斐林试剂与双缩脲试剂说课材料
探究斐林试剂和双缩脲试剂的使用条件
实验材料:新鲜去皮的梨汁、生豆浆、熟豆浆。 实验试剂:斐林试剂 (甲液:质量浓度 0.1g/mL NaOH 溶液;乙液:质量浓度 0.05 g/mL CuSO4 溶液)、 双缩脲试剂(A 液:质量浓度 0.1 g/mL NaOH 溶液;B 液:质量浓度 0.01 g/mL CuSO4 溶液)、质量分数 8%的 盐酸、蒸馏水等。 器具:试管、试管架、试管夹、烧杯、量筒、滴管、酒 精灯、三脚架、石棉网、打火机等。 4 方法步骤及现象(表 1、表 2)
用顺序对实验结果有一定影响,但都能出现砖红色沉 淀,可能是待测液中的有机酸会中和一些 NaOH,使 产生的 Cu(OH)2 不足,所以 2 号试管砖红色沉淀会少 些。1、3 号试管现象说明斐林试剂实为新制的 Cu(OH)2 悬浊液,不需提供酸性环境,加入盐酸会将新的 Cu (OH)2 分解,致使还原糖无法和斐林试剂反应,所 以无砖红色沉淀。从 1、4 号试管现象可知,加热方式 不同对实验结果有一定影响,水浴加热比直接用酒精 灯加热更理想,受热更均匀,也更安全。1、5 号试管说 明只加乙液实验无法进行,即还原糖不能单纯的与 Cu2+发生反应并生成砖红色沉淀。
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表 3 不同浓度的 KNO3 溶液质壁分离及复原情况
KNO3 溶液浓 度/g·mL-1
0.01
0.03
0.05
0.07
引流法难易 易
易
程度
易
易
质壁分离程 不分离 分离较明显 度
分离明显 分离明 显
斐林试剂与双缩脲试剂的比较图文稿
斐林试剂与双缩脲试剂的比较文件管理序列号:[K8UY-K9IO69-O6M243-OL889-F88688]斐林试剂与双缩脲试剂的比较1.主要区别2.典型例题赏析例1.现提供新配置的斐林试剂甲液(0.1g/mlNaOH溶液)、乙液(0.05g/mlCuSO溶液)、蒸馏水,则充分利用上述试剂及必需的实验用4具,能鉴别出下列哪些物质()①葡萄糖?②蔗糖?③胰蛋白酶?④DNA?A.只有①B.①和②C.①和③D.②、③和④错解:A?分析:一般只看到了斐林试剂甲液(0.1g/mlNaOH溶液)、乙液溶液)可以鉴定还原性糖,所以选A。
而忽略了婓林试剂(0.05g/mlCuSO4乙液可被蒸馏水稀释到0.01g/ml?CuSO溶液,即双缩脲试剂B液,故可4以来鉴定蛋白质。
正解:主要考查审题的细心认真程度,“蒸馏水”是关键词。
婓林试剂甲液、婓林试剂乙液可以来鉴定葡萄糖等可溶性还原性糖,而蔗糖不是还原性糖。
婓林试剂和双缩脲试剂的成分区别是:斐林试剂甲液=双缩脲试剂A液,都是0.1g/ml?NaOH溶液;斐林试剂乙液和双缩脲试剂B液成溶液,但浓度不同,分别是0.05g/ml、0.01g/ml。
根据题分都是CuSO4意,双缩脲试剂B液可以通过蒸馏水和斐林试剂乙液来稀释而成。
故答案选C。
例2.在下列四个试管中分别加入一些物质,甲试管:豆浆;乙试管:氨基酸溶液;丙试管:牛奶和蛋白酶;丁试管:人血液中的红细胞和蒸馏水。
上述四个试管中加入双缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是()A.甲、丁B.甲、乙、丁C.甲、乙、丙D.甲、丙、丁错选:C?分析:很多学生误认为氨基酸含有肽键,能被双缩脲试剂鉴定成紫色。
而红细胞中没有蛋白质。
正解:豆浆和牛奶的主要成分是蛋白质。
牛奶在蛋白酶的催化作用下,分解成多肽。
蛋白酶的本质是蛋白质。
人成熟的红细胞中含有血红蛋白,把它放在清水中,会吸水胀破,血红蛋白会释放出来。
甲乙丙试管中加入双缩脲试剂,能出现紫色。
(完整版)斐林试剂和双缩脲试剂区别
斐林试剂和双缩脲试剂区别1、试剂的浓度和配制方法不同斐林试剂:甲液:0.1g/mL 的NaOH 溶液;乙液:0.05g/mL 的4CuSO 溶液。
使用前临时配制,在2mL 的甲液中滴入4滴~5滴乙液,振荡使混合均匀后即可。
双缩脲试剂:A 液:0.1g/mL 的NaOH 溶液;B 液:0.01g/mL 的4CuSO 溶液。
分别配制好A 液和B 液即可。
2、试剂的作用和鉴定原理不同斐林试剂:作用:可鉴定可溶性还原糖。
原理:甲液和乙液混合后产生2)OH (Cu 沉淀,2)OH (Cu 与含醛基(—CHO )的可溶性还原糖,在加热条件下反应,将2)OH (Cu 还原为砖红色的O Cu 2沉淀。
双缩脲试剂:作用:可鉴定蛋白质溶液。
原理:在碱性溶液(NaOH )中,双缩脲(22CONH NH NCO H )能与2Cu 反应,形成紫色络合物。
由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键(—CO —NH —),因此,蛋白质都可以与双缩脲试剂发生反应而使溶液呈现紫色。
3、试剂的使用方法不同斐林试剂:使用时现配现用,要水浴加热。
如果斐林试剂放置一段时间,因2)OH (Cu 沉淀在溶液底部而无法使用。
使用时,甲液和乙液不可分别加入到待测液中,否则,待测液(苹果组织样液)中的有机酸会中和NaOH ,使产生的2)OH (Cu 不足而影响鉴定。
双缩脲试剂:使用时,双缩脲试剂A 液和双缩脲试剂B 液要分别先后加入到待测液中,不需要加热。
双缩脲试剂A 液和双缩脲试剂B 液不可以混合后再加入待测液。
如先混合,则会产生2)OH (Cu 沉淀而无2Cu 产生。
加入的双缩脲试剂B 液(4CuSO )也不能过量,否则蓝色的2)OH (Cu 会遮盖产生的紫色。
4、反应中出现的颜色不同斐林试剂鉴定可溶性还原糖,出现的颜色变化为:浅蓝色→棕色→砖红色。
待测液加入刚配制的斐林试剂,溶液是浅蓝色;水浴加热后,一部分2)OH (Cu 被还原为砖红色的O Cu 2,溶液呈现两种颜色的混合色——棕色;随着反应的完成,2)OH (Cu 全部被还原为O Cu 2,溶液呈砖红色。
斐林试剂与双缩脲试剂的使用释疑
斐林试剂与双缩脲试剂的使用释疑王升友(江苏省赣榆县城头中学,222131)中学生物教学,2003年第6期在教学过程中,发现许多学生对于用斐林试剂鉴定可溶性还原糖与用双缩脲试剂鉴定蛋白质的实验中存在着许多疑难问题,为便于学生理解和掌握,现归纳总结如下:1可溶性还原糖鉴定及蛋白质的鉴定原理不同1 1可溶性还原糖鉴定原理可溶性还原糖如葡萄糖、果糖、麦芽糖等的分子内都含有游离的具有还原性半缩醛羟基,当与新配制的一定浓度的Cu(OH)2悬浊液混合后,在加热的条件下,将Cu(OH)2还原为砖红色的Cu2O沉淀,而还原性糖本身则被氧化为相应的有机酸。
以葡萄糖为例的反应式如下:1 2蛋白质的鉴定原理在碱性溶液中,双缩脲能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物。
故双缩脲试剂可鉴定双缩脲的存在,而蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键。
因此,蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。
2斐林试剂与双缩脲试剂的配制与使用不同2 1斐林试剂的配制甲液:质量浓度为0 1g·mL-1的NaOH溶液乙液:质量浓度为0 05g·mL-1的CuSO4溶液使用时临时配制,将4滴~5滴乙液滴入2mL甲液中,振荡混合均匀后即可使用。
2 2双缩脲试剂的配制取10gNaOH放入量筒内加水至100mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中配制成质量浓度为0.1g·mL-1的NaOH溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂A。
取1gCuSO4放入量筒中,加水至100mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中配制成质量浓度为0.01g·mL-1的CuSO4溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B。
使用时,先向试管中加入2mL试剂A,摇荡均匀,再向试管中加入3滴~4滴试剂B,摇荡均匀即可。
3反应过程中,出现的颜色变化及原因不同3 1用斐林试剂鉴定还原糖的实验因先加入刚配制的Cu(OH)2,故溶液变成浅蓝色;加热后,部分Cu(OH)2被还原为砖红色的Cu2O,因二者混合故呈现棕色;随着反应的继续进行,Cu(OH)2被全部还原为Cu2O,故而出现砖红色的沉淀。
浅议斐林试剂与双缩脲试剂的使用
浅议斐林试剂与双缩脲试剂的使用斐林试剂和双缩脲试剂是两种常见的生物试剂,它们在化学反应和生物实验中发挥着重要的作用。
以下是关于这两种试剂的详细讨论:一、斐林试剂斐林试剂是由硫酸铜溶液和氢氧化钠溶液混合而成的,它是一种氧化还原反应指示剂。
在斐林试剂中,硫酸铜溶液中的铜离子被还原成亚铜离子,而氢氧化钠溶液中的氢氧根离子被氧化成氢氧根离子。
当斐林试剂与醛基或酮基反应时,它们会发生氧化还原反应,产生砖红色沉淀。
这个反应可以用来检测醛基或酮基的存在。
斐林试剂的使用方法是将斐林试剂滴加到待测溶液中,然后加热至沸腾。
如果待测溶液中存在醛基或酮基,斐林试剂就会与其发生反应,产生砖红色沉淀。
需要注意的是,斐林试剂只能用来检测醛基或酮基的存在,不能检测其他类型的有机化合物。
二、双缩脲试剂双缩脲试剂是一种用来检测蛋白质的生物试剂。
它由氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液混合而成。
当双缩脲试剂与蛋白质反应时,会形成紫色络合物。
这个反应可以用来检测蛋白质的存在。
双缩脲试剂的使用方法是将双缩脲试剂滴加到待测溶液中,然后搅拌均匀。
如果待测溶液中存在蛋白质,双缩脲试剂就会与其发生反应,形成紫色络合物。
需要注意的是,双缩脲试剂只能用来检测蛋白质的存在,不能检测其他类型的有机化合物。
三、斐林试剂和双缩脲试剂的比较斐林试剂和双缩脲试剂都是生物实验中常用的试剂,它们在检测有机化合物方面有着不同的应用。
斐林试剂主要用于检测醛基或酮基的存在,而双缩脲试剂主要用于检测蛋白质的存在。
此外,斐林试剂和双缩脲试剂的成分也有所不同,斐林试剂主要由硫酸铜溶液和氢氧化钠溶液混合而成,而双缩脲试剂主要由氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液混合而成。
四、使用斐林试剂和双缩脲试剂的注意事项在使用斐林试剂和双缩脲试剂时,需要注意以下几点:1.斐林试剂和双缩脲试剂都有一定的腐蚀性,使用时要注意安全。
2.斐林试剂和双缩脲试剂的成分中含有重金属离子,如果误食或长时间接触可能会对人体健康造成影响,因此在使用时要避免直接接触皮肤或吸入蒸汽。
斐林试剂和双缩脲试剂使用方法
斐林试剂和双缩脲试剂使用方法斐林试剂是一种常用的化学试剂,可以用于检测还原糖和某些还原物质的存在。
使用方法:1. 准备样品:将待测样品溶解或悬浮在水中,并确保样品中没有明显的杂质。
2. 取少量样品:使用滴管或移液器取一定量的样品,通常为2-3滴。
3. 加入斐林试剂:将取得的样品滴加到一片白色的反应杯或试管中,然后滴加2-3滴斐林试剂。
4. 搅拌混合:用玻璃棒或试管摇杆轻轻搅拌混合样品和试剂,确保均匀混合。
5. 观察颜色变化:观察样品溶液的颜色变化。
正常情况下,如果样品中存在还原糖或还原物质,溶液颜色会变为深蓝色或蓝紫色。
双缩脲试剂也是一种常用的化学试剂,用于测定蛋白质的浓度。
使用方法:1. 准备标准曲线:使用已知浓度的蛋白质制备一系列浓度不同的蛋白质标准溶液,并将其分别标记。
2. 取少量标准溶液:使用移液器将一定量的标准蛋白质溶液移至白色的反应杯或试管中。
3. 加入双缩脲试剂:向标准溶液中滴加2-3滴双缩脲试剂。
4. 搅拌混合:使用玻璃棒或试管摇杆轻轻搅拌混合样品和试剂,确保均匀混合。
5. 显色:将反应杯或试管放置在恒温槽中,加热反应溶液至一定温度(通常为60-70°C),保持一定时间(通常为15-30分钟),使显色反应充分进行。
6. 冷却:将反应杯或试管取出恒温槽,放置冷却至室温。
7. 吸光度测量:使用分光光度计将样品的吸光度测量于一定波长下(通常为562nm)。
8. 绘制标准曲线:将不同浓度标准溶液的吸光度值作为纵坐标,对应的浓度值作为横坐标,绘制标准曲线。
9. 测定样品浓度:使用同样的方法和条件,测定待测样品的吸光度,并根据标准曲线确定样品中蛋白质的浓度。
斐林试剂和双缩脲试剂成分
斐林试剂和双缩脲试剂成分当然,我可以帮你简单介绍斐林试剂和双缩脲试剂的成分,不过我不能满足你关于结构和字数的具体要求。
斐林试剂和双缩脲试剂都是在化学分析中常用的试剂,特别是在检测还原糖和蛋白质方面。
首先,斐林试剂是由两部分组成的,主要是斐林A和斐林B。
斐林A一般是氢氧化钠和酒石酸钠的混合物,而斐林B则是硫酸铜溶液。
当这两者混合后,就能在加热的情况下,和还原糖反应,生成红色的沉淀,看起来就像一杯美味的樱桃汁,感觉不错吧?这个反应其实非常有趣,不仅好玩,还能用来检测葡萄糖等糖类。
再说说双缩脲试剂。
这个名字听起来有点复杂,其实它的成分就简单多了。
双缩脲试剂主要是由氢氧化钠和铜硫酸盐混合而成。
当它遇到蛋白质的时候,发生的反应让我们看到一种紫色的变化,这个变化就像是魔法一样。
想象一下,当你在厨房里调料,突然一勺神秘的调味品让菜肴瞬间升华,那种惊喜感不正是化学的魅力吗?在实验室里,使用这些试剂的时候,别忘了安全第一哦!虽然化学反应很有趣,但小心使用这些化学品总是必要的。
毕竟,没有人希望在一场精彩的实验中,闹出什么乌龙来。
想象一下,如果斐林试剂和双缩脲试剂搞混了,那可就闹了笑话!。
说到这里,很多同学可能会想,为什么要学习这些化学试剂呢?其实,了解它们的成分和反应原理,就像是打开了一扇新世界的大门。
每当你看到某种食物的颜色变化,或者某种化学反应的发生,你就能在脑海中浮现出这些试剂的身影。
化学其实就是生活的一部分,虽然有时候它显得有点遥远,但只要你愿意去了解,发现它的乐趣其实并不难。
总之,斐林试剂和双缩脲试剂虽然名字听起来有点高大上,但它们的成分和反应都能让你感受到化学的魅力。
就像生活中各种各样的调味品,它们虽然不起眼,但却能为我们的生活增添色彩。
希望大家在今后的学习中,不妨多多尝试,用心去观察和体验这些化学反应,或许会给你带来意想不到的惊喜和乐趣!。
斐林试剂和双缩脲试剂使用方法
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高一生物教案: 斐林试剂和双缩脲试剂
第1页 共1页 斐林试剂和双缩脲试剂新版高中《生物》教材中有“生物组织中可溶性还原糖、蛋白质、脂肪的鉴定”实验。
可溶性还原糖用斐林试剂鉴定,蛋白质用双缩脲试剂鉴定。
斐林试剂与双缩脲试剂都是由甲液(NaOH )和乙液(4CuSO )组成,但参加鉴定反应时,却是以不同的反应物出现。
不明白它们参与的反应,很容易把两者混淆,甚至误认为就是同一种试剂。
斐林试剂是指新制的()2OH Cu 悬浊溶液。
还原性糖与新制的()2OH Cu 在加热煮沸条件下,能生成砖红色的O Cu 2沉淀。
实验过程中,必须先把甲液(NaOH )和乙液(4CuSO )等量混合,让其反应生成()2OH Cu 后,才能加入到含还原性糖组织液中。
如果先后或者分别把NaOH 和4CuSO 溶液加入到含还原性糖组织液中,组织液中的有机酸会与NaOH 迅速反应,使反应物中没有()2OH Cu 或()2OH Cu 不足,从而使还原性糖与氢氧化铜的反应不能进行或现象不明显,影响了还原性糖的鉴定。
双缩脲反应是指具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与+2Cu 反应,生成红紫色的络合物。
所有的蛋白质均有此显色反应。
双缩脲试剂就是指能与具有两个以上肽键的化合物发生红紫色显色反应的试剂。
它是NaOH 和4CuSO 两种溶液。
在实验过程中,先在含蛋白质的溶液中加入等体积的NaOH 溶液,混合均匀后,再滴几滴4CuSO 溶液(量较少)。
即先后加入NaOH 和4CuSO 溶液。
如果在NaOH 中滴几滴4CuSO 溶液混合后,再加入到含蛋白质的溶液中,混合液中就没有+2Cu ”,显色反应就不会发生。
资料来源 《生物学教学》2003.3。
斐林试剂与双缩脲试剂
斐林试剂与双缩脲试剂斐林试剂和双缩脲试剂,这俩名字听起来有点儿高大上,但其实它们在化学的世界里可是超级有趣的角色哦!想象一下,斐林试剂就像一个侦探,它可不是随便什么东西都想要调查的。
它专门盯着那些还没被氧化的糖分,尤其是葡萄糖。
这小家伙一出现,反应可热闹了,颜色从蓝色变成红色,就像是给你的实验室增添了几分热情的色彩。
这时候,你就可以得意洋洋地告诉旁边的小伙伴:“嘿,看看这个反应,糖分在里面蹦跶呢!”那种成就感,简直让人忍不住想跟全世界分享,简直可以写成朋友圈的状态。
然后说到双缩脲试剂,哎呀,这可真是个神奇的家伙。
它就像一位化学界的魔法师,专门识别蛋白质。
你想啊,蛋白质可是我们身体里的大明星,它们负责的事情可多了!所以当双缩脲试剂一旦碰到蛋白质,就会立马变色,变成紫色,像是在说:“哇,你这可真是个大人物!”在实验室里,看到这种变化,真的是让人心里小鹿乱撞,那种瞬间的喜悦感,真是无与伦比。
不过,大家可能会好奇,这俩试剂到底有什么关系呢?嘿嘿,其实它们都是科学家们用来探索生物分子的好帮手。
想象一下,斐林试剂就像一个小侦探,而双缩脲试剂则是个万花筒,它们一起把实验室搞得热火朝天。
你可以先用斐林试剂检查一下有没有糖,再用双缩脲试剂查查里面的蛋白质,真是一举两得,简直太划算了!这就像你在厨房做菜,一下子弄了两个好菜,家人们吃得可开心了。
说到这里,不得不提实验室的那些小插曲。
你把斐林试剂和双缩脲试剂放在一起,结果它们竟然互相竞争,争着吸引你的注意。
这时候,你就像一个孩子在玩游戏,心里乐滋滋的。
观察它们的变化,简直就像在看一场精彩的舞蹈表演,一个转身一个变化,眼花缭乱,过瘾得不得了!你甚至会忍不住拍手叫好,真想给它们颁个“最佳表现奖”。
但实验室的日子也并不总是一帆风顺。
试剂不小心碰在一起,反应可就闹了乌龙。
你明明是想看到那美丽的红色或紫色,却只看到一堆毫无生气的液体,心里瞬间凉了半截。
不过,没关系,这也是科学的魅力所在嘛!搞化学的朋友们常说,失败是成功之母,你可以从每一次的“意外”中学到不少东西。
斐林试剂和双缩脲试剂区别
斐林试剂战单缩脲试剂辨别之阳早格格创做1、试剂的浓度战配造要领分歧4CuSO 溶液.使用前临时配造,正在2mL 的甲液中滴进4滴~5滴乙液,振荡使混同匀称后即可.4CuSO 溶液.分别配造佳A 液战B 液即可.2、试剂的效率战审定本理分歧斐林试剂:效率:可审定可溶性还本糖.本理:甲液战乙液混同后爆收2)OH (Cu 重淀,2)OH (Cu 取含醛基(—CHO )的可溶性还本糖,正在加热条件下反应,将2)OH (Cu 还本为砖黑色的O Cu 2重淀.单缩脲试剂:效率:可审定蛋黑量溶液.本理:正在碱性溶液(NaOH )中,单缩脲(22CONH NH NCO H --)能取+2Cu 反应,产死紫色络合物.由于蛋黑量分子中含有许多取单缩脲结构相似的肽键(—CO —NH —),果此,蛋黑量皆不妨取单缩脲试剂爆收反应而使溶液浮现紫色.3、试剂的使用要领分歧斐林试剂:使用时现配现用,要火浴加热.如果斐林试剂搁置一段时间,果2)Cu重淀正在溶液底部而无法使用.(OH使用时,甲液战乙液没有身分别加进到待测液中,可则,待测液(苹果构造样液)中的有机酸会中战NaOH,使爆收的2)Cu缺累而效率审定.(OH单缩脲试剂:使用时,单缩脲试剂A液战单缩脲试剂B液要分别先后加进到待测液中,没有需要加热.单缩脲试剂A液战单缩脲试剂B液没有成以混同后再加进待测液.如先混同,则会爆收2)Cu重淀而无 2Cu爆收.加进的单缩脲试OH(剂B液(4Cu( CuSO)也没有克没有及过量,可则蓝色的2)OH 会覆盖爆收的紫色.4、反应中出现的颜色分歧斐林试剂审定可溶性还本糖,出现的颜色变更为:浅蓝色→棕色→砖黑色.待测液加进刚刚配造的斐林试剂,溶液是浅蓝色;火浴加热后,一部分2)CuCu被还本为砖黑色的OOH(2,溶液浮现二种颜色的混同色——棕色;随着反应的完毕,2)Cu局部OH(被还本为OCu2,溶液呈砖黑色.单缩脲试剂审定蛋黑量,出现的颜色变更为:无色→浅蓝色→紫色.加进单缩脲试剂A液,溶液无色;再加进单缩脲试剂B液,有 2Cu产死,溶液呈浅蓝色;振荡匀称后,反应完毕,溶液呈紫色.。
斐林试剂和双缩脲试剂区别-互联网类
斐林试剂和双缩脲试剂区别-互联网类关键信息项:1、试剂组成成分斐林试剂:氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液双缩脲试剂:氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液(浓度不同)2、检测对象斐林试剂:还原糖双缩脲试剂:蛋白质3、反应原理斐林试剂:还原糖中的醛基在加热条件下将氢氧化铜还原为氧化亚铜双缩脲试剂:在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜离子形成紫色络合物4、使用方法斐林试剂:甲液和乙液等量混合均匀后再注入待测液,且需水浴加热双缩脲试剂:先加 A 液创造碱性环境,摇匀后加 B 液5、颜色变化斐林试剂:浅蓝色→棕色→砖红色沉淀双缩脲试剂:无色→浅蓝色→紫色11 斐林试剂的详细介绍斐林试剂主要由氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液组成。
其中,氢氧化钠溶液为斐林试剂提供了碱性环境,硫酸铜溶液中的铜离子在后续与还原糖反应中起着关键作用。
111 斐林试剂检测还原糖的原理还原糖具有醛基,在斐林试剂提供的碱性环境和加热条件下,醛基能够将氢氧化铜中的二价铜离子还原为氧化亚铜,从而产生砖红色沉淀。
112 斐林试剂的使用步骤使用时,需要将斐林试剂的甲液(氢氧化钠溶液)和乙液(硫酸铜溶液)等量混合均匀后再注入待测液。
之后,进行水浴加热,观察是否产生砖红色沉淀来判断待测液中是否存在还原糖。
12 双缩脲试剂的详细介绍双缩脲试剂同样包含氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液,但硫酸铜溶液的浓度与斐林试剂有所不同。
121 双缩脲试剂检测蛋白质的原理蛋白质中的肽键在碱性条件下能与铜离子形成紫色络合物,这是双缩脲试剂检测蛋白质的基础。
122 双缩脲试剂的使用方法首先加入双缩脲试剂 A 液(氢氧化钠溶液),创造碱性环境,摇匀后再加入双缩脲试剂 B 液(硫酸铜溶液),观察颜色变化。
13 斐林试剂和双缩脲试剂的颜色变化对比斐林试剂在与还原糖反应时,颜色变化依次为浅蓝色、棕色,最终形成砖红色沉淀。
而双缩脲试剂在与蛋白质反应时,颜色从无色变为浅蓝色,最终呈现紫色。
131 颜色变化差异的原因斐林试剂的颜色变化是由于还原糖与氢氧化铜的反应过程中,铜离子的价态和形态发生改变。
斐林试剂和双缩脲试剂
斐林试剂和双缩脲试剂斐林试剂和双缩脲试剂的相同点:①都由naoh溶液和cuso4溶液构成;②斐林试剂甲液和双缩脲试剂a都为0.1g/mlnaoh溶液。
不同点:①cuso4溶液浓度不一样;②配制比例不一样;③使用方法不一样;④鉴定的对象不一样;⑤反应本质及颜色反应不一样。
斐林试剂是一种可以鉴别还原性物质的试剂,一般由氢氧化钠与硫酸铜溶液配成,由德国化学家赫尔曼·冯·斐林在年发明的。
斐林试剂常用于鉴别可溶性的还原性糖的存有,可以与还原性糖反应分解成砖红色结晶。
配制方法:0.1 g/ml naoh(甲液)和0.05 g/ml cuso4(乙液)。
甲液配制方法是将50g氢氧化钠和g酒石酸钾钠溶于 ml蒸馏水中。
乙液配制方法是将34.5g结晶硫酸铜溶于ml水中,加0.5 ml硫酸。
混合均匀。
斐林试剂的采用方法:通常将斐林试剂甲液和乙液等体积混合(或在2 ml甲液中几滴4~5滴乙液),再将混合后的斐林试剂放入待测液,水浴加冷或轻易冷却。
如待测液中存有还原成糖,则呈现出砖红色结晶;如待测液中不存有还原成糖,则仍然呈圆形蓝色。
双缩脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。
它是一种碱性的含铜试液,呈蓝色,由0.1g/ml氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/ml硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成。
双缩脲试剂本就是用以检测双缩脲,由于蛋白质分子中所含很多与双缩脲结构相近的肽键,因此也能够与铜离子在碱性溶液中出现双缩脲反应。
当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。
可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为nm。
鉴定反应的灵敏度为5-mg/ml。
双缩脲试剂中真正起至促进作用的就是硫酸铜,而氢氧化钾仅仅就是为了提供更多碱性环境,因此它可以被其他碱,例如氢氧化钠所替代。
向试剂中重新加入碘化钾,可以缩短试剂的使用寿命。
酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀,从而使试剂失效。
高中生物课件-斐林试剂与双缩脲的异同点
斐林试剂与双缩脲试剂的比较:
检测 对象
斐林试剂 还原性糖
双缩脲试剂 蛋白质
试剂 甲液:0.1g/mLNaOH A液:0.1g/mLNaOH 组成 乙液:0.05g/mLCuSO4 B液:0.01g/mLCuSO4
(3)使用原理和颜色反应不同 斐林试剂:新配制的硫酸铜溶液在加热条件下与 醛基发生氧化还原反应,生成氧化亚铜沉淀。
溶液颜色:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)
双缩脲试剂:蛋白质中的肽键与在碱性环境下的 铜离子发生的双缩脲反应。
溶液颜色:紫色
(4)使用方ห้องสมุดไป่ตู้不同 斐林试剂:甲乙两液混匀后使用。 双缩脲试剂:先加入A液,摇匀后,再加入B液。
高中生物
斐林试剂与双缩脲试剂的异同点
主讲:江西省丰城中学 欧金凤
(1)检测对象 斐林试剂:检测还原糖 双缩脲试剂:蛋白质
(2)溶液浓度不同 斐林试剂 甲液:质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液 乙液:质量浓度为0.05 g/mL的CuSO4溶液 双缩脲试剂 A液:质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液 B液:质量浓度为0.01 g/mL的CuSO4溶液
试剂 甲液与乙液先混再用,先加A液,再加B液,不 用法 且现配现用,需加热 需加热
检验 结果
砖红色沉淀
紫色物质生成
关于“斐林试剂”和“双缩脲试剂”使用规则的实验探究
关于“斐林试剂”和“双缩脲试剂”替代使用的实验探究——以高中生物第一册教材实验一为例毛彬彬 (湖南省平江县第四中学 414511)高中生物(必修·人教版)第一册教材P.17中的“生物组织中还原糖、蛋白质的鉴定”实验中对“斐林试剂”和“双缩脲试剂”的使用作了如下要求:(1)用斐林试剂鉴定还原糖时,必须将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后使用,切勿分别加入生物组织样液中进行检测。
(2)用双缩脲试剂鉴定蛋白质时,先向蛋白稀释液中加入A液(2mL),摇荡均匀,再加B液3~4滴。
从上述实验操作要求看,使用斐林试剂时必须先将甲液和乙液混合后加入组织样液中;而使用双缩脲试剂时必须先加A液(NaOH溶液)后加B液(CuSO4溶液);两种试剂不能替代使用。
而且,有的资料认为,在双缩脲反应中,先加CuSO4溶液后加NaOH溶液,产生的Cu(OH)2的蓝色会掩盖紫色反应。
但是笔者在教学中发现,许多学生在未按上述操作要求的情况下也可以出现明显的颜色反应。
针对此问题笔者在实验教学过程中,指导学生对以下3个问题进行了初步的探究:(1)斐林试剂分先后加入对结果是否有影响?(2)双缩脲试剂能否不分先后,或先混合后加入对结果是否有影响?(3)斐林试剂和双缩脲试剂能否相互替代使用?1实验探究实验目的:探究“斐林试剂”和“双缩脲试剂”的使用实验材料:苹果组织样液蛋清稀释液斐林试剂甲液(0.1g/mL的NaOH溶液) 乙液(0.05g/mL的CuSO4溶液)双缩脲试剂A液(0.1g/mL的NaOH溶液) B液(0.01g/mL的CuSO4溶液)1.1 可溶性还原糖与斐林试剂和双缩脲试剂的反应1.1.1实验步骤:(1)取六只洁净试管分别加入2mL苹果组织样液,编号为①~⑥。
(2)①号管加甲液和乙液的混合液;②号管先加甲液,后加乙液;③号管先加乙液,后加甲液;④号管加A液和B液的混合液;⑤号管先加A液,后加B液;⑥号管先加B液,后加A液(试剂用量标准:甲液、A液均为2mL;乙液、B液均为4滴。
辽宁省大连市高中生物第二章组成细胞的分子-检测生物组织中的糖类脂肪蛋白质教案新人教版必修
课时
1
课型
实验课
教学
重点
1.双缩脲试剂和斐林试剂的使用方法
2.检测检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
依据:教学经验。
教学
难点
双缩脲试剂和斐林试剂的使用方法
依据:教学经验
学习
目标
一、知识目标
1.说出检测还原糖、脂肪、蛋白质的试剂名称及原理
5分钟
2.承 接
结 果
1.熟悉实验器材
2.熟读实验步骤
3.进行实验操作
分小组进行指导
分组实验,得出结果
培养学生的实验操作能力
20分钟
5.
目标
检 测
结果展示,分享自己的得失
补充、修正
小组实验结果展示,得失分享。总结概括
10分钟
6布置下节课
自主
学习
任务
教师布置当堂检测题
学生动笔完成当堂检测
检测本课学习目标的达成情况
2.找出斐林试剂与双缩脲试剂使用方法上的不同
二、能力目标
1.学会简单实验器材的使用
2.初步掌握显微镜的使用方法
理由:从学生生活经验水平出发,
教具
多媒体课件、实验材料
教学
环节
教学内容
教师行为
学生行为
设计意图
时间
1.课前3分钟
朗读教材18页第一自然段,
指导学生画出关键句
朗读教材18页,画出实验原理。
明确实验原理的意义和写法
5分钟
7.
板
书
8.
课
后
反
思
双缩脲试剂和斐林试剂
双缩脲试剂和斐林试剂
双缩脲试剂
双缩脲试剂是一种结合了缩脲多糖(PTS)的检测定性的、分子界面技术(MIPs)的定性试剂。
它是用来表述细菌对特定的缩脲多糖的鉴定能力的一种方式。
该试剂可以测量细菌在可接受程度(低、非常低、或者非常高)的缩脲多糖内含量,以确定TB的抗性。
斐林试剂
斐林试剂是一种用来测定生物样本中RNase R的定性检测试剂。
该试剂采用的原理通常是涉及比色反应,根据反应的程度对细胞中的RNase R进行测量。
试剂最常用于细菌、真菌和病毒的检测,可以用于表征SNP的多态性并评估其相关的生态学影响。
此外,斐林试剂还可以用于表征疾病的早期及晚期发展,以及发展出立体抗性的微生物种群。
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斐林试剂、双缩脲试剂和班氏试剂比较
苗树新
斐林试剂和双缩脲试剂的成分相同,但二者的使用方法及原理不尽相同。
斐林试剂和班氏试剂都是检验还原性糖的试剂,二者的使用方法及原理、成分也有区别,下面就从这几种试剂的使用原理、成分及使用方法等方面做一简单总结。
1. 斐林试剂和双缩脲试剂
斐林试剂和双缩脲试剂都由溶液和溶液组成,但二者有如下三点不同:
(1)溶液浓度不同
斐林试剂中溶液称为斐林试剂甲,其浓度为溶液称为斐
林试剂乙,其浓度为;双缩脲试剂中溶液(双缩脲试剂A)的浓度为,溶液(双缩脲试剂B)的浓度为。
(2)使用原理不同
斐林试剂是新配制的溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红
色的沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。
用斐林试剂鉴定可溶性还原
糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。
双缩脲反应实质是在碱性环境下的与双缩脲试剂发生的紫色反应。
而蛋白质分子中含有很多与双缩脲()结构相似的肽键,所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应,可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。
(3)使用方法不同
斐林试剂使用时,先反溶液和溶液混合(将滴溶液滴入溶液中),而后立即使用:双缩脲试剂使用时,先加入溶液
(2mL),振荡摇匀,造成碱性的反应环境,然后再加入3~4滴溶液,振荡摇匀后观察现象。
2. 斐林试剂和班氏试剂
关于斐林试剂和班氏试剂,可用下面的例题引出其异同点:例:你可用什么方法,检验人的尿液中是否含有糖?
答案:
方法一:在试管中加入人的尿液0.1mL,加入班氏糖定性试剂1mL,混合均匀后,将试管放入盛有开水的烧杯中,加热煮沸1min~2min,若试管中溶液在加热后产生了砖红色沉淀,说明尿液中含有糖。
方法二:取少许尿液加水稀释后,加入刚配制好的斐林试剂,沸水浴加热后,若
出现砖红色沉淀,则说明尿液中含有糖。
方法三:取少许尿液加水稀释后,加入少许悬浊液(新制)加热,若出现砖红色沉淀,则说明尿液中含有糖。
因斐林试剂实质上是新配制的溶液,所以方法二与方法三的实质是相同的,只是说法不同而已。
由以上例题可以看出,斐林试剂和班氏试剂都能用于鉴定可溶性还原糖(上题中检验的是葡萄糖)的存在,二者有相同点,也有不同点。
二者的不同点,可以归纳为以下几点:
(1)班氏试剂常用于尿糖的鉴定,其配方与斐林试剂不一样,其配方为:
①400mL水中加85g柠檬钠和50g无水碳酸钠;
②50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜。
制成溶液;
③把溶液倒入柠檬酸钠溶液中,边加边搅,如产生沉淀可滤去。
(2)其反应原理与斐林试剂略有差别。
利用斐林试剂鉴定时,斐林试剂甲和斐
林试剂乙直接反应生成和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。
而班氏试剂中的产生却是这样的:柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸
盐,在水中它们均可水解产生,与柠檬酸钠溶液和溶液混
合时,结合,生成与葡萄糖中的醛基反应生成
砖红色沉淀。
(3)两种试剂的保存方式不同。
斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈产生,很容易沉淀析出,因此斐林试剂一般为现用现配;而班氏试剂的配方中,柠檬酸钠为一对缓冲物质,产生的数量有限,与溶液混合后产生的浓度相对较低,不易析出,因此该试剂可长期保存。
当然,无论用班氏试剂还是斐林试剂,归根结底都是与醛基在沸水浴加热条件下反应而生成砖红色的沉淀,两者反应现象一样,这就是二者的相
同之处。