ABO血型鉴定与血涂片观察
实验六 血型鉴定与血涂片的制作
4. 染液不可过少，以防蒸发干燥，染料 沉着于血片上难冲洗干净；
5. 冲洗时应用流水将染液冲去，不能先 倒掉染液，以免染料沉着于血片上；
6. 染色时应注意保护血膜尾部细胞，不 能划掉，因为体积较大细胞常在此处 出现。
消 毒
法，用一次性医用采
血针无名指指腹迅速
扎
扎一下，取血；
取 无
名
注意：采血针、牙 签、棉花等请勿
指 采 血
混用，以免造成
交叉感染，用完
即弃入垃圾桶中！
血型鉴定
（5）用右手自无名指指腹下 端挤压，流出适量血液；
（6）用第一根牙签蘸取少许 血液混于抗A血清，搅拌混 匀即可（10s之内），将牙 签放入垃圾桶；再用另一 根牙签蘸取血液混于抗B血 清（切记换牙签！！）；
实验六 ABO血型的鉴定 及血涂片的制作
一、实验目的
1. 掌握光学显微镜的使用方法； 2. 了解人体血液以及输血相关常识； 3. 掌握ABO组成以及分型原则； 4. 初步掌握血涂片制片的方法和练
习光学显微镜的常规使用。
显微镜的结构
目镜 瞳距调节拉板
视度调节圈
物镜转换器 物镜
聚光镜 载物台左右推进螺旋 集光镜
五、作业
1、玻片拍照片，将鉴定的血型标示清楚，贴到实验报 告上。 2、简述血液的组成成分。
（7）将此玻片静置与空闲处 5min，观察血液是否凝集；
血型鉴定
血型鉴定
请问：上图是什么血型？？
血涂片制作
（8）取末捎血一滴置于玻片的 一端，左手持，载片上保留 下一薄层血膜载玻片，右手 以边缘平滑的推片的一端从 血滴前方后移接触血滴，待 血滴即沿推片散开。然后使 推片与载片夹角保持30-45度 平稳地向前移动；
实验八、ABO血型和血细胞
• B型：感觉灵敏，不怕羞，不易受事物感动。擅长社交， 多言，好管闲事。
• O型：意志坚强，好胜霸道，不听指挥，爱支使别人，有 胆识，不愿吃亏。
问：血型真的决定人的性格吗？
血型是先天遗传的
性格是由遗传和后天习惯养成的
淋巴细胞：
胞体圆形或近 圆形,胞核圆 形而浓染, 偏于一侧,染 色质粗糙致密， 胞浆很少
中性粒细胞
圆形或椭圆形,胞 浆丰富,染粉红色, 含大量均匀的浅 紫红色中性颗粒, 细胞核大,染色质 粗糙不均,排列紧 密成小块状,染深 紫红色,细胞核变 化多
嗜酸性粒细胞
圆形或椭圆形,细 胞核分两叶， 胞浆中充满均匀 整齐、紧密排列 的圆形或椭圆形 桔红色嗜酸性颗 粒
O(30.86%) O(47.28%)
血型的意义
• 对临床输血的指导意义 • O型血是“万能血”吗？ • 血型有多神秘？血型跟个人的性格、气质
关系很大吗？
血型决定人的性格？
• 日本学者古川竹二1927年就提出了一种古川学说。他认为， 在血型和性格、气质之间明显地存在相关关系。他曾经发 表了《血型与性格学的研究》一文，他认为，不同血型的 人具有不同的心理特征。
嗜碱性粒细胞
圆形或椭圆形, 数目稀少,核椭 圆形, 分叶不明显,被 嗜碱性颗粒遮盖, 胞浆中充满大小 不均,排列不整 齐的深色圆形, 菱角形及长米粒 形颗粒
血小板(blood platelets)
• 形态：椭圆形、梭形或不 规则形的小颗粒
• 成群分布于血细胞之间
• 数量：10～30万/mm3
• 功能：是来源于骨髓成熟 巨核细胞胞浆脱落下来 的小块胞质，在止血和 凝血系统中发挥重要作 用。
6ABO实验6 ABO血型鉴定暨血涂片的制作与血细胞显微观察
实验6 ABO血型鉴定暨血涂片的制作与血细胞显微观察1. 实验目的1.1了解ABO和Rh血型分类系统的背景知识和遗传学原理1.2掌握微量采血及血涂片的制作方法1.3学习使用光学显微镜观察和区分红细胞与白细胞2实验原理What is BloodBlood is made of four components: plasma, red blood cells, whiteblood cells, platelets.Plasma is a mixture of water, sugar, fat, protein, and potassium andcalcium salts. It also contains many chemicals that help form blood theclots necessary to stop bleeding. More than 92% of plasma is water.Red blood cells contain a special protein called hemoglobin, which carries the oxygen we inhale with our lungs to all of the parts of our bodies. It then returnscarbon dioxide from our body to our lungs so we can exhale it.Hemoglobin is also responsible for making red blood cells red. We haveso many red blood cells that our blood itself appears red, even though it contains more than red blood cells.White blood cells are clear round cells that are bigger than red bloodcells. White blood cells produce proteins called antibodies that help ourbodies fight infections caused by bacteria, viruses, and foreign proteins.Platelets aren't really cells at all; they are just fragments of cells. When we are injured, platelets gather at the site of the injury and stick to the edges ofthe wound. They release chemicals that help start the process of bloodclotting so that bleeding will stop.What is blood types and Rh statuesEverybody has a blood type. The most common blood type classification system is the ABO (say "A-B-O") system discovered by Karl Landsteiner in the early 1900s. There are four types of blood in the ABO system: A, B, AB, and O. Your blood type is established before you are born, by specific genes inherited from your parents. You receive one gene from your mother and one from your father; these two combine to establish your blood type. These two genes determine your blood type by causing proteins called agglutinogens (a-GLOO-tin-a-gins) to exist on the surface of all of your red blood cells.There are three alleles or versions of the blood type gene: A, B, and O. Sinceeverybody has two copies of these genes, there are six possible combinations; AA, BB, OO, AB, AO, and BO. In genetic terms, these combinations are called genotypes, and they describe the genes you got from your parents.In addition to the proteins (agglutinogens) existing on your red blood cells, other genes make proteins called agglutinins (a-GLOO-tin-ins) that circulate in your blood plasma. Agglutinins are responsible for ensuring that only the blood cells of your blood type exist in your body.Your genotype determines your blood type and statueThe agglutinogen produced by the O allele has no special enzymatic activities. However, the agglutinogens produced by the A and B alleles do have enzymatic activities, which are different from each other. Therefore people whose genotype is OO are said to have type O blood, meaning the agglutinogen on their red blood cells doesn't have any enzymatic activity. People with Type O blood have agglutinins a and b in their blood plasma. Agglutinin a helps the body destroy any type A blood cells that might enter the circulation system. Agglutinin b helps the body destroy any type B blood cells that might enter the circulation system.The ABO Blood systemBlood type (genotype) Type A(AA, Ai)Type B(BB, Bi)Type AB(AB)Type O(ii)Red Blood CellSurfaceAntigens(Phenotype)PlasmaAntibodies(Phenotype)People who have an AA genotype are said to have type A blood because the agglutinogen on their red blood cells has the enzyme activity associated with the A allele. It is important to recognize that people with the AO genotype also have the enzyme activity associated with the A allele, so they are also said to have type A blood. (Remember the O allele doesn't have any enzyme activity associated with it!) People with Type A blood have agglutinin b in their blood plasma. Agglutinin b helps the body destroy any type B blood cells that might enter the circulation system.Likewise, people with the BB and the BO genotypes are said to have type B blood. These people have agglutinin a in their blood plasma. Agglutinin a helps the body destroy any type A blood cells that might enter the circulation system.People who have the AB genotype have the enzyme activity associated with both the A and B alleles. These people have no agglutinins in their blood plasma.The concepts of genotype and phenotype can be easily understood in the case of blood type. Genotype refers the actual genes an individual possesses that determine aparticular trait. Phenotype refers to the characteristics of that trait an individual displays. In the case of blood type, both the AA and AO genotypes cause individuals to display the A blood type phenotype. Similarly, both the BB and BO genotypes cause individuals to display the B blood type phenotype. Individuals who are phenotypically type O or type AB have only one possible genotype, OO and AB, respectively.In different parts of the world, the fraction of individuals with blood type A, B, O, or AB differs. The frequency with which blood types are observed is determined by the frequency with which the three alleles of the ABO gene are found in different parts of the world (allele frequency). Variation in the allele frequency at the ABO gene reflects the social tendency of populations to marry and reproduce within a national, regional, or ethnic group. As people throughout the world intermingle to a greater extent, the distribution of the different blood types will become more uniform throughout the world.Blood TransfusionsBecause there are only four types of blood, it is possible to take blood from one person and donate it to another person in a process called transfusion. In order for a transfusion to work it is essential that the agglutinogens on the surface of the donor's blood cells match the agglutinogens on the surface of the recipient's blood cells. In other words, the blood type of the donor and the blood type of the person receiving the transfusion must be compatible. If the blood types don't match, special antibodies in the recipient's blood, called agglutinins, will attack the donated blood causing blood clots to form in a reaction called agglutination.If you ever need a blood transfusion, someone will take a sample of your blood in order to determine your blood type and the genotypes of matching blood types. Someone with type A blood can receive blood from people with the AA, AO, and OO genotypes. People with type B blood can receive blood from people with the BB, BO, and OO genotypes.There are two special genotypes when it comes to blood transfusions: OO and AB.The first special genotype is OO. People with O blood are said to be universal donors because they can donate blood to everybody. However, people with type O blood canonly receive transfusions from other type Odonors. Because O blood does not carryeither the A or B agglutinogens, the immunesystem of a person with O blood viewsthese agglutinogens as foreign. People withtype O blood have agglutinins in theirplasma that will react against the A and Bagglutinogens. Therefore, type O blood willundergo agglutination if exposed to A, B, orAB blood.The second special genotype is AB. People with AB blood are said to be universal recipients because they can receive blood from people with all four blood types. Since in AB blood both the A and B agglutinogens are presented on the surface of the red blood。
abo血型玻片法鉴定流程
abo血型玻片法鉴定流程ABO血型玻片法鉴定流程。
一、准备工作。
咱要做这个ABO血型玻片法鉴定呀，那准备工作可不能马虎哦。
就像做饭得先把食材和厨具准备好一样。
首先得有个干净的玻片，这个玻片就像是咱们做实验的小舞台。
然后呢，还得有抗 - A和抗 - B标准血清，这俩可重要啦，是能让咱们知道血型秘密的小助手。
再有就是消毒的采血针，这就像一个小小的魔法棒，用来获取咱们的血液样本。
当然啦，还有消毒棉球，它可是负责在采血之后照顾小伤口的贴心小卫士呢。
二、采血啦。
接下来就是采血环节啦。
这听起来有点吓人，不过只要按照正确的方法来，就没问题的哦。
咱们要先把手指消毒干净，用消毒棉球仔细地擦一擦，就像给手指洗个澡一样。
然后呢，用采血针轻轻地扎一下手指，这时候可能会有点小疼，就像被小蚂蚁咬了一口似的。
把扎破的手指轻轻挤压，让血液滴出来。
一般滴两到三滴就够啦，可别太用力挤哦，不然手指会疼很久的呢。
就把这宝贵的血液滴在之前准备好的玻片的两端，一边一滴，这就像是在玻片上种下了两颗小小的生命种子。
三、加血清。
现在到了加血清的步骤喽。
把抗 - A标准血清小心地加到其中一滴血液里，就像给这个小血液滴找了个小伙伴。
然后呢，再把抗 - B标准血清加到另一滴血液里。
这时候呀，就像是在给两滴血液分别安排不同的任务一样。
在加血清的时候，要特别小心，别把血清滴到外面去了，不然就像做饭把调料洒了一样，会影响结果的呢。
而且加的时候要慢慢地滴，就像给小花朵浇水一样，要让血清和血液充分混合。
四、观察结果。
好啦，现在就是等待和观察结果的时候啦。
这个过程就像等待小种子发芽一样，充满了期待。
如果加了抗 - A血清的那滴血液发生了凝集反应，就是血液变成了一小团一小团的，就像沙子聚成了小沙堆一样，那就说明这个人可能是A型血。
要是加了抗 - B血清的那滴血液发生凝集反应，那可能就是B型血。
要是两滴血液都发生凝集反应，那就是AB型血啦，就像这个人的血液很特别，两种血清都能让它有反应呢。
人血细胞观察及 ABO 血型检测
人血细胞观察及ABO 血型检测哲学1701班李鹿鸣U201716565一、实验结果及分析实验结果：实验分析：（一）人血细胞观察实验1.实验材料与试剂医用一次性采血针、75%酒精棉球、镊子、医用棉签、载玻片、瑞氏染液、记号笔、吸水纸、洗瓶、一次性手套、普通生物显微镜、ABO 血型鉴定试剂盒（正定型），牙签。
2.实验步骤（1）涂片①取两张载玻片②用70％酒精棉球消毒人的指腹，用采血针采血。
③挤出血置于玻片的右侧，用另一张玻片（推片）将其前端放在血滴前，与载血的玻片保持30-40度角，并稍向后移与血滴接触，推片与载玻片呈30°角，边轻压推片边将血液往玻片左侧方向推动涂抹，至血液铺完血膜为止。
（2）染色①血涂片制成后，将血膜平放在实验台上，加瑞氏染液2滴，使之覆盖整个血膜，静置2分钟。
②滴加等量磷酸缓冲液或稍多的新鲜蒸馏水，与染料混匀，续染7分钟。
③用清水冲去染液，直至血膜呈淡红色；待自然干燥或用吸水纸吸干后，置血涂片于显微镜下进行镜检。
先在低倍镜（10 X）下浏览全片，了解染色好坏和细胞分布情况，观察有无异常细胞。
再在高倍镜（40 X）下观察白细胞。
3.实验结果分析观察到红细胞、中性粒细胞和嗜碱性细胞（二）ABO 血型检测1.实验步骤①在一块干净的玻片上，间隔一定距离分别滴一滴抗A 和抗B 试剂。
②在每滴试剂中加一滴待测红细胞全血。
③用牙签混匀试剂和红细胞。
④轻摇玻片，2分钟内观察结果。
⑤判读、解释并记录反应结果。
2.实验结果分析A试剂和B试剂都无凝集，测得为O型血。
二、思考题1. 简述外周血细胞的形态特征及功能。
①红细胞：呈两面中央凹的圆饼状，中央较薄，周缘较厚，在血涂片标本上中央染色较浅、周围较深。
大量红细胞使血液呈深红色。
功能主要是运输氧气。
②中性粒细胞：数量最多的白细胞，细胞直径约10-12µm。
核呈深染的弯曲杆状(马蹄铁形)或分叶状。
功能主要是吞噬和杀灭细菌，参与急性炎症反应。
ABO血型鉴定和血涂片观察
血型鉴定
请问：上图是什么血型？？
血涂片制作
（8）取末捎血一滴置于玻片旳 一端，左手持，载片上保存 下一薄层血膜载玻片，右手 以边沿平滑旳推片旳一端从 血滴前方后移接触血滴，待 血滴即沿推片散开。然后使 推片与载片夹角保持30-45度 平稳地向前移动；
血涂片制作
推
片①
②
动
作
③
④
血涂片制作
(9) 血涂片制成后可手持 玻片在空气中挥动，使 血膜迅速干燥，以免血 细胞皱缩；
(10) 将干燥后旳血膜平放 在试验台上，加瑞氏染 液2-3滴,使覆盖整个血 膜，固定5-10min，注意 不要让染液干掉，如若 有干燥请覆以少许清水；
血涂片制作
(11)用流水小心冲去染液， 待自然干燥后或用吸水 纸吸干，即可置血涂片 于显微镜下进行镜检、 摄影；
(12)镜检完毕请将载玻片 放入垃圾桶，将显微镜 收好、桌面擦拭洁净。
8、双眼从目镜观察视野，将两个视野合并为 一种。缓缓调整粗准焦螺旋使载物台下降， 找到物像，配合细准焦螺旋将物像调整清楚；
9、使用物镜转换器胶轮，将10X或40X目镜 调整到位，配合粗细准焦螺旋和聚光镜、集 光镜亮度将视野调整清楚；
注意玻片旳正确放置！
操作环节（三）
10、将物镜调到4x，载物台调低，取出玻 片放于合适位置，用擦镜纸轻轻擦拭用过旳 目镜与物镜；
3. 血膜未干透,细胞还未牢固附在玻片上,在 染色过程中轻易脱落,所以血膜必需充分 干燥；
注意事项
4. 染液不可过少，以防蒸发干燥，染料 从容于血片上难冲洗洁净；
5. 冲洗时应用流水将染液冲去，不能先 倒掉染液，以免染料从容于血片上；
6. 染色时应注意保护血膜尾部细胞，不 能划掉，因为体积较大细胞常在此处 出现。
ABO血型实验报告
abo血型鉴定实验报告生命科学院张茜 111070094 一、实验目的1、学习辨别血型的方法2、观察红细胞凝集现象,掌握abo血型鉴定的原理3、通过实验认识血型鉴定在输血中的重要性二、实验原理人类的abo血型遗传是由基因决定的。
很多時间，一个基因只包含两个等位基因。
但是，控制血型的基因i则有三个不同等位基因。
即同一时间内，一个位点可以有其中任何两个等位基因出现。
等位基因a使红血球产生抗原a；等位基因b使红血球产生抗原b；等位基因o使红血球不产生抗原；等位基因a和b为等显性，o对a和b均为隐性。
ａｂｏ血型鉴定的原理是根据红细胞上有或无ａ抗原和ｂ抗原或ab抗原，将血型分为ａ型、ｂ型、ａｂ型及ｏ型四种。
血型 a b ab o可能基因型 iaia或iaio ibib或ibio iaib ioio 本实验采用红细胞凝集试验，用已知抗ａ和抗ｂ分型血清来测定红细胞上有无相应的ａ抗原或ｂ抗原或ab抗原来确定abo血型。
三、实验材料消毒采血针；载玻片；消毒棉(转载于:abo血型实验报告)签；抗a、抗b血型定型试剂；75%乙醇；受检者血液四、实验步骤1、取干净载玻片，滴加定型剂2、用70－75％的酒精消毒取血部位3、用针扎一下消毒部位，使血冒出，立即滴一滴血液在抗a或b上。
4、再次消毒后取血滴在抗b或a上5、观察有无凝聚。
实验结果如下图：左边为抗b型定型试剂，呈淡红色，未发生凝聚；右边为抗a型定型试剂，血液在试剂中凝结，试剂较清亮。
6、记录结果：受测血液为a型血。
五、注意事项1.实验用具严格消毒，消毒采血针应一人一针。
2.取血切勿过多，以防止在血清中形成团块，影响判断结果。
3.分清牙签，不要用一牙签一端同时在抗a血清和抗b血清中搅拌。
4.注意区别凝集现象与红细胞叠连。
发生红细胞凝集时，肉眼观察呈朱红色颗粒，且液体变得清亮。
六、关于abo血型与性格的思考这次测定自己血型的实验让我们对血型与性格之间的关系升起了好奇。
血涂片制作和白细胞分类／ABO血型鉴定
实验报告说明：1、实验报告务必独完成，对抄袭者将按不及格处理；2、实验报告的格式请按下面的各项要求来填写，不要改动；3、正文字体统一用“仿宋-GB2312”、，小四号，单倍行距，小标题加黑；4、下面的“替换这里”字体底纹在完成后去除；5、实验报告按时上传，上传时文件名统一按照网上说明来命名；实验名称：血涂片制作和白细胞分类／ABO 血型鉴定同组姓名： 实验日期：室 温： 气 压：成 绩： 教师：一、实验结果（一）观察到的红细胞、白细胞和血小板图一图一中可观察到三种细胞，其中数量最多的是红细胞，最中间的为嗜中性粒细胞，左侧的紫色细胞为淋巴细胞。
姓名： 学号：图二图二中可观察到两种细胞，中间细胞核呈肾形的为单核细胞，其余的均为红细胞。
（二）ABO血型鉴定结果发生凝集；与抗A、B血清混合后不发生凝集。
二、分析与讨论（一）观察到的红细胞、白细胞和血小板血液由血浆和血细胞组成，血细胞主要包括红细胞、白细胞和血小板。
1、红细胞：数量最多，约占全血体积的40%左右。
体积小而圆、均匀分布，呈红色的中央凹圆盘状。
成熟红细胞没有细胞核，胞质内充满血红蛋白。
2、白细胞：白细胞数量较红细胞少，但胞体大，细胞核明显，极易与红细胞区别开。
对白细胞进行瑞氏染色后，根据细胞的染色特征，可将其分为两大类：（1）颗粒白细胞①嗜中性粒细胞：是白细胞中较多的一种，约占白细胞总数50-70%。
细胞大小约10-12μm，核多分叶2-5叶或不分叶为杆状，胞质中的特殊颗粒细小，呈紫红色。
②嗜酸性粒细胞：数量较少，约占白细胞的0.5%-3%。
细胞大小约10-15μm，核常分为2叶，胞质中的颗粒粗大,分布均匀,呈桔红色。
③嗜碱性粒细胞：数量很少，约占白细胞1%以下。
细胞大小约为10-12μm。
核常呈S形或不规则，胞质中的颗粒大小不等,分布不匀, 呈紫蓝色。
（2）无颗粒细胞：①淋巴细胞：数量较多，约占白细胞的20%-30%。
淋巴细胞分为大、中、小淋巴细胞，细胞大小约为6-12μm，其中以6-8μm居多。
5 ABO血型鉴定与血涂片观察概述
– 贫血Anemia – 黄疸Jaundice & 核黄疸kernicterus – 释放出许多不成熟的红细胞 (骨髓成红细胞 增多症erythroblastosis fetalis) – 严重的可造成死胎
• 1939年，一个妇女在产下死婴后接受ABO 血型匹 配的丈夫输血时，出现了严重的输血反应. • 1940年，Landsteiner & Wiener发现“兔抗恒河猴” 抗体同样可以黏附到85%欧洲白人的红细胞表面。 • Rh 抗原同样是红细胞表面抗原的一种，其遗传方 式为显性遗传，Rh+Rh-和Rh+Rh+两种基因型的表 型均为Rh(+)，只有Rh-Rh-的表型才为Rh(-)。
白细胞各成员简介
– 嗜中性粒细胞: 具有分叶核，在循环系统中能够 存活10-12h，然后进入身体各组织，在组织中的 存活时间可以长达1-2d。
主要生理功 能是分泌溶菌酶， 消化细菌和其它 入侵病原物
白细胞各成员简介
– 嗜曙红细胞: 含过氧化物 酶和酸性磷酸酶，完成 吞噬作用，对抗组胺等 炎症因子，也称嗜酸性 细胞。 – 嗜碱性细胞: 释放组胺， 同时释放肝磷脂，抑制 凝血。
Blood-Formed Elements
红细胞 嗜曙红细胞 (嗜酸性) 嗜碱性细胞 血小板 嗜中性粒细胞 单核细胞 淋巴细胞
红细胞从肺部向身体各组织输送新 鲜O2，并排出CO2； 红细胞中的血红蛋白是红细胞呈红 色的原因； RBC呈圆形，中间较薄，形态上类 似部分充气的气球，这种弹性结构 使得它们在经过微血管时不会破坏 血管壁。
注意玻片的正确放置！
实验三 人类ABO血型检测及人血涂片的制备和观察
1868年生于奥地利首 都维也纳。维也纳大学 医学院毕业后，继续留 校，学习化学。1900年 发现A、B、O3种血型。 1919年在荷兰巴库的一 所医院工作。1922年赴 美，受聘于洛克菲勒研 究所。1930年获诺贝尔 生理学医学奖。1943年 逝世。
• 凡是人体血液红细胞上有Rh抗原（又称D 抗原）的，称为Rh阴性。这样就使已发现 的红细胞A、B、O及AB四种主要血型的人， 又都分别一分为二地被划分为Rh阳性和阴 性两种。
随着对Rh血型的不断研究，认为Rh血型 系统可能是红细胞血型中最为复杂的一个血 型系。Rh血型的发现，对更加科学地指导输 血工作和进一步提高新生儿溶血病的实验诊 断和维护母婴健康，都有非常重要的作用。 根据有关资料介绍，Rh阳性血型在我国汉族 及大多数民族人中约占99.7%，个别少数民 族约为90%。在国外的一些民族中，Rh阳 性血型的人约为85%，其中在欧美白种人钟， Rh阴性血型人约占15%。
嗜酸性粒细胞
细胞核常为两叶 胞质内充满粗大、均匀、略带折光性的嗜酸性颗粒（橘红色）
嗜碱性粒细胞
细胞核分叶或呈S形、不规则形，着色较浅 胞质含有染成蓝紫色的嗜碱性颗粒，大小不等，分布不均。
实验要求
• 记录结果。 –血型检测结果 –描述用你制备的血涂片在显微镜下观察 到的各种血细胞
红细胞血型
血型（blood group）：人类血液由遗传控 制的个体性状之一，是血液的遗传标记 (genetic marker) 红细胞血型：指红细胞表面抗原由遗传所 决定的个体差异 广义的血型概念：指包括血液、体液、分 泌液、排泄物及组织细胞上，由遗传所控 制的个体性状
人ABO血型鉴定和血细胞标本的制备和观察
人ABO血型鉴定和血细胞标本的制备和观察1. 实验内容●血型的鉴定。
●人血凃片标本的制备、观察。
●人血细胞永久切片标本的观察。
2. 实验目的●学习巩固显微镜的使用方法。
●学习掌握人血涂片标本制备的方法，并了解人血细胞的类型和形态。
●了解血型测定的方法原理，学习玻片法测定ABO血型。
3. 实验背景3.1科勒照明：光学显微镜的一般原理科勒照明系统（kÖhler illumination）是由德国的动物学家August KÖhler 于1893年发明的。
相对于传统的临界照明（Critical Illumination），科勒照明系统在样品的视野范围内减少了内部散射光，控制了反差和深度，更有效的提供了中心亮视野照明。
3.1.1光学显微镜的基本构造光学显微镜的基本结构包括机械、照明和光学三部分（图1，表1）。
显微镜的放大作用是由物镜和目镜共同完成的。
标本经物镜放大后，在目镜的焦平面上形成一个倒立的实像，再经目镜的进一步放大形成一个虚像，被人的眼睛所观察到。
每台显微镜一般有3~4个物镜，可分为低倍镜（如4×，10×），高倍镜（如40×）和油镜（100×）。
目镜通常有5×、10×和15×三种。
目镜只起着放大作用，而物镜决定显微镜的分辨率。
物镜外壳上通常标有放大倍数、数值孔径、镜筒长、盖玻片的厚度和使用条件等性质参数。
如标有“oil，N.A.1.30，100×，160/0.17”的物镜表示数值孔径为1.3，放大倍数为100倍的油镜。
其要求镜筒长为160 mm，盖玻片的厚度为0.17 mm。
数值孔径（Numerical Aperture）是决定显微镜分辨率的最重要参数。
图1 LEICA EME型生物显微镜的构造（/）表1 显微镜的基本结构显微镜部分具体部件名称机械部分镜座、镜柱、镜臂、镜筒、物镜转换器，载物台、调节器照明部分光源部分（反光镜或电光源）、聚光器光学部分物镜、目镜3.1.2 显微镜的分辨率（1）瑞利极限（Rayleigh limit）：光学显微镜的最大分辨率为0.2 μm。
ABO血型鉴定人血涂片的观察
实验原理
根据凝集原与凝集素之间的免疫反应 关系，用已知的凝集素等（抗体）鉴 定被检查者红细胞上的未知的凝集原 （抗原）。
实验原理
若将血型不相容的两个人的血滴放在玻片上混 合，其中的红细胞即聚集成簇，这种相容称为 凝集 (agglutination )。红细胞的凝集有时还伴 有溶血。造成红细胞凝集的机制是抗原-抗体反 应。凝集原的特异性完全取决于镶嵌入红细胞 膜上的一些特异糖蛋白，在凝集反应中糖蛋白 起着抗原的作用，因而称它们为凝集原。能与 红细胞膜上的凝集原起反应的特异抗体则称为 凝集素(agglutinin)。凝集素是由γ-球蛋白构成 的，它们溶解在血浆中。发生抗原-抗体反应时， 由于每个抗体上具有10个左右与抗原结合的部 位，抗体在若干个带有相应抗原的红细胞之间 形成桥梁，因而使它们聚集成簇。
形态：胞体球形 结构：胞核呈蓝紫色，染色质呈块状，着色深，成熟 N 胞核
多为分叶状，一般可分2～5叶，常见3 叶，幼稚N 胞核 呈杆状。胞质中含许多散在细小颗粒 ：嗜天青颗粒 （溶酶体）、特殊（分泌）颗粒，Wright染色呈紫红色 特点：占白细胞总数的50-70%，是数量最多的白细胞 功能：趋化作用和吞噬功能
红细胞 Wright 或 Giemsa染色 红细胞 扫描电镜
Байду номын сангаас
2）白细胞( leukocyte, white blood cell, WBC)
中性粒细胞 有粒白细胞 嗜酸性粒细胞
白细胞
嗜碱性粒细胞
无粒白细胞
淋巴细胞 单核细胞
正常值:4000~10000/μl
中性粒细胞 ( neutrophilic granulocyte, N )
血液
❖ 组成
实验八、ABO血型的鉴定和血涂片的观察
子女不可能有的血型
B、AB 无 O B、AB A、AB O A、AB O AB、O A、B、AB
Rh血型 Rh是恒河猴（Rhesus Macacus）两个首字母 Karl Landsteiner等科学家在1940年做动物实验
时，发现恒河猴和多数人体内的红细胞上存 在Rh血型的抗原物质，故而命名的。 Rh阳性：红细胞上有Rh凝集原
antibody A A
A
antibody B B
A
B
B
A
B
AB
A
B
O
血涂片的观察
观察和分辨出红细胞、中性粒细胞、嗜酸性 粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞、淋巴细 胞、血小板
六、作业 1.记录自己的血型
2. 简图说明红细胞、中性粒细胞、嗜酸 性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞、淋 巴细胞、血小板的形态和特征。
IA IB,i
基因型 IAIB IAi 表型 AB A
A× B IAi IBIB
IA,i IB
IAIB IBi AB B
婚配式 子女可能有的血型
A× A A、O A× B A、B、O、AB A× AB A、B、AB A× O A、O B× B B、O B× AB A、B、AB B× O B、O AB× AB A、B、AB AB× O A、B O× O O
实验八、ABO血型的鉴 定和血涂片的观察
读万卷书，行万里路。 工欲善其事，必先利其器 少说多做，句句都会得到别人的重视；多说少做，句句都会受到
别人的忽视。
一、背景介绍 血液 是在心、血管系统中循环流动着的液体组织， 是广义结缔组织的一种，具有运输和防御等 功能。
血细胞 血浆
血型 通常指红细胞表面抗原的类型 已经发现并为国际输血协会承认的血型系统有
实验六ABO血型鉴定、血涂片的制作与血细胞显微观察(精)
实验六:ABO血型鉴定、血涂片的制作与血细胞显微观察一、实验目的1 . 了解 ABO 和 Rh 血型分类系统的背景知识和遗传学原理2. 掌握微量采血及血涂片的制作方法3. 学习使用光学显微镜观察和区分红细胞与各种白细胞二、实验材料1. 实验材料:医用采血针、酒精棉球、载玻片、血推片、消毒牙签2. 实验试剂:瑞氏染液、抗 B 血清、抗 A 血清、生理盐水、蒸馏水3. 仪器设备: Motic 光学显微镜三、实验内容和方法1 ABO 血型鉴定1.1 取一块清洁玻片,用记号笔标上记号。
1.2 用小滴管吸 A 型标准血清(抗 B )一滴加入左侧,用另一小滴管吸 B 型标准血清(抗 A )一滴加入右侧1.3 以穿刺法自左手无名指指尖取血,在玻片的每侧各放入一小滴血,用牙签搅拌,使每侧抗血清和血液混和。
每边用一支牙签,切勿混用。
1.4 静置室温下 10—15min 后,观察有无凝集现象,并据此判断血型。
2 血涂片的制作及血细胞观察2.1 取末捎血一滴置于玻片的一端 , 左手持载玻片 , 右手以边缘平滑的推片的一端从血滴前方后移接触血滴,血滴即沿推片散开。
然后便推片与载片夹角保持 30-45 度平稳地向前移动 , 载片上保留下一薄层血膜2.2 血涂片制成后可手持玻片在空气中挥动 , 使血膜迅速干燥 , 以免血细胞皱缩 .2.3 用蜡笔在血膜两侧划线 , 以防染液溢出 , 然后将血膜平放在染色架上 . 加瑞氏染液 2-3 滴 , 使覆盖整个血膜 , 固定 0.5-1.0 分钟 . 滴加等量或稍多的新鲜蒸馏水 , 与染料混匀染色 5-10 分钟 .2.4 用清水冲去染液 , 待自然干燥后或用吸水纸吸干 , 即可置血涂片于显微镜下进行镜检。
2.5 白细胞分类计数: 选择涂片的体尾交界处染色良好的区域 , 在油镜下计数 100 个红细胞 , 按其形态特征进行分类计数 , 求出各类细胞所占比值。
注:1. 瑞氏染液 : 瑞氏染料 1g 加甲醇 (AR)600ML 。
医院ABO血型鉴定玻片法操作规程及注意事项
XXXX医院ABO血型鉴定玻片法操作规程及注意事项一、目的检测ABO血型。
二、工作原理根据红细胞上有或无A抗原和（或）B抗原，将血型分为A型、B 型、AB型及O型4种。
可利用红细胞凝集试验，通过正向、反向定型准确鉴定ABO血型。
三、试验材料1、抗—A（B型血）血清、抗—B（A型血）血清。
2、5%A、B及O型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注。
3、受检者血清。
4、受检者5%红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注。
四、操作方法玻片法1、正定型：取清洁玻片1张（或白瓷板1块），用蜡笔划成方格，标明抗—A、抗—B和抗—A+B，分别用滴管滴加抗—A、抗—B和抗—A+B 分型血清1滴于标明的方格内，再各加受检者5%红细胞悬液1滴，混和。
2、反定型：另取洁净玻片一张（或白瓷板1块）用蜡笔划成方格，标明A细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管加A、B和O型试剂细胞悬液1滴。
3、将玻片（或白瓷板）不断轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，连续约15min，以肉眼观察有无凝集（或溶血）反应。
以玻片作试验时，也可用低倍镜观察结果。
五、结果判断1、抗A凝集，抗B不凝，为A型。
同时A细胞不凝，B细胞凝集，O细胞不凝2、抗A不凝，抗B凝集，为B型。
同时A细胞凝集，B细胞不凝，O细胞不凝3、抗A凝集，抗B凝集，为AB型。
同时A细胞凝集，B细胞凝集，O细胞不凝4、抗A不凝，抗B不凝，为O型。
同时A细胞不凝，B细胞不凝，O细胞不凝六、临床意义1、输血已成为临床上必不可少的治疗手段，输血必须输入ABO同型血，如输入异型血，输入的红细胞可能迅速破坏，导致严重的溶血反应，常常威胁生命甚至造成死亡。
2、用于血型普查。
七、注意事项1、标准血清质量应符合要求，用毕后应放置冰箱内保存，以免细菌污染。
2、试剂红细胞以3个健康者同型新鲜红细胞混合，用生理盐水洗涤3次，以除却存在于血清中的抗体及可溶性抗原。
3、试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。
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注意玻片的正确放置！
操作步骤（三）
10、将物镜调到4x，载物台调低，取出玻 片放于适当位置，用擦镜纸轻轻擦拭用过的 目镜与物镜；
11、关闭聚光灯，拔出插头，将载物台调高 后将线缆轻轻缠绕在显微镜柱上；
12、将目镜调节拉板调回，套上镜罩，将显 微镜轻轻放回。
第二节 ABO血型鉴定与血涂片制作
•ABO血型鉴定原理与 鉴定方法 •血涂片制作与观察 •红细胞、白细胞的识 别（照相）
显微镜的结构
目镜 瞳距调节拉板
视度调节圈
物镜转换器 物镜
聚光镜 载物台左右推进螺旋 集光镜
载物台 焦距粗\微调螺旋
光源亮度调节手轮
操作步骤（一）
1、将凳子调节到合适的高度，保持桌面整洁； 2、手握镜柱将显微镜轻轻挪出，目镜筒与桌 边对齐，将镜罩拿下放于抽屉中，插上电源； 3、调节物镜转换器胶轮到4x物 镜（最短物镜），缓慢旋转粗准 焦螺旋，将载物台调到最低； 4、打开集光灯电源，将灯光调节到适当亮度， 将集光镜调节到最高； 5、将目镜调节到合适的瞳距，调节聚光镜轮 找到白亮的视野；
2. 血片制好后最好立即固定染色,以免细胞 变化影响观察；
3. 血膜未干透,细胞尚未牢固附在玻片上,在 染色过程中容易脱落,因此血膜必需充分 干燥；
注意事项
4. 染液不可过少，以防蒸发干燥，染料 沉着于血片上难冲洗干净；
5. 冲洗时应用流水将染液冲去，不能先 倒掉染液，以免染料沉着于血片上；
6. 染色时应注意保护血膜尾部细胞，不 能划掉，因为体积较大细胞常在此处 出现。
ABO血型鉴定、血涂片和 血细胞观察
邹方东 生命科学学院
实验目的
1. 掌握光学显微镜的使用方法； 2. 了解人体血液以及输血相关常识； 3. 掌握ABO组成以及分型原则； 4. 初步掌握血涂片制片的方法和练
习光学显微镜的常规使用。
第一节 显微镜的使用
•光学显微镜的构造 •显微镜的正确使用方法 •显微镜的保养 •油镜的使用与清洁（了解）
AB型血：抗A血清、抗B血清均凝集 凝集
血液的组成
血浆 水、糖类、脂类、蛋白质和钾盐、钠
盐、钙盐的混合物。
血浆 55% 红细胞 45% 白细胞 0.1% 血小板 0.17%
红细胞
血小板
白细胞
红细胞 血小板
嗜中性粒细胞 巨淋巴细胞
血细胞的组成
小淋巴细胞
嗜曙红细胞 嗜碱性细胞 单核细胞
实验步骤
注意：有严重晕血史的同学请不要参 加实验，可到休息室休息，待放学后 离开！
(12)镜检完毕请将载玻片 放入垃圾桶，将显微镜 收好、桌面擦拭干净。
请从低倍镜到高倍镜进行镜 检，并用手机或相机拍照， 将照片贴在实验报告上。
红细胞 血小板
嗜中性粒细胞 巨淋巴细胞
血细胞的组成
小淋巴细胞
嗜曙红细胞 嗜碱性细胞 单核细胞
注意事项
1. 一张良好的血片,要求厚薄适宜,头体尾分 明,分布均匀,边缘整齐, 两侧留有空隙；
实验材料与仪器
一次性医用采血针 酒精消毒棉球 抗A血清(蓝色)，抗B血清(黄色) 瑞氏染液 载玻片，消毒牙签 显微镜(带油镜，香柏油，擦镜纸，洗镜液)
红细胞 抗原
（表型）
血型鉴定原理
1、抗A血清含有使A型血凝集的抗体（B凝集素）， 抗B血清含有使B型血凝集的抗体（A凝集素）；
2、A型血：抗A血清凝集、抗B血清不凝集 B型血：抗A血清不凝集、抗B血清凝集 O型血：抗A血清、抗B血清均不凝集
血涂片制作
推
片①
②
动
作
③
④
血涂片制作
(9) 血涂片制成后可手持 玻片在空气中挥动，使 血膜迅速干燥，以免血 细胞皱缩；
(10) 将干燥后的血膜平放 在实验台上，加瑞氏染 液2-3滴,使覆盖整个血 膜，固定5-10min，注意 不要让染液干掉，如若 有干燥请覆以少量清水；
血涂片制作
(11)用流水小心冲去染液， 待自然干燥后或用吸水 纸吸干，即可置血涂片 于显微镜下进行镜检、 照相；
消 毒
法，用一次性医用采
血针无名指指腹迅速
扎
扎一下，取血；
取 无
注意：采血针、牙签、
名 指
棉花等请勿混用，以
采
免造成交叉感染，用
血
完即弃入垃圾桶中！
血型鉴定
（5）用右手自无名指指腹下 端挤压，流出适量血液；
（6）用第一根牙签蘸取少许 血液混于抗A血清，搅拌混 匀，将牙签放入垃圾桶； 再用另一根牙签蘸取血液 混于抗B血清（切记换牙 签！！）；
（7）将此玻片静置与空闲处， 观察血液是否凝集；
血型鉴定
请问：上图是什么血型？？
血涂片制作
（8）取末捎血一滴置于玻片的 一端，左手持，载片上保留 下一薄层血膜载玻片，右手 以边缘平滑的推片的一端从 血滴前方后移接触血滴，待 血滴即沿推片散开。然后使 推片与载片夹角保持30-45度 平稳地向前移动；
操作步骤（二）
6、将青蛙血涂片正确放置于载物台，将涂有 血细胞的一面朝上，用玻片夹固定；
7、缓慢调节粗准焦螺旋，将载物台调到最高；
8、双眼从目镜观察视野，将两个视野合并为 一个。缓缓调节粗准焦螺旋使载物台下降， 找到物像，配合细准焦螺旋将物像调节清晰；
9、使用物镜转换器胶轮，将10X或40X目镜 调节到位，配合粗细准焦螺旋和聚光镜、集 光镜亮度将视野调节清晰；
准备
（1）取三张载玻片，用吸 水纸将两面擦干，放于 白纸上；
（2）取一张玻片，如图在 两端分别滴上抗A、抗B 血清，在白纸上标明；
（3）取未用过的采血针， 检查包装是否破损、是 否干燥，检查牙签；
A
B
第1张：血型鉴定
第2张：血涂片
第3张：血涂片推片
采血
酒
精
棉
（4）用酒精棉球将左手
球
无名指消毒，Biblioteka 穿刺实验要求1. 通过凝集反应判断自身血型； 2. 从显微镜下找到白细胞，并由老师检查； 3. 完成实验报告。
实验报告包括：实验目的、实验原理、实 验步骤、实验结果、讨论、思考题、引用 文献等
※实验报告于最后一次实验完成后，装订 成册交到王英老师办公室。
问题与思考
血细胞由红细胞、白细胞、血小板等组成，每种细 胞有什么特点和作用？ 如何区别血液的凝集和凝固？其机理有何差别？ 根据你的血型，判断你能接受何种血型并且能够给 何种血型供血？ O型血人又被称为“万能供血者”，试根据ABO血 型分型作出你对这一说法的理解。