固定化乳酸菌产酸

２实验结果与讨论 ． ３１ 柱式反应来性能考察
在柱式反应床 中对固定化乳酸菌生长 曲线、 产
（） １ 固定化乳酸菌在接种 ２ ｈ后进人快速生长
期 ，１后进人稳定生长期 ， ６ ， 可将固定化细胞培养 ２ ｈ 后再开启蠕动进行乳酸发酵。
酸曲线、 耗糖 曲线及批资产酸量进行了测定， 结果
定化乳酸菌发酵生产乳酸进行了研究。
②乳酸的定量测定一Ｅ Ｔ Ｄ Ａ滴定法。
１３实验万法
① 固定化乳酸菌发酵工艺流程 菌种活化一 扩培一 细胞固定化一 柱 式反应床发酵一 乳酸提取。
② 柱式反应床发酵培养
在无菌条件下将 ０ｇ ３０ 固定化细胞装人柱
抽出发酵液， 同时向反应柱中加人新鲜发酵培养基
继续发醉。图 １ 为反应床装置示意图
③ 固定化乳酸菌生长曲线的测定 ；
活化培养基： 麦汁１％ Ｃ ３． ５ ０ ０ ａＯ０ ， Ｃ ６０ ５
（ ％、 。 、 岛２ 蛋白陈１ ％ 调节Ｐ ５ － ． Ｈ ． ５ ５６０
动泵进行乳酸发醉。
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［』 ２叶子坚 姚善没． 乳杆菌微胶索化培养的研究１１ １．
徽生物学报 ００ （ ） ２０ ， ０５ ４
［ ｉｎｋ Ｅ Ｓ ｌｒ ． ｍ Ｅ ｇＰ ｎ ， ｃ ｉＲ Ｃ ｅ ． ． ｇ １８ ３Ｌ ｉ ｙ ， ａ Ｇ ｈ ］ ｐ Ｓ ｉ ｎ ｎ ｒ ｏ ９６
量为６ ．８／ ｏ ９２ｇＬ 关键词 乳酸； 固定化乳酸菌； 发酵； 柱式反应床
中图分类号 ：９４５ Ｒ １． 文献标识码 ： Ａ
乳酸是一种重要的有机酸， 乳酸及其盐类和衍 生物在医药、 食品工业中广泛用作酸味剂、 防腐剂、 还原剂、 杀菌剂等。国内目前多以传统的间歇法发
２ ５ ８ １５乳能脸肋价次产吸 创 圈
图． 砚定化与ｑ ： 幽定化９翻曲 ｋ 雌
￣ 口 － 未胭定于 ，尸 ｔ － ． 一 周定化
医生在线
剪刀将颗粒剪破， 挤压， 让颗粒中的菌体充分释放
出来， ６０ｍ处测其吸光值。 在 ８ｎ ④ 产酸曲线及葡萄糖消耗曲线的测定：
在无菌条件下将固定化细胞装人柱式反应
白陈 ．％， １０ 调节 Ｐ ５５ ．０ Ｈ ．一６５
② 仪器及设 备 ＨＬ －２恒流泵温、 自制 柱式反应床装置、 隔
见图 ２ －图 ５ 。
晰
（） ２ 固定化乳酸菌在柱式反应床中连续发酵 ５
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批次无细胞泄漏， 产酸稳定， 具有 良好的操作稳定
性。
（） ３ 固定化细胞在柱式反应床 中产 酸量 为 ６ ． ９
现代中医药 ２０ ０ ２年第 ５ 期
柱式反应床中固定化乳酸菌生产乳酸的研究
齐香君 刘树兴 薛宗明 陕西科技大学生命科学与工程学院（ 陕西・ 威阳 ７２８ １０劝
提 要 在柱式反应床中对固定化乳酸菌发绪生产歌酸进行 了 研究。结果表明： ） （ 固定化细胞在柱 １
式反应床 中可以连续化进行乳酸菌发酵 ；２ 连续化发０－ 艺条件为 ４ １ ， Ｈ ；３ 乳酸产 （） ｒ － ０ Ｐ ５ （） Ｃ
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２ｇ１ 未固定化细胞产酸量为 ３ ． １ ８／ ， ７ ６／， ｇ 。可见固 定化乳酸菌的产酸量较之未固定化明显提高。
图 ｓ乳曲翻产酸而线
Ｉ艺 Ｎ 洲定化乳限苗生长曲ｆ ｔ
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发醇培养基： １ ％、 葡萄糖 ０ 醇母膏 １５ 蛋 ． ％、
配制发酵培养液， 装人三角瓶中 ３ｍ ， ０ （灭
养， 每隔 ２ ｈ取出， 洗净， 定量加人 ２ ｍ 无菌水， ０工 用
接人 ３克未经预培养的固定化颗粒于 ４ ℃培 ０ 种子培养基： ２０ 醇母膏 １５ Ｃ － 菌， 葡萄糖 ．％， ．％， ａ
水式电热恒温培养箱。
１２分析万法 ．
①残糖的测定一斐林滴定法。
酵生产乳酸， 即在发酵的过程中不断的添加碳酸钙 以中和发酵液中的乳酸。这不但增加了发酵过程 中染菌的机会， 而且工艺繁杂。如何在发酵过程 中， 降低细胞周围的乳酸浓度， 消除产物抑制， 提高 原料的利用率， 减少非生产时间， 降低生产成本 是 乳酸生产研究的重点。本文利用柱式反应床对固
床中， 通人发酵培养基。启动恒流泵， ０ 于４℃下， 发
作者简介 ： 齐Ｂ君（９７ ． 河南博 爱人、７ １５ 一）女． ａ教授。研充万向： 生
物 及制 药工程
酵培养。每隔 １ｈ取样， ２ 测定乳酸及残糖 的 含量
同时在三角瓶 中发醇未固定化细胞做对照
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现代 中医药 ２ ０ ０ ２年第 ５期
式反应床中， 通人发酵培养基７０ ！ ０ｍ 。启动恒流泵，
１实验研究方法 ．
１１ ． 材料和仪器 ① 菌种和试剂 植物乳杆菌、 海藻酸钠、 碳酸钙、 聚乙烯醇 （Ｖ ）硼酸、 ＰＡ、 氯化钙。
于４℃发酵培养。当残糖降至 ｌ／ ０ ｇＬ时停止发酵，
尸 －一 日定化
由图 ２ 可以看出固定化乳酸菌在接种 ２ 后进 ｈ
人快速生长期，ｈ后进人稳定生长期， ６ 反以在柱式
参考文献
［］ １常秀莲． 对乳酸发酵中反情抑制 消除万法的探计 ［］食品与发肆工业．９８ （ ） Ｊ． １９ ，２ ４ ４
反应床发酵中， 可将固定化细胞培养２ 后， ｈ 开启蠕
⑤ 柱式反应床中固定化细胞批次发酵稳定性
的考察 ： 操作同（ ）共做 ５批次。 ２，
由图 ３图 ４可知固定化乳酸 菌在柱式反应床 中产酸量和耗糖速率明显高于固定化细胞。 由图 ５ 可以看出： 发酵 ５批次， 产酸量没有明 显变化 ， 且循环的发醉液保持澄清状
以上结果表明本实验 中所 设计 的柱式 反应床
发酵装置性能良好， 能有效地防止染菌， 且操作 并 简便， 与未固定化乳酸菌的传统间歇发酵相 比具有 产酸量高， 产酸稳定的优点。反应床及发酵液储液 罐上的保温夹套可以使乳酸攻固定化细胞保持稳
图］ 仁 住Ｊ反心床绪甘示盆Ｉ 习
定的发配温度。蠕动泵可将恒定在 Ｐ ５ ０的发酵 Ｈ．
液不断地输人反应 柱 中， 避免 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ产物抑制 ， 高 了 提 固定化细胞对基质的利用速度和产酸速度 ３ 结论 ．
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