基因工程试卷及答案 (1)

一、名词解释

1、基因治疗：是将目的基因放进特定载体中导入靶细胞或组织，通过替换或补偿引起疾病的基因，或者关闭或抑

制异常表达的基因来克服疾病的治疗方法。

2、反义核酸：是指能与特定mRNA精确互补、特异阻断其翻译的RNA或DNA分子。

3、反义DNA：也称反义寡核苷酸或反义脱氧寡核苷酸，是一种人工合成的、能与mRNA互补的、用于抑制翻译的

短小反义核酸分子。

4、同尾酶：指切割DNA可产生相同的黏性末端的限制酶

5、转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得

细胞DNA的过程。

6、ａ-互补：指E.coli-半乳糖苷酶的两个无活性片段组合而成为功能完整的酶的过程。

7、转化：指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主细胞，并使其获得新的表型的过程。

8、基因克隆：通过体外重组技术，将一段目的DNA经切割、连接插入适当载体，并导入受体细胞，扩增形成大量

子代分子的过程。

9、核酶：是一类具有催化活性的RNA分子，具有核苷酸水解活性，可特异性剪切RNA分子，相当于RNA酶。

10、位点偏爱：某些限制酶对同一底物中的有些位点表现出偏爱性切割，即对不同位置的同一识别序列表现出不同的切割效率，这种现象称作为位点偏爱。

二、选择

1.在( B )诱导下，目的蛋白与lacZ就会以融合蛋白的形式表达出来。

A. dNTP

B.IPTA

C. DMSO

D.SDS

2.（ A ）可使表达蛋白避免被细胞内蛋白降解，或使表达的蛋白正确折叠，从而达到维护目的蛋白的目的。

A.分泌表达载体

B.G S T融合表达载体

C.组氨酸标签表达载体

D.内含肽表达载体

3.DNA的琼脂糖凝胶电泳方向为（ B ）

A.正极向负极

B.负极向正极C浓度高向浓度低. D.浓度低向浓度高

4.影响脉冲场凝胶电泳电泳分辨率的最关键因素是（D ）

A.电场强度

B.缓冲液浓度

C.温度

D.脉冲时间

5.控制潜在RNA酶活性最重要的是（C）

A.使用R N A酶抑制剂

B.实验用具

C.细致谨慎的操作

D.温度控制

6.酵母基因表达系统的宿主不具有以下哪一条件(B )

A.安全无毒

B.载体D N A转化频率低

C.发酵周期短

D.蛋白质分泌能力好

7. 酿酒酵母的附加体形表达载体有（D）的缺点

A.蛋白分泌能力差

B.无终止子

C.不能独立复制

D.无选择压力时不稳定

8.（C）不能用大肠杆菌表达系统来生产。

A.胰岛素

B. 干扰素

C.EPO

D.赛若金

9.中国学者从人脐血白细胞中获得的（B）基因已用于我国第一个基因工程干扰素的生产。

A.胰岛素

B. 干扰素ａ-1b

C.EPO

D.CHO

10.下列哪项不属于反义核酸药物(D )

A.反义DNA

B. 核酶

C.肽核酸

D.siRNA

答案：BABDC BDCBD

11.I型限制与修饰系统的酶分子是（B）

A.内切酶与甲基化酶分子在一起

B.三亚基双功能酶

C .二亚基双功能酶 D.四亚基双功能酶

12.限制性内切酶的命名遵循的一定原则（D）

A．种名 B. 菌株号 C . 属名 D.种名，菌株号或生物型

13.大肠杆菌DNA聚合酶I 型5’→3’外切核酸酶活性的反应底物是（C）

A.单链DNA及引物

B.5’突出的双链DNA

C.双链DNA或DNA:RNA杂交体

D.带3’—OH的双链DNA或单链DNA

14．提高酶连接效率的方法（C）

A.加大酶量20倍

B.降低温度

C.加大平头末端的底物浓度

D.降低平头末端的底物浓度

15.碱性磷酸酶CIAP指（D）

A.细菌和虾的细菌碱性磷酸酶

B.虾碱性磷酸酶

C.细菌碱性磷酸酶

D.牛小肠碱性磷酸酶

16.为了突出3’末端可采用的方法（A）

A．T4—DNAPOL切平，然后平头连接 B.Klenow补平，然后平头连接

C．S1核酸酶切平，然后平头连接 D.Klenow补平，或S1核酸酶切平

17.能使X—gal变蓝的条件是（C）

A.有α—片段

B. α—受体片段

C.同时具有α—片段和α—受体片段

D.同时具有β—片段和β受体片段

18.当基因组DNA长度为野生型入噬菌体基因组多少时，不会明显影响存活能力（C）

A.78％~90％

B.60％~78％

C.78％~105％

D.105％以上

19质粒PSC101带有何种抗性基因（B）

A.卡那霉素抗性基因

B.四环素抗性基因

C.青霉素抗性基因

D.链霉素抗性基因

20.宿主为rec+，可在噬菌体溶源性细菌中鉴别重组合非重组入噬菌体的条件为（C）

A.red game 基因存在

B.red game 基因缺失，无chi位点

C.red game 基因缺失或替换，且有chi位点

D.red game基因存在且无chi位点

三、判断

1.酶切反应的反应温度大多数为37℃对

2.T4DNA连接酶只连接双链DNA分子，不需要ATP。错

3.同一质粒尽管分子量不同，不同的构型电泳迁移率不同，其中ocDNA最快，scDNA最慢。错

4．酵母DNA的原生质体转化法操作简便，容易掌握，但转化率不稳定，成本较高。错

5.同尾酶的黏性末端互相结合后形成的新位点，一般不能再被原来的酶识别。对

6.在蓝白斑筛选中，只有同时存在α—片段和α—受体片段才能使X—gal变蓝。对

7.基因组大小分左臂，中段，右臂三部分。对

8.cI基因的表达抑制λ噬菌体进入溶源状态。错

9.chi位点是一段与重组事件相关联的10bpDNA序列，它激活以rec为媒介的交换反应。错10.RNA的琼脂糖凝胶电泳实验中，RNA分析是在变性的条件下进行的，常用的变性剂为乙醛。错

四、简答

一简述载体应具备的特征P39

1在宿主细胞内必须能够自主复制（具备复制原点）；

2必须具备合适的酶切位点，供外源DNA片段插入，同时不影响其复制；

3有一定的选择标记，用于筛选；

4最好有较高的拷贝数，便于载体的制备。

二简述构建质粒载体的基本策略和构建过程P43

（一）基本策略

1能在受体细胞内有效的复制；

2必须含有允许外源DNA片段克隆的位点，切尽可能的多；

3含有供选择克隆子的标记基因；

4载体DNA分子尽可能小。

（二）构建过程

1选择合适的出发质粒（亲本质粒）；

2正确获得构建质粒克隆载体的元件；

3选择合适的选择标记基因；

4在能达到预期目的的前提下，过程力求简单。

三大肠杆菌表达载体的表达形式和优缺点P87

1包涵体蛋白，没有生物学活性、易于分离纯化、不会被细胞内蛋白的降解作用、不会伤害宿主细胞；