昆虫分子鉴定技术简介.共47页
昆虫分子生物技术的主要研究方法与领域-发育生物学论文-生物学论文
昆虫分子生物技术的主要研究方法与领域-发育生物学论文-生物学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——摘要：分子生物技术在昆虫系统发育研究中具有重要作用, 该技术在昆虫的鉴定分类, 研究种群系统发育关系等方面应用广泛。
本文主要从分子生物技术的研究材料, 技术方法和应用三方面展开论述, 并展望了分子生物技术未来在系统发育中的应用前景。
关键词：分子生物技术; 系统发育; 分子标记; 应用;Abstract：Molecular biology techniques plays an important role in the research of insect phylogeny. It is widely used in the identification and classification of insects, and in the research of phylogenetic relationships, etc. This paper mainly discussed the molecular biology techniques from the aspects of research materials, technical methods and its application. At last, the prospect of the application of molecular biology technology in the system development prospects in the future.Keyword：molecular biological techniques; phylogeny; molecular marker; application;昆虫系统发育和进化是昆虫学的一个重要分支, 研究昆虫的系统发育不仅对昆虫的命名、鉴定、描述有所帮助, 而且在探究昆虫的起源、进化和种群的形成发展有着更深层次的意义。
分子遗传标记技术及其在昆虫科学中的应用3
分子遗传标记技术及其在昆虫科学中的应用3龚 鹏 杨效文 谭声江 陈晓峰33中国科学院动物研究所农业虫鼠害综合治理研究国家重点实验室 北京 Μολεχυλαργενετιχµαρκερσανδτηειραππλιχατιονινεντοµολογψ ° ≠ ÷ 2• × ≥ 2 εταλ ΣτατεΚεψΛαβορατορψοφΙντεγρατεΜαναγεµεντοφΙνσεχτΠεστσ&Ροδεντσ ΙνστιτυτεοφΖοολογψ ΧηινεσεΑχαδεµψοφΣιχνεχεσ ≤Αβστραχτ × √ ∏ √ √ °≤ ≥ ∏ √ ¬ √ ∏ √ √ √ ¬ √ √ √ ∏ ∏ ∏ ∏ 2 ∏ √ ∏ ∏ ∏ ∏ √ √ √ ∏ ∏ ∏ 2 ∏ ∏ °⁄ ⁄ ƒ ° ƒ ° √ ∏ 2 ∏ ∏ ∏ ≥≥ √ √ ∏ × ∏∏ ∏ ∏ ∏ 2 ¬ √Κεψωορδσ ∏ ∏∏ 2 ∏ 摘 要 分子遗传标记是随着聚合酶链式反应 °≤ 和≥ ∏ 杂交等分子生物学技术的飞速发展而出现的遗传学标记技术它突破了以往形态标记 细胞学标记和同工酶标记等表达型标记的局限性 在揭示物种的遗传变异性研究中发挥着独特的优势∀分子遗传标记目前已出现了几十种可依其涉及的位点和反映的多态性的基础分为多位点分子标记和单位点分子标记多位点分子标记反映核苷酸序列的多态性单位点分子标记反映基因座上等位基因的多态性∀本文对一些常用的分子标记技术的特点和它们在昆虫系统进化!昆虫分类!昆虫生态!生物防治和特定基因标记等研究中的应用作了介绍∀关键词 分子遗传标记 多位点分子标记 单位点分子标记 昆虫学3国家自然科学基金重点资助项目 !中科院九五重大项目 2 2 和瑞典国际基金 ƒ≥资助项目 ≤Π ∀33通讯作者∀收稿日期 2 2遗传标记 是指用来区分不同的个体或群体 能够稳定遗传的物质或性状∀最早的遗传标记是形态标记 后来在显微镜技术的支持下诞生了细胞学标记∀ 世纪 年代电泳技术的发展又出现了同工酶标记∀这 种标记都是基因表达型的标记 易受环境条件和发育阶段的影响 可利用的多态位点较少∀从 世纪 年代开始 由于分子生物学的飞速发展 出现了多种多样的分子遗传标记 2 ∏ 分子遗传标记突破了表达型标记的局限性 其变异只来源于基因⁄ 序列的差异 具有稳定性高!受环境条件的影响较小!信息含量高!不同层次和类群之间广泛可比等优越性 因而成为遗传标记中又一强有力的工具 在揭示物种的遗传变异性研究中发挥着独特的优势∀1常用的分子标记分子标记技术目前已出现了几十种 新的分子标记还会不断涌现 下面介绍一些常用的分子标记方法∀1.1核苷酸序列多态性的标记技术1.1.1以≥ ∏ 杂交为基础的分子标记技术以≥ ∏ 杂交为基础的分子标记的技术过程包括基因组⁄ 的限制性酶切 电泳分离 利用探针进行≥ ∏ 杂交来检测基因组⁄ 的多态性∀此类技术应用较多的是限制性内切酶酶切片段长度多态性 2 简称 ƒ ° 和⁄ 指纹谱 ⁄ ∀ƒ °是由 在 年首先建立并发展起来的一种分子遗传标记∀它是指用限制性内切酶切割不同个体基因组⁄ 后 含有同源序列的酶切片段在长度上的差异∀这种差异可通过用特定的探针进行分子杂交 然后放射自显影而显示出来∀常用的探针来自于对单拷贝或低拷贝的基因组⁄ 的随机克隆或 ⁄ 克隆∀⁄ 指纹谱是 及其同事于 年在人体遗传研究中发展起来的一种遗传标记方法∀该技术运用小卫星或微卫星⁄ 序列为探针 与酶切后的基因组⁄ 杂交产生出包含许多条谱带的杂交图谱 且不同个体杂交图谱上带的位置千差万别 就象人的指纹一样 因此 等人将这种杂交图谱称为⁄ 指纹谱≈ ∀在⁄ 指纹技术诞生之初 ⁄ 指纹探针仅局限于 的人源小卫星探针 和 ∀随着⁄ 指纹技术的广泛采用 新的探针不断涌现∀目前使用的探针有 类 小卫星探针 微卫星探针 2 基因组⁄ 探针∀1.1.2以°≤ 为基础的分子标记技术随着°≤ 技术的产生 近几年已出现了以°≤ 为基础的几种分子标记技术∀这些技术的优势在于容易操作 灵敏度高 有的技术还可在不了解目的物种任何分子生物学背景的情况下 对其进行研究∀下面对目前应用较多的几种标记技术加以介绍∀随机扩增片段长度多态性 ⁄ 简称 °⁄ ∀ 年 两个实验室几乎同时建立了检测随机扩增多态⁄ °⁄ 的分子生物学技术≈ ∀ °⁄是以 左右的随机寡核苷酸单引物 对基因组⁄ 进行扩增 扩增产物可通过琼脂糖凝胶电泳 溴化乙锭染色来检测∀也可对扩增产物进行同位素标记 用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离 然后用放射自显影检测∀⁄ 扩增指纹分析 ⁄ 2 简称⁄ ƒ 利用非常短的随机引物扩增不同个体的⁄ 然后采用高分辨力的聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染显色检测⁄ 的多态性∀⁄ ƒ使用的引物为 ∗ 比 °⁄的引物更短 因而扩增产物也更多∀重复序列 微卫星 引物扩增 ∏ 2°≤ 简称≥ ≥°2°≤ 以微卫星序列和小卫星核心序列为单一引物进行°≤ 扩增∀由于一般使用 以上的重复序列做引物 所以扩增稳定性比 °⁄大大增强∀扩增片段长度多态性 简称 ƒ ° 是 年由 ∏ 和∂ ° 发明的一种⁄ 指纹技术≈ ∀它结合了 ƒ °和°≤ 技术的特点##昆虫知识∞ × ≤ • ∞⁄ ∞具有 ƒ °技术的可靠性和°≤ 技术的高效性∀其基本原理是对基因组⁄ 酶切片段的选择性扩增∀该技术设计了对某种限制性内切酶的通用接头 以及可与接头序列的限制性酶切位点的序列配对的专用引物 扩增的酶切片段在高分辨力的顺序分析胶上电泳 产生扩增片段长度不同的多态性带型∀单链构象多态性°≤ 2 22°≤ ≥≥≤°2°≤此方法是 等于 年建立的∀应用这一方法必须事先知道目的⁄ 的序列 根据其两端的核苷酸顺序设计合成双引物 特异性扩增目的序列扩增产物变性后 用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离检测∀其基本原理是目的片段上所发生的突变 甚至单个碱基的替换!缺失或插入等微小变化 也将导致其构象改变 并在电泳迁移率上表现出来∀由于缺乏完整的理论依据来预测迁移率和序列对应构象的关系 ≥≥≤°技术目前仍属经验总结阶段∀1.2 基因座上等位基因多态性的标记技术1.2.1 以重复序列为基础的分子标记技术简单重复序列即微卫星⁄ 标记∏ 简称≥≥ 由几个核苷酸 个 为重复单位组成的长达几十个核苷酸的重复序列 如 ≤ 等 在染色体上呈随机分布 由于重复次数不同及重复程度的不完全而造成了每个基因座上等位基因的多态性≈ ∀可以利用某个微卫星⁄ 两端的保守序列设计一对特异引物 扩增这个位点的微卫星序列 经聚丙烯酰胺凝胶电泳即可显示不同基因型个体在这个≥≥ 位点上的多态性∀1.2.2 以为基础的分子标记技术 差别显示°≤ √ 2简称⁄⁄ ×2°≤ 技术 年由 和° 所创建≈ ∗将总 以选用的 χ2端锚定引物作反转录合成第一链 ⁄ 然后以反转录产物作模板 用 χ2端随机引物和 χ2端锚定引物组合的引物对 在加入放射性同位素或荧光标记的 ×°的条件下进行°≤ 表1 常用的分子遗传标记的特点分子标记优点局限性涉及的位点多态性的基础 ƒ °多位点 高变异对⁄ 质和量的要求高多位点核苷酸序列稳定性强只能检测内切酶识别位点上的变异孟德尔遗传需用探针 检测方法较繁琐 成本高⁄ 指纹谱同 ƒ °同 ƒ °多位点核苷酸序列 °⁄操作简便易行 成本低稳定性差多位点核苷酸序列样品⁄ 的质和量要求不高显性标记可在不了解遗传背景下应用⁄ ƒ提供信息高于 °⁄技术较为复杂多位点核苷酸序列 °2°≤ 信息量大假阳性高 稳定性差多位点核苷酸序列≥ ≥°2°≤操作简便易行 成本低需前期研究基础多位点核苷酸序列对样品⁄ 的要求不高 ƒ °多态性丰富受专利保护多位点核苷酸序列结果稳定可靠试剂盒价格昂贵所需⁄ 量少对操作和样品⁄ 质量要求严格孟德尔遗传主要用同位素标记≥≥≤°2°≤操作简单可能漏检一些突变单位点核苷酸序列共显性标记≥≥ 共显性标记需前期研究基础单位点基因座上等位基因⁄⁄ ×2°≤可同时检测基因和表达的差异对操作和样品⁄ 要求严格单位点基因座上等位基因# #昆虫知识 ∞ × ≤ • ∞⁄ ∞扩增 将扩增样品加在变性的⁄ 测序胶中进行电泳分离 经÷光底片暴光后就可以观察到差别表达的 之 ⁄ 扩增条带∀2分子遗传标记在昆虫科学中的应用分子遗传标记在昆虫系统进化!近似种的区分!种群遗传结构及分化!生态特性和行为 迁移扩散!生态入侵!领地扩展 等研究领域得到越来越广泛的应用∀2.1系统进化分子遗传标记大大推进了昆虫系统进化的研究∀用 ƒ °技术° 等研究了冈比亚按蚊Ανοπηελεσγαµβιαε 内 个同型种的 ⁄ 的 ×≥区 发现同型种间差异很小 说明出现分化的时间距今并不遥远≈ ∀ 分析了全爪螨属Πανονψχηυσ 个相近种的系统关系 证明Π µορι与Π χιτρι亲缘关系虽然十分接近 但明显是两个独立的种≈ ∀根据钠离子通道侧翼位点的内含子序列分析 等明确了贪夜蛾属Σποδοπτερα 个种的进化关系≈ ∀通过检测 ≥和 ≥ ⁄ 基因序列的差异 等分析蚊总科的进化起源 证实≤∏ 亚目中的≤ ≤ 和≤∏ 个科组成一个单系群≈ ∀2.2分类学在昆虫纲里 同翅目与半翅目的关系一直存在一些争论 目前分类学家大多支持将同翅目划为一个独立的目 应用分子生物学手段分析的结果也证实了这一观点∀∂ ⁄ 等分析了同翅目与半翅目中 个种及作为外群的 个目 个种的 ≥ ⁄ 部分序列 证实了同翅目应作为一个单系与半翅目分开≈ ∀蚜虫分类学家将分子标记用于以往由于缺乏明确的特征以及形态的可变性而比较困难的蚜虫分类和鉴定工作中∀ƒ 等用 ƒ °技术检测了豌豆蚜Αχρψτηοσιπηονπισυµ 和麦长管蚜Σιτοβιοναϖεναε ƒ ∏ 在内的多种蚜虫的 ⁄ 的多态性≈ ∀≤ 等用 °⁄方法对 种蚜虫进行了成功的鉴别≈ ∀≥ 等用 ƒ °方法研究赤眼蜂属Τρι2χηογραµµα 个种 微小赤眼蜂Τ µινυτυµ!甘蓝夜蛾赤眼蜂Τ βρασσιχαε和西伯利亚赤眼峰Τ σιβιριχυµ的 ⁄ 发现这 个种在 ×≥ 和 ×≥ 区的长度上都有差异 每个种都有其特有的酶切谱带型∀这些结果表明赤眼蜂属的一些种可用 ⁄ 标记清楚地区别≈ ∀铁杉尺蛾Λαµβδιναφισχελλαρια是北美广泛分布的森林害虫 它的种下有 个亚种 铁杉尺蛾Λ φ φισχελλαρια ∏ i 西方铁杉尺蛾Λ φ λυγυβροσα ∏ 美西栎尺蛾Λ φ σοµ2νιαρια ∏ 在形态上难以区分 以往根据幼虫寄主和成虫外激素来区别∀≥ 的研究表明细胞色素氧化酶 和 的基因序列差异和酶切位点的变异可成功区分这 个亚种≈ ∀2.3生态学分子标记技术使人们对昆虫的生态学 包括种群遗传分化!种群间迁移扩散关系以及生殖策略等问题获得了更深入的认识∀同一物种不同的种群可能发生遗传变异 在形态学上通常难以发现这种差异 但在⁄ 水平却容易找出明显的不同∀用 °⁄方法 杨效文等≈ 研究了我国烟蚜种群的寄主分化和地理分化 结果表明我国烟蚜分化仅在种群水平上 未达亚种分化程度∀通过对 ⁄ 的分析 ° 等成功地区分了麦二叉蚜的生物型 ≤ ∞和ƒ≈ 研究豌豆蚜在寄主利用方面的种群遗传趋异的程度≈ ∏ 等研究了传播疟疾的Ανοπηελεσφυνεστυσ在西非和东非的地理分化≈ ∀用⁄⁄ ×2°≤ 方法 杨效文等研究了棉蚜的体色遗传分化 杨效文等 待发表 ∀用多位点 ×探针 ⁄ 等对澳大利亚麦长管蚜Σιτοβιοναϖεναε进行指纹谱研究 结果表明不同麦穗上的麦长管蚜的遗传多样性主要由于扩散 即进行二次扩散 而不是迁入造成≈ ∀用⁄ 指纹谱研究苜蓿切叶蜂Μεγαχηιλεροτυνδατα生殖策略 证实每巢中的后代基本上来自单一雌性 而且在多数情况下雌性只与单一雄性交配≈ ∀##昆虫知识∞ × ≤ • ∞⁄ ∞荻草谷网蚜属的Σιτοβιονµισχαντηι和Σφραγαριαε在南亚和欧洲有两性生殖阶段 在澳洲仅有孤雌生殖∀• 等用微卫星多态性研究表明这两种蚜虫的新西兰种群中基因型非常少 其中有来自澳洲和亚洲迁入的个体∀同时从进化的角度解释了蚜虫两种生殖方式的关系≈ ∀ ∏等用微卫星位点多态性研究冈比亚按蚊由于山谷而使两侧的种群缺乏基因交流 导致了种群的分化≈ ∀2.4 生物防治非洲舌蝇是非洲锥虫的中间寄主∀由于非洲锥虫是人类和家畜几种极其危险热带病的病原 因此非洲舌蝇成为第一个尝试用遗传学方法进行控制的昆虫 运用⁄ 指纹谱技术分析了舌蝇不同家系的遗传关系 以帮助进行舌蝇生物防治的设计≈∀2.5 特定基因的标记和≤ 用导致抗性产生的酯酶 基因的探针研究不同地区的库蚊Χυλεξπιπιενσ证明此基因的扩增具有单一的起源 通过迁飞扩散到不同地区≈ ∀ 等用含有绝大部分∞ 基因的探针来确定Μεγαχηιλεπερσιχαε抗药性酯酶基因在染色体上的位置≈∀ƒ 等根据Μ νιχοτιαναε和Μ περσιχαε的∞ 和ƒ∞ ⁄ 的序列及侧翼区限制性酶切图的分析 推断抗性基因在Μ περσιχαε中形成 通过与Μ νιχοτιαναε的杂交而转移到后者并在后者种群中扩散≈ ∀3 讨论3.1 目前多位点标记多是通过计算样品间的相似性指数 ¬ 和遗传距离 然后进行聚类来分析遗传关系∀大多数情况下 无法进行遗传关系的显著性检验 所得到的结果仅是相对遗传关系 同时无法进行种群遗传结构 迁移!选择!漂变 的定量分析∀而单位点标记可定量分析种群是否符合 • 平衡或 平衡用ƒ统计量 ƒ !ƒ !ƒ 可考察不同地理种群间是否有基因交流及种群的遗传结构模式∀多位点标记的分析及计算需进一步研究 使其结果能进行统计检验∀3.2 多位点标记和单位点标记的多态性实质上分别反映了核苷酸序列的多态性和基因座上等位基因的多态性∀在研究中可根据所针对的问题来选择所采用的分子标记方法∀如需考察相对性关系 可用多位点标记∀若要较为准确地了解种群内或种群间基因交流的程度 则应采用单位点标记∀参 考 文 献• ∂ ≥ × Νατυρε316: ∗• ∏ √ εταλ ΝυχλειχΑχιδΡεσεαρχη 18 ∗• ≤ ΝυχλειχΑχιδΡεσεαρχη 18∗∏ ∂ ° ∞∏• ° ∞ Αµ ϑ Ηυµ Γενετ 44∗° ° Σχιενχε 257 ∗ ° ° ΝυχλειχΑχιδσΡεσ 21: ∗° ∏• ÷ εταλ ΝυχλειχΑχιδσΡεσ22 ∗° ≥ • ⁄ ≤ ƒ ΙνσεχτΜολΒιολ 2 ∗≥ ≠ ΙνσεχτΜολ Βιολ 3∗≥ √ ƒ ° ° ⁄ ΑννΕντοµολ Σοχ Αµ 89 ∗≤ ≥ √ ΙνσεχτΜολ Βι2ολ 6 ∗∂ ⁄ ≤ ⁄ ϑ Μολ Εϖολ 41:∗ƒ √ ≤ ΑχταΠηψτοπατηολ ετΕντο2µολ Ηυνγαριχα 25 ∗≤ ° ° ƒ Ανν Εντ Σοχ οφΑµ86 ∗√ ° ≥ ≥ ∏ εταλ Γε2νοµε 38 ∗≥ ƒ √ ≥ ΙνσεχτΜολ Βι2ολ 8 ∗杨效文 张孝羲 陈晓峰等 植物保护学报 26∗# #昆虫知识 ∞ × ≤ • ∞⁄ ∞杨效文 张孝羲 陈晓峰等 昆虫学报 42 ∗° × ≥ ≥ ⁄ εταλ Ανν Εντ Σοχ Αµ 82 ∗× ≤ ° ∏ ⁄ Γε2νοµε 37 ∗∏ ⁄ ∏ εταλ Μολ Εχολ 8 ∗⁄ ° ≥ × ≤ √ εταλ ΙνσεχτΜολ Βιολ 3 ∗Γενοµε 35 ∗ • ≤ ≤ ≥∏ ∏ ° ⁄ ƒ Μολ Εχολ8 ∗∏ ∏ • • εταλ ΙνσεχτΜολ Βιολ 8 ∗ΙνσεχτΒιοχηεµ Μολ Βιολ23 ∗≤ Νατυρε 350 ∗ ≥ ƒ εταλ Ηερεδιτψ 75: ∗ƒ √ ≥ ƒ εταλ ΙνσεχτΜολ Βι2ολ 3 ∗##昆虫知识∞ × ≤ • ∞⁄ ∞。
法医昆虫学ForensicEntomology课件
麻蝇科Sarcoph第a八gi页d，a共e二十四页。
伤口侵入
鞘翅目 Coa
步甲科Carabidae 阎甲科Histeridae 露尾甲科Nitidulidae 水龟甲科Hydrophilidae 埋葬甲科Siliphidae 隐翅甲科Staphylinidae 金龟甲科Scarabaeidae 粪金龟科Ceotrupidae 蜉金甲科Aphodiidae 皮金龟科Trogidae 皮蠹科Dermestidae 蛛甲科Ptinidae 郭公甲科Cleridae 拟步甲科Tenebrionidae 蚁形甲科Anthicidae 缨甲科Ptiliidae 隐食甲科Cryptophagidae 螟蛾科Pralidae
麻 蝇
法医昆虫学Forensic-Entomology
第十二页，共二十四页。
水蝇
叶蝇
虻科
花 蝇
法医昆虫学Forensic-Entomology
第十三页，共二十四页。
阎甲科
埋葬(máizàng) 甲科
隐 翅 甲 科
法医昆虫学Forensic-Entomology
第十四页，共二十四页。
昆虫 与尸体 (kūnchóng)
– DNA分析技术包括：RAPD 、RFLP、PCR 等
– 线粒体DNA鉴定的标记
法医昆虫学Forensic-Entomology
第二十二页，共二十四页。
谢谢 观赏 (xiè xie)
法医昆虫学Forensic-Entomology
第二十三页，共二十四页。
内容(nèiróng)总结
法医昆虫学 Forensic Entomology。杂食性昆虫：即取食尸体，也可取食尸食性昆虫。但若死者在临死前曾 遭性侵害时，则丽蝇会较喜于产卵在生殖器部位。例如有些杀虫剂被使用于自杀，当杀虫剂液 体在口中出现时，会使得嘴巴上的蝇类繁殖减缓。昆虫会在人或者(huòzhě)动物死亡后两天内即 前来产卵，可藉由计算昆虫的生活史来估算死亡时间。确定死亡地点是否为第一现场，可藉由 比较尸体上的虫相和周遭的虫相即可得知。谢谢观赏
昆虫识别与鉴定绩缨
鉴别微观特征
利用显微镜等工具观察昆虫的微观特 征，如细胞结构、生殖器官等，进行 鉴别。
03
昆虫鉴定技巧
依据形态特征鉴定
总结词
通过观察昆虫的外部形态特征，如触角、复眼、口器、翅脉等，可以初步判断 其所属的科、属或种。
详细描述
触角的形状和长度、复眼的排列方式、口器的构造以及翅脉的图案等都是昆虫 分类的重要依据。了解不同科、属、种昆虫的典型特征，有助于准确地进行初 步鉴定。
昆虫识别与鉴定
• 昆虫基础知识 • 昆虫识别方法 • 昆虫鉴定技巧 • 昆虫鉴定工具 • 昆虫鉴定实践 • 昆虫鉴定的意义与应用
01
昆虫基础知识
昆虫的定义与分类
昆虫是动物界中种类最多、数 量最大的一类生物，占据了地 球上生物多样性的很大一部分。
昆虫属于节肢动物门，昆虫纲， 是动物界中唯一有变态发育的 类群。
生态恢复与重建
在生态恢复和重建过程中，昆虫鉴定可以评估生 态环境的质量和恢复状况，为制定合理的生态恢 复方案提供参考。
自然保护区管理
在自然保护区管理中，昆虫鉴定可以监测保护区 内昆虫种群的变化情况，为保护区的管理和保护 提供科学依据。
昆虫鉴定在农业害虫防治中的应用
害虫种类识别
通过昆虫鉴定可以准确识别害虫 种类，为制定有效的防治策略提
昆虫可以根据其形态、生活习 性、食性等进行分类，常见的 分类方式包括目、科、属等。
昆虫的形态特征
昆虫的身体一般分为头、胸、腹三个部分，头部有触角一对 ，复眼一对，口器一个；胸部有三对腿，一对翅膀；腹部一 般膨大，内有消化系统和生殖系统。
不同种类的昆虫形态各异，但一般都具有上述特征。例如蝴 蝶的翅膀上有各种美丽的花纹，而蜜蜂则有可以采集花蜜的 口器等。
昆虫分子生态学
1.分子标记的方法 分子标记的方法
①同工酶（蛋白质电泳技术）方法； ②限制性片段长度多态性（RFLP）方法； ③随机扩增DNA多态性（RAPD）方法； ④微卫星DNA和小卫星DNA标记方法； ⑤扩增片段长度多态性（AFLP）标记。
表1 昆虫分子生态学常用技术比较
技术名称 同工酶 （蛋白质电泳技 术） RFLP 区别水平及 所获得资料类型 氨基酸所带电荷 及电性，基因频 及电性， 率资料。 率资料。 优点 相对便宜， 相对便宜，已有的方 法较多，产生在生理 法较多， 上重要的共显性孟德 尔遗传。 尔遗传。 缺点 与DNA系列方法相比 系列方法相比 灵敏度较差，较多的试 灵敏度较差， 验数量局限于小型昆虫， 验数量局限于小型昆虫， 酶易受环境条件影响。 酶易受环境条件影响。
1.基本原理 基本原理
通过分子生物学的方法检测昆虫种群或个 体的遗传变异，分析和解释遗传变异的特点与 规律，揭示遗传变异所反映的规律性的东西， 从而进一步阐明昆虫之间以及昆虫与环境之间 的相互作用关系。 其研究的最典型特色是运用分子遗传标记 来检测研究对象的遗传变异特征，以揭示事物 所隐含的演化规律。
三．昆虫分子生态学研究内容
（1）由于昆虫迁飞、扩散或外来种、地理隔离的 昆虫种群在分子水平上的遗传多样性及遗传结构； （2）昆虫种群的生物型； （3）昆虫—植物相互作用的分子机理； （4）昆虫抗药性分子机理； （5）昆虫对环境适应（如耐寒性）的分子机理。
四．昆虫分子生态学的应用
1.昆虫地理种群的遗传变异分析 2.昆虫生物型差异的分子特征 3. 3.昆虫嗅觉的分子识别 4.昆虫与共生菌互作的分子机制
昆虫生态学
一．主要原理
•分子生态学是应用分子进化和群体遗传学的理论、 分子生物学的技术手段、系统发生学和数学的分析 方法以及其他学科的知识（如地学、古气候学等） 去研究种群、进化、生态、行为、分类、生物地理 演化、生物保护等学科领域的各种问题。它主要通 过大量使用分子生物学先进的技术和方法，在分子 水平上研究生态现象，阐明生态现象的分子机制。 •昆虫分子生态学就是以昆虫为研究对象，应用分 子生态学的原理与方法研究昆虫进化与适应机制的 一门学科。
昆虫分子鉴定技术简介
DNA条形码技术在昆虫学中的应用
在昆虫生态学中的应用
推断气候变化对昆虫的影响：如通过形态结合 DNA 条形码的方法调查20 世纪中期及
其50～70 年后加拿大极地Churchill地区的一些寄生蜂的多样性，并比较这两个时期的物种多 样性的改变，结果发现在这50～70年间，这些地区的物种组成确实随着温度的升高发生了显 著的变化。
昆虫已命名100多万种，占动物界已知种类的2/3。
一、昆虫主要的分子鉴定技术
1、分子鉴定技术的必要性
由于经典分类学方法具有局限性 （专业技术要求高，相对专一性），很 难同时有效地对某一个地区某一个项目 或某一次大型考察所得到的全部生物样 本进行鉴定与记录。
对形态学分类固有的缺陷，如表型 可塑性和遗传可变性，无法鉴定隐存分 类单元和不同发育阶段的昆虫。
2007年5月，加拿大圭尔夫大学正式筹建生命条形码数据库系统(Barco也包括完整的物种描述、地理分布信息、标本图片等。
DNA条形码技术在昆虫学中的应用
已经开展的昆虫 DNA 条形码计划
DN的A相条最互基区形本别的和码用新途物技就种术是的物发在种现间。昆虫学中的应用
DNA 序列比对与分析
距离法
距离法是通过计算物种间的遗传距离来鉴定物种，根据条形码间隙的概念， 即种内遗传距离和种间遗传距离之间应存在一个距离间隙，或通过定义一个能区 分种内、种间遗传距离的阈值，将未知物种鉴定为已知物种或定义为新种。
TaxonDNA是基于遗传距离分析条形码鉴定效率的程序（评价方法：最佳匹配方法 （BM）和基于阈值的最佳匹配方法（BCM））。通常基于K-2-P模型进行计算。BM方法的 常会导致假阳性的错误鉴定；BCM有所改进，该方法先对数据库中的序列进行统 计分析，得出一个相似性的阈值，即与未知序列遗传距离最小且在阈值范围内的 数据库中的物种为鉴定成功的物种。
第二章昆虫的鉴定
昆虫鉴定目录第一节园艺昆虫十目及有关科鉴别第二节鳞翅目重要科鉴别第三节鞘翅目、同翅目重要科鉴别第一节昆虫十目及有关科鉴别一、昆虫分类的意义1、定义：昆虫分类是根据不同昆虫的形态特征、生物学特性、生态、生理特性等方面的异同，通过分析、对比、归纳、综合等手段，把种类繁多的昆虫加以分门别类。
总结类群间的亲缘关系，反映昆虫进化过程建立分类系统。
2、意义（1）昆虫分类是认识昆虫的一种基本方法：有了昆虫分类系统，就可以认识昆虫，如建立昆虫分类检索表，并借助予这一‘字典’‘工具书’去查找昆虫的分类地位，叫出它的名称。
（2）昆虫分类是昆虫学研究的基础：昆虫种类的鉴定是植保工作开展的前题，无论是害虫的防治，还是益虫的利用，都需要在种名确定后，去查阅有关科学文献，了解前人的工作经验和研究进展，作为自已植保工作开展的参考。
二、分类的阶元和命名昆虫属动物界节肢动物门、昆虫纲，纲以下又可分为目、科、属、种共七个主要分类阶元。
从界到种，均可设亚级，如亚门、亚科等。
物种是分类的基本阶元，种的定义是繁殖单元，即不同种之间存在生殖隔离。
界：动物界Animalia门：节肢动物门Arthropoda纲：昆虫纲Insecta目：直翅目Orthoptera科：蝗科Locustidae属：飞蝗属Locusta种：飞蝗Locusta migratoria L亚种：东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis Meyen三、昆虫纲分目Order 目World 世界China 中国Subclass Apterygota无翅亚纲Thysanura 缨尾目600 21Diplura 双尾目600 51Protura 原尾目650 199Collembola 弹尾目5000 289 ubclass Pterygota: Ephemeroptera 蜉蝣目2200 306Odonata 蜻蜓目3500 738 Division Exopterygota Plecoptera衤责翅目2300 374有翅亚纲外翅部Grylloblattodea 蛩蠊目251Order 目World 世界China 中国Orthoptera 直翅目23000 2256 Phasmatodea虫脩目2500 221 Dermaptera 革翅目1850 284 Embioptera 纺足目200 7 Blattaria 蜚蠊目4000 366 Mantodea 螳螂目2000 165 Isoptera 等翅目3000 538 Zoraptera 缺翅目25 2 Psocoptera 啮虫目4500 1656 Mallophaga 食毛目4500 934 Anoplura 虱目500 104 Homoptera 同翅目45000 6885 Heteroptera 半翅目38000 3873 Thysanoptera 缨翅目6000 489 有翅亚纲内翅部Order 目World 世界China 中国Neuroptera 脉翅目4500 645 Megaloptera 广翅目500 74 Mecoptera 长翅目500 194 Lepidoptera 鳞翅目200000 18985 Trichoptera 毛翅目10000 987 Diptera 双翅目110000 104 Siphonaptera 蚤目3000 617 Hymenoptera 膜翅目120000 8796 Coleoptera 鞘翅目330000 18794 Strepsiptera 捻翅目400 19Total 79313四、昆虫十大目及重要科鉴定（一）园艺昆虫分目依据1、翅的有无；翅的类型、数目、翅脉脉相；2、口器类型；3、变态类型；4、触角、足类型等。
线虫分子鉴定
，5S rDNA及5．8S rDNA序列较短，大约100150 bp，包含的系统发育信息不多，进化缓慢， 仅适合于纲以上水平的系统发育研究， 目前很 少应用。 18S rDNA区序列较长，大约2 kb，并存在一些 多变区，适合作为科级水平以上的分类依据 28S rDNA区序列比18S rDNA长，大约4—5 kb， 包含的系统发育的信息较多，适合于科和属级 水平以上的系统发育研究。
/
BLAST
BLAST
nucleotide blast
孢囊线虫分子鉴定
线虫是一类低等的无脊椎动物．地球上约１０ 万种，但目前只记载约260属5700多种 包括自由生活线虫（海洋、淡水和土壤中） 危害植物的病原线虫。 几乎所有的农作物都受到植物线虫的寄生。 人类最早发现的是小麦粒线虫（1743年）
唇区
松材线虫病及S区序列最长，大约4～5 kb，属于高 度变化区，适合于种及种下水平的研究， 尤其适合于种的分类签定，但由于序列 过长，全程测序较难，故需结合其它分 子生物学方法进行
ITS 序列是一个多用途的遗传标记,位于 18S 和28S 核糖体DNA基因的重复簇之间, 中间被5.8S 核糖体DNA 基因分开。 受到的选择压力小，在生物种和亚种间 变化较大，可用于属、种及种群水平的 相互关系的研究，用PCR 技术扩增ITS 区，可通过酶切、克隆、测序等来揭示 线虫种间或群体间的差异，从而进行植 物病原线虫种的快速分子鉴定。
检测试剂盒
样品检测
PCR产物 测序
检测体系的优化
探针设计
序列比较， 得差异片段
聚合酶链反应：（polymerase chain reaction, PCR）
原理： 1）引物的设计：合成2个与目的DNA序列两 侧互补的寡核苷酸，一般长约15-25bp。 2）基本条件：引物、DNA前提物质、含有 一定离子（Mg）的反应体系 、DNA聚合酶、 模板。 3）三段循环：变性：93-95℃；复性：5070 ℃;延伸：70-75 ℃ 。n个周期，2n个DNA
农业昆虫鉴定半ppt
130
131
132
筛豆龟蝽
圆(龟)蝽科 Plataspidae
①小盾片极大,覆 盖整个腹部,其端 部宽于基部，近 基部有一横沟；
游泳足：水 生的类型
捕获足：捕 食的类型
开掘足：土 壤或土缝中 的类型
14
中国螳瘤蝽Cnizocoris sinensis Kormilev
15
（3）跗节：1~3节；
前足跗节的形状,跗节端部完整或 分裂；爪着生的部位,爪、中垫的 有无。胫节着生有坚强的长刺或 光滑。
胸部
16
（4）翅：半翅目前翅各 分区，各区的明显程度， 膜质部的脉相是分类重 要特征。
猎蝽科 Reduviidae
陆 ①前翅具缘片和 ①前翅无缘片和楔片；
不完整的楔片； ②喙明显弯曲短，不达
生 ②喙不弯曲，长 中足基节；
组 达中足基节。
③翅膜片上具2个大翅室。 黄猎蝽、暴猎蝽
微小花蝽
66
花蝽科
Anthocoridae ①前翅具缘 片和不完整 的楔片；
②喙不弯曲， 长达中足基 节。
67
一种条蝽
1980
Eurydema
spectabile
一种菜蝽，1982
124
澳洲，1991年 Tectoris
diopthalmus
盾蝽亚科
葡属几内亚，1953年 Callidae panaethiopica
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麦扁盾蝽，1983 Eurygaster integriceps
梭蝽，1965 Rhynchocoris
围； ②触 角4 节。
正 常
③无单 眼。
梨冠
绿盲蝽
昆虫分子鉴定技术简介
该基因不存在内含子，是 蛋白编码基因，所以便于比对， 且可通过翻译检测错误，极少出 现重组、 插入和缺失。
3014 1460
UEA5/UEA6、UEA7/UEA8和UEA5/UEA8：相对保守——高水平（科、属、种） 系统发育研究 UEA3/UEA4 (or UEA4d) 和UEA9/UEA10：较为变异——种群遗传学研究（种内 或近缘物种系统发育）
在昆虫分类学中的应用
其他用途均是由这两个用途衍 生出的。
鉴定物种：在双翅目、膜翅目、鞘翅目、
蜉蝣目、弹尾目、直翅目、蜻蜓目、缨翅 目、襀翅目和毛翅目等中 DNA 条形码也被 证实可以很好地区分物种。
确定虫态关系： 可以对通常形态上无
法鉴定的尤其是完全变态的幼虫、蛹、卵 等虫态进行分类。
DNA条形码技术在昆虫学中的应用
一、昆虫主要的分子鉴定技术
1、分子鉴定技术的必要性
现有物种正以每年约1万种的速度在灭绝， 也亟需一种更加具有效率的生物物种鉴定与 记录体系。 以现在人类社会生产力发展的需求来看， 亟需一种更加具有效率的昆虫物种鉴定体系， 更好地为生产生活服务。
分子鉴定技术能够从不同发育时期的昆
虫标本或残缺的组织中鉴别出物种。
一、昆虫主要的分子鉴定技术
1、分子鉴定技术的必要性
自林奈创立双名法近 250 年来，仅 有 100 多万个昆虫物种被命名，而昆虫 数量巨大（ 1000-2000 万未鉴定），单 靠专业的经典分类学家命名，几乎是不 可能完成的任务。
以平均一个经典分类学家一生鉴定 1000 个物
种的标准来计算，需要 1 万多个经典分类学家同时 参与完成。 昆虫已命名100多万种，占动物界已知种类的2/3。
（BM）和基于阈值的最佳匹配方法（BCM））。通常基于K-2-P模型进行计算。BM方法的
项目一任务4-1昆虫主要类群识别技术
04
昆虫主要类群识别的应用与展望
昆虫主要类群识别的应用价值
生态保护
生物多样性研究
准确识别昆虫种类，有助于了解昆虫 在生态系统中的作用，为生态保护提 供科学依据。
了解昆虫物种多样性，有助于深入探 究生物进化历程和生态系统的稳定性。
农业害虫防治
识别农业上的重要害虫，有助于采取 有效的防治措施，减少害虫对农作物 系统中具有重要的作用，能够传播花粉、促进 植物繁殖。同时，蜂蜜也是一种营养丰富的食品。
蜻蜓类群的识别实例
蜻蜓类群识别
蜻蜓类群特征
蜻蜓是水生昆虫，以捕食其他小型生物为 生。通过观察蜻蜓的翅膀、身体形态等特 征，可以初步判断其所属的类群。
蜻蜓的翅膀通常较长，上面有各种网状或 点状花纹；身体形态较为细长，头部可以 灵活转动。
生物学特性也是分类的重 要依据，如生殖方式、生 活习性、食性等。
依据系统发生关系
通过比较不同物种间的基 因序列和分子结构，可以 确定它们的系统发生关系， 从而进行分类。
昆虫主要类群在生态系统中的作用
传粉媒介
昆虫是植物传粉的主要媒 介，通过传粉作用促进植 物繁殖，维持生态系统的 多样性。
分解者
一些昆虫能够分解有机物， 将其转化为无机物，促进 物质循环和能量流动。
分子生物学识别技术
总结词
基于DNA序列差异进行鉴别。
详细描述
通过提取昆虫DNA，进行基因测序和分析，比较不同昆虫种类的基因序列差异，确定昆虫种类。该技术具有较高 的鉴别准确性和可靠性，适用于大量样本的快速鉴定。
声音识别技术
总结词
基于昆虫发出的声音特征进行鉴别。
详细描述
通过采集昆虫发出的声音信号，分析 声音的频率、节奏等特征，对比已知 的昆虫声音特征信息，确定昆虫的种 类。该技术适用于在野外环境中进行 昆虫种类的快速鉴别。
病虫害的分子诊断方法
总结词
基因编辑技术是一种能够精确地修饰 生物体基因组的最新技术，包括 CRISPR-Cas9系统等。
详细描述
基因编辑技术可以用于创建病虫害的 基因敲除或敲入模型，研究基因功能 和表型变化，为病虫害防治提供新的 策略和靶点。该技术具有精确、高效 和可定制化的优点。
03
分子诊断在病虫害防治中的应用
病原菌的分子鉴定
提高检测的灵敏度与特异性
优化引物设计
针对目标基因设计高特异性引物，降低非特异性扩增 ，提高检测的准确性。
荧光定量PCR技术
利用荧光标记探针进行实时监测，提高检测的灵敏度 和可靠性。
特异性抗体开发
针对目标蛋白开发高特异性抗体，用于免疫学检测方 法的建立。
推动分子诊断的普及与推广
标准化与规范化
制定分子诊断技术的标准操作流程和质量控制标准，确保检测结 果的可靠性。
和改进，提高检测灵敏度和特异性，为未来的医学和农业发展奠定坚实
基础。
02
分子诊断的核心技术
基因测序技术
总结词
基因测序技术是利用新一代高通量测序平台对生物样本进行深度测序，从而获取基因组的全部序列信 息。
详细描述
基因测序技术能够精确地检测出病虫害的基因序列，揭示其遗传特征，为防治病虫害提供科学依据。 通过基因测序，可以快速鉴定未知病原菌，并对已发现的病原菌进行基因分型，监测其变异情况。
生物芯片技术
总结词
生物芯片技术是将大量生物分子以微阵列形式固定在硅片、玻璃片或尼龙膜等固 相支持物上，利用微阵列中生物分子的特异亲和性进行检测。
详细描述
生物芯片技术可以同时检测多个基因的表达水平和变异情况，为病虫害的分子诊 断提供高通量的检测手段。该技术具有高并行性、高灵敏度和高特异性等优点。
初中生物科学解析昆虫的保护与鉴定
科学研究与监测： 加强昆虫的科学 研究，了解其生 态习性和生存状 况，为保护和利 用提供科学依据。 同时，对昆虫种 群进行监测，及 时发现和解决生 态问题。
开展科普教育宣传
开展科普教育宣传： 提高公众对昆虫重 要性的认识，培养 保护意识
建立自然保护区： 保护昆虫栖息地， 防止人为破坏
制定法律法规： 禁止非法捕捉、 猎杀、买卖和运 输昆虫
加强法律法规保护
加强法律法规保 护：制定严格的 法律法规，禁止 非法捕捉、猎杀 和交易昆虫，加 大对违法行为的 惩罚力度。
建立自然保护区： 在昆虫栖息地建 立自然保护区， 保护其生态环境， 防止人类活动对 其造成破坏。
开展科普教育： 通过科普教育活 动，提高公众对 昆虫的认识和保 护意识，倡导人 们尊重自然、保 护生态。
昆虫的体态：昆虫的体态多种多样，不同种类的昆虫具有独特的身体形态，有助于昆虫的分类和鉴别。
03 昆虫的保护价值
生态平衡的作用
昆虫在生态系统中占据重要地位，是许多动物的食物来源。
昆虫对于植物的传粉和繁殖具有重要作用，维持植物种群的繁衍。
昆虫能够分解有机物，参与物质循环，保持生态系统的稳定。 昆虫种群的变化会对整个生态系统产生影响，保护昆虫有助于维护生态 平衡。
昆虫的胸部一般生有翅膀和腿，翅膀用于飞行，腿用于爬行和跳跃。
昆虫的胸部形态多样，根据不同种类昆虫的特点，胸部形态也各不相同， 如蜻蜓的胸部细长，而蝗虫的胸部短粗察昆虫的胸部形 态可以初步确定其种类。
昆虫的腹部特征
昆虫腹部由多个节组成，通常分为 前、中、后三个部分。
初中生物科学解析昆 虫的保护与鉴定
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汇报人：
昆虫研究方法-PPT课件
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绘图
绘图桌，绘图桌的桌面为30°斜面毛玻璃， 屉厢里有荧光灯。 草稿图应标明放大倍数，其计算如下： 在同一镜下放一尺，用绘图仪把尺的细格 画下来，测量画下来的图上多少毫米是原 先的一毫米，即为放大的倍数。绝不可直 接用物镜的放大倍数计算。 爱护标本，勿使损坏。
观察，特点是工作距离大，视野宽 阔，被观察物呈正视立体放大像， 镜下操作方便。
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观察仪器 显微镜
普通显微镜(略）
暗视野显微镜
利用特别的集光器，不使照射被检视 物体的光线直接进入物镜，而是利用被检 视物体表面散射的光线，来观察普通照明 视野显微镜下所看不到得物体，如精子、 脂肪粒。
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绘图
2.绘草图的注意事项 绘图要专心致志，安静耐心，座位合适， 一气呵成。 图纸要质地厚实、色白，耐涂檫，不沁 墨水。图纸应钉在绘图板上，不使移动。 铅笔需软硬适中，以HB-1H为宜，橡皮 擦软而不带颜色。 绘虫体背面时头朝前，绘侧面时头朝左。
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绘图
绘虫的背面观或腹面观等对称图时，可 先绘一半（以中轴为界）再合成全图，或 一半背面另一半腹面，或一半是翅的斑纹 图，另一半是翅脉图。 各部位的比例需正确，标本要整姿。 绘图大小应与出版单位事先商定。 草稿图须注明昆虫名称、编号。 草稿图到硫酸纸上墨线，最好有专用
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绘图
3.图稿着墨和着色 用铅笔在硫酸纸上蒙拓草图，再在硫酸纸 拓下来的铅笔图上着墨，即可成为线条图 或黑白图。 着墨需用绘图墨水或碳素墨水（有时碳 素墨水色淡、沁纸），用前要摇匀。 绘图要用专用的绘图笔（一般市售的碳 素笔不敷需用），绘图笔的笔尖较细，绘 图墨水易干而堵塞笔尖，使用时要时时保
昆虫识别与鉴定同翅目
已知330属2300多种，分4科。
7、沫蝉科 Cercopidae
颜色艳丽；前胸背板大，常呈六边形，前缘平直。
已知1000多种，中国已知100多种，如稻赤斑黑沫蝉Callitettix versicolo。.
8、尖胸沫蝉科 Aphrophoridae
分类概括和系统发育
同翅亚目昆虫已知约45000多种，我国已知3000 多种。现在我们一般采用5次目13总科62科的系统。
触角着生在复眼间下方
同 翅 亚
目 触角着生
在复眼间
前胸背板长
前胸背 板短
产卵器 发达
产卵器 萎缩
渐变态
出现 拟蛹
跗节 2节
跗节 1节
蜡蝉总科
蝉总科 蝉
沫蝉总科 次
目
叶蝉总科
角蝉总科
13、根瘤蚜科 Phylloxeridae
中胸盾片不分为左右两 片；无翅蚜和幼蚜触角上 幼1个感觉圈，有翅型后 翅无斜脉，静止时翅平叠 于背面；性蚜有无，不活 泼；多营同寄主全周期； 寄主为阔叶植物，如葡萄 根瘤蚜Viteus vitifolii
Ⅷ、蚜总科 Aphidoidea
孤雌蚜胎生，性蚜卵生；前翅有4斜脉；触角4－6节， 如为3节，则尾片烧瓶状；头胸部之和大于腹部；尾片形状 多样，腹管有或无。
3、象蜡蝉科 Dictyopharidae
头多明显延长呈锥状或圆柱状，触 角梗节圆球形或卵形；前翅狭长，有 明显翅痣；前足腿节胫节扁宽，后足 胫节具3－5根强刺。
已知130属700多种，我国34种。
4、蛾蜡蝉科 Flatidae
蛾形，多褐色或淡绿色；头比胸 部狭；翅静止时常呈屋脊状，前翅 宽大，近三角形，爪片有颗粒，后 翅宽大且翅脉不呈网状。
第二章昆虫的鉴定
昆虫鉴定目录第一节园艺昆虫十目及有关科鉴别第二节鳞翅目重要科鉴别第三节鞘翅目、同翅目重要科鉴别第一节昆虫十目及有关科鉴别一、昆虫分类的意义1、定义：昆虫分类是根据不同昆虫的形态特征、生物学特性、生态、生理特性等方面的异同，通过分析、对比、归纳、综合等手段，把种类繁多的昆虫加以分门别类。
总结类群间的亲缘关系，反映昆虫进化过程建立分类系统。
2、意义（1）昆虫分类是认识昆虫的一种基本方法：有了昆虫分类系统，就可以认识昆虫，如建立昆虫分类检索表，并借助予这一‘字典’‘工具书’去查找昆虫的分类地位，叫出它的名称。
（2）昆虫分类是昆虫学研究的基础：昆虫种类的鉴定是植保工作开展的前题，无论是害虫的防治，还是益虫的利用，都需要在种名确定后，去查阅有关科学文献，了解前人的工作经验和研究进展，作为自已植保工作开展的参考。
二、分类的阶元和命名昆虫属动物界节肢动物门、昆虫纲，纲以下又可分为目、科、属、种共七个主要分类阶元。
从界到种，均可设亚级，如亚门、亚科等。
物种是分类的基本阶元，种的定义是繁殖单元，即不同种之间存在生殖隔离。
界：动物界Animalia门：节肢动物门Arthropoda纲：昆虫纲Insecta目：直翅目Orthoptera科：蝗科Locustidae属：飞蝗属Locusta种：飞蝗Locusta migratoria L亚种：东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis Meyen三、昆虫纲分目Order 目World 世界China 中国Subclass Apterygota无翅亚纲Thysanura 缨尾目600 21Diplura 双尾目600 51Protura 原尾目650 199Collembola 弹尾目5000 289 ubclass Pterygota: Ephemeroptera 蜉蝣目2200 306Odonata 蜻蜓目3500 738 Division Exopterygota Plecoptera衤责翅目2300 374有翅亚纲外翅部Grylloblattodea 蛩蠊目251Order 目World 世界China 中国Orthoptera 直翅目23000 2256 Phasmatodea虫脩目2500 221 Dermaptera 革翅目1850 284 Embioptera 纺足目200 7 Blattaria 蜚蠊目4000 366 Mantodea 螳螂目2000 165 Isoptera 等翅目3000 538 Zoraptera 缺翅目25 2 Psocoptera 啮虫目4500 1656 Mallophaga 食毛目4500 934 Anoplura 虱目500 104 Homoptera 同翅目45000 6885 Heteroptera 半翅目38000 3873 Thysanoptera 缨翅目6000 489 有翅亚纲内翅部Order 目World 世界China 中国Neuroptera 脉翅目4500 645 Megaloptera 广翅目500 74 Mecoptera 长翅目500 194 Lepidoptera 鳞翅目200000 18985 Trichoptera 毛翅目10000 987 Diptera 双翅目110000 104 Siphonaptera 蚤目3000 617 Hymenoptera 膜翅目120000 8796 Coleoptera 鞘翅目330000 18794 Strepsiptera 捻翅目400 19Total 79313四、昆虫十大目及重要科鉴定（一）园艺昆虫分目依据1、翅的有无；翅的类型、数目、翅脉脉相；2、口器类型；3、变态类型；4、触角、足类型等。
第12专题 分子生物学技术在昆虫分类学中发展[可修改版ppt]
![第12专题 分子生物学技术在昆虫分类学中发展[可修改版ppt]](https://img.taocdn.com/s3/m/bd4972e383c4bb4cf6ecd1bd.png)
1. RAPD标记技术
Random Ampifled Polymphic DNA
随机扩增多态性DNA。 RAPD是由williams等1990年发明的一种遗传标记
方法，其原理是用随机序列的9～10个核苷酸的 引物，对基因组的DNA进行PCR扩增，再进行 电泳分离和溴化乙锭染色。多态性的产生由互补 核苷酸引物的碱基差别形成。 RAPD要求对每个分离群体中的标记所进行的 PCR扩增和电泳分离有高度的重复性，所以操作 一般采用自动化。
但是传统的形态学方法有不少的局限，例 如一些昆虫的形态特征不稳定、同种异型 和异种同型现象、近缘种，形态结构十分 相似等问题。
电子显微镜和扫描电子显微镜 的问世，使昆虫的形态学分类 达到了超微结构水平。
电子显微镜
热带火蚁 Solenopsis geminata
扫描电子显微镜
五、分子生物学方法
PCR技术常与RAPD技术结合应用，如 Kambhampati等(1992),应用RAPD-PCR技术
对蚊虫和蚜虫进行了分子系统学的研究。 Paskewitz(1993)用PCR技术识别按蚊种类。 此外，RFLP、RARDPCR、DNAfp等方法
也应用在同翅目蚜科、蝉科和叶蝉科等昆
虫的研究方面。直翅目蝗科、鞘翅目叶甲 科、鳞翅目凤蝶科等方面也有类似研究。
链式反应PCR(Polymerase chain reaction) 技术，目前这一技术在分子生物学领域 获得了广泛的应用，已经在很大程度上 代替了传统的DNA克隆方法。 利用PCR技术能够从复杂的DNA分子群 体中选择性地复制一段特异的DNA序列， 从而使某一DNA片段得到特异性的扩增； 同时这一技术在昆虫学领域也得到了广 泛的应用。
Hex
Probe
病虫害研究中的分子生物学技术与方法
防治策略制定
结合转录组学和RNAi技术的研究结果，可 以制定更加有效的防治策略，实现精准施策 。
04
蛋白质组学与蛋白质互作 技术
蛋白质组学概述
蛋白质组学定义
蛋白质组学是一门研究生物体内蛋白质结构和功能的科学，它涉及 到蛋白质的表达、修饰、相互作用以及与疾病的关系等方面。
物种鉴定与分类
利用分子标记技术鉴别不同物种，为病虫害 防治提供依据。
遗传图谱构建
通过QTL定位技术构建病虫害的遗传图谱， 有助于了解其遗传基础。
抗性基因定位
利用分子标记技术定位抗性基因，为抗性育 种提供指导。
进化生物学研究
通过比较不同种群或物种的分子标记和QTL ，研究病虫害的进化历程。
THANKS
常见蛋白质互作技术
常见的蛋白质互作技术包括酵母双杂交、免疫共沉淀、蛋白质芯片等技术。这些技术能够检测蛋白质之间的相互作用 ，并确定相互作用的具体位点和强度。
蛋白质互作技术的应用
蛋白质互作技术广泛应用于生物医药领域，如药物筛选、疾病诊断和治疗等。通过研究蛋白质之间的相 互作用，可以深入了解疾病的发生和发展机制，为药物研发提供新的靶点和思路。
它包括基因组学、蛋白质组学、转录 组学等多个领域，是现代生物学研究 的重要手段。
分子生物学技术在病虫害研究中的应用
基因组学技术
用于研究病虫害基因组结构、基因功能和进化关 系，为抗病抗虫育种提供基础数据。
蛋白质组学技术
用于研究病虫害蛋白质的表达、修饰和功能，揭 示病虫害的生物学特性和致病机制。
转录组学技术
基因克隆技术流程
基因克隆技术包括目的基因的获取、载体的构建、目的基 因与载体的连接、将重组DNA导入受体细胞以及筛选阳性 克隆等步骤。