实验五 肝中酮体的生成
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实验五肝中酮体的生成
一、课堂目标
1.说出酮体在体内生成的必要条件及过程
2.注意观察比较和记录实验结果,分析原因,得出明确的结论
3.深入理解为什么酮体的生成是肝特有的功能
二、原理
酮体是乙酰乙酸,β—羟丁酸和丙酮三种物质的总称。肝脏中含有合成酮体的酶
系,用丁酸作为底物与新鲜的肝匀浆混合后保温,即有酮体生成,酮体与含亚硝基铁
氰化钠的显色粉作用产生紫红色化合物。经同样处理的肌匀浆,因缺乏酮体生成的酶
则不产生酮体,无显色反应。通过本实验能证明酮体生成部位。
三、试剂
1.生理盐水
2.洛克溶液氯化钠0.9克、氯化钾0.042克、氯化钙0.024克、碳酸氢钠0.02 克、葡萄糖0.1克,将以上物质混合溶于水中,溶解后加入蒸馏水至100毫升。
3.0.5摩尔/升丁酸溶液取44.0克丁酸溶于0.1摩尔/升氢氧化钠溶液中,并用0.1摩尔/升氢氧化钠稀释至100毫升。
4.0.1摩尔/升磷酸缓冲液(pH7.6) 准确称取磷酸氢二钠7.74克和磷酸二氢
钠0.897克,用蒸馏水稀释至500毫升,精确测定pH值。
5.15%三氯醋酸溶液
6.显色粉亚硝基铁氰化钠
四、器材
试管及试管架、滴管,解剖剪刀、搅拌机、恒温水浴箱、台式天平、离心机、小药匙。
五、操作
1,肝匀浆和肌匀浆的制备;取家兔一只,处死后迅速取出肝和大腿肌肉
各约10克,分别放入搅拌机磨成浆,然后各加入生理盐水20毫升混匀,过滤,备用。
2.取试管4支,标号,按下表操作
.
3.将各管摇匀后,置入37℃水浴中保温40~50分钟。
4.取出各管,各加入15%三氯醋酸10滴,混匀,离心5分钟(3000转/分)。
5.分别取出上述各管上清液,放入显色粉一小匙,观察和记录所产生的颜色反应,并分析结果。
六、实验报告
2.简答
(1) 何谓酮体? 酮体在何处生成? 何处利用? 为什么?
(2) 酮体生成有何生理意义?
实验日期:____月 ____日评分____________ 评改老师___________
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