最新肝功能检验
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第十三章肝功能检验
掌握:黄疸的发生机理、类型及实验室鉴别诊断要点;肝功能实验生化检查指标的种类和重点项目的测定方法及评价。
(一)胆红素代谢障碍(黄疸)
黄疸分类: 溶血性黄疸、肝细胞性黄疸、阻塞性黄疸
(二)胆汁酸代谢障碍
1、胆汁酸合成障碍、
2、胆汁酸向肠道排出障碍、3.胆汁酸肠肝循环紊乱、4.胆汁瘀积病变时胆汁酸代谢紊乱
(三)血浆酶异常
1.肝脏合成酶类:胆碱脂酶、凝血因子、铜蓝蛋白;2. 肝细胞内酶: ALT、AST
3.肝脏阻塞性疾病酶活性改变:ALP、GGT;4.肝硬化疾病酶活性改变:单胺氧化酶(MAO)(四)血浆蛋白异常
第二节肝功能试验
⏹血清(浆)蛋白
⏹血清酶测定
⏹血清胆红素测定
⏹血清胆汁酸测定
⏹血氨测定
一、血清(浆)蛋白测定
(一)总蛋白、白蛋白、及白蛋白/球蛋白(A/G)比值测定
1.总蛋白测定:化学法(双缩脲法)、物理法、染料结合法、电泳法
2.白蛋白测定:染料结合法(BCG、BCP)、沉淀法
3.A/G比值
【参考范围】
总蛋白60~80g/L 白蛋白35~55g/L
球蛋白:15~32g/L A/G比值:1.5~2.0/1
临床意义:血中白蛋白(总蛋白浓度)减少: 见于严重肝病、肾病;
A/G比值减少与A/G比值倒置:表示肝功能损害严重。
(二)纤维蛋白原测定(凝血因子Ⅰ)
测定方法:分为三大类
①根据纤维蛋白原的生物学特性测定方
②根据纤维蛋白原理化性质而建立的测定方法。
③根据纤维蛋白原免疫学特点而建立的测定方法。
【参考范围】 2.22~4.22g/L(热沉淀比浊法)
【临床意义】(1) 纤维蛋白原增加:①感染;②无菌炎症;③其它。
(2) 纤维蛋白原减少: ①严重的肝脏疾病;②其它疾病引起纤维蛋白原减少的疾病。(三)甲胎蛋白(α1-fetoprotein,AFP)测定
测定方法:酶联免疫吸附法、放射免疫分析法、斑点免疫结合法、火箭电泳放射自显影法、酶联火箭电泳法等
【参考范围】成人10~30g/L 、>400g/L作为肝癌诊断标准
【临床意义】(1) 原发性肝细胞肝癌的诊断标:400g/L(400ng/ml) ;
(2)活动性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的诊断.
(四)其它
1.铜蓝蛋白测定
【原理】铜蓝蛋白具有氧化酶活性
【参考范围】52.9~167.7 IU/L
【临床意义】肝豆状核变性(Wilson病)和遗传性色素沉积症.
2.转铁蛋白
【原理】双联吡啶法
【参考范围】TIBC 男50~77μmol/L 女54~77μmol/L , 转铁蛋白饱和度为33.0%~
35.0%
【临床意义】遗传性血色素沉积症铁沉积
二、血清酶测定
▪(2)方法评价
▪①赖氏法的实验结果需与卡门分光法的结果对比后求出;
▪②NaOH的浓度对显色有影响;
▪③该法的重复性差。
【参考范围】5~25卡门氏单位
【临床意义】(1) 肝细胞损伤的灵敏指标;(2) 慢性活动性肝炎或脂肪肝:ALT轻度增高(100~200IU),或属正常范围.
ALT测定连续监测法(速率法)
(2)方法评价:
①存在着两个副反应,会使测定结果偏高;
A、血清中存在的α-酮酸(如丙酮酸)能消耗NADH。
B、血清中谷氨酸脱氢酶(GLDH)增高时,在有氨存在条件下,亦能消耗NADH。
②双试剂法,因温育期长,能有效地消除干扰反应,测定准确性高,是ALT测定的首选方法;③血清不宜反复冰冻保存,以免影响酶活性;避免使用溶血标本。
3.赖氏法测定AST
(1)原理与方法评价(类似ALT测定)
【参考范围】8~28卡门氏单位
【临床意义】
增高见于:心肌梗死、肌炎、胸膜炎、肾炎及肺炎和各种肝病病人
4.连续监测法测定AST
(2)方法评价
误差来源
内源性干扰:主要来自血清中高浓度丙酮酸和L-谷氨酸脱氢酶(GLDH)。
外源性:干扰来自试剂中污染的GLDH和AST。
【参考范围】5~40 IU/L(连续监测法测定)
【临床意义】见赖氏法
ALP测定:化学法:金氏法、皮氏法、连续监测法:
1、金氏法测定ALP
(2) 方法评价:磷酸苯二钠比色法与更早的β-甘油磷酸钠法相比具有较大的优点,如水解速度快,保温时间较短、灵敏度较高、显色稳定、不需去蛋白、操作简单、快速。但与磷酸对硝基酚连续监测法相比,准确度、精密度较低;操作比较繁琐,,灵敏度低。
【参考范围成人:3~13 单位,儿童:5~28单位
【临床意义】:ALP主要用于诊断肝胆和骨骼疾病
2.连续监测法测定ALP
(1)方法评价:线性范围可达500U/L,批内CV为2.06%~2.36%,批间CV为2.74%。【参考范围】
男性:1~12岁<500U/L, 女性:1~12岁<500U/L
12~15岁<750U/L,
>15岁40 ~150U/L,>25岁40~150U/L。
【临床意义】见金氏法
(三)GGT测定法
化学法(重氮反应比色法)和连续监测法。
1. 重氮反应比色法测定GGT
【参考范围】男性 3 ~17 U/L;女性 2 ~13 U/L
连续监测法测定GGT
【参考范围】
男性:11~50 U/L;(以γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺为底物)
女性:7~32 U/L
男性:≤40U/L;女性:≤30U/L(以γ-谷氨酰-4-硝基苯胺为底物)
(四)MAO测定
(2) 方法评价
【参考范围】12~40 U/ml
【临床意义】:肝硬化时,肝纤维化现象十分活跃,MAO活性明显升高。
三、血清胆红素测定
测定方法:重氮盐法、胆红素氧化酶(BOD)法、高效液相色谱法(HPLC)、导数分光光度法直接分光光度计法
四、血清胆汁酸测定
测定方法:比色分析测定法、酶免疫分析法、放射免疫分析法、高效液相色谱法;酶比色法(2) 酶比色测定法评价:
优点: 快速、简便、准确、可靠和适用
缺点:试剂价贵、不易保存。对酶量的要求严格,易产生误差。此外,标准品的制备非常重要。常采用甘氨胆酸溶入小牛血清中制成冻干品。
【参考范围】 1 ~7 µmol/L(成人空腹)
【临床意义】1、任何引起肝细胞损伤的病理过程都可能引起血中胆汁酸升高.
2、各种类型的肝病、肝硬化、脂肪肝,及急慢性胆道阻塞。
3、空腹胆汁酸测定:敏感、特异性强; 最敏感的肝功能试验之一。特别适用于可疑有肝病,
但其它生化试验正常或轻度异常的病人的诊断。