01组织学绪论PPT课件

7.细胞培养术（cell culture） • 把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件 下进行培养；培养组织块或器官则称组织培 养术或器官培养术。 • 用于研究细胞、组织的代谢、增殖、分化、 形态和功能变化，各种理化因子对活细胞的 影响。 • 培养条件：营养、生长因子、pH值、渗透压 O2和CO2浓度、温度，控制污染。 • 用相差显微镜观察。
扫描电镜图，血细胞
3.组织化学和细胞化学术
组织化学(histochemistry)和细胞化学 (cytochemistry)术是用化学或物理反应原理 显示组织或细胞内某种化学成分，并对其 进行定位、定量及其相关功能的研究。将 该技术应用于游离细胞的样品，则称细胞 化学术。
组织化学术: 组织中的某种结构成分与所加试剂发生化 学反应、并呈现某种颜色,在显微镜下可观察到
体外培养的平滑肌细胞 （免疫组织化学染色显示肌动蛋白）
8. 组织工程（tissue engineering） 将组织学和材料学相结合，利用组织细胞
培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技 术。
正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨 骼肌、血管、角膜等；其中以组织工程皮肤 较为成功，已成为商品用于治疗烧伤、皮肤 静脉性溃疡等疾病。
1）普通光学显微镜切片标本的制备方法
• 石蜡切片术(paraffin section): 取材、 固定、脱水、包埋、切片、脱蜡和 染色、封片。
苏木精-伊红染色法 (hematoxylin-eosin staining, HE染色法)：
嗜碱性(basophilia):苏木精为碱性染料,可使 细胞核内的染色质和胞质内的核糖体等结 构染成紫蓝色, 易被碱性染料着色的性质称 为嗜碱性。 嗜酸性(acidophilia):伊红为酸性染料,使细胞 质和细胞外基质中的成分染成粉红色,易被 酸性染料着色的性质称为嗜酸性。 中性
实验中的组织工程耳
三、组织学的学习方法:
•理论联系实验 •平面与立体的关系。
•糖类：PAS(过碘酸-希夫)反应，显示多糖和糖蛋白， 呈紫红色
过碘酸
糖
醛基
紫红色沉淀
亚硫酸品红复合物 （Schiff试剂，无色）
PAS反应，小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒
•酶类:酶与特异性底物的反应产物、再与 捕捉剂反应，形成有色的沉淀物。
•脂类:尼罗蓝、苏丹类等脂溶性染料，使 脂类呈相应染料的颜色。 锇酸固定兼染色，呈黑色。
• 特殊染色
醛复红与偶氮焰红染色，肥大细胞和弹性纤维
2) 几种特殊显微镜术 • 相差显微镜
•荧光显微镜
免疫组织化学（荧光素标记） 毛细血管内皮细胞呈vWF阳
性
2. 电镜技术:用于观察组织细胞的超微结构
分辨率：0.2nm
1) 透射电镜术
2)
(transmission electron microscopy,
水平(例：心脏)
上皮组织 结缔组织
神经组织
肌组织 心脏（左:器官 右:组织光镜图）
心脏 （心肌细胞光镜像图）
细胞(cell)是人体形态结构和功能 的基本单位，由细胞膜、细胞 质和细胞核构成。
成人约有1014-15个,200余种。
组织(tissue)是由细胞和细胞外基质构成
细胞外基质：由细胞分泌形成。
四种基本组织：上皮组织、结缔组织、 肌组织和神经组织。
几种组织相互有序地组合，具有一定的形态结构 和特定的生理功能构成器官(organ)。 系统(system)由形态结构相似或完全不同、能够 完成某种系列生理功能的器官组成。
二、组织学的研究方法和常用技术 1.光镜(light microscope)技术 光学显微镜分辨率：0.2µm
原位杂交 脐静脉内皮细胞呈心房钠尿肽阳性
6.放射自显影术（autoradiography）
•通过活细胞对某种放射性物质的特异性摄入, 以显示该物质在组织和细胞内的分布、含量 和代谢过程，借以反映细胞的功能状态。
•用3H标记。
放射自显影示幽门部胃 小凹底的干细胞 （3H标记的胸腺嘧啶核 苷标记）
抗原
抗体
荧光素
辣根过氧化物酶 胶体金
免疫组织化学原理模式图
免疫组织化学（荧光素标记） 毛细血管内皮细胞呈vWF阳性
免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记） 胰岛B细胞呈胰岛素阳性
免疫组织化学电镜图示上皮细胞膜MAM－6蛋白 （A 胶体金标记 B 辣根过氧化物酶标记）
5.原位杂交术（in situ hybridization）
组织学与胚胎学 Histology and Embryology
办 公 室---- 组织学绪论
Introduction of Histology
一、组织学的研究内容
1.概念： 组织学(histology)是研究正常人体
微细结构及其相关功能的科学。 研究内容：细胞、组织、器官与系统 研究水平：组织、细胞、亚细胞和分子
•核酸:福尔根反应显示DNA-紫红色； 甲基绿－派若宁反应，同时显示 DNA(蓝绿色)与RNA(红色)。
4.免疫组织化学（immunohistochemistry）
• 根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织 细胞中的多肽和蛋白质等大分子物质。
• 用标记的抗体与组织中的抗原结合，标记物 可于显微镜下观察。标记物有荧光素(荧光显 微镜观察)、辣根过氧化物酶(光镜或电镜观 察)、胶体金（多用于电镜观察）。
TEM): 以电子束穿透样品，经聚合放大后显
像于荧光屏上进行观察和摄片
戊二醛、锇酸双重固定→树脂包埋→超薄切
片(50~80nm)→电子染色(醋酸铀、柠檬酸铅)
根据电子束在不同结构上被散射程度的 差异表现为电子密度高(黑或深灰色)和电子 密度低(浅灰色).
透射电镜图，浆细胞
2) 扫描电镜术（scanning electron microscopy, SEM） 用于观察组织细胞表面立体结构，具有真实的立体感
• 即核酸分子杂交组织化学术，检测基因(DNA 片段)的有无、基因的表达活性(mRNA）。
• 原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探 针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特 异性原位结合(杂交),并通过对标记物的显示 而获知待测核酸的有无及相对量。
• 常用标记物有放射性同位素和非放射性物质 (地高辛等)。