,不影响红细胞体积,不引起溶血,适用于做红细胞渗透脆性试验、血气、血浆渗透量、红细胞压积、血沉及普通生化测定。因肝素具有抗凝血酶的作用,不适于做血凝试验。过量的肝素会引起白细胞的聚集,不能用于白细胞计数,因其可使血片染色后背景呈淡蓝色,故不适于做白细胞分类。由于肝素不能使离体后的血小板离散,成为单个颗粒或细胞通过微孔,可造成血小板计数减低,白细胞计数及淋巴细胞计数偏高。商品肝素常含有磷酸盐,可使无机磷测定偏高。肝素抗凝血应于短时间内使用,否则搁置过久血液又可凝固。

(2)含有乙二胺四乙酸(EDTA)以及其盐的采血管(紫头管):乙二胺四乙酸是一种氨基多羧基酸,可以有效地鳌合血液中的钙离子,鳌合钙会将钙从反应点移走将阻止和终止内源性或外源性凝血过程,从而防止血液凝固,与其他抗凝剂比较而言,其对血球的凝集及血细胞的形态影响较小,并且可以抑制血小板的聚集,适用于一般血液学检验。EDTA 溶液pH 与盐类关系较大,低pH 可使细胞膨胀。EDTA2K2 可使红细胞体积轻度胀大,采血后短时间内平均血小板体积(MPV)非常不稳定,半小时后趋于稳定。EDTA2K2 使钙、镁下降,同时使肌酸激酶(CK)、碱性磷酸酶(ALP)减低,因这些酶测定需要这些金属离子;EDTA2K3 的最佳浓度是1. 5 mg/ ml ,如果血少,EDTA 浓度增高,中性粒细

胞会肿胀分叶消失,血小板会肿胀、崩解,产生正常血小板大小的碎片,使分析结果产生错误。EDTA由于螯合钙的作用强,使二磷酸腺苷(ADP)不能引起血小板聚集,另外EDTA 能抑制或干涉纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体聚合,不适用于血凝及血小板功能检查,亦不适用于钙、钾、钠及含氮物质测定。国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐使用的抗凝剂是EDTA2K2 ,EDTA2Na2 与EDTA2K2 比较结果无明显变化,但其溶解度低,抗凝速度慢,不适合末梢血的抗凝。EDTA 抗凝的末梢血也宜15 min 后测定,否则血小板有暂时聚集使血小板假性减少,白细胞假性升高,直方图异常。

(3)含有柠檬酸钠抗凝剂浓度为3.2%(0.109mol/L)的采血管(蓝头管):柠檬酸钠通过作用于血样中钙离子鳌合而起抗凝作用,大部分凝血试验都可用枸橼酸钠抗凝,它有助于Ⅴ因子和Ⅷ因子的稳定。另外,用枸橼酸钠抗凝的血浆做活化部分凝血活酶时间(APTT)试验,其对肝素的敏感性远远高于草酸盐抗凝血浆,当APTT试验用于监控接受肝素治疗的患者时,这一点显得非常重要。枸橼酸钠6 mg 才能抗凝1ml血,碱性强,不适于血液化验,亦不适于做生化检测,枸橼酸钠对MPV 及其他凝血因子影响极小,可用于血小板功能分析。血小板的聚集作用随血浆中枸橼酸钠的浓度降低而增高,因此在贫血患者应加入较正常人为多的抗凝剂。对于血液凝固试验来讲,如果血液比例过低,APTT 时间会延长,凝血酶原时间(PT)结果亦会有显著改变。PT 测定,3.8%的抗凝剂比3.2%的国际标准化比值(INR)值高,其差别变化一般在0.7~2.7个INR 单位之间。由于枸橼酸钠毒性小,也用于血液保存。同时枸橼酸钠在水中溶解慢,故只能配成水剂而不能用粉剂。抗凝剂与血比例为1:9时,主要用于纤溶系统(凝血酶原时间、凝血酶时间、活化部分凝血酶时间、纤维蛋白原)。采血时应注意采足血量,以保证检验结果的准确性,采血后应立即颠倒混匀5-8次。

(4)含有柠檬酸钠抗凝剂浓度为3.8%的采血管(黑头管):其抗凝剂与血液的体积比为1:4,一般用于血沉检测,抗凝剂比例过于偏高时,血液被稀释,可使血沉加快。

(5)管内含有草酸钾/氟化钠(1份氟化钠3份草酸钾)(灰头管):草酸钾是最常用的抗凝剂,优点是溶解度大,与血液混合后可迅速与血中的钙离子结合,形成不溶解的草酸钙,使血液不凝固。常配成10%溶液,0.1ml(10 mg)可使5ml 血液不凝固。常用于血液生化测定,但不适于钾、钙的测定,草酸钾还抑制乳酸脱氢酶(LDH)、ALP、淀粉酶(AMY)的活性。由于生成不溶性的草酸钙沉淀,红细胞会出现锯齿状,白细胞出现空泡,淋巴及单核会变形,不易做血片检查。草酸可影响血液中某些成分的活性及与钙形成的不溶性沉淀物可影响自动凝血仪测定时光电终点的观察,所以草酸钾很少用于血液学分析及血凝测定。而氟化钠是一种弱效抗凝剂,浓度达6~10 mg/ml 血液才有抗凝作用,但它是血糖测定的优良保存剂,使用时应注意缓慢颠倒混匀,2 mg/ml血液即能抑制糖分解。一般常同草酸钾合并使用,其比例为氟化钠1份,草酸钾3份,此混合物4 mg可使

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