实验五 肝中酮体的生成

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实验五肝中酮体的生成

一、课堂目标

1.说出酮体在体内生成的必要条件及过程

2.注意观察比较和记录实验结果,分析原因,得出明确的结论

3.深入理解为什么酮体的生成是肝特有的功能

二、原理

酮体是乙酰乙酸,β—羟丁酸和丙酮三种物质的总称。肝脏中含有合成酮体的酶

系,用丁酸作为底物与新鲜的肝匀浆混合后保温,即有酮体生成,酮体与含亚硝基铁

氰化钠的显色粉作用产生紫红色化合物。经同样处理的肌匀浆,因缺乏酮体生成的酶

则不产生酮体,无显色反应。通过本实验能证明酮体生成部位。

三、试剂

1.生理盐水

2.洛克溶液氯化钠0.9克、氯化钾0.042克、氯化钙0.024克、碳酸氢钠0.02 克、葡萄糖0.1克,将以上物质混合溶于水中,溶解后加入蒸馏水至100毫升。

3.0.5摩尔/升丁酸溶液取44.0克丁酸溶于0.1摩尔/升氢氧化钠溶液中,并用0.1摩尔/升氢氧化钠稀释至100毫升。

4.0.1摩尔/升磷酸缓冲液(pH7.6) 准确称取磷酸氢二钠7.74克和磷酸二氢

钠0.897克,用蒸馏水稀释至500毫升,精确测定pH值。

5.15%三氯醋酸溶液

6.显色粉亚硝基铁氰化钠

四、器材

试管及试管架、滴管,解剖剪刀、搅拌机、恒温水浴箱、台式天平、离心机、小药匙。

五、操作

1,肝匀浆和肌匀浆的制备;取家兔一只,处死后迅速取出肝和大腿肌肉

各约10克,分别放入搅拌机磨成浆,然后各加入生理盐水20毫升混匀,过滤,备用。

2.取试管4支,标号,按下表操作

.

3.将各管摇匀后,置入37℃水浴中保温40~50分钟。

4.取出各管,各加入15%三氯醋酸10滴,混匀,离心5分钟(3000转/分)。

5.分别取出上述各管上清液,放入显色粉一小匙,观察和记录所产生的颜色反应,并分析结果。

六、实验报告

2.简答

(1) 何谓酮体? 酮体在何处生成? 何处利用? 为什么?

(2) 酮体生成有何生理意义?

实验日期:____月 ____日评分____________ 评改老师___________

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