浙江大学生物生物化学与分子生物学

浙江大学2009年考研专业课试卷生物化学试题和往年的题型完全不一样，多了不定项选择题，而且选择超多，达到10个，都是些很细小的东西。

大题有：1、G蛋白及其作用过程图2、柠檬酸循环及其意义3、糖酵解和糖异生不可逆的原因4、血红蛋白为什么比肌红蛋白更适合运输氧浙江大学2008年考研专业课试卷生物化学1、什么是膜蛋白？举例说明膜蛋白的主要特征和生物学功能。

(10)2、如何理解在酶催化作用的高效性和专一性理论中论述的“来自酶与底物相互作用的结合赋予了催化反应的高效性和特异性”，举例说明。

(10)3、什么是G蛋白？描述生物通过G蛋白受体进行信号传导的机理，并举例说明。

(10)4、脂肪酸具哪些特征适合能量储存？分析阐明胖熊如何利用脂肪冬眠，骆驼如何利用驼峰储存脂肪作为水的来源。

(10)5、什么是糖酵解和糖异生？由于糖酵解和糖异生都是不可逆的过程，因此二个途径可以同时进行。

如果两个途径同时以相同的速率进行，会导致什么结果？细胞是通过什么机制对这两个过程进行调控的。

(10)6、人消耗了大量的蔗糖之后，多余的葡萄糖和果糖是如何转化成脂肪酸的。

(10)7、水在生命过程中主要功能有哪些？与其他普通溶剂比较，水的什么性质决定水是生命不可缺少的物质，为什么？(10)8、写出20中氨基酸的3字母和1字母的缩写，根据R基团的极性，电荷及苯环可以分成哪五类？哪些是人体必需的氨基酸和非必需氨基酸？(20)9、氨基酸的序列决定了蛋白质的分子构造和功能，请阐明至少两种分析和决定氨基酸序列的方法及其原理，并比较说明这两种方法的优缺点。

(20)10、有8种酶参与三羧酸循环：柠檬酸合酶，顺乌头酸酶，异柠檬酸脱氢酶，а-酮戊二酸脱氢酶，琥珀酸脱氢酶，延胡索酸酶和苹果酸脱氢酶，（1）写出每一种酶催化反应的平衡化学方程式。

（2）说出每一种酶催化反应需要的辅助因子。

（3）写出从乙酰辅酶A到CO2代谢过程的一个平衡净反应方程式。

(20) 11、作为生物化学实验室的新手，进入实验室后，首先你需要几周的时间刷瓶子和试管等，然后逐渐开始学习配制各种缓冲液和试剂。

接下来你要开始一个蛋白质纯化实验。

实验目的是分离一种参与柠檬酸循环的酶——即位于线粒体间质的柠檬酸盐合成酶。

请根据上述要求设计这个实验（包括实验的材料，主要的实验设备仪器和药品，蛋白质分离纯化的技术及原理，描述具体的实验步骤，最后对实验可能获得的结果进行分析）。

(20)浙江大学2007年考研专业课试卷生物化学1.什么是蛋白质？分类并举例描述蛋白质的功能，描述你最熟悉的5种蛋白质分离纯化方法的工作原理。

2.蛋白质分子变性与核酸分子变性的本质区别是什么？引起蛋白质和核酸变性的主要因素有哪些，原理是什么？它们变性后进行复性的方法分别有哪些？（20分）3.什么是酶？酶的国际分类法将酶分为几类？举例说明每一类酶催化反应的原理？（20分）4.细胞呼吸分为几个阶段？简单描述这几个阶段的代谢特征。

（20分）5.真核生物mRNA分子构造通常都具有5’帽（5’cap）和3’端的多聚腺苷酸尾[3’poly(A) tail]，简单描述它们的结构特征和可能的生物学功能。

（20分）6.什么是生物膜？生物膜的主要分子组成、结构特征及生物学功能是什么？简单描述生物膜是如何被动及主动的进行溶质分子的运输的。

（20分）7.细胞内收到损伤的RNA及蛋白质能跟很快被编码的DNA信息取代而得以修复，然而DNA的损伤却不能被自身的信息所取代，DNA的损伤是依靠细胞内多重系统进行修复，请描述目前已知的可导致DNA损伤的物理化学因素以及细胞内的多重DNA修复系统，并结合相关知识，以癌症为例讨论“DNA 的修复决定人的生死”的含义。

（30分）浙江大学2006年考研专业课试卷生物化学1水是生命不可缺少的物质，从生物化学的角度描述水在生命体中的重要作用。

2描述生物膜的结构特征及其生物学功能。

3简单描述生物体内的三种DNA重组方式。

4简单描述生物体内的四种DNA修复系统。

5简单描述蛋白质合成的五个阶段。

6简单描述柠檬酸循环的八个步骤：7非共价键在生物大分子中扮演了十分重要的作用，有哪四种非共价键？并举例说明它们在维持蛋白质、核酸结构中所起到的作用。

8在自然界中构成蛋白质的氨基酸有20种，根据他们的R基的化学特征可以分成哪几大类？每一类的特征是什么？请写出每一类中包括的氨基酸全称、三字母和单字母的缩写。

9传统的氨基酸测序原理是Edman化学降解法，近年来又发展了电喷射串联质谱法测定氨基酸序列，分别描述它们的原理和特点。

10什么是抗原和抗体？什么是单克隆抗体和多克隆抗体？基于抗体－抗原相互作用的生化分析方法有酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫印记测定(Western Blot)及抗体芯片等，描述其中一种的作用原理。

11描述使用双向电泳进行蛋白质分离的原理，利用这项分离技术设计一个研究实验，写出实验目的、方法及步骤，并列出所需要的其它仪器、药品、研究工具等。

浙江大学2005年考研专业课试卷生物化学1、简单描述蛋白质的超二级结构和结构域的概念。

2、简单描述蛋白质及核酸的变性。

3、在功能上RNA可以分为几种？描述生物体内蛋白质合成过程及各种RNA在这个过程中作用是什么？4、描述生物膜的机构特征及其生物学功能。

5、简单描述柠檬酸循环的反应机制。

6、DNA聚合酶、RNA聚合酶、逆转录酶是生物体内重要的核酸合成酶，通过触媒反应机理，描述它们的相同点和不同点。

7、什么是抗原和抗体？什么是单克隆抗体和多克隆抗体？基于抗体－抗原相互作用的生化分析方法有酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫印记测定(Western Blot)及抗体芯片等，描述其中一种的作用原理。

8、国际分类法，酶分为哪六大类？酶作为生物催化剂的特点是什么？写出3－5种你所熟悉的酶并简单描述它们的活性。

9、作为生物化学实验室的新手，进入实验室后，首先你需要几周的时间刷瓶子和试管等，然后逐渐开始学习配制各种缓冲液和试剂。

接下来你要开始一个蛋白质纯化实验。

实验目的是分离一种参与柠檬酸循环的酶——即位于线粒体间质的柠檬酸盐合成酶。

请根据一下的步骤回答相应的问题。

实验步骤1：取20kg新鲜牛的心脏，置于冰上，使用含有0.2M蔗糖、pH7.2的缓冲液，匀浆（均质化）。

问题1:为什么要用心脏组织？并且为什么选用如此大量的组织？问题2：在整个过程中为什么必须使组织始终保持在低温？为什么需要维持pH在7.2左右？问题3:下一步通过什么实验能够获得较纯的组织细胞中的线粒体组分？问题4:纯化的线粒体通过渗透压裂解后，样品中含有线粒体膜和线粒体内含物。

如何使得蛋白质从样品中沉淀下来？解释相应的原理。

实验步骤2:沉淀经溶解和透析后进行分子量排阻层析分离。

通过280nm紫外吸收收集各分离的组分。

问题5:为什么使用280nm进行测定？第一个和最后一个组分所含蛋白质的分子特征是什么？实验步骤3:将上一步收集的组分进行离子交换层析分离。

问题6: 实验步骤3的蛋白质分离的原理是什么?实验步骤4:为了获得能够测序（氨基酸）的高纯度的蛋白质并且进一步特征分析，需要使用双向电泳进行纯化。

问题7：描述双向电泳的纯化原理。

浙江大学2004年考研专业课试卷生物化学一、名词解释：（50）1 埃德曼降解2 抗体3 诱导契合学说4 热力学第二定律5 补救途径6 荷尔蒙7 竞争性抑制8 细胞膜9 DNA聚合酶10 基因表达二、问答题：1 根据国际分类法将酶分成哪几大类，分别叙述它们的酶反应特征？（15）2 对生物体转录和复制的特征进行说明比较？（15）3 叙述基因文库和cDNA文库的制作步骤并进行它们的特征比较？（20）4 用图表示说明生物体内三羧酸循环ATP产生的途径和它们的调控机理？（20）5 比较说明SDS-PAGE（SDS-聚丙烯酰胺电泳）和琼脂糖凝胶电泳的物质分离原理和特点？（30）浙江大学2003年考研专业课试卷生物化学一是非题(1/20)1 氧化磷酸化作用是ATP的生成基于与相偶联的磷酸化作用.( )2 酶的化学本质是蛋白质.( )3 多肽链结构中,一个氨基酸残基就是一个肽单位.( )4 FMN和FAD的组成中有核黄素.( )5 在细菌的复制中起主要作用的是DNA聚合酶I( )6 DNA变性后其粘度增大( )7乙醛酸循环在所有的高等植物中都存在.( )8 EMP途径本身只产生还原剂,而不产生高能中间产物.( )9 酶促反应的能量效应是降低反应的活化能.( )10 与胆固醇的化学结构最相近的维生素是维生素B12.( )11 CoQ只能作为电子传递的中间载体.( )12 DNA双螺旋结构的稳定性主要来自碱基对之间的氢键( )13 组成蛋白质的所有氨基酸中,由于含有的α-碳原子属于不对称碳原子,因此都具有旋光性.( )14 mRNA的3`端polyA结构是由DNA的非编码区转录的.( )15 糖酵解的限速酶为丙酮酸激酶.( )16 乙酰辅酶A是进入TCA循环还是生成酮体,主要由草酰乙酸浓度调控.( )17 E.coli RNA 聚合酶的σ亚基与转录的终止识别有关.( )18 氧化还原电对中,电子从电势较低的电对流向电势较高的电对,这是自由能降低的现象( )19 葡萄糖和果糖都具有还原性.( )20 如果加入足够量的底物,即使有竞争性抑制剂存在,酶催化的最大反应速度Vmax是可以达到的( ) 二写出下列物质的结构式(2/10)1 Ser2 U3 草酰乙酸4 ATP5 D-glucose三写出下列酶催化的生化反应式( 不要求写结构式)(3/30)1 磷酸果糖激酶2 磷酸甘油变位酶3 丙酮酸脱氢酶系4 顺乌头酸酶5 异柠檬酸裂解酶6 脂酰辅酶A脱氢酶7 谷丙转氨酶8 鸟氨酸转氨甲酰酶9 DNA合成酶10 氨酰tRNA合成酶四综合题(15/90)1 简述SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳基本原理,你使用该技术分离和检测过何种物质?主要操作步骤有哪些?2 质粒是基因工程中最常用的载体,为获得某质粒(如pUC18)DNA,请设计一简单的实验过程(步骤).3 谈谈你所了解的生物化学近年来的新进展.4 DNA双螺旋模型是哪年由谁提出的?简述其基本内容.为什么说该模型的提出是分子生物学发展史上的里程碑,具有划时代的贡献?5 何谓变性,那些因素可以引起蛋白质的变性?何谓别构(变构)?举一例说明.6 试述三羧酸循环是如何沟通糖类,脂类和蛋白质三大有机物的代谢的?浙江大学2002年考研专业课试卷生物化学一是非题(1/20)1 所谓肽单位就是指组成蛋白质的氨基酸残基2 在竞争性抑制剂存在的情况下,即使加入足够量的底物,酶仍不能达到其催化的最大反应速度3 一级结构决定空间结构,所以蛋白质合成中新生肽链的折叠无须其他蛋白质的帮助.4 Sanger反应(二硝基氟苯法)用以鉴定多肽链羧基末端氨基酸,而Edman反应(苯异硫氰酸酯法)则用以鉴定多肽链氨基末端氨基酸.5 与胆固醇的化学结构最相近的维生素是维生素B12.6 在某些生物中,RNA也可以是遗传信息的基本携带者7 生长激素释放抑制因子是一个14肽8 维生素B1的辅酶形式是TPP9 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种10 肾上腺素和胰高血糖素都通过cAMP很快地对机体组织发挥作用11 呼吸链电子载体是按照其标准势能逐步下降而氧化还原电势逐步增加的方向排列的12 CO对氧化磷酸化的影响主要是抑制ATP的形成过程,但不抑制电子传递过程13 花生四烯酸广泛存在与植物中,它是哺乳动物的必需脂肪酸14 即使在饥饿状态下,肝脏也不利用酮体作为燃料分子,而大脑组织在血糖供应不足时利用酮体作为燃料分子供能15 不同生物对氨基氮的排泄方式不同,如鱼类以氨的形式直接将氨基氮排出体外;鸟类以尿酸形式,植物和动物以尿素形式将氨基氮排出体外16 紫外辐射引起的DNA损伤可通过光复活作用修复. 光复活酶虽然在生物界分布很广,从低等单细胞生物直到鸟类都有,但高等哺乳类中却没有17 逆转录酶存在与所有RNA病毒中,在RNA病毒复制中起作用18 遗传密码字典在生物界并非完全通用,像原生动物纤毛虫就有例外19 糖基化是真核生物蛋白质修饰的一种重要方式,内质网和高尔基体两种亚细胞器都能对蛋白质进行糖基化修饰20 真核生物中同一转录单位可以通过不同的拼接而产生不同的蛋白质合成模板mRNA二用化学结构式完成下列酶促反应(4/20)1异柠檬酸裂解酶 2 丙酮酸羧化酶 3 磷酸戊糖异构酶4 烯脂酰辅酶A水化酶5 丙氨酰tRNA合成酶三综合题(10/60)1 什么是蛋白质的二级结构?稳定二级结构的主要作用力是什么?多肽链中存在的脯氨酸对α螺旋的形成有何影响,为什么?哪种蛋白质完全由α螺旋构成?2 电泳是分离生物大分子的主要方法之一,简述其原理;SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳能测定蛋白质的分子量,原理是什么? 分子量不同的蛋白质在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率与分子量有什么关系？3 何谓酶促反应动力学?底物浓度,温度和PH值对酶促反应速度各有什么影响?试分析之.如果希望反应初速度达到其最大速度的90%,底物浓度应为多大?4 何谓核酸变性?引起核酸变性的因素有哪些?何谓DNA的熔解温度(Tm)?其大小与哪些因素有关?5 从结构和功能两大方面比较E.coli DNA 聚合酶III和RNA聚合酶6 Jacob 和Monod在上个世纪60年代初提出乳糖操纵子模型,开创了基因表达调节研究的新领域, 具有划时代意义.请你试述乳糖操纵子理论.浙江大学2001年考研专业课试卷生物化学一是非题(1/30)1 酶反应的专一性取决于其辅助因子的结构2 肽酰转移酶在蛋白质合成中催化肽键的生成和酯键的水解3 E.coli 连接酶摧化两条游离单链DNA分子形成磷酸二酯键4 通过柠檬酸途径将乙酰辅酶A转移至胞液中,同时可使NADH上的氢传递给NADP+生成NADPH5 亮氨酸的疏水性比缬氨酸强6 必需氨基酸是指合成蛋白质必不可少的一些氨基酸7 脯氨酸是α螺旋破坏者8 维系蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键9 在DNA变性过程中总是G-C对丰富区先解链10 真核细胞中DNA只存在于细胞核中11 DNA双螺旋的两条链方向一定是相反的12 酶影响其催化反应的平衡13 酶促反应的米氏常数与催化的底物无关14 维生素E是一种天然的抗氧化剂15 维生素B1的辅酶形式是TPP16 ATP是体内能量的储存形式17 糖酵解过程无需氧气的参与18 胆固醇是生物膜的主要成分,可调节生物膜的流动性19 蛋白质的生理价值主要取决于必需氨基酸的种类,数量和比例20 磷酸吡哆醛只作为转氨酶的辅酶起作用21 DNA复制时,后滞链需多个引物22 绝缘子和增强子一样都属于顺式作用元件23 PCR是包括变性,复性和延伸三个步骤的循环反应24 Sanger曾两获诺贝尔奖25 核糖体上有三个与tRNA有关的位点:A位点,P位点,E位点26 生长激素释放抑制因子是一个14肽27 脂肪酸合成酶催化的反应是脂肪酸-β氧化反应的逆反应28 镰刀型贫血症患者血红蛋白与正常人的血红蛋白在氨基酸组成上只有2个残基有差别29 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种30 中国科学家在今年完成了人类基因组1%的测序任务二写出下列物质的分子结构式1/61 Thr2 D-核糖3 A4 GSH5 尼克酰胺6 丙酮酸三名词解释(4/24)1 反密码子2 操纵基因3 多肽核酸( peptide nucleic acid )4 折叠酶5 共价调节6 Humen Genome Project四综合题（10/40)1 试表述Glu经脱氨基,有氧氧化等途径彻底分解成NH3 , CO2, 和H2O 时的代谢路线,要求用箭头表示所经过的主要中间产物.计算1摩尔Glu共可产生多少摩尔的NH3,CO2,ATP?2 以血红蛋白为例说明蛋白质四级结构的含义,比较血红蛋白与肌红蛋白结构和功能的异同3 请对中心法则加以阐述4 凝胶过滤是分离蛋白质混合物最有效的方法之一,说明其工作原理并简述用该法分离蛋白质的实验操作步骤.浙江大学2000年考研专业课试卷分子生物学一、名词解释(12)1、PCR2、Southern bolt3、外显子4、G蛋白5、基因组6、反式作用子二、问答题：1、简述DNA结构(15)2、何为分子克隆?扼要说明分子克隆技术操作要点和常用的工具酶(15)。