高效液相色谱等梯度测定食品中柠檬黄_苋菜红_胭脂红_日落黄
高效液相色谱法测定饮料中的合成着色剂
高效液相色谱法测定饮料中的合成着色剂唐传禹内蒙古食品药品检验所呼和浩特（010020）摘要目的：探讨高效液相色谱法测定饮料中的合成着色剂。
方法：采用C18液相色谱柱，以甲醇：乙酸铵溶液(pH=4)为流动相梯度洗脱。
结果：柠檬黄、苋菜红、胭脂红，三种着色剂分离完全，灵敏度高，出峰时间较短。
平均回收率为91.5％—97.5％，相对标准偏差为3.1％—4.5％。
结论：该方法对样品检测快、灵敏、准确。
关键词：高效液相色谱饮料合成着色剂Abstract Aim: Determination of beverages in the synthetic coloring agent. Methods: Using liquid C18 column, methanol: ammonium acetate solution (pH = 4) as the mobile phase gradient elution. Results: lemon yellow, red amaranth, Carmine, the coloring agent are completely isolated, high sensitivity, a shorter time to peak. The average recovery rate was 91.5% -97.5% and the relative standard deviation of 3.1% -4.5%.Conclusion: The method of testing samples fast, sensitive and accurate.Key W ords: HPLC Beverage Synthetic coloring agent食用合成色素多以苯、甲苯、萘等化工产品做原料，经有机反应化合而成。
我国批准已使用合成色素21种，其中较常用的有柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝等。
高效液相色谱法同时测定水果中7种合成色素
食用色素能够改善食品色泽，是食品添加剂的一个 重要组成部分，在食品加工业中具有十分重要的地位。 按其来源和性质，食用色素分为天然色素和合成色素，天 然色素安全对环境无污染[1]，但稳定性较差。合成色素价 格便宜、着色力强、稳定性好，目前在食品加工方面应用 广泛，但是合成色素大多属于偶氮类化合物，对人体健康 存在一定的不安全性。我国允许在食品中添加的合成色 素有苋菜红、胭脂红、柠檬黄、新红、赤藓红、日落黄、亮 蓝、酸性红、喹啉黄、靛蓝及其铝色淀。而根据我国 GB 2760-2014 《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》[2] 规定，它们禁止用于新鲜水果。
Determination of Seven Synthetic Pigments in Fruits by High Performance Liquid Chromatography
LIU Pei, YU Wen-jiang, ZHENG Hong* (Shandong Institute for Food and Drug Control, Jinan 250103, China)
目前，食品中人工合成色素的检测方法主要有高效 液相色谱法[3-7]、紫外分光光度法、高效液相色谱-串联质 谱法[8,9]、毛细管电泳法[10]、极谱法[11]和薄层色谱法等。由于 水果本身含有大量的天然色素，建立一种针对水果中多 种人工合成色素同时检测的方法是十分必要的。文章对 水果中易添加的柠檬黄、新红、苋菜红、胭脂红、日落黄、 诱惑红、酸性红 7 种人工合成色素的测定方法进行了研 究，建立了同时检测水果中违规添加的 7 种人工合成色 素的高效液相色谱检测方法。
Abstract: A high performance liquid chromatographic method was developed for the simultaneous determination of seven synthetic pigments (tartrazine, new red, amaranth, ponceau, sunset yellow, seduction red, and acid red) in fruits. After extraction, the fruits samples were separated on a C18 (3.5滋m, 4.6mm 伊150mm) reversed-phase chromatographic column with 20mmol/L ammonium acetate-methanol as the mobile phase for gradient elution. The column temperature was 35℃, the flow rate was 0.8mL/min, and the sample volume was 10滋L. Diode array detector was used for detection. The chromatographic retention time and spectrogram of the target compound were used to determine the quality of the product, and the peak area of the chromatographic peak was determined by standard
超高效液相色谱法同时测定饮料中5种人工合成色素
Abstract ：Objective: To develop an ultra performance liquid chromatography (UPLC) method for the determination of five
synthetic pigments such as tatrazine, amaranth, carmine, sunset yellow and brilliant blue in beverage. Methods: Synthetic
变宽，柱效降低，且综合考虑检测大量样品时溶剂的 消耗量，本实验选择 0.25mL/min 为最佳流速。在最佳 色谱条件下，对标准样品和实际样品进样分析，结果 见图 1 。
AU
2.00
液相色谱法测定果酱中的柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝
食品实验为了改善食品的颜色或外观，从而有利于产品销售，着色剂在食品工业中得到了很广泛的应用。
与天然色素相比，合成着色剂的着色力强、色泽鲜艳、不易褪色、稳定性好、易溶解、易调色、成本低，但安全性低，所以国家对合成着色剂的监管很严格。
根据GB 2760－2014《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》的规定，果酱（食品分类号04.01.02.05）产品允许使用合成着色剂，限值为：柠檬黄0.5g/kg、日落黄0.5g/kg、苋菜红0.3g/kg、胭脂红0.5g/kg、亮蓝0.5g/kg。
不过，GB 5009.35－2016《食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定》只适用于巧克力豆、硬糖、着色糖衣制品、蜜饯、配制酒、饮料、淀粉软糖等7种产品的测定，对于允许而且经常使用合成着色剂的果酱产品，则不在适用范围内。
本文通过检出限、回收率和精密度等检验数据，验证GB 5009.35－2016《食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定》的检测方法是否适用于果酱产品的检测，从而解决实验室选择测试方法的问题。
一、实验材料1.试剂及配制方法。
甲醇：色谱纯。
乙酸铵（CH3COONH4）溶液（0.02mol/L）：称量乙酸铵1.54g，加水至1L，后经微孔滤膜（0.45μm）过滤。
柠檬酸（C6H8O7·H2O）溶液（20g/100m L水），用该浓度的柠檬酸溶液把水调到pH6和pH4。
氨水溶液：氨水含量要求20％－25％，把2mL的氨水加水稀释至100mL。
甲醇－甲酸溶液：把甲醇、甲酸按体积比（6＋4）混匀。
无水乙醇－氨水－水溶液：把无水乙醇、氨水溶液、水按体积比（7＋2＋1）混匀。
聚酰胺粉（尼龙6）：过200μm（目）筛。
无水乙醇（CH3CH2OH），乙酸（CH3COOH）。
2.标准品。
柠檬黄（CAS︰1934－21－0）；苋菜红（CAS︰915－67－3）；胭脂红（CAS︰2611－82－液相色谱法测定果酱中的柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝7）；日落黄（CAS︰2783－94－0）；亮蓝（CAS︰3844－45－9）。
食品中多种合成色素的反相高效液相色谱法测定
作者单位:山东省济南市疾病预防控制中心卫生检验科,250013作者简介:王春荣(1972-),女,济南人,主管技师,硕士,主要从事食品理化检验及液相方法开发研究。
文章编号:100120580(2005)0320359202 中图分类号:O 65717+2 文献标识码:B【检验技术】食品中多种合成色素的反相高效液相色谱法测定王春荣,张济,刘岚铮 我国批准使用的食用合成色素有21种,其中最常见的有柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝等〔1〕。
本文用反相高效液相色谱法实现了上述5种色素的同时测定,结果令人满意。
现报告如下。
1 实验部分111 主要仪器 美国Waters Aliance 2695高效液相色谱系统(带有自动进样器、四元梯度泵);Waters 2996二极管阵列检测器(DAD )和Empower 色谱信息管理系统。
112 主要试剂 甲醇;0102mol/L 乙酸铵溶液;甲酸;乙醇;氨水;聚酰胺粉(50目);5种合成色素(柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝)标准溶液由国家标准物质中心提供。
以上试剂除甲醇为色谱纯外,均为优级纯,且均需经0145μm 滤膜过滤后方可使用。
113 色谱条件 色谱柱:Waters Symmetry RP 18;150mm ×319mm (5μm );:254nm ;柱压力:1110～1214mPa ;进样量:10μl ;柱温:室温;流动相:0102mol/L 乙酸铵溶液-甲醇(梯度洗脱);流量:017ml/min 。
114 样品制备 (1)样品选取:选取5个有代表性的实际样品,1#吸的果冻,2#青苹果汁,3#柠檬味碳酸饮料,4#香橙果酱,5#苹果味碳酸饮料;(2)样品处理:参照G B/T 5009135-1996。
2 结果与讨论211 梯度洗脱条件的选择 为了利于色谱峰的分离,选用0102mol/L 乙酸铵溶液与甲醇进行梯度洗脱。
最初5min内,如甲醇浓度变化过快,柠檬黄和苋菜红不能很好的分离,采用甲醇首先缓慢上升而后快速上升,但总时间仍保持不变的方法,使5种色素得到很好的分离且灵敏度均有一定程度的提高。
高效液相色谱法测定水果罐头中的7种合成着色剂
分析检测高效液相色谱法测定水果罐头中的7种合成着色剂崔 洁（山西省检验检测中心（山西省标准计量技术研究院)，山西太原 030012）摘 要：建立了高效液相色谱法测定水果罐头中柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红和亮蓝共7种合成着色剂的分析方法。
样品用乙醇-氨水溶液提取，固相萃取柱净化，经C18色谱柱分离，二极管阵列检测器检测。
结果表明，7种合成着色剂在0.08～4.00 μg·mL-1线性关系良好，检出限均为0.05 mg·kg-1，定量限均为0.1 mg·kg-1，加标测试的平均回收率在82.77%～101.67%，重复性RSD为0.21%～3.58%，适用于水果罐头中7种合成着色剂的定性、定量检测。
关键词：合成着色剂；水果罐头；高效液相色谱法Determination of Seven Synthetic Colorants in Canned Fruits by High-Performance Liquid ChromatographyCUI Jie(Shanxi Inspection and Testing Center (Shanxi Institute of Standard Measurement Technology), Taiyuan030012, China)Abstract: The method for the determination of seven synthetic colorants in canned fruits by high performance liquid chromatography was established. The samples were extracted with ethanol ammonia solution, purified by solid phase extraction column, separated by C18 column and detected by diode array detector. The results showed that the linear relationship of the seven synthetic colorants was good in the range of 0.08～4.00 μg·mL-1, the detection limits were all 0.05 mg·kg-1, the quantitative limits were all 0.1 mg·kg-1, the average recovery was 82.77%～101.67%, and the RSD was 0.21%～3.58%, which was suitable for the qualitative and quantitative detection of the seven synthetic colorants in canned fruits.Keywords: synthetic colorant; canned fruit; high-performance liquid chromatography随着食品工业的发展，部分食品厂家与商贩常常在食品生产、加工过程中加入食用色素来改善食品的感官性状，吸引消费者购买食用[1]。
高效液相色谱法同时测定食品中11种添加剂
工程管理与技术现代商贸工业２０１８年第１３期１８２㊀㊀作者简介:周原(１９８６－),女,汉族,湖北荆州人,硕士,武汉食品化妆品检验所,工程师,研究方向:食品检测.由于激励函数没有初始状态,故其拉氏变换只有对应的第一项.将方程化为F (s )＝H １(S )＋H ２(s) E (S ),其中H １(S )对应零输入,H ２(s ) E (S )对应零状态.将H １(S )㊁H ２(s ) E (S )都用部分分式展开法化为ðk is －λi,则有对应的时域解为ðki e λitε(t ),最后同样将零状态解与零输入解相加即得总的系统方程解.复频域法十分适用于求解全响应,对于系统的微分方程,运用时域微分性质及和部分分式展开法,将方程两边进行拉氏变换,求解全响应十分简便.３㊀结论通过上述对连续时间系统的响应分析与求解,可以得出以下结论:当求解电路的电压响应或者电流响应,即先列出K C L 或者K V L 方程,再运用微分算子创建微分方程,用时域法求解全响应㊁零输入响应㊁零状态响应.频域法是运用傅里叶变换及其性质进行求解,但是只能求解零状态响应.复频域法特别适用于微分方程已知的情况下,对方程两边进行拉氏变换,即可以十分简便的得到全响应㊁零输入响应㊁零状态响应.当然这些方法是系统分析的重要方法,如果能够将M a t l a b 的数值运算功能与绘图功能有机结合起来,将会使系统分析更简便和精确.参考文献[１]吴湘淇．信号与系统(第３版)[M ]．北京:电子工业出版社,２００９．[２]郑君里,应启珩,杨为理．信号与系统(第二版)[M ]．北京:高等教育出版社,２０００:４２Ｇ５２．[３]陈从颜,翟军勇．信号与系统基础[M ]．北京:机械工业出版社,２００９:８５Ｇ８９．高效液相色谱法同时测定食品中１１种添加剂周㊀原㊀刘㊀坤㊀代㊀钰㊀何㊀艳㊀周晓婷(武汉食品化妆品检验所,湖北武汉４３００００)摘㊀要:建立了反相高效液相色谱法同时快速测定食品中安赛蜜㊁柠檬黄㊁苯甲酸㊁糖精钠㊁山梨酸㊁苋菜红㊁胭脂红㊁日落黄㊁咖啡因㊁诱惑红和亮蓝的方法.以甲醇－２０m m o l /L 乙酸铵为流动相进行梯度洗脱,通过D I ＧO N E X A c c l a i m１２０C １８(４．６ˑ２５０m m ,５μm )色谱柱分离,经二极管阵列检测器进行检测,外标法定量.１１种添加剂的检出限均在０．１~０．５m g/L 之间,加标回收率为９３．５~１０４．０％,线性相关系数均大于０．９９９,相对标准偏差(R S D )均小于０．９７４％.结果表明该方法前处理简单,毒性小,分离效果好,一次进样可以同时检测食品种１１种添加剂,能够满足同时快速检测食品中常见的添加剂的需要.关键词:高效液相色谱;添加剂;食品中图分类号:T B ㊀㊀㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀㊀㊀㊀d o i :１０．１９３１１/j ．c n k i ．１６７２Ｇ３１９８．２０１８．１３．０８５㊀㊀现代食品产业中,食品添加剂发挥着巨大的作用.食品添加剂能够改善食品品质和延长保质期.食品添加剂已经成为食品中不可缺少的物质,各国都致力于开发新产品及新技术.食品添加剂在使用过程中除应保证其原有作用外,更应保证其安全性.但近年来,假酒中毒致死案件㊁ 糖精枣 ㊁ 瘦肉精 ㊁ 染色馒头 ㊁ 红心鸭蛋 ㊁ 三聚氰胺奶粉 等重大食品安全事故频发,一些食品加工企业缺乏社会责任感,违规添加食品添加剂甚至使用有毒原料,给我国的食品行业带来了沉重的打击,因此需要严格监控食品添加剂的使用.高效液相色谱法(H i g h P e r f o r m a n c e L i qu i d C h r o ma t o g r a p h y ,H P L C )是２０世纪６０年代末,在经典液相和气相色谱基础上发展起来的新型分离分析技术.高效液相色谱法具有操作简便㊁检测灵敏度好㊁对样品适用范围广㊁可供选择的流动相种类多㊁分析速度快㊁能分析高沸点有机物和热稳定性差的化合物等特点.至今,高效液相色谱法已经在食品工业㊁制药工业㊁石油化工等领域获得广泛应用.在现行的国标中,对食品添加剂的检测,多是针对一种或少数几种添加剂,而一种食品中往往同时使用多种食品添加剂,如果按照现行的标准进行检测,必须对样品进行多次处理,分别检测不同的添加剂,费时费力.目前报到的文献中,大多数是针对饮料等简单基质的食品中添加剂进行研究,对糕点㊁蜜饯等复杂基质食品中添加剂的研究较少,且已报道的方法多直接用水提取,对食品中低含量的色素提取效果较差.本研究用碱性的有机溶剂提取食品中的添加剂,采用反相高效液相色谱法,同时测定食品中１１种常见的添加剂.实验证明,该方法具有现代商贸工业２０１８年第１３期１８３㊀提取效果好㊁前处理简单㊁快速㊁准确等优点.１㊀实验部分１．１㊀仪器与试剂U l t i M a t e ３０００高效液相色谱仪:配D A D－３０００光电二极管阵列检测器及C h r o m e l e o n TM 色谱作站,美国戴安公司;超声波清洗器,上海科导超声仪器有限公司;超纯水系统,美国M i l l i po r e 公司;电子分析天平,日本岛津公司.甲醇,M e r c k 公司,色谱纯;乙酸铵,北京中西泰安技术服务有限公司,优级纯;０．５m g/m L 安赛蜜㊁１．０m g /m L 苯甲酸㊁糖精钠㊁山梨酸㊁柠檬黄㊁日落黄㊁苋菜红㊁胭脂红㊁诱惑红㊁亮蓝㊁咖啡因标准储备液,国家标准物质中心.１．２㊀混合标准储备液的配制分别精密吸取标准储备液各５m L ,于１００m L 的容量瓶中,用M i l l i p o r e 水稀释至刻度,摇匀,即配成安赛蜜的浓度为２５．０m g /L ,其余１０种食品添加剂的浓度均为５０．０m g/L 的混合标准储备液.１．３㊀供试品溶液的制备将样品剪碎或放入捣碎机捣碎,精密称取５．０g 于５０m L 的具塞比色管中,加３５m L１％的氨水－乙醇溶液,超声提取３０m i n ,用水定容至５０m L ,摇匀,３０００r/m i n 离心１５m i n ,取上清液,调p H 值至中性,用微孔滤膜过滤后备用.１．４㊀色谱条件色谱柱:D I O N E X A c c l a i m１２０C １８(４．６ˑ２５０m m ,５μm );流动相为甲醇和２０m m o l /L 乙酸铵,梯度洗脱程序见表１,流速为１m L /m i n ,柱温为３０ħ,进样量为５μL ,采用保留时间和光谱图定性,峰面积外标法定量.表１㊀梯度洗脱程序表时间/m i n甲醇/％２０m m o l /L 乙酸铵/％０１４８６３１４８６１１４０６０１６６０４０２０１４８６２５１４８６２㊀结果与讨论２．１㊀流动相及p H 的选择本实验考察了乙腈－２０m m o l /L 乙酸铵和甲醇－２０m m o l /L 乙酸铵两种流动相系统,经过不同的梯度洗脱程序,１１种添加剂均能实现基线的分离.但乙腈的毒性较大,故本实验采用甲醇－２０m m o l /L 乙酸铵作为流动相.用冰乙酸将２０m m o l /L 乙酸铵缓冲溶液的p H 值分别调至３．０㊁４．０㊁５．０㊁６．０和７．０,然后考察不同p H 值的流动相分别对１１种食品添加剂分离的影响.实验结果表明,p H 值的改变对色素的分离影响较小,但对苯甲酸㊁山梨酸和糖精钠的分离有较大的影响.当pH 为３．０㊁４．０和５．０时,个别色谱峰严重拖尾,１１种添加剂不能被完全分开;当p H 为６．０和７．０时,峰形较好,所有添加剂均能实现基线的分离.由于２０m m o l /L 乙酸铵缓冲溶液的原始p H 值在６．０~７．０之间,故本实验不对流动相的p H 值进行调节.２．２㊀检测波长的选择尽管各组分均有紫外吸收,但最大吸收波长各不相同.二极管阵列检测器的特点是可以同时检测和处理多个波长的色谱图,本实验对比了２１０㊁２３０㊁２５４㊁４２０㊁５２０㊁６２８n m 六种检测波长下各组分的响应值.通过对比发现:除亮蓝外,在２３０n m 处各组分的灵敏度相对较高.因此,本实验在２３０n m 处对安赛蜜㊁苯甲酸㊁糖精钠㊁山梨酸㊁柠檬黄㊁日落黄㊁胭脂红㊁苋菜红㊁诱惑红和咖啡因进行同时检测,色谱图见图１a ;在６２８n m处对亮蓝进行检测,色谱图见图１b .结果表明,各组分间无干扰,一次进样可以同时测定１１种食品添加剂.图１㊀１１种食品添加剂混合标准液的色谱图(１．安赛蜜,２．柠檬黄,３．苯甲酸,４．糖精钠,５．山梨酸,６．苋菜红,７．胭脂红,８．日落黄,９．咖啡因,１０．诱惑红,１１．亮蓝)２．３㊀线性关系和最小检出量的考察将１１种食品添加剂分别配制成一系列不同浓度的标准溶液,按照上述色谱条件进行测定,以浓度为横坐标,测得的峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,以样品峰高为基线噪音峰高的３倍为准计算最小检出量.结果表明,１１种食品添加剂的相关系数R ２均大于０．９９９,线性范围为０．５~８００m g/L ,最低检出限在０．１~０．５m g/L 之间.２．４㊀实际样品的测定按照１．３所述处理方法处理样品,在优化的色谱条件下,对话梅及青豆中的食品添加剂进行测定,每个样品平行测定三次,得到的色谱图如图２㊁３所示.表２对比了同一个样品中,用水直接提取和用碱性有机溶工程管理与技术现代商贸工业２０１８年第１３期１８４㊀㊀剂提取的方法所测得的结果.结果表明,该方法对食品中低含量的色素的提取效果较好,一次进样可以同时检测食品中的１１种添加剂.图２㊀话梅色谱图(１．苯甲酸,２．糖精钠,３．山梨酸)图３㊀青豆色谱图(a ．亮蓝,b ．柠檬黄)表２㊀不同样品中添加剂的检测结果(g /k g)样品柠檬黄苯甲酸糖精钠山梨酸亮蓝１n d ０．１５５０．７５００．０８２n d２n d ０．１５３０．７４２０．０７９n d ３０．０２６n d n d n d ０．００６４０．０１２n dn dn dn d ㊀㊀注:１:话梅(用碱性有机溶剂提取),２:话梅(用水提取),３:青豆(用碱性有机溶剂提取),４:青豆(用水提取),n d 表示未检出.２．５㊀回收率实验采用碱性有机溶剂提取的方法对话梅在二个不同的添加水平进行加标回收率实验,其分析结果见表３.结果表明该方法的加标回收率为９３．５％~１０４．０％.表３㊀回收率的测定结果添加剂名称本底值/(g /k g)加标量/(g /k g )测定值/(g /k g )回收率/(％)安赛蜜００．０２０．２００．０１９７０．１９３９９８．５９７．０柠檬黄００．０２０．２００．０１９３０．１９３１９６．５９６．６苯甲酸０．１５５０．０２０．２００．１７３７０．３５４６９３．５９９．８糖精钠０．７５００．０２０．２００．７７０８０．９５０６１０４．０１００．３山梨酸０．０８２０．０２０．２００．１０２２０．２８１０１０１．０９９．５苋菜红００．０２０．２００．０１９００．１９０９９５．０９５．５胭脂红００．０２０．２００．０１８９０．１９０１９４．５９５．１日落黄００．０２０．２００．０１９３０．２０１２９６．５１００．６咖啡因００．０２０．２００．０１９９０．１９９７９９．５９９．９诱惑红００．０２０．２００．０１９００．２０１０９５．０１００．５亮蓝００．０２０．２００．０１８８０．１９００９４．０９５．０２．６㊀精密度实验本实验对加标０．２g /k g 的青豆样品平行测定６次,根据峰面积外标法对其定量,计算安赛蜜㊁柠檬黄㊁苯甲酸㊁糖精钠㊁山梨酸㊁苋菜红㊁胭脂红㊁日落黄㊁咖啡因㊁诱惑红和亮蓝的R S D 分别为０．４６７％㊁０．６８５％㊁０．９７４％㊁０．５１９％㊁０．４３６％㊁０．８０８％㊁０．２０８％㊁０．４５１％㊁０．６６５％㊁０．８１４％和０．６２７％,结果表明该方法的重现性较好.３㊀结论该方法前处理简单,采用D A D 检测器可以在不同波长下查看不同的添加剂的出峰情况,避免了保留时间接近的峰之间的干扰,一次进样可以测定１１种常见的添加剂,并能检测出食品中含量较低的添加剂,具有快速㊁准确㊁提取效果好㊁毒性小㊁精密度和准确度较高等优点,可以用于多种常规食品中的快速检测.参考文献[１]王静,孙宝国．食品添加剂与食品安全[J ]．中国科学,２０１３,５８(２６):２６１９Ｇ２６２５．[２]A y a l a －Z a v a l a J F ,V e g a －Ve g aV ,R o s a s －Do m i n gu e zC ,e t a １．A g r o－i n d u s t r i a l p o t e n t i a l o f e x o t i cf r u i tb y p r o d u c t sa sa s o u r c e o f f o o da d d i t i v e s [J ]．F o o d R e sI n t e r n a t l ,２０１１,(４４):１８６６Ｇ１８７４．[３]L i uX ,Z h e n g XD ,F a n g W W ．S c r e e n i n g of f o o d a d d i t i v e s a n d p l a n t e x t r a c t s ag a i n s tCa n d i d aAl b i c a n s i nv i t r o f o r p r e v e n t i o n o f d e n t u r es t o m a t i t i s [J ]．P r o c e d i a E n v i r o n S c i ,２０１２,(１２):１３８１Ｇ１３６６．[４]于世林．高效液相色谱法及应用[M ]．北京:化学化工出版社,２０００,３Ｇ１０．[５]武中庸,赫欣睿,叶永丽等．高效液相色谱在食品添加剂检测中的应用[J ]．西北民族大学学报(自然科学版),２０１６,３７(１０２):６５Ｇ６９．[６]G B５００９．２８－２０１６食品安全国家标准食品中苯甲酸㊁山梨酸和糖精钠的测定[S ]．[７]G B５００９．１３９－２０１４食品安全国家标准饮料中咖啡因的测定[S ]．[８]王骏,胡梅,张卉等．超高效液相色谱快速测定饮料中的１６种食品添加剂[J ]．食品科学,２０１０,３１(２):１９５Ｇ１９８．[９]李芸瑛,黄丽华．高效液相色谱法同时快速测定饮料中的３种食品添加剂[J ]．肇庆学院学报,２００３,２４(２):３１Ｇ３５．。
高效液相色谱法检测食品添加剂
高效液相色谱法同时测定饮料中的9种食品添加剂作者：廊坊师范学院化学系2005届毕业生祁楠指导教师：孙欣摘要:研究了等梯度高效液相色谱法直接测定饮料中的防腐剂、甜味剂、色素的方法。
采用C18柱以甲醇—乙酸氨（L)—溴化四丁铵L),pH 为流动相,紫外检测波长为230nm,可在15分钟内将山梨酸、苯甲酸、糖精、VC、咖啡因、日落黄、柠檬黄、胭脂红、苋菜红完全分离。
关键词：高效液相色谱、山梨酸、苯甲酸、糖精、VC、咖啡因、日落黄、柠檬黄、胭脂红、苋菜红前言：高效液相色谱(HPLC)是上世纪60年代末70年代初,发展起来的一种新型分析分离技术,它是在经典液相色谱法的基础上，引入了气相色谱的理论，采用高压输送流动相和高灵敏度检测器,发展而成的现代化液相色谱分析方法, 具有分离效率高、选择性好、分析速度快、检测灵敏度高、操作自动化和应用范围广等特点。
近年来，由于消费者对于食品的安全性日益的关注，食品中的各种添加剂越来越受到人们的重视。
食品添加剂指为改善食品品质和色、香、味，而加入食品中的化学合成或天然物质，但在目前所使用的添加剂中，绝大多数为化学合成添加剂，它们是通过氧化、还原、缩合等一系列化学合成反应所得，有的具有一定毒性，有的在食品中起变态反应或转化成其它有毒物质。
通过动物实验证明有些物质有致癌、致畸形等作用，如果不加以限制使用，将对人体健康产生危害。
高效液相色谱具备分离效果好、灵敏度高和重现性好等优点,因此是目前食品添加剂定性、定量分析的首选方法,本实验采用甲醇—乙酸氨 L)—溴化四丁铵L)（ 35：65：4，）为流动相,能将食品中的食用色素、防腐剂、甜味剂、抗氧化剂、兴奋剂完全分离。
1.实验部分仪器与试剂ACS2000高效毛细管电泳仪液相色谱一体机(北京彩陆科学仪器公司)、紫外可见光检测器(UV DETECTOR VK-2051)、PHS-2F数字pH计（上海精密科学仪器有限公司）、双频超声清洗机型号SK8200LH(上海科导超声仪器有限公司)、氨水溶液(分析纯氨水：原子水=1：9)、醋酸溶液(分析纯醋酸：原子水=1：9)标准储备液： VC、胭脂红、柠檬黄、日落黄、苋菜红均为L、苯甲酸、山梨酸均为5mmol\L，咖啡因L标准混合液：取各组分标准储备液各1ml，混合均匀后备用。
HPLC法测定保健食品胶囊壳中合成着色剂含量
HPLC法测定保健食品胶囊壳中合成着色剂含量黄玉琴（宁德市食品药品检验检测中心，福建宁德 352100）摘 要：目的：建立一种高效液相色谱法测定保健食品胶囊壳中7种合成着色剂含量的方法。
方法：用60 ℃热水溶解胶囊壳，通过聚酰胺SPE固相萃取柱富集洗脱，得到含有合成着色剂的待测样，经安捷伦ZORBAX C18色谱柱分离，甲醇-乙酸铵溶液作为流动相梯度洗脱，各合成着色剂的特征波长为检测波长，DAD检测器检测，外标法定量。
结果：7种合成着色剂分离效果良好，在1～20 µg/mL呈现良好线性关系，相对系数均大于0.999 0，回收率为86.42%～96.70%，RSD均小于1%。
检出限为0.5 mg/kg，定量限为 2.0 mg/kg。
采用该方法对13批明胶空心胶囊和4批保健食品胶囊壳进行测定，均检测出国标允许使用的合成着色剂。
结论：该方法操作简便、准确可靠，适用于保健食品胶囊壳中合成着色剂的测定。
关键词：高效液相色谱法；合成着色剂；明胶空心胶囊；保健食品胶囊壳Determination of Synthetic Colorant in Capsule Shell ofHealth Food by HPLCHUANG Yuqin(Ningde Testing Center for Food and Drug Control, Ningde 352100, China) Abstract: Objective: To establish a method for the determination of seven synthetic colorants in health food capsule shell by HPLC. Methods: the capsule shell was dissolved in 60 ℃ hot water, enriched and eluted by polyamide SPE solid phase extraction column to obtain the sample to be tested containing synthetic colorant. It was separated by Agilent ZORBAX C18 chromatographic column, and gradient eluted by methanol ammonium acetate solution as mobile phase. The characteristic wavelength of each synthetic colorant was the detection wavelength, detected by DAD detector and quantified by appearance method. Results: the separation effect of the seven synthetic colorants is good, showing a good linear relationship in the range of 1～20 µ g/mL, the relative coefficients are greater than 0.999 0, the recovery is 86.42%～96.70%, and the RSD is less than 1%. The detection limit is 0.5 mg/kg and the quantitative limit is 2.0 mg/kg. 13 batches of gelatin hollow capsules and 4 batches of health food capsule shells were determined by this method, and the synthetic colorants allowed by the national standard were detected. Conclusion: the method is simple, accurate and reliable. It is suitable for the determination of synthetic colorants in health food capsule shell.Keywords: high performance liquid chromatography; synthetic colorants; Gelatin hollow capsule; health food capsule shell如今人们对于合成着色剂的添加认知多是在饮料、果冻、熟肉制品中，在这些食品中，国家规定其能够添加一定量的合成色素，但本文所探究的保健食品胶囊壳是否超范围添加合成着色剂却往往容易被人们所忽视。
HPLC-MS
分析检测HPLC-MS/MS测定食糖中4种合成着色剂陈 艳，张 丽，冉艳瑞，黄 立，万 静，马艳红（昆明市食品药品检验所，云南昆明 650000）摘 要：目的：建立高效液相色谱-串联质谱法（High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry，HPLC-MS/MS）测定食糖中4种着色剂的分析方法。
方法：样品经80%甲醇超声提取，再用PWA-2固相萃取柱净化后，经VP-ODS C18柱（2.0 mm×150 mm，5.0 μm）分离，以乙酸铵和甲醇为流动相，梯度洗脱，用HPLC-MS/MS检测。
结果：4种化合物在考察范围内线性良好，相关系数均大于0.999；加标回收率在85.36%～102.30%，RSD为0.42%～2.72%；检出限为2～5 μg·kg-1。
结论：该方法灵敏度高、分辨率高、分析速度快，适用于食糖中合成着色剂的快速筛查和定量分析。
关键词：食糖；高效液相色谱-串联质谱法；合成着色剂；快速测定Determination of 4 Synthetic Colorants in Sugar by HPLC-MS/MS CHEN Yan, ZHANG Li, RAN Yanrui, HUANG Li, WAN Jing, MA Yanhong(Kunming Food and Drug Inspection Institute, Kunming 650000, China) Abstract: Objective: To establish an analytical method for the determination of four colorants in sugar using high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS). Method: The sample was ultrasonically extracted with 80% methanol, purified with a PWA-2 solid phase extraction column, and then separated on a VP-ODS C18 column (2.0 mm×150 mm, 5.0 μm) with a gradient elution using ammonium acetate and methanol as the mobile phases, and detected by HPLC-MS/MS. Result: The four compounds had good linearity within the investigation range, and the correlation coefficients were all greater than 0.999; the standard recovery rate was 85.36%～102.30%, and the RSD was 0.42%～2.72%; the detection limit was 2～5 μg·kg-1. Conclusion: This method has the characteristics of high sensitivity, resolution and fast analysis speed, and is suitable for rapid screening and quantitative analysis of synthetic colorants in sugar.Keywords: sugar; high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry; synthetic colorant; rapid determination.食糖作为人们日常生活中的必需品，其安全问题备受关注。
高效液相色谱法测定糕点中的柠檬黄、日落黄
ｃ ｏ ｒ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｃ ｏ ｅ ｉｃ ｆ ｉ ｅ ｎ ｔ ｗａ ｓ ０ ． ９ ９ ９ ． ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｌ ｉ ｍｉ ｔ ｏ ｆ ｌ ｅ ｍｏ ｎ ｙ ｅ ｌ ｌ ｏ ｗ ａ ｎ ｄ ｓ ｕ ｎ ｓ ｅ ｔ ｙ ｅ ｌ ｌ ｏ ｗ ｗａ ｓ ０ ． ４ ａ ｎ ｄ Ｏ ． ３ ｍｇ／ｋ ｇ ．
高效液相色谱法测定糕 点 中的柠檬 黄 、 日落黄
刘 芳
（ 北京市昌平 区质量技术监督局 ， 北京 １ ０ ２ ２ ０ ０ ）
摘要
建 立 高 效 液 相 色谱 法 测 定 糕 点 中 的柠 檬 黄 、 日落 黄 的 方 法 。样 品 经 水 浸 泡提 取 ， 于 涡 旋 混 匀器 中快 速 混
ｒ ｅ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｌ ｙ ． Ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｙ ｒ ｗａ ｓ ７ ２ ． ５ ％一 ８ ２ ． ０ ％ ．ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｓ ｔ ａ ｎ ｄ ａ ｒ ｄ ｄ ｅ ｖ ｉ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｄ ｅ ｔ ｅ ｍ ｉ ｒ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｗａ ｓ ４ ． ８ ％ ａ ｎ ｄ
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ Ｔｈ ｅ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｆ ｏ ｒ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｌ ｅ ｍｏ ｎ ｙ ｅ ｌ ｌ ｏ ｗ ａ ｎ ｄ ｓ ｕ ｎ ｓ ｅ ｔ ｙ ｅ ｌ ｌ ｏ ｗ ｉ ｎ ｐ ａ ｓ ｔ ｒ ｙ ｂ ｙ ｈ ｉ ｇ ｈ ｐ ｅ ｒ ｆ ｏ ｍ ａ ｒ ｎ ｃ ｅ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ
高效液相色谱快速检测8种合成着色剂的改进方法
高效液相色谱快速检测８种合成着色剂的改进方法摘要】建立了高效液相色谱法同时测定食品中８种合成着色剂（柠檬黄、新红、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红）的方法。
样品经乙醇．氨水．水溶液前处理，经ＺＯＲＢＡＸＳＢ．Ｃ１８（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）色谱柱分离，以甲醇和０．０２ｍｏｌ／Ｌ的乙酸铵为流动相，进行梯度洗脱，用紫外检测器设定波长程序，分别在４５０ｎｍ、４９０ｎｍ、６００ｎｍ波长处检测，８种物质的线性相关系数大于０．９９９，方法检出限为０．０２６～０．０９０μｇ／ｍＬ。
８种合成着色剂的回收率范围在６３．４％～１０１．２％之间，ＲＳＤ（ｎ＝６）范围在１．１４～６．２６之间，满足食品中合成着色剂含量的检测需要。
【关键词】高效液相色谱法［合成着色剂［食品［检测为了改善食品的色泽，人们常常在加工食品的过程中添加着色剂，以改善感官性质，增加食欲［１］。
与天然色素相比，合成着色剂具有色泽鲜艳、着色力强、性质稳定和价格便宜等优点，但人工合成着色剂多为偶氮化合物，具有一定毒性，若使用不当会危害人体健康。
许多国家和地区已对其使用范围、限量及相关的检测方法做了明确的规定［２．３］。
目前，我国已批准使用的合成食用色素有２１种，常用的有苋菜红、胭脂红、诱惑红、新红、柠檬黄、靛蓝、日落黄及亮蓝等，这些合成着色剂被广泛应用于饮料、雪糕、糖果、糕点、果酱、调料、火腿、罐头等食品［４］。
但是，在经济利益驱使下，我国食品中人工合成着色剂的超标、超范围使用现象屡禁不止。
目前国家标准中给出的最佳方法是高效液相色谱法［５］，但其样品前处理技术是聚酰胺粉的吸附与解吸附方法，步骤繁琐，易造成损失［６］，样品经乙醇．氨水．水溶液提取后，蒸干耗时过长。
并且使用紫外检测器于２５４ｎｍ波长下测定，无法顾及到不同组分的最大吸收波长［７］，且在紫外区域很多杂质都有吸收，干扰严重。
本文采用快速液相色谱、ＶＷＤ多波长检测法，在可见光区域进行测定，不仅缩短了检测时间，提高了灵敏度，扩大了检测范围，而且大大简化了前处理方法。
高效液相色谱法分析(柠檬黄、苋菜红、胭脂红、新红、日落黄、亮蓝、赤藓红、时亮蓝)原始记录
（g/kg）
相对偏差（%）
柠檬黄
新红
苋菜红胭脂红ຫໍສະໝຸດ 日落黄亮蓝赤藓红
柠檬黄
新红
苋菜红
胭脂红
日落黄
亮蓝
赤藓红
柠檬黄
新红
苋菜红
胭脂红
日落黄
亮蓝
赤藓红
备注
实验允许误差：≤10%
仪器使用情况使用前：使用后：检验人：复核人：审核人：
日落黄峰面积（A）
赤藓红峰面积（A）
新红峰面积（A）
亮蓝面积（A）
检出限
柠檬黄、苋菜红、胭脂红、新红、日落黄：0.5mg/kg，亮蓝、赤藓红：0.2mg/kg(检测波长为254nm时亮蓝：1.0mg/kg,赤藓红：0.5mg/kg)
计算公式：X=C×V×1000/m×1000×1000;
X--试样中合成着色剂的含量，（g/kg）；C--进样液中着色剂的浓度，（μg/mL）；V--试样定容体积，（mL）；m--试样质量，（g）；1000--换算系数；计算保留两位有效数字；
按照GB 5009.35-2016对样品进行处理。
混合标准贮备液浓度
1mg/mL
色谱
条件
检测器：PDA
波长：254nm
色谱柱：C18
进样量：10 μL
柱温: 35.0 ℃
流速：1.0 mL/min
流动相：甲醇：乙酸铵溶液梯度洗脱
单点校正
名称
浓度μg/mL
峰面积
柠檬黄峰面积（A）
苋菜红峰面积（A）
胭脂红峰面积（A）
高效液相色谱法分析（柠檬黄、苋菜红、胭脂红、新红、日落黄、亮蓝、赤藓红、时亮蓝）
原始记录
检测项目
检测开始时间
高效液相色谱法同时检测液体食品中6种人工合成色素
高效液相色谱法同时检测液体食品中6种人工合成色素作者：童优芸王小宝王晓燕丁文慧来源：《安徽农业科学》2022年第04期摘要 [目的]通过优化高效液相色谱条件和前处理步骤，建立高效液相色谱法同时测定液体食品中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝、诱惑红6种人工合成色素，以此提高合成色素的检测效率。
[方法]试验优化了前处理方法，液体食品基质比较干净时采用直接水提进样法，基质比较复杂时采用固相萃取净化法;优化了梯度洗脱程序和波长程序等仪器条件。
[结果]6种人工合成色素浓度在5～50 μg/mL 线性关系良好（R2>0.999）;柠檬黄、苋菜红、日落黄、胭脂红、诱惑红的检出限为0.031 25 mg/kg，亮蓝的检出限为0.125 00 mg/kg，样品添加标准物质后平均回收率在89.0%～100.3%，相对标准偏差（RSD）在1.56%～3.12%。
[结论]该研究可为实验室日常的人工合成色素检测提供参考。
关键词高效液相色谱;食品;人工合成色素;仪器条件;前处理;方法优化中图分类号 TS 207文献标识码 A文章编号 0517-6611（2022）04-0190-05doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2022.04.049开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Simultaneous Detection of Six Synthetic Pigments in Liquid Food by High Performance Liquid ChromatographyTONG You-yun1，WANG Xiao-bao2，WANG Xiao-yan1 et al（1.Sion Inspection Service Co.， Ltd.， Ningbo， Zhejiang 315000;2.Ningbo Academy of Product and Food Quality Inspection （Ningbo Fibre Inspection Institute），Ningbo，Zhejiang 315000）Abstract [Objective] By optimizing the conditions and pretreatment steps of high performance liquid chromatography， a high performance liquid chromatography method was established for the simultaneous determination of 6 synthetic pigments of lemon yellow， amaranth， carmine， sunset yellow， brilliant blue， and allure red in liquid food， so as to improve the detection efficiency of synthetic pigments.[Method] The experiment optimized the pretreatment method. The direct water extraction method was used when the liquid food matrix was relatively clean， and the solid phase extraction purification method was used when the matrix was more complicated;the instrument conditions such as gradient elution procedure and wavelength procedure were optimized.[Result] The concentration of 6 kinds of synthetic pigments has a good linear relationship between 5-50 μg/mL （R2>0.999）.The detection limit of lemon yellow， amaranth， sunset yellow， carmine and allure red was 0.031 25 mg/kg， and the detection limit of brilliant blue was 0.125 00 mg/kg. The average recovery rate of samples after adding standard substances was 89.0%-100.3%，the relative standard deviation （RSD） was 1.56%-3.12%.[Conclusion] This study can provide reference for the daily synthetic pigment detection in laboratories.Key words High performance liquid chromatography （HPLC）;Food;Syntheticpigments;Instrument conditions;Pretreatment;Method optimization作者简介童优芸（1987—），女，浙江宁波人，工程师，从事食品质量检测工作。
糕点中四种人工合成着色剂的测定
引言糕点是目前市场上最为常见的一类小吃，因种类繁多，口味多元，而受到人们的广泛喜爱。
根据国家标准GB/T 20977-2007《糕点通则》，糕点可按加工方式分为热加工糕点和冷加工糕点两大类，其中，热加工糕点占主导，其因产品制作工艺和本身特色的不同又可分为五大类：烘烤糕点、油炸糕点、水蒸糕点、熟粉糕点和其他类。
蛋糕、水晶饼、麻花等就是糕点大类中的一部分。
然而，许多不法商家为了提升糕点的色泽，纷纷往糕点中违规添加合成着色剂，合成着色剂没有营养价值，长期过量食用会对身体健康产生一定影响[1]。
食品中合成着色剂的测定方法目前已知的有：示波极谱法[2]、分光光度法[3]、液相色谱串联质谱法[4]、高效液相色谱法[5]等。
其中，高效液相色谱法因定性定量准确而应用最为普遍，国家标准GB 5009.35-2016《食品安全国家标准食品中合成着色剂的测定》采用此法，但是标准适用范围为：饮料、配制酒、硬糖、蜜饯、淀粉软糖、巧克力豆及着色糖衣制品，糕点并未在其列。
本文拟建立糕点中四种人工合成着色剂的液相色谱测定法。
1仪器与试剂1.1仪器岛津LC-20液相色谱仪(二元泵，柱温箱，自动进样器，二极管阵列检测器SPD-M20A)，分析天平（CPA224S ，德国赛多利斯），纯水器（AWL-1002-M ，台湾艾科浦）；组织捣碎匀浆机（JJ -2（2003-61），常州国华电器有限公司）；离心机（LD4-2A ，北京医用离心机厂）；超声波清洗器（KQ-500E,昆山市超声仪器有限公司）；漩涡混合器（VORTEX 3，德国IKA ）。
1.2试剂超纯水由艾科浦纯水器制备（再经0.45μm 滤膜过滤），甲醇（色谱纯，阿拉丁试剂）；乙酸铵（优级纯，国药集团）；石油醚（分析纯，沸程30~60℃,国药集团）；乙醚（分析纯，国药集团）；氯化钠（分析纯，国药集团）；乙酸锌（分析纯，国药集团）；亚铁氰化钾（分析纯，国药集团）；冰醋酸（分析纯，国药集团）；柠檬黄标准物质：GBW (E)100158，苋菜红标准物质：GBW(E)100160，胭脂红标准物质：GBW(E)100161,日落黄标准物质：GBW(E)100159,均购于中国计量科学研究院。
高效液相色谱法同时测定复杂食品基质中8种合成色素的含量
回收率（/ %） 84.5 85.4 86.1 97.1 98.0 99.1 92.1 93.5 95.6 88.3 91.8 95.1 95.8 96.5 98.7 91.2 94.2 96.8 92.1 94.2 96.8 94.5 95.1 97.1
RSD（/ %） 2.2 2.1 2.4 1.6 1.7 2.2 2.4 1.4 2.0 1.7 2.0 2.5 2.2 2.4 1.4 2.3 2.4 2.3 2.2 2.4 2.2 1.6 1.9 1.8
传统检测方法存在种种缺陷，难以满足实际检测准确
性需要，因此有必要加强对高效液相色谱法合成色素检测分
析，更好地保食品安全。
1 材料与方法 1.1 试验仪器
高效液相色谱仪，型号为岛津 LC-2030C；真空脱气机， 型号为岛津 LC-2030C 系列，与高效液相色谱仪配套；自动 进样器；二极管阵列检测器（PDA）；ProElut PWA-2 固相 萃取柱，规格为 150 mg/6 mL。 1.2 试验试剂
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分析检测
色素 赤藓红 亮蓝 酸性红 诱惑红 日落黄 胭脂红 苋菜红 柠檬黄
表 1 精密度与回收实验结果（n=6）
加标量 /(mg/kg) 0.79 1.61 8.10 0.59 1.2 6.0 0.25 0.49 2.5 0.25 0.49 2.5 0.7 1.3 6.9 0.7 1.5 8.0 0.61 1.2 5.9 0.4 0.8 3.9
乙酸铵溶液，浓度为 0.02 mol/L；提取溶剂；质量浓度 为 0.500 g/L 的日落黄、柠檬黄、胭脂红、苋菜红、亮蓝标 准溶液，质量浓度为 1.00 g/L 的赤藓红、诱惑红标准溶液， 质量浓度为 93.5% 的酸性红标准品。 1.3 试验方法
高效液相色谱法测定熟肉制品中四种合成色素
高效液相色谱法测定熟肉制品中四种合成色素摘要：目的：建立反相高效液相色谱法测定熟肉制品中的柠檬黄、胭脂红、日落黄、诱惑红等四种合成色素。
方法：样品中合成色素经涡旋提取，注入高效液相色谱仪中进行分离，测定。
结果：四种合成色素在0～1mg·L-1的范围内线性关系良好；回收率均可达到90％以上。
结论：本法灵敏度高，简单，易行，结果准确可靠，可用于大批量样品的监测工作。
关键词：反相高效液相色谱法熟肉制品合成色素人工合成色素着色力强，色泽鲜艳，成本较低。
但近年来，诸多对人工合成色素的研究发现，有些色素有致癌作用，因此，我国规定了人工合成色素的使用限量[1]及检测方法。
然而市场却存在为了非法利润而滥用人工合成色素的现象，因此，必须对其进行监督和监管。
在对市场抽检的熟肉制品中四种合成色素的检测过程中发现，现行标准方法繁琐，前处理时间长，针对熟肉制品专属性不强，回收率较低，难以适应大批量的检测工作的需要，且现行标准中，诱惑红采用纸色谱法[2]测定，不仅操作繁琐，还要与其他色素分别测定，增大了工作量。
因此结合文献报道[3]，在原标准基础上加以改进，从而大大的提高了检测专属性、灵敏度及工作效率。
1、材料与方法1.1 检测仪器LC20液相色谱仪、UV检测器（日本岛津公司），CAPELL PAK C18色谱柱（15cm×0.46 mm,5μm）（日本资生堂），ALC-1100 电子天平（德国赛多利斯公司），GENIUS 3涡旋混合器（德国IKA公司），DK-S26型电热恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司)。
1.2 试剂试药石油醚(沸程30℃～60℃，分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；甲醇(色谱纯，天津康科德科技有限公司)；醋酸铵(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；盐酸(优级纯，北京化工厂)；无水乙醇-氨水-水(7-2-1)；硫酸锌(300g/L)；铁氰化钾溶液(150g/L)。
标准工作溶液为柠檬黄、胭脂红、日落黄、诱惑红国家标准物质加超纯水稀释而成。
高效液相色谱一质谱质谱联用法测定酱腌菜中的人工合成着色剂
高效液相色谱一质谱质谱联用法测定酱腌菜中的人工合成着色剂摘要:目的:建立酱腌菜中6种人工合成着色剂日落黄、柠檬黄、苋菜红、胭脂红、诱惑红、亮蓝的定性、定量分析方法。
方法:样品经聚酰胺吸附,碱洗解吸后待测。
检测时以甲醇-乙酸铵(0.02M)为流动相,经梯度洗脱,电喷雾(ESI)离子化,选择反应监控(SRM)定性和定量。
结果:样品检测灵敏度高,干扰少,回收率为89.0%～101.2%,RSD0.5%～1.6%,相关系数0.9990～0.9999,检出限0.4～13μg/kg。
结论:该方法准确、灵敏,适用于酱腌菜中6种人工合成着色剂的定性和定量分析。
关键词:高效液相色谱-质谱/质谱人工合成着色剂酱腌菜食品着色剂从来源分可以分为天然着色剂和合成着色剂两大类。
然而,合成着色剂是由煤焦油中的苯胺为原料制成,已经被证实在过量的情况下会对人体健康造成负面影响。
因此,世界各国对其使用范围和使用量都有严格的控制。
本文建立了酱腌菜中6种人工合成着色剂同时测定的高效液相色谱-质谱/质谱联用法,解决了在测定中所存在的问题。
1 材料与方法1.1 实验条件色谱条件:C18柱:Thermo Hypersil GOLD(50mm×2.1mm,1.9μm);柱温:30℃;流动相:甲醇(A)和0.02M乙酸铵水溶液(B),梯度洗脱:0～2min15%A;2～3min,A线形变化为98%,保持7min,10～11min,A线性变化为15%,保持4min。
流速200μL/min,进样体积10μL。
质谱条件:电喷雾电离(ESI),正离子方式,选择反应监控,分辨率Q1=0.7M,Q3=0.7M,喷雾电压3500V,鞘气(N2)压力39au,辅助气(N2)压力10au,加热毛细管温度:350℃,碰撞气1.5m Torr,扫描宽度0.100,扫描时间0.200s。
1.2 实验方法将酱腌菜置于搅拌机中搅碎,称取5.00g,加水30mL,用柠檬酸调节pH到6,将1g聚酰胺粉加少许水调成粥状,倒入试样溶液中,搅拌均匀,超声提取15min,以G3垂融漏斗抽滤,用纯水洗涤3～5次,然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3～5次,再用水洗至中性,用乙醇-氨水混合溶液解吸3～5次,每次5mL,收集解吸液,加乙酸中和,蒸发至近干,加水溶解,定容至5mL。
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・实验研究・
高效液相色谱等梯度测定食品中柠檬黄、
苋菜红、胭脂红、日落黄
刘丽珍 徐晓枫 杨剑业 包玉龙
010031 内蒙古 呼和浩特市 内蒙古疾病预防控制中心检测中心
摘 要 目的:建立食品中常用四种合成著色剂的检测新方法;方法:选择适宜的高效液相流动相最佳配比;结果:在流动相为甲醇-0.02mol/L 乙酸铵(20/80,v/v );流速:1ml/min ;检测器波长:254nm 色谱条件下,方法回收率80%-95%;结论:本方法具有设备要求简单、工作效率高等优点。
关键词:高效液相法 流动相 合成著色剂 等梯度洗脱
中图分类号:R155.5 文献标识码:A 文章编号:1003-6245(2007)02-0101-02
Study on contents of in food by high perform ance liquid chrom atography using gradient elution
L IU L i -z hen ,X u X iao -f eng ,YangJ ian -ye ,B ao Yu -L ong
(Center for Disease Control and Prevention of Inner Mongolia ,Hohhot ,010020)
Abstract Objective :To establish a method to judge and determine the contents of in food ;Method :A best com 2ponent in mobile phases ;R esults and Conclusion :The methods were facilitate and effective
K ey w ords :HPL C ;Mobile Phases ;Synthetic Pigment ;Gradient elution
作者简介:刘丽珍,女,1949年,副主任检验技师,长期从事食品理化检验工作。
随着市场监督力度的不断加强,常常需要检测部门开展食品中合成著色剂的检测工作。
国标G B/T5009.35-2003中规定高效液相色谱法是测
定食品中合成著色剂的首选方法,方法需用梯度洗脱对设备要求较高[1],我们在方法的基础上,充分利用现有设备结合自身条件,尝试用等梯度洗脱法测定食品中常见合成著色剂,顺利地完成了卫生部下达的对于以上四种合成著色剂的质控样的测定,为没有配备双泵以上高效液相色谱的检测部门能够顺应当前需求,开展此项检测工作提供了借鉴。
1 材料与方法
1.1 仪器及试剂:岛津液相色谱仪(SPD -10A 紫
外检测器、L C -10AD 单元泵、手动进样器)TL -9900色谱工作站;色谱纯甲醇;0.02mol/L 乙酸铵
溶液;浓度为1.00mg/ml 的柠檬黄、苋菜红、胭脂
红、日落黄标准溶液;浓度为5、10、20、40μg/ml 的柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄混合标准溶液。
1.2 色谱条件:
色谱柱:GEM -C18(dp 5
μm4.6mmID ×250mm ;保护柱:C18;柱温:室温;流动相:甲醇-0.02mol/L 乙酸铵(20/80,v/v );流速:1ml/min ;检
测器波长:254nm ;进样20
μl 。
1.3 样品处理:同G B/T5009.35-2003。
1.4 测定:分别取经0.45
μm 滤膜过滤的合成色素标准使用液、标准混合液及样品色素提取液各20
μl ,注入高效液相色谱仪分析测定,根据谱峰保留时间、峰面积与标准峰比较,进行定性、定量。
2 结果与讨论2.1 色谱条件的选择2.1.1 流动相配比的选择:流动相的选择关系到检测的分离度、灵敏度、检出限。
试验表明,在C18柱中,甲醇、0.02mol/L 乙酸铵是合成色素分离的理想的洗脱液,但需选择合适的配比,甲醇比例过大,可造成分离不完全;甲醇比例过小,又使得运行时间拖长,且后面的谱峰展宽,难以检测。
本试验通过改变二者的比例[2],以5/95、10/90、20/80、25/75(v/v )的比例分别进行分离实验,选择出甲醇与乙酸铵比例为20/80(v/v )时,分离度和分析时间均能得到较好的效果。
能使以上四种色素得到很好分离。
2.1.2 流速的选择:流速的大小直接影响柱及系统的压力、各组分离度、洗脱时间,在流动相选定之后,则需选择最佳分离度、最佳分析时间的流速。
流速太小,分析时间长且后流出组分峰型变差;流速太大,导致系统压力增高,容易冲塌柱,本试验以0.5、0.8、1.0和1.2ml/min 流速进行试验,选定1.
0mL/min 流速最佳。
2.1.3 柱温的选择:柱温是影响组分分离的因素之
一,本试验验证柱温为30℃较好。
在此色谱条件下
分离效果如图
:
2.2 精密度、回收率分别取浓度为1.00mg/ml 的柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄标准溶液用流动相稀释,配置成浓度
为5、10、20、40μg/ml 的柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日
落黄混合标准溶液,分别进样20
μl ,记录图谱和峰面积,以峰面积为横坐标,以标准系列浓度为纵座标求线性回归,相关系数均大于0.998,对同一饮料样
品加标各10
μg/ml 重复测定5次回收率分别为柠檬黄85-95%;苋菜红83-94%;胭脂红80-
92%;日落黄80-91%。
3 结 论
综上所述,在不具备梯度洗脱设备条件下,也可通过等梯度进行常见合成著色剂的分析检测。
参 考 文 献
1 G B/T5009.35-2003食品中合成著色剂的测定,食品卫生检验
方法理化部分,[S]标准出版社,276～279
2 [美]L ・R ・森德尔,张玉奎等实用高效液相色谱法的建立(第
二版),[M ].北京:华文出版社,2001.369～380
濮阳市市直幼托机构消毒质量监测与分析
朱文刚
457000 河南省 濮阳市 濮阳市疾病预防控制中心
摘 要 目的:为了解濮阳市市直幼托机构消毒管理工作现状,我们于2003-2005年对市直3所幼托机构消
毒情况进行了卫生学监测,监测结果表明:濮阳市市直幼托机构消毒管理工作基本趋于正规化,卫生消毒状况尚好,但是幼儿园室内空气污染严重,监测合格率为22.73%。
关键词:幼托机构 消毒 监测
中图分类号:R187 文献标识码:A 文章编号:1003-6245(2007)02-0102-03
作者简介:朱文刚,男,1966年3月生,本科学历,副主任医师,主要从事病媒生物控制专业,已发表专业学术论文20余篇,获市级科技成果2项。
幼托机构是幼儿集体生活、娱乐的公共场所,因
此,幼托机构的卫生状况直接关系到幼儿的身体健康。
预防性卫生消毒是预防和控制疾病传播的重要手段,为了解濮阳市市直幼托机构消毒质量现状,我们于2003-2005年对濮阳市市直3所幼托机构消毒情况进行了卫生学监测。
1 监测对象
幼托机构紫外线灯管照射强度和室内空气、玩
具、保教人员的手、物体表面、餐具、毛巾的卫生消毒
质量。
2 采样方法:
室内空气采样在消毒处理后与儿童活动之前进行,用直径9cm 普通琼脂平板在采样点暴露5min 后采样送检。
保教人员的手在消毒后工作前采样,被检人五指并拢,将浸有灭菌生理盐水的棉试子在双手指曲面,从指尖甲沟至指根处往返涂抹2次后,剪去手接触部分,将棉试子放入10ml 灭菌生理盐水的试管中送检。
门把手、水龙头、玩具、桌面、床头、毛巾等物体表面,消毒后未使用前采样,≤100cm 2全采,将浸有灭菌生理盐水的棉试子,反复。