乳酸菌的筛选及生物学特性的研究
乳酸菌菌种的培养筛选方法
乳酸菌菌种的培养筛选方法
简介
本文档介绍了乳酸菌菌种的培养筛选方法。
乳酸菌是一种有益菌，常被应用于食品工业和医药领域。
通过培养筛选方法，可以有效筛选出优质的乳酸菌菌种，以满足特定需求。
培养基准备
1. 选择适合乳酸菌生长的培养基，如MRS培养基。
2. 按照培养基的使用说明准备培养基溶液。
3. 灭菌培养基溶液，可使用高压灭菌器或高温灭菌法。
菌种接种
1. 从已有的乳酸菌菌种中选择适合的菌株。
2. 取一定量的菌种，注意保持无菌操作。
3. 将菌种转移到培养基中，可采用无菌环或吸管接种法。
4. 将接种好的培养基培养物置于恒温培养箱中，保持适宜的温度和氧气条件。
筛选方法
1. pH值筛选：选择适宜pH范围的培养基进行培养，通常在
pH 4-6之间。
2. 温度筛选：通过调整培养温度来筛选适应不同温度的菌种。
3. 抗性筛选：将菌种暴露在一定浓度的抗生素中，筛选出对抗
生素具有抗性的菌株。
4. 发酵性筛选：观察菌种在培养基中发酵的能力，以选择产酸
产气能力强的菌株。
筛选结果评估
1. 观察培养基的菌落形态，如形状、颜色等特征。
2. 测定菌株的生长速度和产酸量等。
3. 利用分子生物学方法进行菌株鉴定，如PCR、16S rRNA测
序等。
结论
通过以上培养筛选方法，可以高效地筛选出优质的乳酸菌菌种。
根据特定需求，可以选择适应不同环境和具有良好生产特性的菌株，为食品工业和医药领域的应用提供基础支持。
以上为乳酸菌菌种的培养筛选方法的简要介绍，希望对您有所帮助。
食品中乳酸细菌的筛选和鉴定
食品中乳酸细菌的筛选和鉴定食品是人类生活中不可或缺的一部分，而乳酸细菌则是食品产业中的重要组成部分。
乳酸细菌在食品加工过程中起着关键的作用，例如发酵乳制品、面包、啤酒等。
因此，筛选和鉴定食品中的乳酸细菌对于食品安全和质量的保障具有重要意义。
首先，筛选食品中的乳酸细菌应该从源头开始。
当我们选择原料时，应注意选择新鲜且有机的食材。
乳酸细菌通常存在于新鲜的奶制品、蔬菜和水果中。
因此，在生产过程中应该选择高质量的原料，以确保食品中含有丰富的乳酸细菌。
其次，对食品中的乳酸细菌进行鉴定也是非常重要的。
目前常用的方法有传统培养方法和分子生物学方法。
传统培养方法是通过将食品样品接种到乳酸菌富集培养基中，然后根据菌落形态和生理特性进行鉴定。
虽然该方法简单易行，但对于少数难以培养的乳酸细菌则无法准确鉴定。
分子生物学方法是近年来迅速发展的一种鉴定乳酸细菌的新方法。
这种方法基于对乳酸细菌基因组的分析，通过PCR、蛋白质电泳等技术手段来确定乳酸菌的种类和数量。
分子生物学方法具有快速、准确和高通量的特点，可以帮助我们更好地了解食品中乳酸细菌的情况。
此外，筛选合适的乳酸菌应具备以下特点。
首先，应具备较强的耐受性，能够在食品加工过程中存活和繁殖。
其次，应具备较好的产酸能力，确保食品发酵的质量和风味。
最后，应能够对食品中的有害细菌起到一定的抑制作用，从而保证食品的安全性。
乳酸细菌在食品发酵过程中起到的作用不仅仅是改善风味，还具有多种益处。
首先，乳酸细菌能够制造出多种有益物质，例如乳酸、对乳酸菌独有的多种抗菌物质等。
这些物质具有抗菌、抗氧化和免疫调节等作用，对人体健康有益。
其次，乳酸细菌可以帮助消化，改善肠道菌群的平衡，增加人体对营养的吸收。
此外，乳酸细菌还可以帮助降低肠道内有害菌的数量，提高人体的免疫力。
然而，在乳酸细菌的选择过程中也存在一些问题和挑战。
首先，不同种类的食品需要不同的菌株，因此我们需要根据具体产品的特点来选择适合的乳酸菌。
东北传统酱腌菜中耐盐乳酸菌的筛选、鉴定及其发酵特性研究
东北传统酱腌菜中耐盐乳酸菌的筛选、鉴定及其发酵特性研究目录一、内容概述 (2)1. 研究背景与意义 (2)2. 国内外研究现状 (3)3. 研究内容与方法 (4)二、材料与方法 (6)1. 材料选取 (6)东北传统酱腌菜样品采集 (7)耐盐乳酸菌分离纯化 (8)2. 实验室培养条件 (9)培养基选择与制备 (10)培养方法与步骤 (11)3. 耐盐乳酸菌筛选 (12)斜面初筛 (13)耐盐性测试 (14)4. 耐盐乳酸菌鉴定 (15)16S rDNA序列分析 (16)准备好凝胶电泳 (17)5. 发酵特性研究 (18)发酵条件优化 (19)产物分析 (20)三、结果与讨论 (21)1. 耐盐乳酸菌的筛选结果 (22)不同样品中的耐盐乳酸菌数量对比 (23)耐盐乳酸菌的生理生化特征 (24)2. 耐盐乳酸菌鉴定结果 (25)16S rDNA序列比对与分析 (26)准备好凝胶电泳图谱 (27)3. 发酵特性分析 (28)四、结论与展望 (29)1. 研究结论 (30)2. 研究创新点 (31)3. 研究不足与展望 (32)一、内容概述本研究聚焦于东北传统酱腌菜中耐盐乳酸菌的筛选、鉴定及其发酵特性，旨在深入挖掘和利用这一宝贵资源。
在筛选阶段，我们采集了多种东北传统酱腌菜样品，并经过严格筛选，成功分离出多株具有耐盐特性的乳酸菌。
这些乳酸菌在高盐环境中仍能保持旺盛的生长势头，显示出出色的耐盐能力。
我们运用先进的生理生化鉴定方法和分子生物学技术对这些乳酸菌进行了鉴定。
通过对比分析，确定这些菌株的分类地位及遗传特性，为东北传统酱腌菜的发酵剂提供科学依据。
在探究其发酵特性的过程中，我们对这些乳酸菌的生长曲线、产酸能力、耐盐能力等关键指标进行了系统研究。
这些研究结果不仅揭示了乳酸菌在酱腌菜发酵过程中的重要作用，还为其在工业生产中的应用提供了理论支持。
本研究不仅全面了解了东北传统酱腌菜中耐盐乳酸菌的种类和特性，还为优化酱腌菜生产工艺、提升产品质量提供了新的思路和方向。
食品中嗜酸乳酸菌的筛选与应用研究
食品中嗜酸乳酸菌的筛选与应用研究引言：食品安全和营养健康一直是人们关注的焦点。
乳酸菌作为一类益生菌，具有很强的生物活性和保健功能，被广泛应用于食品行业。
本文将讨论食品中嗜酸乳酸菌的筛选与应用研究。
第一部分：嗜酸乳酸菌的筛选方法自然界中存在海量的乳酸菌，包括嗜酸乳酸菌和耐酸乳酸菌。
嗜酸乳酸菌是指在低pH环境下可以快速生长和发酵的乳酸菌。
其筛选方法包括传统方法和分子生物学方法。
传统方法主要包括菌落计数法、筛选培养基法、生理生化方法等，而分子生物学方法主要包括PCR技术、16S rRNA测序等。
这些方法可以分离出具有鲜明特点的嗜酸乳酸菌菌株，为进一步的应用研究奠定基础。
第二部分：嗜酸乳酸菌在食品中的应用嗜酸乳酸菌在食品工业中有着广泛的应用前景。
首先，嗜酸乳酸菌可以应用于发酵乳制品，如酸奶、酸乳酪等。
通过嗜酸乳酸菌的发酵作用，乳制品不仅能延长保质期，还能增强其口感和营养成分。
其次，嗜酸乳酸菌还可以用于面包、饼干等烘焙食品的制作。
在这些制品中，嗜酸乳酸菌能够增加产品的口感、改善口味，并提高产品的质量和食品安全。
此外，嗜酸乳酸菌还可以用于肉制品的发酵腌制，如腊肠、腊肉等。
乳酸菌的发酵作用不仅可以提高产品的风味，还能促进蛋白质降解，增加产品的储存稳定性。
第三部分：嗜酸乳酸菌的保健功能研究嗜酸乳酸菌除了在食品加工中的应用外，其保健功能也备受重视。
嗜酸乳酸菌含有丰富的益生物质和乳果糖，能够改善肠道菌群结构，增强免疫力，同时还对抗肠道疾病有一定的预防作用。
此外，乳酸菌还具有排毒、抗氧化、抗菌等多种保健功效。
因此，人们开始将乳酸菌应用于保健品、营养补充剂的制作中，以满足现代人们对健康饮食的需求。
结论：食品中嗜酸乳酸菌的筛选与应用研究在食品工业中具有重要的意义。
通过选择适合的筛选方法，可以分离出优良的嗜酸乳酸菌菌株，并将其应用于食品工业中，以提高产品的质量和食品安全。
此外，嗜酸乳酸菌还具有丰富的保健功能，可以改善肠道菌群结构，增强免疫力，并对抗肠道疾病。
《乳酸菌胞外多糖的筛选、纯化及免疫活性研究》范文
《乳酸菌胞外多糖的筛选、纯化及免疫活性研究》篇一一、引言乳酸菌是一类重要的微生物，其产生的胞外多糖（Exopolysaccharides, EPS）具有多种生物活性，包括增强免疫力、抗肿瘤、抗氧化等作用。
因此，对乳酸菌胞外多糖的筛选、纯化及免疫活性研究具有重要的科学意义和应用价值。
本文旨在探讨乳酸菌胞外多糖的筛选、纯化方法及其免疫活性的研究进展。
二、乳酸菌胞外多糖的筛选1. 菌种筛选首先，从各种乳酸菌中筛选出能够产生胞外多糖的菌种。
通过观察菌株在培养基上的生长情况、产糖量的多少以及产糖速度的快慢等因素，初步筛选出具有产糖潜力的菌种。
2. 发酵条件优化对初步筛选出的菌种进行发酵条件的优化，包括温度、pH值、接种量、培养时间等因素的调整，以提高胞外多糖的产量和质量。
三、乳酸菌胞外多糖的纯化1. 初步纯化采用离心、沉淀、超滤等方法对发酵液中的胞外多糖进行初步纯化，去除杂质和未完全分解的物质。
2. 高级纯化通过凝胶过滤、离子交换、高效液相色谱等方法对初步纯化后的胞外多糖进行进一步纯化，得到较为纯净的胞外多糖样品。
四、免疫活性研究1. 细胞免疫实验通过细胞免疫实验，观察乳酸菌胞外多糖对免疫细胞的影响，包括刺激淋巴细胞增殖、促进细胞因子分泌等作用。
2. 动物实验通过动物实验，观察乳酸菌胞外多糖对动物免疫功能的影响，包括增强体液免疫、细胞免疫等作用，以及其对肿瘤的抑制作用等。
五、结果与讨论经过筛选、纯化后的乳酸菌胞外多糖具有较高的纯度和生物活性。
在细胞免疫实验和动物实验中，均表现出较强的免疫增强作用，能够刺激免疫细胞增殖、促进细胞因子分泌，增强体液免疫和细胞免疫等作用。
此外，乳酸菌胞外多糖还具有抗肿瘤、抗氧化等作用，具有广泛的应用前景。
在研究过程中，我们还发现乳酸菌胞外多糖的产量和纯度受发酵条件、菌种类型等多种因素的影响。
因此，在今后的研究中，需要进一步探讨不同因素对乳酸菌胞外多糖产量和纯度的影响，以及不同来源的乳酸菌胞外多糖的生物活性差异等方面的内容。
乳酸菌菌种的分离筛选原理
乳酸菌菌种的分离筛选原理乳酸菌是一类广泛存在于自然界中的益生菌，广泛应用于食品、饲料、医药等领域。
乳酸菌菌种的分离筛选是乳酸菌应用研究中的重要一环，其目的是从大量的混合菌群中筛选出具有优良特性的菌株。
乳酸菌菌种的分离筛选原理主要包括以下几个方面：1. 选择合适的培养基：乳酸菌菌种对营养要求较高，因此选择适宜的培养基是分离筛选的首要步骤。
常用的培养基有MRS培养基、DC培养基等，它们含有适宜乳酸菌生长的营养成分，能提供所需能量和营养物质。
2. 适宜的培养条件：乳酸菌对培养环境的温度、pH、氧气和二氧化碳等条件有一定要求。
通常情况下，乳酸菌分离筛选需要在适宜的温度（一般为30-40）下进行，pH值保持在4.5-7.0之间，氧气和二氧化碳含量适中。
3. 分离方法：乳酸菌菌种的分离常采用传统的分离培养技术，如层析法、稀释平板法、摇瓶培养法等。
其中，层析法是一种常用的快速分离方法，通过将混合菌群在筛选培养基上涂抹或刺激，使不同菌株在筛选培养基上形成分离的菌落。
4. 鉴定鉴别：乳酸菌菌种的筛选与鉴定是不可分割的一步，只有确定菌株的种属和特性才能真正确认其乳酸菌的菌种类型。
目前，常用的鉴定方法包括形态学观察、生理和生化特性检测、分子生物学方法（如PCR技术、16S rDNA序列分析）等。
在乳酸菌菌种的分离筛选过程中，还需要注意以下几个问题：1. 选择样品：样品的选择对于乳酸菌菌种的分离筛选至关重要。
通常情况下，从乳制品、肠道、土壤等环境中寻找潜在的乳酸菌菌种，可以提高分离到优良菌株的几率。
2. 优化培养条件：对于特殊的乳酸菌菌种，可能需要优化培养条件，如调整温度、添加特定的营养成分等，以促进其生长和繁殖。
3. 评价筛选结果：乳酸菌菌种的分离筛选结果需要综合考虑其特性和应用价值。
如菌株的酸奶生产能力、耐酸碱能力、抗菌能力、抗氧化能力等。
总结起来，乳酸菌菌种的分离筛选原理主要包括选择合适的培养基和培养条件、采用适当的分离方法和鉴定鉴别技术。
乳酸菌的分离与筛选具体实验流程
乳酸菌的分离与筛选具体实验流程1. 引言1.1 背景介绍乳酸菌是一类广泛存在于自然界中的细菌，它们能够以乳酸为代谢产物进行无氧发酵，并且在食品工业、农业和医学领域具有重要的应用价值。
乳酸菌不仅能够促进食品品质的改善和保鲜，还对人体健康具有积极影响。
然而，目前市面上存在许多商业化的乳酸菌制剂，其有效成分及效果并不尽相同。
因此，研究和筛选出优质活性的乳酸菌种类，具有重要意义和广阔前景。
1.2 研究意义本研究旨在通过分离与筛选方法得到高活性的乳酸菌。
通过该研究可以加深我们对乳酸菌及其作用机制的理解，并为特定领域如食品工业、农业等提供先进的技术支持和解决方案。
此外，筛选出具有优良特性的乳酸菌株也将为开发新型功能性食品、生物农药等领域的产品提供重要支持。
因此，本研究对于推动食品工业、农业发展具有积极意义。
1.3 实验目的本实验主要目的如下：- 收集和处理样品：收集富含乳酸菌的样品，并经过适当处理以提高分离效果。
- 选择与制备分离培养基：根据乳酸菌的特性选择适合的培养基并进行制备。
- 设定分离培养条件：通过调控温度、pH值等参数，确定适宜的乳酸菌分离培养条件。
- 鉴定活性乳酸菌指标：确定评价乳酸菌活性和质量的指标，并进行相关试验和检测。
- 设计与实施筛选试验：根据所选指标设计筛选试验，并在实验中采用相应方法进行实施。
- 可行性评估与结果分析：对筛选试验结果进行评估和分析，并总结可行性及相关优化建议。
通过以上实验流程，我们旨在深入了解乳酸菌的特点及其在不同领域中应用潜力，并为进一步研究和开发具有市场竞争力的乳酸菌产品提供理论和实践基础。
2. 乳酸菌的分离方法2.1 样品收集与处理在乳酸菌的分离研究中，样品的选择和处理十分重要。
我们可以选择不同来源的样品，如发酵食品、生态环境等。
收集样品后，需要进行适当的处理以消除非目标微生物对于乳酸菌生长和筛选的干扰。
常见的样品处理方法包括冷藏、过滤、稀释等。
2.2 分离培养基选择与制备为了促进乳酸菌的分离和生长，在实验中需要选择适宜的分离培养基。
食品中乳酸菌的筛选与活性鉴定
食品中乳酸菌的筛选与活性鉴定乳酸菌是一类对人体健康具有益处的细菌，在许多食物中都可以找到它们的踪迹。
从酸奶到发酵食品，乳酸菌都发挥着重要的作用。
然而，如何筛选出具有较高活性的乳酸菌，并对其进行鉴定，这是一个令人感兴趣的话题。
首先，我们需要选择适当的食品样本进行筛选。
常见的食品包括酸奶、奶酪、纳豆等发酵产品。
这些食品中含有大量的乳酸菌，因此是我们进行筛选的理想选择。
此外，还可以考虑其他一些食物，如蔬菜和肉类，它们也可能含有乳酸菌。
接下来，我们需要从样本中分离出乳酸菌。
这可以通过培养基选用和分离培养来实现。
培养基的选用非常重要，它应提供乳酸菌所需要的营养物质。
我们可以选择常用的乳酸菌培养基，如MRS培养基。
通过将样品接种于MRS培养基中，我们可以让乳酸菌生长并形成可见的菌落。
然后，通过将这些菌落转移至其他培养基中，可以进行单菌落分离，确保我们获得的是纯种的乳酸菌菌株。
鉴定乳酸菌的活性也是我们的重点之一。
活性乳酸菌可以产生乳酸、酶和抗菌物质，这些物质对人体健康有益。
因此，我们想要筛选出活性较高的乳酸菌菌株。
常见的活性鉴定方法包括测定乳酸产量、酶活性和抗菌活性。
乳酸产量是乳酸菌活性的重要指标之一。
我们可以通过高效液相色谱法（HPLC）来测定乳酸的含量。
通过将培养基或发酵物转移到HPLC系统中，我们可以分析出乳酸的浓度。
通过与不同菌株之间的比较，我们可以确定哪些菌株产乳酸的能力更强。
酶活性是另一个衡量乳酸菌活性的重要指标。
乳酸菌常常能够产生多种酶，如蛋白酶和纤维素酶。
我们可以使用相应的酶活性试剂盒来检测其酶活性。
高酶活性的乳酸菌意味着它们能够更好地消化蛋白质和纤维素，从而提高食物的可消化性和营养吸收能力。
除了乳酸和酶活性外，抗菌活性也是评估乳酸菌活性的重要指标之一。
乳酸菌可以产生抗菌物质，对抗病原菌的侵袭。
我们可以通过抗菌活性试验来评估乳酸菌的抗菌能力。
将不同乳酸菌菌株与病原菌一起接种在琼脂平板上，观察是否形成抑制区域。
抑制副溶血性弧菌的乳酸菌筛选鉴定及其生物学特性研究
基金项目：浙江省基础公益研究计划（编号：ＬＧＮ２２Ｄ０６０００３）；浙江省生物工程重中之重学科项目（编号：ＺＳ２０１７００５）；浙江省“生物工程”一流学科（Ａ类）学生创新计划项目（编号：ＳＺ１００００１２００５０５０）作者简介：于晨，女，浙江万里学院在读硕士研究生。
通信作者：袁勇军（１９７６—），男，浙江万里学院教授，硕士生导师，博士。
Ｅ ｍａｉｌ：ｙｕａｎ２００７０１９＠１６３．ｃｏｍ收稿日期：２０２２ ０９ １３ 改回日期：２０２３ ０１ ０７犇犗犐：１０．１３６５２／犼．狊狆犼狓．１００３．５７８８．２０２２．８０７９６［文章编号］１００３ ５７８８（２０２３）０６ ００１２ ０７抑制副溶血性弧菌的乳酸菌筛选鉴定及其生物学特性研究Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ，ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｒｉａｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ犞犻犫狉犻狅狆犪狉犪犺犪犲犿狅犾狔狋犻犮狌狊于 晨犢犝犆犺犲狀 杨 露犢犃犖犌犔狌 管 峰犌犝犃犖犉犲狀犵 张 捷犣犎犃犖犌犑犻犲 袁勇军犢犝犃犖犢狅狀犵 犼狌狀（浙江万里学院生物与环境学院，浙江宁波 ３１５１００）（犆狅犾犾犲犵犲狅犳犅犻狅犾狅犵犻犮犪犾犪狀犱犈狀狏犻狉狅狀犿犲狀狋犪犾犛犮犻犲狀犮犲狊，犣犺犲犼犻犪狀犵犠犪狀犾犻犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔，犖犻狀犵犫狅，犣犺犲犼犻犪狀犵３１５１００，犆犺犻狀犪）摘要：目的：丰富功能性乳酸菌资源库，寻找具有副溶血性弧菌拮抗能力的优良乳酸菌出发菌株。
方法：采用牛津杯抑菌试验筛选具有广谱抑菌潜力的乳酸菌菌株，通过生长代谢性能、胃肠液耐受性能、耐盐性、抗生素敏感性、抑菌谱等指标探讨其生物学特性。
结果：以副溶血性弧菌为指示菌，筛选得到６株乳酸菌，经形态学、生理生化、分子生物学鉴定，分别归类于类干酪乳酪杆菌、发酵黏液乳杆菌和植物乳植物杆菌。
其中，类干酪乳酪杆菌Ａ１抑菌活性最佳，２４ｈ内菌落总数超过１×１０９ＣＦＵ／ｍＬ，发酵液ｐＨ值稳定在４．１左右，经人工模拟胃液处理２ｈ后，存活率为５４．６１％，再经人工模拟肠液处理８ｈ后，存活率仍可达４５．４６％，经１０％ＮａＣｌ胁迫处理２４ｈ后，活菌总数＞１×１０５ＣＦＵ／ｍＬ。
《乳酸菌胞外多糖的筛选、纯化及免疫活性研究》范文
《乳酸菌胞外多糖的筛选、纯化及免疫活性研究》篇一一、引言乳酸菌作为益生菌的一种，具有调节肠道菌群平衡、增强免疫力等重要功能。
其中，乳酸菌胞外多糖（Exopolysaccharides，EPS）作为乳酸菌的重要代谢产物，具有多种生物活性，如抗肿瘤、抗氧化、免疫调节等。
因此，对乳酸菌胞外多糖的筛选、纯化及免疫活性研究具有重要的理论和实践意义。
本文旨在通过实验研究，探讨乳酸菌胞外多糖的筛选、纯化方法及其免疫活性的作用机制。
二、材料与方法1. 材料（1）菌种：选择不同种属的乳酸菌进行实验。
（2）培养基：根据实验需要，配置不同的培养基。
（3）试剂：如乙醇、丙酮、硫酸铵等。
2. 方法（1）筛选方法：采用薄层层析法、紫外-可见光谱法等手段，对乳酸菌产生的EPS进行筛选。
（2）纯化方法：通过醇沉法、硫酸铵沉淀法等方法对EPS 进行纯化。
（3）免疫活性研究：采用体外实验和动物实验相结合的方法，观察EPS对免疫细胞的刺激作用，评估其免疫活性。
三、实验结果1. EPS的筛选结果通过薄层层析法、紫外-可见光谱法等手段，成功筛选出具有较高EPS产量的乳酸菌菌株。
经过对比分析，发现不同菌株产生的EPS在化学组成和分子量等方面存在差异。
2. EPS的纯化结果采用醇沉法、硫酸铵沉淀法等方法对EPS进行纯化。
经过纯化后的EPS，其纯度得到显著提高，为后续研究提供了可靠的实验材料。
3. 免疫活性研究结果（1）体外实验：通过观察EPS对免疫细胞的刺激作用，发现EPS能够显著提高免疫细胞的活性，促进细胞因子的分泌。
（2）动物实验：通过观察EPS对动物免疫功能的影响，发现EPS能够显著提高动物的免疫力，增强机体的抗病能力。
此外，EPS还具有抗肿瘤作用，能够显著抑制肿瘤细胞的生长。
四、讨论通过对乳酸菌胞外多糖的筛选、纯化及免疫活性研究，我们得出以下结论：1. 不同菌株产生的EPS在化学组成和分子量等方面存在差异，这可能与菌株的遗传特性、培养条件等因素有关。
《乳酸菌胞外多糖的筛选、纯化及免疫活性研究》范文
《乳酸菌胞外多糖的筛选、纯化及免疫活性研究》篇一一、引言乳酸菌作为一种益生菌，因其能够调节肠道微生态平衡，促进肠道健康而备受关注。
近年来，研究发现乳酸菌的胞外多糖（Exopolysaccharides, EPS）在保持益生菌的生理功能中发挥着重要作用。
乳酸菌EPS具有提高机体免疫力、抗氧化、降血脂等多种生物活性。
因此，筛选出具有优良性能的乳酸菌EPS并研究其纯化及免疫活性具有重要意义。
二、乳酸菌胞外多糖的筛选1. 菌种来源本研究所用菌种来源于多种乳酸菌菌株，通过初步筛选，选择具有高产EPS特性的菌株进行深入研究。
2. EPS提取采用适宜的提取方法，如热水浸提法、有机溶剂浸提法等，从筛选出的乳酸菌中提取EPS。
提取过程中需注意温度、时间等条件对EPS产量的影响。
3. EPS纯化将提取得到的EPS进行纯化处理，包括脱盐、浓缩、透析等步骤。
在纯化过程中，可采用色谱法、超滤法等方法进一步纯化EPS。
三、乳酸菌胞外多糖的纯化1. 纯化方法本部分主要介绍采用高效液相色谱法（HPLC）和超滤法对EPS进行纯化的方法。
HPLC法可有效分离不同分子量的EPS组分，超滤法则可去除EPS中的杂质和低分子量组分。
2. 纯化效果评价通过对比纯化前后EPS的物理化学性质、分子量分布、结构特点等，评价纯化效果。
同时，采用高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS）对纯化后的EPS进行结构分析。
四、乳酸菌胞外多糖的免疫活性研究1. 动物实验采用动物实验研究EPS的免疫活性。
将EPS以适当剂量喂食实验动物，观察其对动物免疫系统的影响，如对免疫器官发育、免疫细胞数量和功能的影响等。
2. 细胞实验通过细胞实验研究EPS对免疫细胞的刺激作用及信号传导机制。
采用流式细胞术、荧光定量PCR等技术检测EPS对免疫细胞表面标志物、细胞因子分泌等的影响。
3. 结果分析根据实验结果，分析EPS的免疫活性及其作用机制。
同时，结合文献报道的其他乳酸菌EPS的免疫活性研究结果，进行综合分析。
发酵食品中乳酸菌的菌株筛选研究
发酵食品中乳酸菌的菌株筛选研究发酵食品是人们日常饮食中不可或缺的一部分，其制作过程中乳酸菌的菌株筛选尤为重要。
乳酸菌是一类常见的革兰氏阳性菌，能在无氧条件下通过糖的发酵产生乳酸。
乳酸菌不仅能够改善食品的品质和口感，还具有许多益生功能，有助于人体健康。
因此，针对乳酸菌的菌株筛选研究具有重要的科学和实践价值。
乳酸菌的菌株筛选主要包括从自然界中获取潜在乳酸菌原料，以及通过人工试验筛选。
在自然界中，乳酸菌广泛存在于发酵食品和环境中。
人们可以从乳制品如酸奶、酸牛奶以及发酵蔬菜等中获取到乳酸菌，并进行初步的筛选。
通过酸度、菌落形态、甜酸味等性状，可以初步判断乳酸菌的品质和潜力。
然而，人工试验筛选对于乳酸菌菌株的选育更为有效和精确。
该方法主要通过一系列的实验条件模拟发酵食品的环境，如温度、pH值、氧气含量等，以及添加适当的培养基和营养物质。
菌株筛选的关键是筛选出能够快速发酵、产酸量高、菌株稳定的菌株，而且在发酵过程中不会产生有害物质。
乳酸菌的菌株筛选过程中，不仅要考虑食品的理化性质，还需要关注与人体健康相关的生理功能。
近年来，随着人们对健康食品的需求不断增加，对于乳酸菌发酵食品的功能性要求也越来越高。
例如，有研究表明某些乳酸菌菌株具有抗菌作用、改善肠道菌群、促进营养吸收等功能。
因此，在菌株筛选时，除了对菌株的发酵性能进行评价外，还需要对菌株的生理功能进行检测。
菌株筛选过程中，一般会选取一些重要的指标进行评价。
常见的指标包括生长速度、发酵时间、产酸量和产酸速率等。
同时，还需要利用一系列生化和遗传学技术对菌株进行鉴定，如酸酶谱、电泳图谱分析、16S rDNA序列分析等。
这些技术可以帮助鉴定菌株的物种分类和亲缘关系，了解菌株的遗传多样性，为菌株的选育和应用提供科学依据。
乳酸菌的菌株筛选不仅在食品工业中具有重要意义，还对人类健康产生积极的影响。
乳酸菌作为一种常见的益生菌，对人体具有多种益处。
首先，乳酸菌能够调节肠道菌群的平衡，促进益生菌的生长抑制有害菌的繁殖，从而增强人体对病原微生物的抵抗力。
食品加工中乳酸菌的筛选与应用
食品加工中乳酸菌的筛选与应用食品加工是人们日常生活中不可或缺的一部分。
随着人们对食品质量和健康的关注度不断提高，乳酸菌作为一种有益微生物备受关注。
乳酸菌的筛选与应用对于食品加工行业来说具有重要意义，下面我们来了解一下乳酸菌筛选的方法以及其在食品加工中的应用。
一、乳酸菌的筛选方法乳酸菌是一类常见的益生菌，具有抗菌、抗肿瘤、降血脂等多种功能。
在食品加工中，需要选用菌株进行乳制品、酸奶、发酵蔬菜等食品的制作，因此，乳酸菌的筛选非常重要。
目前，常用的乳酸菌筛选方法主要有以下几种。
首先是酸奶乳酸菌的筛选。
酸奶是一种常见的乳制品，乳酸菌在其中起到发酵作用。
筛选酸奶乳酸菌主要依靠其形态特征和代谢产物。
乳酸菌通常呈链状、球状等形态，也会产生乳酸和醋酸。
通过观察菌落形态和酸度的变化，可以初步确定乳酸菌的种类。
其次是发酵蔬菜中的乳酸菌筛选。
发酵蔬菜是另外一种常见的食品，其中的乳酸菌对保持蔬菜的新鲜度和产生特殊的风味有着重要作用。
筛选发酵蔬菜中的乳酸菌主要依靠发酵过程中的酸度和气味变化。
乳酸菌可以产生乳酸和一些挥发性化合物，通过观察酸度的变化和气味的特殊性，可以初步确定乳酸菌的种类。
最后是基因分析法。
随着科技的不断进步，乳酸菌的筛选越来越多地采用基因分析法。
基因分析法通过对乳酸菌的基因组进行测序和分析，可以准确地确定其物种和亲缘关系。
这种方法不仅可以快速准确地筛选乳酸菌，还可以为乳酸菌的进一步研究提供数据支持。
二、乳酸菌在食品加工中的应用乳酸菌在食品加工中具有广泛的应用价值。
首先是酸奶制作。
酸奶是一种受人们喜爱的乳制品，其中含有丰富的乳酸菌。
乳酸菌能够将乳糖转化为乳酸，降低酸奶的pH值，抑制有害菌的生长，同时还赋予酸奶独特的口感和风味。
其次是乳制品的保鲜。
乳酸菌产生的乳酸具有抗菌作用，可以抑制一些有害菌和腐败菌的生长，延长乳制品的保质期。
乳酸菌还可以产生一些挥发性化合物，赋予乳制品特殊的风味和香味。
此外，乳酸菌还可以用于发酵蔬菜的制作。
高产细菌素乳酸菌的筛选（方案）
⾼产细菌素乳酸菌的筛选（⽅案）项⽬⼀⾼产细菌素乳酸菌的筛选⼀、概述1、乳酸菌乳酸菌是⼀群形态、代谢性能和⽣理学特征不完全相同的⾰兰⽒阳性菌( G+) 的统称，在发酵碳⽔化合物时其代谢产物主要为乳酸。
乳酸菌形态多样，通常不运动，乳酸菌微好氧，在固体培养基上培养时，采⽤厌氧或低氧压可增加其在表⾯的⽣长物，乳酸菌的⽣长温度在20~53℃，最适温度是30~40℃，耐酸，最适pH 通常是5.5~6.2，⼀般pH在5.0 或更低情况下可以⽣长，在碱性或中性条件其⽣长速率降低。
2、细菌素细菌素是由细菌在代谢过程中通过核糖体合成产⽣的⼀类具有抑菌活性的蛋⽩质或多肽，主要对同源和近缘的细菌有抑制作⽤，在产⽣细菌素的同时还会产⽣免疫蛋⽩，从⽽避免细菌素对⾃⾝细胞的杀伤作⽤。
乳酸菌素是乳酸菌在代谢过程中，合成并分泌到环境中的⼀类对⾰兰⽒阳性菌，尤其是亲缘较近的细菌具有抑菌作⽤的杀菌蛋⽩或多肽乳酸菌素( Nisin) 是乳酸球菌代谢过程中合成和分泌的具有很强杀菌作⽤的物质。
作为乳酸菌细菌素，许多证据表明，Nisin对细胞主要作⽤在细胞质膜，⽽对细菌的杀菌作⽤是由于在菌膜上形成空洞，使膜的通透性增⼤。
⼆、实验⽬的1.熟练掌握培养基的接种，抑菌试验。
2.掌握培养基的配制原则与⽅法。
3.了解⽜津杯法，并能规范操作相关步骤。
三、实验内容1.材料与试剂泡菜⼤肠杆菌、⾦黄⾊葡萄球菌1mol/L NaOH、和HCl溶液、pH试纸、⽊⽠蛋⽩酶、双氧⽔2．培养基①MRS培养基: 蛋⽩胨10g、⽜⾁膏10g、酵母膏5g、柠檬酸氢⼆铵2g、葡萄糖20g、吐温80 1mL、⼄酸钠5g、磷酸氢⼆钾2g、硫酸镁0.58g、硫酸锰0.25g、琼脂18g、蒸馏⽔1000mL,②⽜⾁膏蛋⽩胨固体培养基：⽜⾁膏3.00g、蛋⽩胨5.00g、NaCl3.00g、蒸馏⽔1000ml、琼脂粉8.00g、115℃灭菌20min。
③⽯蕊⽜奶培养基：⽜奶培养基(⽜奶培养基的制备取脱脂奶粉，制成10%的溶液) ，每100ml中加⼊2.50ml⽯蕊⼄醇溶液( 取⽯蕊20g，研磨后置锥形瓶中，加⼊40%⼄醇150ml，煮沸1min，倒出上层液，再加⼊40%⼄醇150ml，煮沸1min，倒出上层液，与第1次倒出液合并，再以40%⼄醇加⾄全量为300ml，滴加1mol/L 盐酸，随加随振摇，⾄溶液变紫⾊为⽌,pH6.0~8.0，混匀，取5~10ml分装于试管中，115℃灭菌20min。
发酵食品中乳酸菌的功能鉴定与筛选
发酵食品中乳酸菌的功能鉴定与筛选在我们的日常生活中，发酵食品是不可或缺的一部分。
无论是酸奶、酸菜还是啤酒，它们都是通过乳酸菌的发酵作用而产生的。
但是，我们知道乳酸菌不仅仅只有发酵的功能，它还具备着许多其他的益处。
因此，对于发酵食品中乳酸菌的功能鉴定与筛选，具有重要的意义。
功能鉴定是指通过实验和测试，了解乳酸菌在食品中的具体功能和效果。
首先，鉴定乳酸菌的抗菌能力是一项重要的功能。
通过抑制其他有害菌的生长，乳酸菌能够保持食品的卫生安全。
其次，乳酸菌的产酸能力也是功能鉴定的重点之一。
乳酸的产生会使食物呈现出酸性，这不仅有助于保持食品的新鲜度，还能抑制有害菌的生长。
最后，功能鉴定还包括乳酸菌的抗氧化能力、调节肠道菌群平衡等。
当我们完成了乳酸菌的功能鉴定后，接下来就需要进行筛选，以选出优质的乳酸菌菌种。
筛选的方法有很多种，其中最常用的是理化指标法和生物学指标法。
理化指标法主要是通过测定乳酸菌产酸、产气、耐酸和耐热等性能来筛选合适的菌株。
这种方法能够对乳酸菌的基本性质进行初步评估，并快速进行筛选。
而生物学指标法则是通过检测乳酸菌对人体健康的影响来筛选菌种。
例如，观察乳酸菌对肠道菌群平衡的调节效果、对免疫系统的影响等。
这些生物学指标可以更好地衡量乳酸菌菌种的功能和效果。
在功能鉴定和筛选乳酸菌菌种的过程中，我们也需要注意一些问题。
首先，在筛选乳酸菌时，要考虑到乳酸菌的耐受能力。
有一些菌株在强酸或高温条件下表现出较强的耐受能力，这对于发酵食品的质量和储存稳定性都是至关重要的。
其次，在饮食习惯和健康需求方面，也需要进行相应的筛选。
不同的人群对于乳酸菌的需求和反应可能有所不同，因此要选择适合的乳酸菌菌种。
发酵食品中乳酸菌的功能鉴定与筛选，是一个需要科学、精确和细致的过程。
它涉及到食品的质量和安全问题，也关系到人们的健康和生活质量。
因此，在进行功能鉴定和筛选时，我们需要综合考虑多个因素，如抗菌能力、产酸能力、抗氧化能力、调节肠道菌群平衡等。
酸奶发酵过程中乳酸菌菌株的筛选与鉴定
酸奶发酵过程中乳酸菌菌株的筛选与鉴定酸奶是一种由牛奶或者其他乳制品通过乳酸菌的发酵而制成的食品。
乳酸菌是酸奶发酵的关键因素，具有良好的保健效果和口感。
在酸奶制作过程中，乳酸菌菌株的筛选与鉴定是非常重要的步骤。
本文将介绍酸奶发酵过程中乳酸菌菌株的筛选与鉴定的方法和意义。
首先，乳酸菌菌株的筛选是为了选择出适合酸奶发酵的优质菌株。
在酸奶制作中，菌株的特性包括产酸能力、耐受性、生长速度和抗菌特性等多方面。
通过筛选过程，可以找到产酸量高、生长快速、对不良菌有抑制作用的优质菌株。
这些菌株可以在酸奶制作中快速发酵，产生出优质的酸奶。
乳酸菌菌株的筛选方法有很多种，常见的包括传统筛选法、分子筛选法和生理筛选法等。
传统筛选法是指利用一系列的生理、生化和形态特性对菌株进行初步筛选。
通过这种方法，可以初步判断菌株是否具有发酵酸奶的潜力。
分子筛选法则是通过利用分子生物学技术对乳酸菌菌株进行检测，例如PCR扩增、16S rRNA测序等。
这些方法可以对菌株的遗传信息进行分析，从而确定其种属和亲缘关系。
生理筛选法则是根据菌株在不同环境条件下的生长情况，筛选出适应性强、产酸能力高的菌株。
乳酸菌菌株的鉴定是为了确保酸奶发酵过程中使用的菌株的纯度和品质。
鉴定的目的是确定菌株的种属和亚种，以及其在酸奶制作中的适用性。
鉴定的方法多样化，常用的有生化鉴定法、微生物学鉴定法和分子生物学鉴定法等。
生化鉴定法是利用菌株在特定培养基和条件下的代谢特征进行分析，通过菌株对不同物质的反应情况来确定其种属。
微生物学鉴定法则是通过观察菌株的细胞形态、培养特性等进行判断。
分子生物学鉴定法则是通过测序菌株的特定基因序列，例如16S rRNA，来确定菌株的种属和亲缘关系。
乳酸菌菌株的筛选与鉴定在酸奶发酵过程中具有重要的意义。
通过合适的筛选和鉴定方法，可以保证酸奶发酵的质量和稳定性。
优质的菌株不仅可以提高酸奶的口感和品质，还具有益生菌的功能，对消化系统和免疫系统有益。
乳酸菌分离鉴定及试验方法
乳酸菌分离鉴定及试验方法
乳酸菌的分离鉴定主要包括以下步骤：
1. 菌落筛选：根据菌落的颜色、大小、光泽度和透明程度，挑取含溶钙圈的单菌落。
2. 分离纯化：在MRS或Elliker固体培养基上反复划线分离，直到分离到纯的单一菌落。
3. 革兰氏染色：镜检观察菌体颜色、大小、形状和排列方式。
4. 过氧化氢酶实验：将革兰氏染色阳性、过氧化氢酶阴性的菌株初步认定为乳酸菌。
5. 保藏：用终浓度为25%甘油冻存管进行菌株的保藏，置于-80℃冰箱中保存备用。
乳酸菌的试验方法主要包括以下步骤：
1. 耐酸性优良菌株筛选试验：将分离纯化的乳酸菌和实验室耐酸性较好的WHH544接种到MRS液体培养基中，接种量为2%，于37℃培养箱中培养24小时，连续活化2代后，以6000r/min离心10分钟，弃去上清液，沉淀菌体用灭菌生理盐水洗涤、离心2次后，通过麦氏比浊法调整菌悬液浓度为×108CFU/mL。
2. 其他试验：根据具体研究需求进行相关试验，例如通过不同条件培养，观察菌株生长情况；或通过发酵实验，测定乳酸菌的产酸能力等。
以上内容仅供参考，建议查阅专业微生物学书籍或文献获取更全面和准确的信息。
泡菜纯种发酵优良乳酸菌的筛选及菌株特性研究
泡菜纯种发酵优良乳酸菌的筛选及菌株特性研究张冬梅,于康宁,涂 强,艾 方,彭丽桃3(华中农业大学食品科技学院,湖北武汉430070)摘 要:从不同时期的新鲜泡菜汁中分离得到18株乳酸菌,筛选出2株发酵萝卜产酸能力强、风味好、亚硝酸盐含量低的菌株,经鉴定分别为肠膜明串珠菌肠膜亚种和戊糖乳杆菌。
对这2株菌生长特性的测试结果表明:2株菌的生长温度范围较宽,最适生长温度均为37℃,最适生长pH 值均为6～8,肠膜明串珠菌对酸度和盐度的耐受性比戊糖乳杆菌差,肠膜明串珠菌在pH 值<4和盐浓度>8%时生长停滞,戊糖乳杆菌能够耐受pH 值<3和盐浓度>8%的生长条件。
肠膜明串珠菌和戊糖乳杆菌在MRS 培养基中对初始亚硝酸盐的降解率分别为84196%和93117%。
关 键 词:泡菜;肠膜明串珠菌;戊糖乳杆菌;筛选;特性中图分类号:TS20113 文献标识码:A 文章编号:0254-5071(2008)16-0022-04Isol a ti on,i den ti f i ca ti on and character isti cs of l acti c ac i d bacter i a fro m p i cklesZ HANG Dong mei,Y U Kangning,T U Q iang,A I Fang,PE NG L itao 3(College of Food Science and Technology,Huazhong Agricultural U niversity,W uhan 430070,China )Abstract:18Strains of lactic acid bacteria were is olated and identified from pickling cabbage and radish during vari ous fer mentati on stages 1T wo strains were selected for having excellent characteristics in acid production,fer mentation flavor and low nitrite concentration when p ickling radish 1These t w o strains were identified as Leuconostoc m esenteroides subsp 1M esenteroides and Lactobacillus pentosus 1The characteristics of strains were als o investigated 1The strains could t olorate a wide range of temperature,the opti m al growth situation for them were at 37℃and at pH 6281Lactobacillus pentosus had better ability of acid and salty t olerance than Leuconostoc m esenteroides,Leuconostoc m esenteroides could gr ow when pH value is under 3or content of salts is up to 8%,while Lactobacillus pentosus could not grow when pH value under 4or content of salt up t o 8%1Leuconostoc m esenteroides and Lactobacillus pentosus depleted 84196%and 93117%of the initial nitrite p resent in de Man,Rogosa and Shar pe br oth cultural mediu m,res pectively 1Key words:pickles;Leuconostoc m esenteroides ;Lactobacillus pentosus;is olation;characteristics收稿日期:2008206217作者简介:张冬梅(19842),女,硕士,研究方向为食品加工;彭丽桃3,通讯作者,E 2mail:penglt12@mail 1hzau 1edu 1cn 。
泡菜中乳酸菌的筛选及其生物学特性的研究
Ｋｅ ｒ ｓ： ｉ ｋ ｉ ｇ ｖ ｇ ｔｂ ｅ ；ｌ ｃｉ ｃｄ ｂ ｃｅ ｉ ｍ ；ｓ ｒ ｅ ｉ ｇ；ｂｉｌ ｇｃ ｌｐ ｏ ｅｔｅ ｙ ｗｏ ｄ ｐ ｃ ｌｎ ｅ ｅａ ｌ ｓ ａ ｔ ａ ｉ ａ ｔｒｕ ｃ ｃｅ ｎｎ ｏｏ ｉ ａ ｒ ｐ ｒｉ ｓ
７． ０．
１ １２ ３ Ｐ ． ． ． Ｙ基 础 培 养 基 ： 白胨 ０ ５ｇ胰 酶 解 酪 朊 ０ ５ｇ 酵 母 提 取 物 １ ， 溶 液 ４ｍＬ 盐 溶 液 成 分 （ ） 无 水 Ｃ Ｃ： ． ， 蛋 ． ， ． ， ０ｇ 盐 （ Ｌ ： ａ １０ ２ｇ
ＭｇＯ ７ ２ ．８ｇ ２ Ｐ ４ ． ， Ｈ Ｐ １０ｇ Ｎ ＨＣ ３ ０ ０ｇ Ｎ Ｃ ． ， Ｓ ． Ｈ Ｏ０ ４ ，Ｋ Ｈ Ｏ ０ｇ Ｋ Ｏ ． ， ａ Ｏ ． ， ａ １ ０ｇ） 蒸馏水 １０ｍ ， １ １ ２ ０ Ｌ 添加溴 甲酚紫作 为指示
泡菜属乳酸菌发酵食品 ， 在我 国已有几 千年 的历史． 传统 的泡 菜加工 方法具 有发酵 周期 长 ， 品稳定 性差 ， 产 大规 模生 产 难， 亚硝 酸盐含量高等弊端 ， 重制 约了蔬菜发酵工业 的发展． 严 从食 品营养 和安全角度来 讲 ， 纯种乳酸菌发酵 能解决传统泡 菜 所存在 的不足 ， 具有重要 的社会和经济意义… ． 乳酸菌作为 一种益生 菌 ， 人体具有 降低胆 固醇水平 ， 对 降血 压 ， 节肠道微 生 调
泡 菜 中乳酸 菌 的筛选 及 其 生物 学 特 性 的研 究
王莉 ， 刘秀花 ， 淮骏
（ 商丘师范学院 生命科 学系 ， 河南 商丘 ４ ６０ ） ７０ ０ 摘 要： 从泡菜 中分 离出４株具有乳 酸菌菌落特征 的菌株 ， 菌株编 号分别为 Ｌ 、 ：Ｌ 和 Ｌ． 。Ｌ 、 ３ ４经革 兰氏染 色， 光
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用较大量的新鲜活力强的菌种进行穿刺接种 ,若指示剂变黄表示产酸 ,软琼脂柱内产生气泡表示产气 .
1. 4. 9 碳水化合物发酵产酸试验
在改良的 PY基础培养基中分别加入碳水化合物至最终浓度为 1% ,分装试管 ,高度为 4 ～5 cm ,灭菌后接种 , 37 ℃ 培养 48
第 12 期 王莉 ,等 : 乳酸菌的筛选及生物学特性的研究
99
产葡聚糖试验培养基 (L ) : 胰蛋白胨 10. 0 g, K2 HPO4 5. 0 g, 酵母提取物 5. 0 g, 柠檬酸三铵 5. 0 g, 蔗糖 50. 0 g, 琼脂
1510 g, 115 ℃ 灭菌 25 m in.
Screen in g and study in g on b iolog ica l character istics of lactic ac id bacter ia WANG L i, L I U Xiu 2hua, L I U Yan 2ya
(Departm ent of L ife Science, Shangqiu Teachers University, Shangqiu 476000, China)
1 材料与方法
1. 1 样品来源
酸奶 : 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 ,内蒙古蒙牛乳业 (集团 )股份有限公司
1. 2 培养基
西红柿汁培养基 : 酵母膏 7. 5 g, 蛋白胨 7. 5 g, 葡萄糖 10. 0 g, 西红柿汁 100 mL , K2 HPO4 2. 0 g, CaCO3 3. 0 g, 琼脂粉
第 24 卷第 12 期 2008 年 12 月
商丘师范学院学报
JOURNAL OF SHANGQ I U TEACHERS COLLEGE
Vol . 24 No. 12 Dec. 2008
乳酸菌的筛选及生物学特性的研究
王莉 ,刘秀花 ,刘燕雅
(商丘师范学院 生命科学系 ,河南 商丘 476000 )
镜检细胞形态 ,大小 ,排列方式及革兰氏染色 ,结果见表 2. 表 2 5 株菌的形态特征
Table 2 Morphology and sA-1
A-2 B-1 B-2 B-3
染色
G G G G G
+ + + + +
μm 大小 / d =1 - 2 ( 0. 5 ～1 ) ×( 2 ～3 ) ( 0. 5 ～1 ) ×( 2 ～3 ) ( 0. 5 ～1 ) ×( 1. 5 ～2 ) (0. 5 ～1) ×(2. 5 ～3. 5)
1. 4. 4 运动性试验
用直针穿刺接种于半固体培养基中 ,置 37 ℃ 培养 48 ～72 h,若培养物只生长在接种的穿刺线上 ,边缘十分清晰 ,则表明试 验菌无运动性 ; 若培养物生长由穿刺线向四周呈云雾状扩散 ,其边缘模糊 ,则表明试验菌有运动性 .
1. 4. 5 明胶液化试验
试验菌接种于明胶基础培养基后 37 ℃ 培养 ,观察时低温处理 ,如对照管 (未接菌 )凝固而接种管液化为阳性 ,同时凝固为 阴性 .
Abstract: In this paper, we isolated and screened lactic acid bacteria from acidophilus m ilk. Based on the morphol2 ogy and a series of physiological and biochem ical test, 2 of 5 strains were identified as S. ther m oph ilus . Key words: lactic acid bacteria; screening; biological characteristics
1. 4 生理生化试验 1. 4. 1 接触酶检测
取 1 ～2 环斜面培养物 (培养基中至少含有 1%的葡萄糖 ) ,涂于干净的载玻片上 ,然后在其上滴加 15%的 H2 O2. 若有气 泡产生为阳性反应 ,无气泡为阴性反应 .
1. 4. 2 KOH 试验
用灭菌的接种环加 1 ～2 环 5% KOH 溶液于干净的载玻片上 ,挑菌于溶液中 ,用接种环将其混合搅匀 ,短时间内 KOH 试 验阳性菌会越搅越稠 ,抬起接种环会有拉丝现象 ,而 KOH 试验菌阴性则无拉丝现象 .
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100
商 丘 师 范 学 院 学 报 2008 年 表 1 菌落形态特征
012 g, M gSO4 ・7H2 O 0. 48 g, K2 HPO4 1. 0 g, KH2 PO4 1. 0 g, NaHCO3 10. 0 g, NaCl 2. 0 g ) ,蒸馏水 100 mL. MRS液体培养基 (L ) : 蛋白胨 10. 0 g, 牛肉膏 10. 0 g, 酵母提取物 5. 0 g, K2 HPO4 2. 0 g, 柠檬酸三铵 2. 0 g, 乙酸钠 5. 0 g, 葡萄糖 20. 0 g, 吐温 80 1. 0 mL , M gSO4 ・7H2 O 0. 5 g, M nSO4 ・4H2 O 0. 25 g, 调 pH 至 6. 2 ～6. 4, 115 ℃ 灭菌 25 m in.
Table 1 Morphology and size of colonies
编号 A-1
A-2 B-1 B-2 B-3
形状 圆形 圆形 圆形 圆形 圆形
大小 1 mm
2 cm 5 - 6 cm 1 cm 2 - 3 cm
表面 光滑 光滑 粗糙 光滑 光滑
隆起 垫状 扁平 突起 凸透镜状 突起
透明度 稍透明 较透明 不透明 稍透明 不透明
1. 4. 7 产葡聚糖试验
将菌种接种于葡聚糖试验培养基中 , 37 ℃ 培养 48 ～96 h,若斜面培养物形成粘稠状菌苔 ,表明该菌株产生葡聚糖 , 为阳 性.
1. 4. 8 葡萄糖产酸产气试验
在改良的 PY基础培养基中加入 30 g葡萄糖 , 0. 5 mL 吐温 80, 0. 5%琼脂 , 1. 6%溴甲酚紫适量 ,分装试管高度为 4 ～5 cm ,
形态 卵圆形 长杆 长杆 短杆似球 长杆
排列方式 成对或呈链球状 单个无规则排列 单个无规则排列 单个或呈链球状 单个无规则排列
由表 2 可以看出 ,从酸奶中分离的 5 株菌均为 G + ,菌体呈杆状或链球状 . 根据陈晓平 、 肖静等人 [ 6, 10 ]的研究 ,综合表 1、 表 2 结果可知 , A - 1、 B - 2 具有链球菌的形态学特征 ; A - 2、 B - 3 具有乳杆 菌的形态学特征 ; B - 1 因菌落表面粗糙 ,不符合乳酸菌的特征 .
18. 0 g, 吐温 80 0. 5 mL , 蒸馏水 900 mL , 调 pH 至 7. 0, 115 ℃ 灭菌 25 m in .
[8 ]
改良的 PY基础培养基 : 蛋白胨 0. 5 g, 胰蛋白胨 0. 5 g, 酵母提取物 1. 0 g, 盐溶液 4. 0 mL (盐溶液成分 ( L ) : 无水 CaCl2
摘 要 : 从酸奶样品中分离 、 筛选出 5 株乳酸菌 ,经过形态学测试及生理生化反应试验 , 最后确定其中 2 株为 嗜热链球菌 . 关键词 : 乳酸菌 ; 筛选 ; 生物学特性 中图分类号 : Q939111 + 7 文献标识码 : A 文章编号 : 1672 - 3600 ( 2008 ) 12 - 0098 - 04
乳酸菌是一类能在可利用的碳水化合物发酵过程中产生大量乳酸的细菌 . 这类细菌广泛存在于土壤 、 植物根 、 茎、 湖泊及 人与动物的体内 . 乳酸菌从形态上可以分为球状 、 类球状 、 短杆或杆状 ,绝大多数为在缺少氧气的环境中生长良好的兼性厌氧 菌或厌氧性细菌 [ 1 ] . 乳酸菌在食品生物技术领域具有重要的作用 ,目前 , 应用于很多发酵食品的生产中 , 如奶酪 、 干制发酵香肠 、 酸面团面包 等 . 乳酸菌作为一种益生菌 ,不仅具有提高食品的营养价值 , 改善食品风味 , 延长食品保存时间的功能 , 而且对人体有多方面 的保健作用 ,如能调节肠道菌群 、 维持体内生态平衡 ,抑制肠道内腐败菌的生长繁殖 , 消除体内有毒物质的产生 , 降低胆固醇 水平 ,帮助消化 ,防止便秘 ,抗肿瘤等 [ 2 - 7 ] . 本文就市售酸奶中的乳酸菌进行了分离筛选 ,并进行了菌种鉴定 ,对其生物学特性 进行了初步探讨 ,为进一步研究开发新型乳酸菌剂奠定基础 .
明胶基础培养基 ( 100 mL ) : 明胶 12. 0 g, 蛋白胨 1. 0 g, 酵母提取物 1. 0 g, 葡萄糖 0. 1 g, 盐溶液 4. 0 mL (与 PY基础培养 基相同 ) , 115 ℃ 灭菌 25 m in. 收稿日期 : 2008 - 06 - 24; 修回日期 : 2008 - 09 - 24 基金项目 : 河南省科技攻关项目 (0424240005) 作者简介 : 王莉 ( 1978 - ) ,女 ,辽宁抚顺人 ,商丘师范学院助教 ,硕士 ,主要从事微生物代谢控制发酵的研究 . © 1994-2011 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.
可溶性淀粉培养基 : 向 PY基础培养基中加入 0. 5%的可溶性淀粉 .
1. 3 样品中乳酸菌的分离和纯化
-5 -6 在超净工作台上取酸奶样品 1 mL ,用无菌水分别稀释为 10 - 4 、 10 、 10 3 个稀释度 ,然后分别取 0. 2 mL ,涂布于西红柿
汁培养基平板上 , 37 ℃ 恒温培养 48 h. 对所有不同菌落进行编号 ,并划线分离 3 ～4 次 ,最后选择单菌落 ,观察菌落特征 ,镜检确认为纯培养 ,采用革兰氏染色法 观察其细胞形态 .