基因工程试题

基因工程试题A

一、名词解释(每题2分,共20分)

1、转染:

2、质粒不亲与性:

3、cDNA 文库:

4、RACE:

5、基因工程:

6、RT-PCR

7、插入失活:

8、S-D 序列:

9、穿梭质粒载体:

10、多克隆位点:

二、选择题(每题1分,共15分)

1( )基因工程操作的三大基本元件就是:(I 供体 II 受体 III 载体 IV 抗体V 配体)

Ａ I + II + III

Ｂ I + III + IV

Ｃ II + III + IV

Ｄ II + IV + V

Ｅ III + IV + V

2( )基因工程的单元操作顺序就是

Ａ增,转,检,切,接

Ｂ切,接,转,增,检

Ｃ接,转,增,检,切

Ｄ检,切,接,增,转

Ｅ切,接,增,转,检

3 ( )生物工程的上游技术就是

Ａ基因工程及分离工程

Ｂ基因工程及发酵工程

Ｃ基因工程及酶工程

Ｄ基因工程及细胞工程

Ｅ基因工程及蛋白质工程

4 ( )下列对逆转录酶描述正确的就是:

A 依赖于RNA的DNA聚合酶或称为RNA指导的DNA聚合酶

B 依赖于cDNA的DNA聚合酶或称为cDNA指导的DNA聚合酶

C 依赖于DNA的DNA聚合酶或称为DNA指导的DNA聚合酶

D 依赖于RNA的RNA聚合酶或称为rNA指导的RNA聚合酶

5( )下列对限制性内切酶描述正确的就是

Ａ限制性内切酶可识别任一的DNA序列

Ｂ使用限制性内切酶时,有时可出现星活性

Ｃ限制性内切酶可识别碱基数不超过5个

Ｄ限制性内切酶切割碱基序列产生都就是黏性末端

6 ( )T 4 -DNA 连接酶就是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起,其底物的关键基团就是

Ａ 2' -OH 与 5' -P

Ｂ 2' -OH 与 3' -P

Ｃ 3' -OH 与 2' -P

Ｄ 3' -OH 与 5' -P

Ｅ 5' -OH 与 3' -P

7 ( )下列有关连接反应的叙述,错误的就是

Ａ连接反应的最佳温度为 12—16℃

Ｂ连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10%

Ｃ连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mM

Ｄ连接酶通常应过量 2-5 倍

Ｅ DTT 在反应中可加也可不加

8( )下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大?

A质粒

B黏粒

C酵母人工染色体(YAC)

Dλ噬菌体

9 ( )载体的功能就是(I 运送外源基因高效进入受体细胞 II 为外源基因提供复制能力 III 为外源基因提供整合能力)

Ａ I

Ｂ I + II

Ｃ I + III

Ｄ II + III

Ｅ I + II + III

10 ( )考斯质粒(cosmid)就是一种

Ａ天然质粒载体

Ｂ由入-DNA 的 cos 区与一质粒重组而成的载体

Ｃ能裂解受体细胞的烈性载体

Ｄ具有溶原性质的载体

Ｅ能在受体细胞内复制并包装的载体

11( )下列有关基因的描述,错误的就是

Ａ蛋白质就是基因表达唯一的产物

Ｂ基因就是DNA链上具有编码功能的片段

Ｃ基因也可以就是RNA

Ｄ基因突变不一定导致其表达产物改变结构

12( )关于cDNA的最正确的提法就是:

A 同mRNA互补的单链DNA

B 同mRNA互补的双链DNA

C 以mRNA为模板合成的双链DNA D以上都正确

13( )某一重组 DNA ( 6、2 kb ) 的载体部分有两个 SmaI 酶切位点。用 SmaI 酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子,其长度总与与已知数据吻合,该重组分子插入片段上的 SmaI 酶切位点共有

Ａ 5 个

Ｂ 4 个

Ｃ 3 个

Ｄ 2 个

14( ) 同一种质粒DNA,以三种不同的形式存在,电泳时,它们的迁移速率就是: A OC DNA>SC DNP>LDNA B SC DNA>L DNA>OC DNA

C L DNA>OC DNA>SC DNA

D SC DNA>OC DNA>L DNA

15( ) cDNA 法获得目的基因的优点就是

Ａ成功率高

Ｂ不含内含子

Ｃ操作简便

Ｄ表达产物可以分泌

Ｅ能纠正密码子的偏爱性

三、简答题(每题5分,共25分)

1、什么就是包涵体？

2、PCR反应体系包括哪些内容？基本反应过程就是什么？

3、限制性核酸内切酶的活性受哪些因素影响？

4、作为基因工程载体必须具备的基本条件就是什么？

5、基因工程诞生的理论基础就是什么？

四、论述题(每题10分,共40分)

1简述载体构建的一般过程

2大肠杆菌作为基因工程受体菌的优点与缺点就是什么？3如何有效地提高外源基因的表达效率？

4试述3′RACE技术原理与方法

基因工程试题标准答案及评分标准A

一、选择题(每题1分,共15分)

1、A

2、A

3、A

4、A 5 、B 6 、D 7 、E 8 、C 9、E 10 、B

11 、A 12、C 13 、D 14 、B 15、B

二、名词解释(每题2分,共20分)

1、转染:专指感受态的大肠杆菌细胞捕获与表达噬菌体DNA分子的生命过程。

2、质粒不亲与性:在没有选择压力的情况下,两种不同质粒不能够在同一宿主细胞系中稳定地共存的现象。

3、cDNA文库:就是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合。

4、RACE:就是一种通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术,就是以mRNA为模板反转录成cDNA第一链后用PCR技术扩增出某个特异位点到3,或5,端之间未知序列的方法。

5、基因工程:在分子水平上的进行的遗传操作,指将一种或多种微生物的基因或基因组提取出来,或人工合成基因,按着人们的愿望,进行严密的设计,经过体外加工重组,转移到另一种生物体的细胞内,使之能在受体细胞遗传并获得新的遗传性状的技术。

6、RT-PCR:先用逆转录酶作用于mRNA,以寡聚dT为引物合成cDNA第一链,然后用已知一对引物,扩增嵌合分子,这种方法称为逆转录PCR

7、Insert inaction:即插入失活,基因工程载体上的某些选择标记基因常常含某种或某几种限制性内切酶的单一酶切位点,在该位点用相应的限制性内切酶处理,并将外源DNA片段插入该位点,则插入的外源DNA片段将破坏原有基因的读码框,往往导致原有的选择标记基因无法翻译表达,或即使翻译表达,形成的也就是丧失了原有生物活性的蛋白质,这一现象称为插入失活。。

8、S-D序列:在大肠杆菌mRNA的核糖体结合位点上,含有一个转译起始密码子及同16S核糖体RNA 3,末端碱基互补的序列,该序列最初由Shine 、Dalgarno发现,故后来命名为Shine —Dalgarno 序列,简称S-D序列。

9、穿梭质粒载体:指一类由人工构建的具有两种不同复制起点的选择标记,因而可在两种不同宿主细胞中存活与复制的质粒载体。

10、MCS:指载体上人工合成的含有紧密排列的多种限制核酸内切酶的酶切位点的DNA片段。

三、简答题(共25分,每题5分)

1、什么就是包涵体？

重组蛋白在胞内表达时,常常以不溶性蛋白聚集成的晶状物形式存在,这种晶状体即包涵体。包涵体的形成就是外源蛋白的高效表达时的普遍现象,这就是由于肽链折叠过程中部分折叠的中间态发生了错误聚合,而不就是形成成熟的天然态或完全解链的蛋白。

2、PCR反应体系包括哪些内容？基本反应过程就是什么？

PCR反应体系所要求的条件: a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的DNA引物(约20个碱基左右)。b、具有热稳定性的酶如:TagDNA聚合酶。c、dNTP。d、作为模板的目的DNA序列,E 无菌水,F,缓冲液

PCR反应体系的基本反应过程:预变性、变性、退火、延伸、复延伸。

3、限制性核酸内切酶的活性受哪些因素影响？

⑴酶的纯度。

⑵DNA样品的纯度。

⑶DNA的甲基化程度。

⑷酶切反应的温度与时间。

⑸DNA分子的构型。