植物组织培养实验及实习指导
植物组织培养实习报告
植物组织培养实习报告篇一：植物组织培养实验报告一、实验目的1．掌握无菌操作的植物组织培养方法；2．通过配置MS培养基母液，掌握母液的配置和保存方法；3．通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；4．通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；5．了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育,最终长成完整再生植株的过程,加深对植物细胞的全能性的理解。
二、实验原理（一）植物组织培养植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。
植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。
这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。
（二）植物细胞的全能性植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。
（三）组织的分化与器官建成外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。
有些情况下，外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。
（四）培养基的组成培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。
营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素（生长调节剂）和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。
三、实验器材高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。
四、实验材料豌豆种子五、实验药品药品、70%酒精、0.1%升汞、MS培养基、蒸馏水、NaOH、84消毒液、蔗糖、琼脂等。
组培学实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解植物组织培养的基本原理和方法。
2. 掌握植物组织培养实验操作技能。
3. 通过实验，学习植物组织培养技术在植物繁殖、育种和基因工程等领域的应用。
二、实验原理植物组织培养是利用植物体细胞的全能性，通过无菌操作，将植物组织、器官或细胞在适宜的培养基上进行培养，使其生长发育成为完整的植株。
实验过程中，培养基的营养成分、激素配比、光照、温度等条件对植物组织培养的成功至关重要。
三、实验材料与仪器材料：1. 植物外植体：叶片、茎段等。
2. MS培养基：含有植物生长激素、维生素、微量元素等。
3. 营养液：用于补充培养基中的营养成分。
4. 灭菌剂：如氯化汞、酒精等。
5. 灭菌器械：高压灭菌锅、无菌操作台、剪刀、镊子等。
仪器：1. 高压灭菌锅2. 灭菌操作台3. 镜头4. 移液器5. 培养箱6. 热水浴锅四、实验步骤1. 外植体消毒：将外植体用70%酒精消毒30秒，再用氯化汞消毒10分钟，最后用无菌水冲洗3-5次。
2. 切割外植体：用无菌剪刀将消毒后的外植体切割成适宜大小的片段。
3. 制备培养基：将MS培养基和营养液按比例混合，加入适量的植物生长激素，搅拌均匀。
4. 接种：将切割好的外植体接种到制备好的培养基上。
5. 培养：将接种好的培养基放入培养箱中，控制适宜的温度、光照等条件进行培养。
6. 观察与记录：定期观察外植体的生长状况，记录其生长过程。
五、实验结果与分析1. 外植体生长情况：在适宜的培养基和培养条件下，外植体能够生长出愈伤组织、芽和根。
2. 愈伤组织形成：愈伤组织是植物组织培养过程中的重要阶段，它为芽和根的形成提供了物质基础。
3. 芽和根的形成：在适宜的培养基和培养条件下，愈伤组织能够分化出芽和根，形成完整的植株。
4. 实验结果分析：通过本实验，我们掌握了植物组织培养的基本原理和操作技能，了解了植物组织培养技术在植物繁殖、育种和基因工程等领域的应用。
六、实验总结1. 本实验成功地进行了植物组织培养，掌握了植物组织培养的基本原理和操作技能。
植物组织培养实践报告
植物组织培养实践报告
植物组织培养是一种利用植物细胞、组织和器官在无菌条件下进行培养和繁殖的技术。
它是现代植物育种和生产中的重要手段之一，可以用于植物繁殖、基因转化、病毒检测、药物合成等方面。
在植物组织培养实践中，首先需要准备无菌培养基和无菌器具。
培养基的配方根据不同的植物种类和培养目的而定，一般包括基础培养基、植物生长调节剂和营养物质。
器具包括无菌操作台、无菌培养箱、无菌吸管、无菌移液器等。
接下来是组织的获取和处理。
组织可以从植物的茎、叶、根、花等部位中获取，需要注意的是，组织的获取和处理必须在无菌条件下进行，以避免污染。
处理后的组织可以通过切片、分离、切碎等方式进行培养。
在培养过程中，需要控制培养基的温度、光照、湿度等条件，以促进组织的生长和分化。
同时，还需要定期更换培养基，以保证营养物质的充足和无菌状态的维持。
植物组织培养的应用非常广泛。
例如，可以通过组织培养实现植物的无性繁殖，即通过组织培养获得大量的无性繁殖植株，以提高植物的繁殖效率。
此外，还可以通过基因转化技术将外源基因导入植物细胞中，以实现植物的基因改良和功能性研究。
植物组织培养是一项非常重要的技术，它为植物育种和生产提供了
有力的支持。
在实践中，我们需要严格控制无菌条件，合理调配培养基，以获得高效的培养效果。
植物组培的实习报告
一、实习目的本次植物组培实习旨在通过实际操作，让学生了解植物组织培养的基本原理、技术流程和实验方法，掌握植物细胞培养的基本技能，提高学生的实践操作能力和科研思维能力。
同时，通过实习，使学生认识到植物组织培养在植物繁殖、品种改良、遗传育种以及植物基因工程等领域的重要应用。
二、实习内容1. 植物组织培养概述实习首先介绍了植物组织培养的基本概念、发展历程、应用领域以及实验室的基本设备。
2. 植物组织培养技术（1）植物材料的选择与预处理介绍了植物材料的选择标准、预处理方法（如消毒、切割等）以及预处理过程中需要注意的问题。
（2）培养基的配制与灭菌详细讲解了培养基的配方、配制方法、灭菌方法以及注意事项。
（3）植物细胞的诱导与增殖介绍了植物细胞诱导与增殖的方法，如愈伤组织的诱导、胚性愈伤组织的诱导、不定芽的诱导等。
（4）植物胚胎发生与植株再生讲解了植物胚胎发生的过程、影响因素以及植株再生的技术要点。
3. 实验操作（1）植物材料的消毒与切割在指导老师的指导下，学生进行了植物材料的消毒与切割操作，掌握了消毒液的配置、消毒时间、切割工具的使用等技能。
（2）培养基的配制与灭菌学生亲自参与了培养基的配制、分装、灭菌等过程，了解了培养基的配方、配制方法、灭菌方法等。
（3）植物细胞的诱导与增殖学生在指导老师的指导下，进行了愈伤组织的诱导、胚性愈伤组织的诱导、不定芽的诱导等实验，掌握了相关技术。
（4）植物胚胎发生与植株再生学生进行了植物胚胎发生与植株再生的实验，了解了植物胚胎发生的过程、影响因素以及植株再生的技术要点。
三、实习收获1. 理论知识与技能的提升通过本次实习，学生对植物组织培养的基本原理、技术流程和实验方法有了更深入的了解，掌握了植物细胞培养的基本技能。
2. 实践操作能力的提高学生在实习过程中，亲自参与了植物材料的消毒、切割、培养基的配制、灭菌、细胞诱导与增殖、胚胎发生与植株再生等实验操作，提高了实践操作能力。
3. 科研思维的培养通过实习，学生学会了如何分析实验现象、解决问题，培养了科研思维。
植物组织培养试验
植物组织培养试验《植物组织培养技术》实验指导实验一组培室设备参观及器皿的洗涤和灭菌一、目的要求：1.通过参观，了解组织培养室的几个主要组成部分和各部分应有的基本设备以及有关仪器的用途与功能。
2.通过实际操作，学会洗涤剂的配制和各种器皿的清洗和灭菌方法。
二、材料用具：高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、双筒解剖镜、酸度测定仪、空调机、控温仪、百分之一与万分之一天平、电炉、玻璃器皿（试管、三角瓶、移液管、漏斗、烧杯、容量瓶、试剂瓶、量筒酒精灯），以及镊子、解剖刀、解剖针、手术剪，肥皂、洗衣粉、重铬酸钾、浓硫酸等。
三、说明：在进行各类具体的组培实验前，首先了解组培室的结构及主要设备的用途和性能是十分必要的,总体上的了解有利于以后各实验的进行以及正确的使用各种仪器和设备。
植物组织培养是一项十分细致的工作，为了保证植物外植体不受污染,第一关就是要对各种器皿进行清洗和消毒,使它们保持无菌状态，做这些工作同样有一套科学的方法和需要熟练的技巧，因此每个学生必须学好这套基本功。
四、方法和步骤：首先在老师带领下参观组培室，并听取讲解，然后配制洗液，称取工业用重铬酸钾40克，溶解在500ml在水中，然后徐徐加入450ml 粗制浓硫酸（或废硫酸）配好的溶液呈红色，铬酸洗液是一种强氧化剂，去污能力强，但玻璃器皿上沾有油脂、凡士林、石蜡等则用此液无效，铬酸洗液可反复使用，直到溶液呈青褐色为止。
此溶液腐蚀性强，洗涤时需注意。
每人清洗部分玻璃器皿，方法：清水洗净一泡入洗衣粉水溶液中进行洗刷f清水反复冲洗f蒸馏水淋一遍f烘干备用。
然后清洗部分较脏的玻璃器皿，方法：采用先碱后酸，即用洗衣粉洗刷后冲洗干净f晾干一侵入酪酸洗液，浸泡时间视器皿的肮脏程度而定f清水反复冲洗干净f蒸馏水淋洗一遍f烘干备用。
带有石蜡或胶布的器皿：先将其除去，再用常规洗涤，石蜡用水煮沸数次即可去掉，胶布粘着物则需用洗衣粉液煮沸数小时,再用水冲洗，凉干后浸入洗液，以后的步骤同前。
组培实验报告
一、实验简介实验名称：植物组织培养实验目的：通过植物组织培养技术，了解植物细胞生长、分化和再生的过程，掌握组培技术的操作方法，并应用于植物繁殖和遗传改良。
二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性，通过特定的培养基和外界条件，使植物组织在体外进行生长、分化和再生，最终形成完整的植株。
该技术广泛应用于植物繁殖、遗传改良、基因工程等领域。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：植物外植体（如叶片、茎段、愈伤组织等）培养基（MS培养基、改良MS培养基等）诱导培养基（1/2MS培养基、添加生长调节剂的培养基等）细菌培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）灭菌剂（如75%酒精、1%次氯酸钠溶液）其他：超净工作台、接种针、酒精灯、移液器、培养皿、培养箱等2. 实验仪器：电子天平高压蒸汽灭菌器移液器超净工作台培养箱显微镜四、实验步骤1. 材料预处理：选择健康、无病虫害的植物材料，用流水冲洗干净。
将外植体浸泡在1%次氯酸钠溶液中消毒5-10分钟，然后用无菌水冲洗3-5次。
将消毒后的外植体用无菌滤纸吸干水分。
2. 培养基制备：称取适量的培养基粉末，加入少量蒸馏水溶解。
将溶解后的培养基过滤除菌，加入适量的琼脂和生长调节剂。
将培养基倒入培养皿中，待凝固后备用。
3. 外植体接种：在超净工作台中，用无菌接种针将外植体接种到培养基上。
每个外植体接种3-5个，确保接种密度适宜。
4. 培养与观察：将接种后的培养皿放入培养箱中，控制适宜的温度、光照和湿度。
定期观察外植体的生长情况，记录愈伤组织形成、芽生长和根生长等过程。
5. 培养基调整与继代培养：当外植体形成愈伤组织或芽生长到一定长度时，可进行培养基调整和继代培养。
将愈伤组织或芽切割成小块，重新接种到新的培养基上。
根据生长情况，适时调整培养基成分和生长调节剂浓度。
五、实验结果与分析1. 愈伤组织形成：在适宜的培养基和条件下，外植体可形成愈伤组织。
愈伤组织是细胞增殖和分化的基础，是组织培养成功的关键。
植物组织培养实训指导书
植物组织培养实训指导书《植物组织培养技术》是生物技术及应用专业的工学结合核心课程之一。
本课程采取“项目引领，任务驱动”的教学模式，使学生掌握植物组织培养技术的职业知识和职业技能，能够在实际工作中具备实验方案设计能力、培养基制备能力、无菌操作能力、组培苗驯化移栽能力及组培苗工厂化生产能力。
实训一：实训室的灭菌与玻璃器皿的清洗一、目的要求1.通过实训，使学生了解各种洗涤液的特性；2.掌握酸液的配制方法和组织培养中常用器血的洗涤技术；3.通过实训，培养学生良好的卫生习惯，建立组织培养的无菌意识；4.会配制新杰尔灭溶液。
二、材料用具1.灭菌用具：2%新洁尔灭、高镒酸钾、甲醛、70%酒精、洗涤剂、各种培养血、工作服、口罩、手套、试管刷。
2.洗涤用具：肥皂液、洗衣粉、重铬酸钾粉末、1%HCL、70%酒精、瓶刷等。
三、方法步骤（一）培养室的灭菌1、地面、墙面和工作台的灭菌2、无菌室和培养室的灭菌（二）玻璃器皿的洗涤（酸洗）玻璃器血的洗涤一般要经过浸泡、刷洗、浸酸和清洗四个步骤。
重铬酸钾洗涤（三种）液配制：重铬酸钾508，加工蒸馏水，加热溶化，冷却后再缓缓加入工业浓硫酸90ml。
1、新玻璃器血的洗涤用1%HCL的溶液浸泡一昼夜，再用清水反复洗涤，最后用蒸馏水冲淋一遍，干燥后备用。
2、用过的玻璃器血先将器血中得残留物质除去，用清水冲洗，再用洗衣粉洗涤，最后用清水冲洗3—4遍，把字迹擦洗干净，干燥后使用。
3、污染的培养瓶的处理首先经高压蒸汽灭菌，再按（2）的步骤洗涤。
4、用过的吸管、滴管、容量瓶先放在重铬酸钾溶液浸泡2h以上，取出后经流水冲洗30min左右，干燥后使用。
四、实训报告①.植物组织培养室的灭菌方法步骤。
②.写出洗涤液的配置步骤。
③.记录各种培养瓶的洗涤方法。
实训二：组织培养工厂的设计一、目的要求通过实训，使同学们对现代组培苗生产模式有一个更为深刻的认识，能熟练的根据生产规模设计合理的厂房及工艺流程。
二、材料用具组培苗生产小工厂、绘图纸、绘图笔三、方法步骤（-）组培工厂的参观1.参观组培实验中心2.组培工厂的组成：准备室、灭菌室、缓冲室、无菌室、培养室、驯化室3.各室内仪器设备的种类及摆放（二）设计一 200m2组培工厂，要求给出大概的布局图。
植物组织培养实验指导
《植物组织培养》实验指导教师：任峻目录实验一参观植物组织培养实验室实验二培养基母液配制实验三培养基配制与灭菌实验四植物快速繁殖培养实验考核一、课程的性质与任务植物细胞工程实验技术一般包括植物细胞组织离体培养技术、细胞融合技术、细胞拆合技术、外源基因转移技术等一系列重要的基础技术。
通过实验课程的学习，实验方法立足于初学者的专业基础和一般实验室的条件，将《植物细胞组织培养技术》课程的理论知识、一般的实验技能和科学研究的初步方法融为一体。
培养学生理论联系实际、独立思考及实践动手能力。
二、实验的目的与基本要求通过本课程的学习使学生掌握植物细胞工程技术的基本原理和实验操作方法，掌握植物细胞体外培养技术，结合科研和生产实际，提高学生分析问题、解决问题的能力。
以适应今后在教学、科研和生产开发等各方面对当代生命科学人才知识结构的需求。
在实验教学过程中，要求学生学习态度严谨，操作动作规范，观察记录耐心细致，独立思考，综合分析实验结果，充分理解后认真地完成实验报告。
09本《植物组织培养》实验考核一、考核方式：实验操作。
二、考核时间：三、考核地点：四、监考教师：实验考核以实验操作形式进行，根据实验4或实验5实验的实验结果（失败或成功）决定实验方案，如果失败，分析失败原因，提出改进措施，在重做中进行实验操作考核，如果成功则继续下一步的实验，实施实验操作考核。
二．考核办法：考核方法主要观察学生的实验操作是否正确，污染率是否高，并要求学生写出实验报告，总结实验中常出现的问题。
在3个课时内小组协作完成实验内容。
包括以下几个方面：1．对实验仪器设备的选择及操作。
湿热灭菌操作过程；无菌操作过程。
2.培养基的配制试剂的配制；母液的移取；实验配方计算。
3.培养条件的设置。
4.实验报告的规范性与科学性。
实验一 参观植物组织培养实验室一、实验的目的和要求掌握植物组织培养实验室的设计要点和必备的仪器设备。
二、实验内容：1. 植物组织培养实验室的设计要点。
植物组织培养技术实验指导
二、实验内容1．配制洗涤液。
2.分类洗涤：新购置的玻璃器皿的洗涤，使用过的玻璃器皿的洗 涤，污染瓶的洗涤，移液管、容量瓶、量筒等量具器皿的洗涤。
三、实验器材与试剂
（一）器材 具体包括：待洗的移液管、吸管、量筒、量杯、容量瓶等量具； 新购和用过的培养皿、 璃器皿；污染瓶（管） 筐等。
作用：常用以浸洗除去普通油污，通常需要用热的溶液。黑色焦 油、硫可用加热的浓碱液（如浓NaOH）溶液洗去。
2.重铬酸钾-硫酸洗液
称取重铬酸钾40gT慢慢加入约50C的80~100ml蒸馏水中，边
搅拌边让它溶解（为了加速溶解，还可加热到约95C）7待稍冷却
后7加入工业用浓硫酸900~1000ml（用玻璃棒引流），刚开始加入时， 速度要缓慢（因为浓硫酸会迅速释放出溶解热，导致溶液激烈沸腾， 甚至会溅到脸上， 烫伤皮肤）7待倒入的浓硫酸不再激烈沸腾和冒浓 雾时，就可加速倒入浓硫酸7搅拌均匀7装瓶7贴上标签。
5.碱性高锰酸钾洗液
取4g高锰酸钾溶于少量水后，加入100ml10%的NaOH溶于混 匀后装瓶备用。
该洗液呈紫红色， 有强碱性和氧化性，能浸洗去除各种油污。洗 后若仪器壁上面有褐色二氧化锰， 可用盐酸、 稀硫酸或亚硫酸钠溶液 洗去。
该洗涤液与重铬酸钾-硫酸洗液一样，可反复使用若干次，直至 碱性及紫红色消失为止。
6.1mol L-1盐酸溶液
用1mol L-1盐酸溶液即可除去附在容器底部或壁上的铁锈、二氧 化锰、碳酸钙等物质。
（二）分类洗涤 根据洗涤对象不同，需分类洗涤。
1.移液管、吸量管、小量筒和容量瓶的洗涤 将小量筒和容量瓶灌满重铬酸钾-硫酸洗液，或将吸量管、移液 管浸泡在重铬酸钾-硫酸洗液中7第二天用竹夹子取出，或将容量瓶 和小量筒中的重铬酸钾-硫酸溶液倒回到洗液瓶中7流水冲洗这些玻 璃器皿至洁净7用蒸馏水冲洗1~3次，然后将吸量管、 量筒等分别倒
组培实验的实习报告
一、实习背景随着生物技术的发展，植物组织培养技术作为一种无性繁殖的新技术，在农业、林业、医药等领域得到了广泛应用。
为了提高自身实践能力，我参加了为期一个月的组培实验实习。
本次实习旨在通过实践操作，了解植物组织培养的基本原理、技术流程以及实验方法，提高自己在植物组织培养方面的实际操作技能。
二、实习内容1. 实验目的（1）掌握植物组织培养的基本原理和实验技术；（2）了解植物组织培养在农业生产、医药研究等方面的应用；（3）提高自身动手操作能力和团队协作精神。
2. 实验材料（1）植物材料：柳树、紫玉兰、栀子花等；（2）培养基：MS培养基、1/2MS培养基、改良培养基等；（3）仪器设备：超净工作台、高压蒸汽灭菌器、培养箱、剪刀、镊子、解剖针等。
3. 实验方法（1）植物材料的采集与处理：选取生长健康的柳树、紫玉兰、栀子花等植物，采集其茎段、叶片等组织，进行消毒处理。
（2）外植体培养：将消毒处理后的外植体接种于MS培养基中，置于培养箱中培养。
（3）培养基的配制与灭菌：根据实验要求，配制不同成分的培养基，进行高压蒸汽灭菌。
（4）观察与记录：定期观察植物组织培养的生长状况，记录培养过程中的各项数据。
三、实习过程1. 实习初期在实习初期，我主要学习了植物组织培养的基本原理和实验技术。
通过查阅资料和老师的讲解，我对植物组织培养有了初步的了解。
在实验过程中，我严格按照操作规程进行操作，确保实验结果的准确性。
2. 实习中期在实习中期，我逐渐掌握了植物组织培养的实验技术。
在老师的指导下，我学会了培养基的配制、灭菌、接种等操作。
同时，我还参与了植物材料的采集、处理等工作。
在实验过程中，我遇到了一些问题，如外植体褐化、培养基污染等，通过查阅资料和请教老师，我找到了解决问题的方法。
3. 实习后期在实习后期，我参与了植物组织培养的整个流程。
从外植体的采集、处理到接种、培养，我都亲身体验了每个环节。
在实验过程中，我积累了丰富的实践经验，提高了自己的动手操作能力。
组织培养的实验报告
一、实验目的1. 掌握植物组织培养的基本原理和方法。
2. 熟悉植物组织培养中培养基的配制、消毒和接种技术。
3. 学习植物组织培养过程中愈伤组织的诱导、继代培养和器官分化等关键技术。
4. 了解植物组织培养在植物育种、种质资源保存等方面的应用。
二、实验原理植物组织培养是指将植物的器官、组织或细胞在人工控制的条件下，通过脱分化、再分化等过程，使其生长、发育成完整植株的技术。
植物组织培养技术具有操作简便、繁殖速度快、不受季节限制等优点，在植物育种、种质资源保存、生物工程等领域具有广泛的应用。
三、实验材料1. 植物材料：小麦种子、胡萝卜切块、番茄叶片等。
2. 培养基：MS培养基、1/2 MS培养基、1/4 MS培养基等。
3. 试剂：氯化钙、氯化钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂、蔗糖、吲哚乙酸（IAA）、6-苄基氨基腺嘌呤（6-BA）等。
4. 仪器设备：超净工作台、高压灭菌锅、电炉、移液管、培养皿、剪刀、镊子等。
四、实验步骤1. 培养基的配制（1）称取适量氯化钙、氯化钠、磷酸二氢钾、硫酸镁等试剂，加入少量蒸馏水溶解。
（2）将溶解后的试剂溶液加入适量琼脂，搅拌至溶解。
（3）将溶解后的琼脂溶液加入蔗糖，搅拌均匀。
（4）将溶液加热至沸腾，持续搅拌，使琼脂完全溶解。
（5）待溶液冷却至50℃左右，加入适量IAA和6-BA，搅拌均匀。
（6）将溶液分装至培养皿中，待凝固后，置于高压灭菌锅中灭菌30分钟。
2. 植物材料的消毒（1）将植物材料用流水冲洗干净。
（2）用75%乙醇消毒30秒。
（3）用无菌水冲洗3-5次。
3. 植物材料的接种（1）将消毒后的植物材料切成小块或叶片。
（2）将植物材料接种至培养基中。
4. 培养与观察（1）将接种后的培养皿置于培养箱中，温度控制在25℃左右，光照时间为12小时/天。
（2）定期观察愈伤组织的形成、生长和分化情况。
五、实验结果与分析1. 愈伤组织的形成经过一段时间培养，小麦种子、胡萝卜切块、番茄叶片等植物材料在培养基上形成了愈伤组织。
植物组织培养实验指导
植物组织培养实验指导一、材料与设备准备1.植物材料：选择符合实验要求的植物组织，如茎段、叶片等。
2.吐温20：用于表面消毒材料。
3.植物生长调节剂：包括激素和营养成分等。
4.植物培养基：选择适合所培养植物组织的培养基。
5.培养器具：试管、蒸馏水瓶、烧杯等。
6.其他辅助材料：包括消毒用酒精、无菌操作需要的洁净衣和手套等。
二、无菌操作准备1.操作台面准备：清洁操作台面，并用75%酒精消毒，然后用紫外线灯照射30分钟。
2.实验者准备：穿戴洁净衣、口罩和手套，洗手并用75%酒精消毒双手。
3.工具准备：将试管、蒸馏水瓶等器具洗净，并用高温高压消毒或用离子蒸汽灭菌器进行灭菌。
三、无菌茎段培养实验步骤1.材料准备：选择健康的植物茎段，将其切成1-2厘米长的小段，洗净并去除表皮。
2.表面消毒：将茎段放入含有0.1%吐温20的蒸馏水中浸泡15-30分钟，再用无菌蒸馏水冲洗3-4次。
3.培养基制备：按照特定比例和配方制备适合茎段培养的培养基。
4.培养基固化：将培养基倒入试管中，约3/4满，然后用高温高压或离子蒸汽灭菌器进行灭菌，同时密封试管。
5.培养基接种：将消毒后的茎段放入培养基中，约每个试管放入1-2个茎段。
6.培养条件设置：将培养瓶在适宜的光照和温度条件下培养，通常为25摄氏度，光照强度为3000-5000勒克斯，光周期为16小时光照和8小时黑暗。
四、观察和记录1.培养基观察：每隔一段时间，观察培养基的颜色变化、植物组织的生长情况等，并记录下来。
2.茎段生长观察：观察茎段的生长情况，包括根的生长情况、叶片形态等，并记录下来。
五、结果分析与总结根据观察和记录的数据，分析植株生长的情况、比较不同处理之间的差异等，并对实验的结果进行总结和讨论。
六、安全注意事项1.在操作过程中要严格遵守无菌操作要求，避免细菌、霉菌等的污染。
2.注意使用化学试剂时的安全操作，避免直接接触皮肤和吸入有害气体。
3.实验完成后，洗手消毒，清洁操作台面，并关闭紫外线灯。
植物组织培养实验报告
植物组织培养实验报告
植物组织培养是一种重要的生物技术手段，它可以用来繁殖植物、改良植物品种、研究植物生长发育规律等。
本实验旨在探究植物组织培养的基本原理和操作技巧，为进一步的研究和应用提供参考。
首先，我们准备了所需的材料和试剂，包括植物组织培养基、植物激素、无菌
器皿、无菌操作工具等。
然后，我们选择了适合组织培养的植物茎段作为实验材料，进行无菌处理并切割成小段。
接着，将这些茎段置于含有植物激素的培养基中，利用无菌技术将其保存在无菌条件下。
在培养过程中，我们需要注意控制培养基的pH值、温度和光照条件，以及定
期更换培养基，促进植物组织的生长和增殖。
同时，还需要注意观察培养过程中是否有细菌或真菌的污染，及时采取措施消除污染源。
经过一段时间的培养，我们观察到茎段逐渐产生了新的组织，包括愈伤组织、
根系和茎芽等。
这些新生组织可以用来进行植物再生、基因转化等研究，具有重要的应用价值。
通过本次实验，我们初步掌握了植物组织培养的基本原理和操作技巧，对植物
生长发育规律有了更深入的了解。
在今后的研究和实践中，我们将进一步探索植物组织培养的应用前景，为农业生产和生物技术的发展做出贡献。
总之，植物组织培养是一项重要的生物技术，它为植物繁殖、品种改良、基因
转化等研究提供了重要手段。
通过本次实验，我们对植物组织培养有了更深入的认识，相信在未来的研究中能够发挥重要作用。
植物组织培养实验报告
植物组织培养实验报告实验报告：植物组织培养一、实验目的掌握植物组织培养的实验技术，培养植物组织，研究其生长过程和生理生化特性。
二、实验原理三、实验步骤1.提取组织：从植物器官中提取叶片、茎段等组织。
2.消毒处理：将提取出的组织进行消毒处理，浸泡在含有消毒剂的溶液中，达到杀灭外界微生物的目的。
3.培养基准备：配置适合植物组织培养的培养基，包括基础培养基和添加剂。
4.培养条件：将消毒处理后的组织置于培养基中，放置在恒温恒湿的培养箱中，设置适宜的光照和温度条件。
5.观察记录：观察组织在培养基上的生长情况，记录其形态变化、增殖情况等。
6.提取代表性样本：根据需要，提取生长良好、代表性的样本进行下一步的分析。
四、实验结果经过数天的培养，观察到了组织的形态发生了变化。
最初的组织经过消毒处理后放置在培养基上，经过一段时间的培养，发现组织逐渐增殖。
最初的组织形态变得模糊，开始出现小芽的形成。
随着时间的推移，这些小芽逐渐长大，发展成幼苗，并开始生长根系。
同时，观察到培养基的颜色也发生了变化，由最初的无色逐渐变为淡黄色。
五、实验分析由实验结果可知，植物组织培养可以通过一系列的人工控制，使植物细胞和组织在无菌条件下繁殖和发育。
通过调节培养基的配方、光照和温度等条件，可以控制生长的速度和分化程度。
实验中观察到的小芽和根系的形成表明植物组织在培养基上能够继续分化和增殖，这为后续的植物繁殖和基因改造提供了基础。
六、实验总结本次实验通过植物组织培养的方法，成功地培养出了植物幼苗，并观察到了其生长过程。
通过实验我们了解到了植物组织培养的基本原理和操作技术，并对植物的细胞分化和增殖有了更深入的了解。
植物组织培养作为一种重要的生物技术手段，不仅可以用于植物繁殖和育种，还可以应用于植物基因工程和药物研究等方面。
1.张三，李四，王五.植物组织培养技术的应用[A].植物生长与发育研究进展[C].北京：科学出版社。
2. Liu K，Liu G F.植物组织培养与应用研究进展[J]. 中国园艺科技.八、附录实验操作记录：日期操作内容观察结果XX月XX日提取叶片叶片消毒漂白后变白XX月XX日放置培养基出现小芽的形成.........注意事项：实验过程中需要严格遵守无菌操作规范，保持培养箱的洁净，避免外界微生物的污染。
09植物组织培养实训指导
实训一MS固体培养基的配制、灭菌及保存一、实训目的掌握MS固体培养基的配制方法。
二、设备仪器电子分析天平、托盘天平、灭菌器、电炉等。
以下按小组为单位，烧杯、棕色细口瓶（1000ml 1个、500ml 1个、100ml 1个）、量筒100ml1个、移液管0.1、0.5、2、10ml各1支、吸气球1个、定容瓶1000ml 1支、小烧杯1支、培养瓶及瓶盖10个、精密pH试纸等。
三、药品试剂MS培养基所需各种物质(见配方)，琼脂，蔗糖(或绵白糖)，0.1M NaOH溶液，0.1M HCl 溶液。
1mol／L NaOH的配制方法是称4gNaOH，溶解后加入蒸馏水，定容到100ml即可。
1mol HCl的配制方法是量取，12mol HCl 8.4ml，加水定容至100m1。
四、母液的配制1．大量元素母液在分析天平上按下表分别称取大量元素药品，置于三角瓶中，分别加蒸馏水100ml左右于三角瓶中，再放到磁力搅拌器（或电炉）搅拌溶解，然后一一倒入1000ml 的容量瓶中（注意CaCl2要后加，最后加蒸馏水定容至刻度，此为10倍液的大量元素母液）。
2．微量元素母液在分析天平上按表分别称取微量元素药品,按大量元素母液配制方法，配成100倍液的微量元素母液。
3．铁盐母液在分析天平上按表称取FeSO4.7H2 O和Na2 －EDTA 药品，配成100倍液的铁盐母液。
4．有机物母液：用分析天平按表分别称取甘氨酸、VB1 、Vpp、VB6、肌醇，配成100倍有机物质母液。
表1 ＭＳ培养基母液的配制实验三还需要 NAA和6-BA，请准备！！！五、MS培养基的合成1. 加热溶解先在1L的烧杯中加500ml蒸馏水，然后加入琼脂丝8g，加热并不断搅拌，直至琼脂完全溶化，透澈见底为止；再放入蔗糖22g，容解后，用量筒取大量元素母液100ml、用专用的移液管分别移取微量元素母液10ml ，铁盐母液10ml ，有机物母液10ml 入烧杯中。
植物组织培养实习报告
一、前言植物组织培养技术是现代生物技术的一个重要分支，具有广泛的应用前景。
通过在无菌条件下，对植物组织进行培养，可以繁殖植物、保存植物种质资源、研究植物生长发育规律等。
为了提高自己的实践操作能力和对植物组织培养技术的了解，我参加了植物组织培养实习。
以下是我对本次实习的总结和体会。
二、实习目的1. 掌握植物组织培养的基本原理和方法；2. 学会无菌操作技术；3. 了解植物组织培养在植物繁殖、种质资源保存等方面的应用；4. 培养动手能力和团队协作精神。
三、实习内容1. 无菌操作技术在实习过程中，我们首先学习了无菌操作技术。
无菌操作是植物组织培养的基础，确保培养过程的顺利进行。
我们学习了无菌室的使用方法、消毒液的配制、无菌器械的清洗和灭菌等。
2. 植物组织培养基本原理植物组织培养的原理是利用植物细胞的全能性，将植物器官、组织或细胞在人工控制的条件下，诱导分化成完整的植株。
我们学习了植物组织培养的基本流程，包括外植体选择、消毒、接种、培养等。
3. 植物组织培养实践操作在实习过程中，我们进行了植物组织培养的实践操作。
具体步骤如下：（1）外植体选择：选择健康的植物器官或组织作为外植体，如茎尖、叶片、愈伤组织等。
（2）外植体消毒：将外植体放入75%酒精中浸泡30秒，然后用无菌水冲洗干净，再放入5%次氯酸钠溶液中浸泡10分钟，最后用无菌水冲洗干净。
（3）接种：将消毒后的外植体接种到含有适宜培养基的培养皿中。
（4）培养：将培养皿放入培养箱中，控制适宜的温度、光照和湿度，观察外植体的生长情况。
4. 植物组织培养的应用植物组织培养在植物繁殖、种质资源保存、新品种培育等方面具有广泛的应用。
我们了解了植物组织培养在这些领域的应用实例，如无病毒苗木的培育、转基因植物的研究等。
四、实习体会1. 植物组织培养技术是一门实践性很强的学科，需要我们掌握无菌操作技术、培养基配制、接种、培养等基本操作。
2. 在实习过程中，我们学会了如何观察和记录外植体的生长情况，提高了自己的观察能力和分析能力。
药用植物组织培养实验指导
药用植物组织培养实验指导药用植物组织培养是一种通过组织培养技术繁殖和培育药用植物，得到高品质的药用植物及其次生代谢产物的方法。
其主要适用于稀有药材、难以繁殖和响应慢的植物种类。
药用植物组织培养技术已成为现代生物技术和药学研究领域中的重要一环，对于药用植物资源的保护和开发利用具有广泛的应用价值。
一、实验材料和方法（一）实验材料药用植物：如丹参、黄芪、当归、川芎等。
生长介质：以MS为基本配方加入不同的生长调节剂和其他必需物质。
生长调节剂：如BA、KT、IBA、NAA、GA3等。
其他必需物质：如蔗糖、琼脂、植物营养物、维生素、酪朊、提取液等。
实验器材：量筒、移液吸管、显微镜、培养室、灭菌器、无菌操作台等。
（二）实验方法1.准备组培外植体：将新鲜的植物叶片，茎尖或子实体等外植体按特定的要求分离，清除植物表面的杂质，并切割成一定大小的切片或组织块。
2.预处理外植体：将清洗好的外植体放入含有适当浓度的消毒液中浸泡消毒，消毒后用蒸馏水冲洗干净备用。
3.生长介质配制：根据外植体的特征和培养要求将适量的生长介质和生长调节剂、蔗糖、琼脂等必需物质按比例配制好，并调节酸碱度等参数。
4.外植体接种：无菌条件下将预处理好的外植体移植到含有生长介质的培养瓶中，密封，然后将其置于适宜的培养条件下进行培养。
5.组织培养条件：组织培养的条件主要包括光照、温度、空气等条件的控制。
合适的光照和温度可以促进组织的生长和发育，而适度的通气可以增加培养瓶内的氧气含量，促进外植体的组织培养和生长。
二、实验结果与分析药用植物组织培养实验是一项需要持续观察和分析的过程。
在实验过程中，可以通过比较不同生长介质中的组织生长情况和代谢产物含量，以及观察外植体的形态和组织构造，来分析生长介质和生长调节剂对药用植物的影响。
实验结果显示，不同的生长介质配方和生长调节剂的添加量可以影响到组织的生长和分化。
在以NAA、IBA为生长调节剂的生长介质中，当归外植体的愈伤组织生长情况最佳，而添加GA3和KT可以进一步增加愈伤组织的分化和代谢产物的合成。
组培实验实习报告
实习报告一、前言植物组织培养技术是一种在无菌条件下，通过人工方法将植物的器官、组织或细胞培养在含有各种营养物质的培养基上，使其发育成完整植物的高新技术。
该技术在植物繁殖、遗传改良、基因工程、细胞产物的工厂化生产等方面具有广泛的应用。
为了更好地了解和掌握植物组织培养技术，我参加了为期两周的组培实验实习。
二、实习内容实习期间，我们主要进行了以下几个方面的实验：1. 培养基的配制：学习如何配制含有植物激素、营养成分、琼脂等成分的培养基，并掌握培养基的灭菌方法。
2. 外植体消毒：学习如何对植物的外植体（如叶片、茎段、根段等）进行消毒处理，以消除表面细菌和病毒。
3. 植物组织培养：将消毒后的外植体接种到已配制的培养基上，进行植物组织的培养和生长观察。
4. 移栽和栽培：将培养好的植物组织移栽到土中，进行栽培和管理。
三、实习心得1. 培养基的配制：在配制培养基的过程中，我了解到各种营养成分对植物生长的影响，并学会了如何准确称量和配制。
同时，掌握培养基的灭菌方法，保证培养基的无菌状态。
2. 外植体消毒：通过实习，我学会了如何正确进行外植体消毒，以消除表面细菌和病毒，保证实验的顺利进行。
3. 植物组织培养：在植物组织培养过程中，我学会了如何观察和记录植物生长的各项指标，如茎段长度、叶片数量等，以便对实验结果进行分析。
4. 移栽和栽培：在移栽和栽培过程中，我学会了如何正确处理植物组织与土壤的关系，以保证植物的成活率。
四、实习收获通过本次实习，我对植物组织培养技术有了更深入的了解，掌握了培养基的配制、外植体消毒、植物组织培养和移栽栽培等基本操作技能。
同时，我也认识到植物组织培养技术在农业生产、生物技术研究等方面的广泛应用，为今后的学习和研究工作奠定了基础。
五、实习总结本次组培实验实习让我受益匪浅，不仅提高了我的实验操作技能，还激发了我对植物组织培养技术的兴趣。
在今后的学习和工作中，我将继续努力，积极探索，为植物组织培养技术的应用和发展贡献自己的力量。
植物组织培养实验指导
植物组织培养实验（一）实验名称：参观植物组织培养实验室实验时间：第二周（分组进行）实验地点：植物组织培养实验室专业：生物技术及应用一、实验目的熟悉实验室的构建和掌握各种常用仪器设备的操作方法和使用注意事项。
二、实验仪器设备、药品及试剂高压蒸汽灭菌锅、培养架、超净工作台、1/100电子天平、1/10000电子天平、蒸馏水器、IAA、6-BA、NAA、KT，各种无机盐，有机化合物等。
三、实验内容方法及步骤参观准备室、无菌操作室和培养室，学习使用各种常用仪器。
四、分析与讨论1. 基本的实验室至少要包括准备室、无菌操作室和培养室，另外根据实验的需要可以设立辅助实验室，如细胞学实验室和生化实验室等。
2. 准备室要求宽敞明亮、便于放置多个实验台和相关设备，方便多人同时工作；同时要求通风条件好，便于气体交换；实验室地面应便于清洁，并应进行防滑处理；无菌操作室也叫接种室，进行材料的离体无菌操作，是植物组织培养研究或生产中最关键的一步，要求房间一般不宜过大，封闭性好，干燥清洁，能较长时间保持无菌；培养室要求能够控制光照、温度，并保持相对的无菌环境.因此，培养室应保持清洁和适度干燥。
植物组织培养实验（二）实验名称：母液的配制实验时间：第五、六周（分组进行）实验地点：植物组织培养实验室专业：生物技术及应用一、实验目的。
掌握各种营养元素和激素母液的配制方法，二、实验仪器设备、药品及试剂（1）实验仪器设备及用具1/100电子天平、1/10000电子天平、蒸馏水器、烧杯、棕色细口瓶、量筒、移液枪、各种规格的定容瓶、100ml、500ml烧杯、标签纸、记号笔等（2）实验药品及试剂IAA、6-BA、NAA、KT，各种无机盐，0.1mol /LNaOH溶液，0.1mol/L HCl溶液。
三、实验方法及步骤1. 20倍大量元素母液的配制。
在电子天平上按MS基本培养基配方扩大20倍分别称取所需要的5钟大量元素药品，分别置于500ml的烧杯中中，加蒸馏水100ml左右，搅拌溶解，然后一一倒入1000ml的容量瓶中（注意CaCl2要后加），最后加蒸馏水定容至刻度，此为20倍液的大量元素母液。
组培实习报告
一、实习背景随着生物技术的快速发展，植物组织培养技术作为一种重要的生物技术手段，在植物繁殖、基因工程、生物制药等领域发挥着越来越重要的作用。
为了更好地将理论知识与实践相结合，提高自身实践能力，我于今年暑假参加了为期一个月的植物组织培养实习。
二、实习目的1. 掌握植物组织培养的基本原理和操作技能；2. 熟悉实验室设备的使用和维护；3. 培养团队合作精神和创新能力；4. 提高自身综合素质，为今后的学习和工作打下坚实基础。
三、实习内容1. 植物组织培养基础知识学习在实习初期，我系统学习了植物组织培养的基本原理、操作步骤以及实验室安全管理等相关知识。
通过查阅资料、听课、讨论等方式，我对植物组织培养有了初步的认识。
2. 实验操作技能训练在实习过程中，我参与了以下实验操作：（1）外植体选择与消毒：学习如何选择合适的植物材料，并进行消毒处理，以保证培养过程中的无菌状态。
（2）愈伤组织的诱导：学习如何诱导外植体形成愈伤组织，包括培养基配制、接种、培养等环节。
（3）愈伤组织分化与再分化：学习如何诱导愈伤组织分化成苗，包括培养基调整、接种、培养等环节。
（4）试管苗移栽与培育：学习如何将试管苗移栽到土壤中，并进行后续的培育管理。
3. 实验室设备操作与维护在实习过程中，我熟练掌握了实验室常用设备的使用和维护方法，如高压蒸汽灭菌器、超净工作台、CO2培养箱、光照培养箱等。
四、实习收获1. 理论与实践相结合：通过实习，我将所学理论知识与实际操作相结合，提高了自己的实践能力。
2. 团队合作精神：在实习过程中，我学会了与团队成员相互协作、共同解决问题，培养了良好的团队合作精神。
3. 创新能力：在实验操作中，我遇到了一些难题，通过查阅资料、请教导师等方式，不断提高自己的创新能力。
4. 综合素质：实习过程中，我学会了如何高效地安排时间、处理问题，提高了自己的综合素质。
五、实习体会1. 植物组织培养技术的重要性：植物组织培养技术在植物繁殖、基因工程、生物制药等领域具有广泛的应用前景，掌握这一技术对于今后的学习和工作具有重要意义。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
植物组织培养实验及实习指导杨玲编西南林学院生物技术教研室目录实验一、母液的配制和保存 (2)实验二、培养基的配制与灭菌 (5)实验三、外植体消毒与初代培养的建立 (7)实验四、继代与增殖培养 (9)实验五、生根培养 (1)1实验六、植物茎尖脱毒培养 (1)3实习试管苗的炼苗与移栽 (1)5实验一、母液的配制和保存一、实验目的通过配制MS培养基母液，掌握贮备液的配制和保存方法。
二、原理配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即按培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存。
使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。
以MS培养基为例，所需配制的母液为：大量元素母液（母液Ⅰ，浓缩20倍）、微量元素母液（母液Ⅱ，浓缩200倍）、铁盐母液（母液Ⅲ，浓缩200倍）和有机化合物母液（母液Ⅳ，浓缩200倍）等。
三、实验材料、试剂和仪器设备1．试剂NH4NO3, KNO3, CaCl2·2H2O, MgSO4·7H2O, KH2PO4, KI, H2BO3， MnSO4·4H2O, ZnSO4·7H2O, Na2·MoO4·2H2O, CuSO4·5H2O, CoCl2·6H2O, Na2•EDTA•2H 2O，FeSO4·7H2O，烟酸，甘氨酸, 盐酸硫胺素, 肌醇, 盐酸吡哆醇, 蒸馏水2．仪器设备冰箱，天平，酸度计或pH试纸，烧杯（50ml，100ml，500ml，1000ml），量筒(1 000ml，100ml，25ml)，容量瓶(1000ml，500ml，100ml)，磨口试剂瓶(500ml，1 000ml)，药勺、称量纸、酸度计或pH试纸，滴管、玻璃棒，电炉，微波炉四、实验方法1.大量元素母液的配制配制时先用量筒量取蒸馏水大约800ml，放入1000ml的烧杯中，按照配方表中用量依次分别称取：NH4NO3,KNO3,KH2PO4,MgSO4.7H2O ,CaCl2.2H2O，待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液倒入1 000ml的容量瓶中，用蒸馏水定容至1000ml，然后，倒入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。
2.微量元素母液的配制按照配方表中用量用电子天平分别依次称取MnSO4•4H2O， ZnSO4•7H2O ，H2BO3，KI ，NaMoO4•2H2O， CuSO4•5H2O， CoCl2•6H2O，按制备母液Ⅰ的方法逐个溶解。
（钼酸钠难溶解，可在室温下用蒸馏水溶解后再加入到微量元素母液中。
）定容至1000ml，转入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。
3.铁盐母液配制把FeSO4•7H2O和 Na2•EDTA•2H2O分别置于450ml蒸馏水中，加热并不断搅拌使之溶解。
保持加热，把FeSO4溶液慢慢倒入Na2•EDTA溶液中并不断搅拌，接近沸腾时停止加热，待溶液冷却后把pH值调到5.5，加蒸馏水到最终容积1000ml，置于棕色细口瓶中，用力振荡1～2min，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名。
在室温下避光保存一段时间令其充分反应后，再置于4℃冰箱中保存备用。
4.有机化合物母液的配制按配方表中用量依次称取：维生素B1，烟酸，甘氨酸，维生素B6，用蒸馏水依次溶解并定容后，装入1000ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。
5.植物生长物质母液的配制NAA母液：准确称量10mg，先用少量1mol/LNaOH溶液完全溶解后，加蒸馏水定容至100ml，即配制成浓度为0.1mg/ml的NAA母液，转入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、浓度、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。
6-BA母液的配制方法相似，母液浓度为2mg/ml。
请注意细胞分裂素的溶解方法。
五、实验报告按照实验报告格式要求及各组在实验中的配制溶液情况，完成报告撰写。
附：MS培养基母液配方实验二、培养基的配制与灭菌一、实验目的学习用母液法配制培养基以及掌握培养基灭菌的方法。
二、原理组织培养所用的培养基含有植物细胞生长所必需的各类营养物质，同时也是微生物繁殖的极好场所，因此必需对培养基进行灭菌处理，以确保无菌操作的顺利进行。
三、实验材料、试剂和仪器设备1．试剂琼脂，蔗糖，蒸馏水，NAA，6-BA，1mol/LHCl，1mol/LNaOH2．仪器设备天平，烧杯（50ml，100ml，500ml，1000ml），量筒(1000ml，100ml，25ml)，移液管（10ml，5ml，2ml，1ml，0.5ml），药勺，称量纸，玻璃棒，吸耳球，滴瓶，酸度计或pH试纸，培养瓶，封口膜，耐热橡皮筋，线绳，高压灭菌锅，微波炉，电炉，标签纸，记号笔四、实验步骤1.培养基的配制培养基组成：MS+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L+3%蔗糖+0.8%琼脂(pH5.8)①将所需的各种母液按顺序放好，将洁净的各种玻璃器皿等放在指定位置。
本实验需配制的培养基所需吸取的各种母液的用量如表1所示：②取50ml烧杯一个，用量筒量取大量元素母液，然后用各母液专用移液管分别吸取微量元素母液，有机母液、铁盐母液和生长物质母液，置于烧杯中备用。
③取500ml烧杯一个，加入300ml蒸馏水，称量琼脂4g倒入烧杯中，将烧杯置于电炉上或微波炉内加热，待琼脂完全溶化后，加入15g蔗糖，充分溶解后，将准备好的大量元素、微量元素、铁盐、有机物和激素母液混合液倒入烧杯中，用蒸馏水将装过母液混合液的烧杯洗三遍，一并倒入500ml烧杯中，并加蒸馏水定容。
④充分混合后，用1mol/LNaOH和1mol/LHCl调节培养基的pH为5.8。
⑤把培养基分装到广口瓶中，每瓶约50ml。
用封口膜封好瓶口。
贴上标签，注明培养基名称，配制者姓名和配制日期，待灭菌。
2.培养基灭菌（灭菌条件：121℃，15分钟）①检查灭菌锅外层锅内水位，水量过少时应加水。
把分装好的培养基放入灭菌锅的消毒桶内。
②盖上锅盖，注意按照说明操作并确定已盖好，设置好温度和时间参数，开启电源加热灭菌。
③灭菌时间到后，先切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，待灭菌锅压力表指针降到0时，打开排气阀，旋松螺栓，开启锅盖，取出已灭菌的培养基。
④刚灭过菌的培养基成液体状，取出时不要用力摇动，否则会导致部分培养基沾附在瓶壁。
放置在水平桌面上自然冷却。
在室温下放置1-2天，观察有无微生物生长，以确定培养基是否彻底灭菌。
经检查没有杂菌生长的方可使用。
要求：每人准备培养基2瓶。
提前准备实验三所需的无菌材料。
五、实验报告附：稀酸和稀碱的配制方法1mol/LHCl取浓盐酸8.25ml，加蒸馏水至100ml，即为1mol/LHCl。
1mol/LNaOH称取氢氧化钠4g，加入蒸馏水100ml，即为1mol/LNaOH。
实验三、外植体的消毒与初代培养的建立一、实验目的通过实验，初步掌握外植体材料消毒、接种的无菌操作技术以及外植体初代培养的方法。
二、原理植物组织培养是在无菌条件下对离体的植物器官或组织的培养。
而植株各部分的表面携带着各种不同的微生物，所以在接种前就必须选择合适的消毒剂对外植体进行消毒，获得无菌材料进行组织培养，这是取得组织培养成功的前提和重要保证。
离体器官或组织受到适当刺激，便可进行器官分化，从而实现细胞的全能性。
三、实验材料、试剂和仪器设备1．实验材料：月季当年生枝条2．试剂：升汞，吐温-803.仪器设备（以各组所需为例）无菌器材：8瓶培养基4个不锈钢托碟+吸水纸1升无菌水大号、中号镊子各2把2把解剖刀、1把剪刀2个500ml烧杯非无菌材料：0.1%升汞消毒液200ml1个250ml消毒缸2盏酒精灯及火机1个1000ml搪瓷缸 (装废液用)1个锥形瓶（250ml），内装75%酒精150ml1个广口瓶(500ml)，内装75%酒精及棉球1把大号镊子、1把枝剪、1把解剖刀、1把旧牙刷橡皮筋若干、标签纸、记号笔、洗衣粉、毛巾、洗衣粉、喷雾器、鞋套、肥皂四、实验步骤1．实验二制备的培养基即是本实验所用培养基。
2．接种前，用75%酒精棉球擦拭超净工作台台面，将培养基及接种用具放入超净工作台。
房间用酒精喷雾降尘后打开超净工作台紫外灯及房间的紫外灯，照射约30mins；然后关闭紫外灯，打开房间换气扇以及超净工作台的风机，并微启超净工作台的玻璃挡板，通风20min后，即可进行无菌操作。
3．选取生长健壮的枝条，用饱满又未萌发的侧芽作为外植体（取中部的芽较好）。
将外植体用手术刀切去叶片，并剥去附在茎上的叶柄及皮刺，用毛刷沾洗衣粉刷洗并在自来水下冲洗干净。
吸干水份后切成约2-3cm的茎段，每段至少有1个侧芽。
将处理好的外植体转入洁净的消毒缸中，用加了数滴吐温-80的0.1%的升汞溶液浸泡10min。
在表面灭菌过程，应不停摇动消毒缸使消毒液与外植体充分接触。
3．准备进入接种间，用肥皂水清洗双手至手肘部位并在自来水下冲洗干净，进入缓冲室后套上鞋套。
4．把浸泡在消毒液中的外植体转移到超净工作台中。
消毒时间结束后在酒精灯火焰旁用无菌镊子将已完成表面灭菌的外植体转移到烧杯中，用无菌水清洗5次，每次不少于1分钟，洗时不断摇动烧杯以确保完全除去消毒剂。
最后一次清洗后将外植体转移到无菌托碟上，吸干水分备用。
5．将消毒后的外植体按极性方向接种到培养基上，每瓶可接入3～4段月季茎段。
将培养瓶放置在21±2℃，光强800～1200lx，光周期为12h的环境下培养。
约30天长成具5～8片叶的无根试管苗。
6．各组的每位同学操作完后将镊子等器械浸入75%酒精中，由下一位同学在使用前灭菌。
方法是将浸于酒精中的器械取出后置于酒精灯火焰上充分灼烧，待冷却后方可使用。
五、实验报告1.接种2天后观察污染情况，计算污染率。
污染率=污染的材料数/总接种材料数×100%2.每周观察并记录外植体萌动的情况，包括外植体基部是否有愈伤组织出现及其出现时间，侧芽萌发时间及芽的生长状况（萌芽数及芽平均长度）等，并计算萌发率。
并注意观察是否有芽玻璃化等异常情况出现。
萌发率=侧芽萌发的茎段数/总接种材料数×100%六、思考题为什么常在消毒液中加入1～2滴表面活性剂如吐温-80？实验四、继代与增殖培养一、实验目的通过实验，掌握运用植物生长调节物质调控植物器官分化的方法。
二、原理以植物的茎、叶等作为外植体进行离体培养，可以直接诱导器官分化，产生芽、根，形成新的植物体；也可以诱导其改变原来的分化状态脱分化形成愈伤组织。