01组织学绪论PPT课件
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组织学与胚胎学(绪论)
模式图和真实的标本彩图。学习时注意将文字描 述与插图对照阅读,加深理解和记忆。如肝小叶 的微细结构及其相互关系图。
4. 理论联系实际,重视标本观察 理论来源于实践,科学的理论能指导实践。
组织学的实验,是在理论的指导下,借助显微镜 观察切片标本。学习正常的组织结构是为进一步 学习病理组织改变打基础的,要认真观察各种微 细结构及其比邻关系。
⑶ 涂片:将游离的细胞直接涂在玻片上染色,
如血液涂片。
⑷ 铺片:将疏松结缔组织、肠系膜等撕成薄
片,铺在载玻片上。
⑸ 磨片:将骨、牙等硬组织切割成片后再磨成
薄片。
3. 其它常用特殊染色法
⑴ 镀银染色:如将神经组织切片标本浸泡在硝酸银 溶液中,可将神经元染成棕黑色或棕黄色。
若将网状组织切片标本浸泡在氢氧胺银溶液中, 再经5%甲醛液还原,能将网状纤维染成黑色,胶原纤 维呈褐色。
(hematoxylin –eosin staining),简称H-E染色法。
苏木精为碱性染料,它的盐溶液带阳电荷, 能将细胞核内的染色质和胞质中的核糖体染成紫 兰色。伊红为酸性染料,它的盐溶液带阴电荷, 能使细胞质和细胞外基质的成分染成红色。
※何谓嗜碱性和嗜酸性? 组织中的某些结构,易于被碱性染料着色的性
图10 免疫组织化学原理模式图
⑶呈色情况与
观察: ① 常用的荧
光素是异硫氰酸荧 光素发出黄绿色荧 光,四甲基异硫 氰酸罗丹明发出橙 红色荧光。 (见图1—4)
② 辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP),它的底物是3,3′-二氨基联苯胺(DAB) 和H2O2。HRP能使DAB氧化形成棕黄色产物。
图:原位杂交(地高辛标记) 大鼠主动脉平滑肌细胞表达弹性蛋白mRNA,胞质呈综黄色。
4. 理论联系实际,重视标本观察 理论来源于实践,科学的理论能指导实践。
组织学的实验,是在理论的指导下,借助显微镜 观察切片标本。学习正常的组织结构是为进一步 学习病理组织改变打基础的,要认真观察各种微 细结构及其比邻关系。
⑶ 涂片:将游离的细胞直接涂在玻片上染色,
如血液涂片。
⑷ 铺片:将疏松结缔组织、肠系膜等撕成薄
片,铺在载玻片上。
⑸ 磨片:将骨、牙等硬组织切割成片后再磨成
薄片。
3. 其它常用特殊染色法
⑴ 镀银染色:如将神经组织切片标本浸泡在硝酸银 溶液中,可将神经元染成棕黑色或棕黄色。
若将网状组织切片标本浸泡在氢氧胺银溶液中, 再经5%甲醛液还原,能将网状纤维染成黑色,胶原纤 维呈褐色。
(hematoxylin –eosin staining),简称H-E染色法。
苏木精为碱性染料,它的盐溶液带阳电荷, 能将细胞核内的染色质和胞质中的核糖体染成紫 兰色。伊红为酸性染料,它的盐溶液带阴电荷, 能使细胞质和细胞外基质的成分染成红色。
※何谓嗜碱性和嗜酸性? 组织中的某些结构,易于被碱性染料着色的性
图10 免疫组织化学原理模式图
⑶呈色情况与
观察: ① 常用的荧
光素是异硫氰酸荧 光素发出黄绿色荧 光,四甲基异硫 氰酸罗丹明发出橙 红色荧光。 (见图1—4)
② 辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP),它的底物是3,3′-二氨基联苯胺(DAB) 和H2O2。HRP能使DAB氧化形成棕黄色产物。
图:原位杂交(地高辛标记) 大鼠主动脉平滑肌细胞表达弹性蛋白mRNA,胞质呈综黄色。
第1章组织学绪论ppt课件
扫描电镜图像(血细胞)
扫描电镜图像 (巨噬细胞正 在吞噬两个衰 老的红细胞)
扫 描 电 子 显 微 镜
小结
组织学:是研究正常人体微细结构及其相 关功能的科学。
组织:由细胞和细胞外基质构成。 石蜡切片术和超薄切片术的基本过程: HE染色法:(嗜酸性和嗜碱性的概念)
细胞(cell)
是机体结构与功能的基本单位, 数量众多(1×1015个),形态多样 (约200余种),是组织的构成基础。 LM:细胞膜、细胞质和细胞核。
EM:分为膜相结构和非膜相结构。
组织(tissue) 是由细胞和细胞外基质
(细胞间质)构成。
人体有四种基本组织,即 上皮组织、结缔组织、肌组织 和神经组织。
脱水
(酒精)
(二甲苯)
透明
封片
(树胶)
染色
(HE染色)
切片 包埋
(厚度5-10m) (石蜡)来自HE染色(垂体远侧部)
其它染色法(特殊染色法):
镀银染色 甲苯胺蓝与醛复红染色 氯化金染色 …………
镀银染色 (大脑皮质神经元)
甲苯胺蓝与醛复红染色(肥大细胞和弹性纤维)
氯化金染色 (运动终板)
除石蜡切片外,还有: 火棉胶切片 冰冻切片 涂片 铺片 磨片
(二)电镜技术
透射电镜术(transmission electron
microscopy,TEM)
基 本
取材
固定
脱水
(1mm3) (戊二醛与锇酸) (酒精或丙酮)
程
序
染色
切片
包 埋
(醋酸铀和 柠檬酸铅)
(厚50~ 80nm)
(树脂)
高电子密度 透射电镜图像(浆细胞)
组织与胚胎学PPT课件 上皮组织
(氧化)
(试剂) 沉淀物
人结肠 (过碘酸-雪夫反应)
(四)免疫细胞化学术 (五)同位素示踪术 (六)原位杂交术 (七)图象分析术 (八)细胞培养术和组织工程
第二章 上皮组织
(epithelial tissue ) 组成 大量细胞,少量间质 分布 体表,管、腔、囊内表面 特点
① 大量细胞密集成层,间质少
内含丝状物,
——中间连接
细胞膜胞质面
附有致密物和
细丝 功能 粘着/保持/传递
中间连接 (透射电镜) ——中间连接
(3) 桥粒 (desmosome)/粘着斑
位于 中间连接深部
—中间连接
20-30NM
——桥粒
桥粒 (电镜模式图) ———相邻两细胞间间隙
————致密中线 ————附着板 ——张力细丝
镀一层碳膜和合金膜,用扫描电镜 观察的方法。
作用: 观察细胞表面的立体结构
柱状细胞表面(扫描电镜)
(三)组织化学和细胞化学术
利用某些化学试剂与组织或细胞内的某种
物质起反应,形成有色终末物,对某种物质
作定位、定量及与功能相关的研究
过碘酸—希夫反应(PAS反应)
显示多糖或蛋白多糖常用方法
多糖 + 过碘酸 →多醛 +无色品红 →紫红色
变移上皮
1.单层扁平上皮(单层鳞状上皮) (simple squamous epithelium)
细胞扁平,胞质薄,核扁平,居中
•内皮 •间皮 •其它
单层扁平上皮— 基膜—————
结缔组织—————
内皮(endothelium) 在心血管、淋巴管腔面的单层
扁平上皮
毛细血管——
间皮(mesothelium)
01组织学绪论
当代组 织学
→1801 年比沙提出“组织”概念
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
光学显
微镜 • 提出:施万、施莱登(1838、1839)
细胞学说
• 内容:细胞是一切动、植物体的基本
电子显 微镜
结构和功能单位;细胞内进行着复杂
当代组 织学
的化学反应;新细胞由原有细胞产生
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
• 形态和结构相统一 结构是功能的基础,功能是结构的必然表现
• 培养观察能力:重视实习课和图像观察 培养空间思维能力:将二维图形还原为三维 构像
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
• 石蜡切片术(paraffin sectioning):取材、
光镜技术 固定、脱水、包埋、切片(5 ~ 10 µ m
电镜技术 厚)、染色
组织化学 • 苏木精- 伊红染色法(hematoxylin-eosin
放射自显 staining, HE染色法):苏木精为碱性染
影术
料,使染色质和核糖体着紫蓝色;伊红
图像分析
细胞培养 组织工程
为酸性染料,使胞质和细胞外基质着红
色
图4
嗜酸性(acidophilia);嗜碱性(basophilia)
组织化学 • 糖类: PAS(过碘酸希夫)反应,显示
放射自显 影术
图像分析
多糖和糖蛋白,呈紫红色
糖
多醛
过碘酸
紫红色反应产物
细胞培养 品红硫酸复合物
图9
组织工程 (希夫试剂,无色)
研究内容 发展简史 学习方法 技术简介
免疫组织化学(immunohistochemistry)
光镜技术
电镜技术 • 根据抗原、抗体特异性结合原理,检 组织化学 测组织切片中的肽和蛋白质
第1章:组织学绪论PPT教案
第7页/共35页
二、组织学发展简史和当代组织学
当代组织学: 20世纪后期,新仪器、新技术的发明和应用; 免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学 引入分子水平;组织工程学技术拓展了组织 学的临床应用前景。
第8页/共35页
三、组织学的学习方法
审视角度 平面与立体 形态与功能
第9页/共35页
审视角度
染色方 法
HE染色
苏木精
光镜技术
伊红
嗜碱性结构: 细胞核 粗面内质网 游离核糖体等
第17页/共35页
嗜酸性结构:
细胞质基质 溶酶体、线粒体 等细胞器 胶原纤维等
第18页/共35页
染色方 法
光镜技术
(2)、特殊染色
HE染色法以外的所有染色法,通常是为 了显示某些用HE染色法显示不出的细胞 和结构。如:
第6页/共35页
二、组织学发展简史和当代组织学
1838年德国植物学家Schladen(施来登)、 1839年动物学家Schwann(施万)分别发现 植物和动物都是由细胞组成的,细胞是植物和 动物的结构、功能和发生的基本单位。创立了 “细胞学说”。 19世纪后叶是组织学和细胞学发展的黄金时代 ,放大倍数较高的显微镜,切片机和各种染料 的应用。已能较为正确地描述细胞结构,使组 织学发展为一门独立而系统的学科。
四、组织学技术简介
电镜技术
(二)电镜技术
发明:1932 年德国学者卢斯卡和科诺尔
⒈ 透射电镜术 (transmission electron microscope ,TEM)
电子束穿透样品(超薄切片)。放大倍数为几万至 几十万倍,分辨率可达0.2nm。标本在荧光屏 上呈黑白反差的结构影像。被重金属浸染呈黑 色的结构,称高电子密度 (electron-dense); 反 之 , 浅 染 的 部 分 称 低 电 子 密 度 (electronlucent)。
二、组织学发展简史和当代组织学
当代组织学: 20世纪后期,新仪器、新技术的发明和应用; 免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学 引入分子水平;组织工程学技术拓展了组织 学的临床应用前景。
第8页/共35页
三、组织学的学习方法
审视角度 平面与立体 形态与功能
第9页/共35页
审视角度
染色方 法
HE染色
苏木精
光镜技术
伊红
嗜碱性结构: 细胞核 粗面内质网 游离核糖体等
第17页/共35页
嗜酸性结构:
细胞质基质 溶酶体、线粒体 等细胞器 胶原纤维等
第18页/共35页
染色方 法
光镜技术
(2)、特殊染色
HE染色法以外的所有染色法,通常是为 了显示某些用HE染色法显示不出的细胞 和结构。如:
第6页/共35页
二、组织学发展简史和当代组织学
1838年德国植物学家Schladen(施来登)、 1839年动物学家Schwann(施万)分别发现 植物和动物都是由细胞组成的,细胞是植物和 动物的结构、功能和发生的基本单位。创立了 “细胞学说”。 19世纪后叶是组织学和细胞学发展的黄金时代 ,放大倍数较高的显微镜,切片机和各种染料 的应用。已能较为正确地描述细胞结构,使组 织学发展为一门独立而系统的学科。
四、组织学技术简介
电镜技术
(二)电镜技术
发明:1932 年德国学者卢斯卡和科诺尔
⒈ 透射电镜术 (transmission electron microscope ,TEM)
电子束穿透样品(超薄切片)。放大倍数为几万至 几十万倍,分辨率可达0.2nm。标本在荧光屏 上呈黑白反差的结构影像。被重金属浸染呈黑 色的结构,称高电子密度 (electron-dense); 反 之 , 浅 染 的 部 分 称 低 电 子 密 度 (electronlucent)。
[课件]组织学第一章 绪论PPT
三、组织学的学习方法
第二章
目的要求
上皮组织 Epithelial tissue
• 掌握上皮组织的特点
• 掌握被覆上皮的分类及各自的结构特点
• 熟悉上皮组织的特殊结构
• 了解腺上皮的概念及分类
概述
(一)上皮组织的一般特征 1 由密集排列的上皮细胞和极少量的细胞外基 质组成。 2 上皮细胞具有极性。 游离面 基底面 3 一般无血管,丰富的感觉神经末梢。
组织学第一 章 绪论
二、组织学技术简介
(一)光镜技术
石蜡切片术 paraffin sectioning
取材 固定 脱水 包埋 切片 染色 封片
· 苏木精-伊红 染色法 HE
Hematoxylin-eosin staining
嗜碱性 basophilia 嗜酸性 acidophilia 中 性 neutrophilia ·特殊染色
小肠柱状上皮游离面有纹状缘 在肠管单层柱状上皮细胞之间加有杯状细胞
分布 功能
胃、肠、子宫、胆囊
4 假复层纤毛柱状上皮 pseudostratified ciliated columnar epithelium 结构 由一层高低不等形状不同的细胞组成,细胞
的基底部位于基膜上。 柱状细胞 杯状细胞 锥体形细胞 梭形细胞
(二)电镜技术 1 透射电镜 TEM transmission electron microscopy 2 扫描电镜 SEM scanning electron microscopy (三)激光共聚焦扫描显微镜 (四)组织化学术 PAS反应 periodic acid Schiff reaction (五)免疫组化 (六)原位杂交 (七)体外培养
(二)功能 保护、分泌、吸收、排泄 (三)分类 被覆上皮 腺上皮 特殊上皮
组织胚胎学1、绪论、上皮组织PPT幻灯片
四大基本组织
2、光镜结构、电镜结构、H.E染色法、 嗜碱性、嗜酸性、中性、嗜银性
绪第 二 章论
上皮组织
epithelial tissue
上皮组织的结构特点:
1.上皮细胞排列紧密,细胞外基质少。 2.有极性:分游离面和基底面。 3.有基膜;没有血管; 神经末梢?
—游离面
——上皮组织
—基底面
—— 结缔组织
免疫组织化学术
根据抗原与抗体特异性结合的原 理,检测组织中肽和蛋白质的技术。
甲状腺
三、组织学与胚胎学的学习方法
1、对组织学内容的审视角度
从组织、细胞、亚细胞和分子四个水平
2、理论联系实际 注意形态与功能的统一
3、培养观察力和空间思维能力,
平面结合立体,看到平面想立体
绪论小结 1、细胞、组织、器官、系统的概念、
镀银染色法 是用硝酸银等重金属
盐显示细胞和组织的某些结构,如将 神经细胞染为黑色,具有嗜银性。
网状纤维(淋巴结)
神经胶质细胞
电子显微镜术
应用电镜观察细胞和细胞外基质超微结构
分 辨 率:0.2nm 电镜结构计量单位:nm(纳米) 1nm = 1/1000 um(微米)
电子显微镜下显示的结构,称 超微结构
第一章
组织学绪论
一、组织学的内容和意义
组织学是用显微镜技术研究
机体微细结构及其相关功能的 一门学科。
研究内容:
分子 亚细胞 细胞 细胞
系统 系统
3. 器 官
几种不同的组织按 一定的构筑方式组合
形成器官。
4. 系 统
许多功能相关的 器官构成系统
二、研究技术
光学显微镜
电子显微镜
纹状缘
微
2、光镜结构、电镜结构、H.E染色法、 嗜碱性、嗜酸性、中性、嗜银性
绪第 二 章论
上皮组织
epithelial tissue
上皮组织的结构特点:
1.上皮细胞排列紧密,细胞外基质少。 2.有极性:分游离面和基底面。 3.有基膜;没有血管; 神经末梢?
—游离面
——上皮组织
—基底面
—— 结缔组织
免疫组织化学术
根据抗原与抗体特异性结合的原 理,检测组织中肽和蛋白质的技术。
甲状腺
三、组织学与胚胎学的学习方法
1、对组织学内容的审视角度
从组织、细胞、亚细胞和分子四个水平
2、理论联系实际 注意形态与功能的统一
3、培养观察力和空间思维能力,
平面结合立体,看到平面想立体
绪论小结 1、细胞、组织、器官、系统的概念、
镀银染色法 是用硝酸银等重金属
盐显示细胞和组织的某些结构,如将 神经细胞染为黑色,具有嗜银性。
网状纤维(淋巴结)
神经胶质细胞
电子显微镜术
应用电镜观察细胞和细胞外基质超微结构
分 辨 率:0.2nm 电镜结构计量单位:nm(纳米) 1nm = 1/1000 um(微米)
电子显微镜下显示的结构,称 超微结构
第一章
组织学绪论
一、组织学的内容和意义
组织学是用显微镜技术研究
机体微细结构及其相关功能的 一门学科。
研究内容:
分子 亚细胞 细胞 细胞
系统 系统
3. 器 官
几种不同的组织按 一定的构筑方式组合
形成器官。
4. 系 统
许多功能相关的 器官构成系统
二、研究技术
光学显微镜
电子显微镜
纹状缘
微
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7.细胞培养术(cell culture) • 把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件 下进行培养;培养组织块或器官则称组织培 养术或器官培养术。 • 用于研究细胞、组织的代谢、增殖、分化、 形态和功能变化,各种理化因子对活细胞的 影响。 • 培养条件:营养、生长因子、pH值、渗透压 O2和CO2浓度、温度,控制污染。 • 用相差显微镜观察。
扫描电镜图,血细胞
3.组织化学和细胞化学术
组织化学(histochemistry)和细胞化学 (cytochemistry)术是用化学或物理反应原理 显示组织或细胞内某种化学成分,并对其 进行定位、定量及其相关功能的研究。将 该技术应用于游离细胞的样品,则称细胞 化学术。
组织化学术: 组织中的某种结构成分与所加试剂发生化 学反应、并呈现某种颜色,在显微镜下可观察到
体外培养的平滑肌细胞 (免疫组织化学染色显示肌动蛋白)
8. 组织工程(tissue engineering) 将组织学和材料学相结合,利用组织细胞
培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技 术。
正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨 骼肌、血管、角膜等;其中以组织工程皮肤 较为成功,已成为商品用于治疗烧伤、皮肤 静脉性溃疡等疾病。
1)普通光学显微镜切片标本的制备方法
• 石蜡切片术(paraffin section): 取材、 固定、脱水、包埋、切片、脱蜡和 染色、封片。
苏木精-伊红染色法 (hematoxylin-eosin staining, HE染色法):
嗜碱性(basophilia):苏木精为碱性染料,可使 细胞核内的染色质和胞质内的核糖体等结 构染成紫蓝色, 易被碱性染料着色的性质称 为嗜碱性。 嗜酸性(acidophilia):伊红为酸性染料,使细胞 质和细胞外基质中的成分染成粉红色,易被 酸性染料着色的性质称为嗜酸性。 中性
实验中的组织工程耳
三、组织学的学习方法:
•理论联系实验 •平面与立体的关系。
•糖类:PAS(过碘酸-希夫)反应,显示多糖和糖蛋白, 呈紫红色
过碘酸
糖
醛基
紫红色沉淀
亚硫酸品红复合物 (Schiff试剂,无色)
PAS反应,小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒
•酶类:酶与特异性底物的反应产物、再与 捕捉剂反应,形成有色的沉淀物。
•脂类:尼罗蓝、苏丹类等脂溶性染料,使 脂类呈相应染料的颜色。 锇酸固定兼染色,呈黑色。
• 特殊染色
醛复红与偶氮焰红染色,肥大细胞和弹性纤维
2) 几种特殊显微镜术 • 相差显微镜
•荧光显微镜
免疫组织化学(荧光素标记) 毛细血管内皮细胞呈vWF阳
性
2. 电镜技术:用于观察组织细胞的超微结构
分辨率:0.2nm
1) 透射电镜术
2)
(transmission electron microscopy,
水平(例:心脏)
上皮组织 结缔组织
神经组织
肌组织 心脏(左:器官 右:组织光镜图)
心脏 (心肌细胞光镜像图)
细胞(cell)是人体形态结构和功能 的基本单位,由细胞膜、细胞 质和细胞核构成。
成人约有1014-15个,200余种。
组织(tissue)是由细胞和细胞外基质构成
细胞外基质:由细胞分泌形成。
四种基本组织:上皮组织、结缔组织、 肌组织和神经组织。
几种组织相互有序地组合,具有一定的形态结构 和特定的生理功能构成器官(organ)。 系统(system)由形态结构相似或完全不同、能够 完成某种系列生理功能的器官组成。
二、组织学的研究方法和常用技术 1.光镜(light microscope)技术 光学显微镜分辨率:0.2µm
原位杂交 脐静脉内皮细胞呈心房钠尿肽阳性
6.放射自显影术(autoradiography)
•通过活细胞对某种放射性物质的特异性摄入, 以显示该物质在组织和细胞内的分布、含量 和代谢过程,借以反映细胞的功能状态。
•用3H标记。
放射自显影示幽门部胃 小凹底的干细胞 (3H标记的胸腺嘧啶核 苷标记)
抗原
抗体
荧光素
辣根过氧化物酶 胶体金
免疫组织化学原理模式图
免疫组织化学(荧光素标记) 毛细血管内皮细胞呈vWF阳性
免疫组织化学(辣根过氧化物酶标记) 胰岛B细胞呈胰岛素阳性
免疫组织化学电镜图示上皮细胞膜MAM-6蛋白 (A 胶体金标记 B 辣根过氧化物酶标记)
5.原位杂交术(in situ hybridization)
组织学与胚胎学 Histology and Embryology
办 公 室---- 组织学绪论
Introduction of Histology
一、组织学的研究内容
1.概念: 组织学(histology)是研究正常人体
微细结构及其相关功能的科学。 研究内容:细胞、组织、器官与系统 研究水平:组织、细胞、亚细胞和分子
•核酸:福尔根反应显示DNA-紫红色; 甲基绿-派若宁反应,同时显示 DNA(蓝绿色)与RNA(红色)。
4.免疫组织化学(immunohistochemistry)
• 根据抗原、抗体特异性结合原理,检测组织 细胞中的多肽和蛋白质等大分子物质。
• 用标记的抗体与组织中的抗原结合,标记物 可于显微镜下观察。标记物有荧光素(荧光显 微镜观察)、辣根过氧化物酶(光镜或电镜观 察)、胶体金(多用于电镜观察)。
TEM): 以电子束穿透样品,经聚合放大后显
像于荧光屏上进行观察和摄片
戊二醛、锇酸双重固定→树脂包埋→超薄切
片(50~80nm)→电子染色(醋酸铀、柠檬酸铅)
根据电子束在不同结构上被散射程度的 差异表现为电子密度高(黑或深灰色)和电子 密度低(浅灰色).
透射电镜图,浆细胞
2) 扫描电镜术(scanning electron microscopy, SEM) 用于观察组织细胞表面立体结构,具有真实的立体感
• 即核酸分子杂交组织化学术,检测基因(DNA 片段)的有无、基因的表达活性(mRNA)。
• 原理:用带标记物的已知碱基顺序的核酸探 针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特 异性原位结合(杂交),并通过对标记物的显示 而获知待测核酸的有无及相对量。
• 常用标记物有放射性同位素和非放射性物质 (地高辛等)。