月季植物组织培养实验报告
月季的组织培养
外植体的取材部位对芽的萌发也有影响,“Gold Glow”和“Improved fire”月季的侧芽如果在不 同激素的培养基上进行组培,可发现在枝条顶部 和基部的芽发育慢,而枝条中部的芽发育快。在 研究中发现靠近外植体顶端的芽较其他部位芽的 发育慢,在茎尖脱毒培养时,由嫩茎的顶芽得到 的外植体成活率高于腋芽。在实际工作中由于顶 芽数量少,故月季的组培依旧常常使用腋芽作为 外植体,这时一般需要进行茎切除顶芽(摘心) 以打破顶端优势、促使腋芽健壮生长,以促进嫩 茎的增殖。 此外,外植体的取材时间及培养所需时间对月季 嫩茎的发育和增殖也有影响。对于“Bulgarian rose”而言,选取外植体的最佳时间是冬季 (1~3月),而“Improved fire”月季的培养时 间以28d继代一次较好,超过 28d,茎的数目就 不再增加了。
诱导培养基以MS为基本培养基(硝酸 盐、钾和铵的含量高),附加适量的 细胞分裂素6-卞氨基嘌呤(6-BA)0.53.0mg/L和生长素萘乙酸(NAA) 0.01-1.0mg/L,且培养基中添加蔗糖有 增加丛生芽数量的作用。
壮苗培养与生根
1、壮苗培养 在继代培养过程中,细胞分裂素浓度的增加有助于增殖系 数的提高。但伴随着增殖系数的提高,增殖的芽往往出现 生长势减弱,不定芽短小、细弱,无法进行生根培养的现 象;即使能够生根,移栽成活率也不高,必须经过壮苗培 养。壮苗培养时,可将生长较好的芽分成单株培养,而将 一些尚未成型的芽分成几个芽丛培养。 通过选择适宜的细胞分裂素和生长素的种类及不同浓度配 比,可以同时满足增殖和壮苗的不同要求。高浓度的生长 素和低浓度的细胞分裂素的组合有利于形成壮苗。因此, 在以丛生芽方式进行增殖时,适当降低培养基中BA等细胞 分裂素的浓度,并增加NAA等生长素的浓度,就能达到壮 苗培养的目的。在实际生产中,我们一般用较低浓度的细 胞分裂素与生长素组成合理的比列,将有效增殖系数控制 在3.0-5.0,以实现增殖和壮苗的双重目的。
月季组织培
月季组织培养技术作者:龙华班级:林学10级1班学号:20101832 指导老师:钟宇摘要:月季为蔷薇科蔷薇属木本植物, 其花姿优美,花型丰富,花色齐备, 树型易修剪,栽培难度小;其花型大,美丽,幽雅,高贵。
月季通常采用扦插、嫁接和压条繁殖,但是一些名贵品种扦插不易生根,主要靠芽接繁殖,而芽接速度慢,因而造成优良品种的月季苗供不应求。
关键词:月季;组培;赤霉素引言随着生物技术的迅猛发展,植物组织培养和细胞培养等现代生物技术得到普遍重视和应用,为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径,在月季的改良上显示了很大的应用潜力。
以月季为试材进行组培试验,综述了月季组织培养、快繁的研究技术及进展,并对月季组培的最优条件进行了总结。
本研究探索出的月季组培快速繁殖技术,在试管苗单芽诱导丛生苗、利用代用品培养降低组培成本、试管苗管外扦插生根、试管苗微型化长途运输等方面,较前人有所改进。
1 月季组织培养的研究进展月季是世界栽培种类较多的多年生木本花卉之一。
别名长春花、月月红、斗雪红、瘦客等,蔷薇科蔷薇属植物,其花姿优美,花型丰富,花色齐备, 树型易修剪,栽培难度小。
其花型大,美丽,幽雅,高贵。
在鲜花应用中,月季花的地位和比重与日俱增,是世界上著名的四大切花之一[1]。
月季的花色可编制成完美的连续色谱。
月季是重要的花卉,世界的销售额多年来稳居各类花)卉的第一或第二。
月季的一大优点是分布极广,适应性良好,栽培容易。
月季是四季常青花卉,花期长,花色多,芳香馥郁,由于其特殊的情感内涵和商品价值[2],被广泛应用于园林、庭院装饰,并可制成月季盆景,作切花、花篮、花束等。
此外,月季花可提取香料,根、叶、花均可人药,具有活血消肿、消炎解毒等功效。
当前,月季育种是花卉育种中最活跃的领域之一。
月季通常采用扦插、嫁接和压条繁殖,但是一些名贵品种扦插不易生根,主要靠芽接繁殖,而芽接速度慢,因而造成优良品种的月季苗供不应求[3]。
随着生物技术的迅猛发展,植物组织培养和细胞培养等现代生物技术得到普遍重视和应用,为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径,在月季的改良上显示了很大的应用潜力。
实习报告月季
实习报告:月季栽培与养护一、实习背景作为一名热爱园艺的学生,我深知月季花在我国园艺领域的重要地位。
为了深入了解月季的栽培与养护技术,提高自己的实践操作能力,我利用暑假期间,在本地一家花卉种植基地进行了为期一个月的实习。
二、实习内容1. 月季栽培在实习期间,我参与了月季的种植环节。
首先,我学习了月季的生物学特性,包括生长习性、花期、繁殖方式等。
在此基础上,我掌握了月季的种植技巧,如选择合适的种植时间、土壤改良、栽植密度等。
此外,我还学习了如何给月季浇水、施肥,以及如何进行修剪、抹芽等操作。
2. 月季养护在月季栽培过程中,养护工作至关重要。
实习期间,我学习了月季病虫害防治、修剪造型、调整株型等养护技术。
针对月季常见的病虫害,如黑斑病、蚜虫等,我掌握了相应的防治方法,如喷洒农药、生物防治等。
在修剪方面,我学会了如何根据月季的生长状况进行适度修剪,以保持良好的株型和延长花期。
3. 实习收获通过实习,我不仅掌握了月季的栽培与养护技术,还加深了对园艺行业的认识。
在实际操作中,我学会了如何将理论知识运用到实践中,提高月季的种植效益。
同时,实习期间与我一起工作的同事们,他们的敬业精神和丰富经验也给我留下了深刻的印象,激发了我对园艺事业的热爱。
三、实习体会本次实习使我深刻认识到,月季栽培与养护并非简单的劳动,而是需要掌握一定的专业知识和技巧。
作为一名园艺爱好者,我将继续努力学习,不断提高自己的园艺技能,为我国园艺事业的发展贡献自己的力量。
同时,实习期间我也体会到了园艺工作的艰辛。
在炎炎夏日,我们顶着高温,辛勤劳作,只为让月季茁壮成长。
这让我更加珍惜每一株花草,也更加尊敬那些为园艺事业默默奉献的劳动者。
总之,这次实习让我受益匪浅,不仅提高了我的实践操作能力,拓宽了我的知识视野,也让我对园艺事业产生了更深的感情。
在今后的学习和工作中,我将继续努力,为我国园艺事业的发展贡献自己的力量。
月季的植物组织培养
月季的植物组织培养一.实验目的1.掌握蔷薇科月季的组织培养技术2.熟悉、巩固无菌操作技术二.实验器皿及试剂1.仪器及用品:超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、电子天平、电热炉酒精灯、镊子、解剖刀、解剖剪、烧杯、三角瓶、培养皿、滤纸、封口膜2.试剂:MS+6BA1+NAA1(诱导)培养基、MS+6BA2+NAA2(继代)培养基、70%酒精、3%次氯酸钠、无菌水3.材料:月季茎段、幼嫩叶片、花萼片、花瓣及花药。
三.实验步骤配制诱导培养基:MS+6BA1+NAA1,1升,灭菌后分装到35个培养1.皿中。
2.取材:将采集的月季茎段、幼嫩叶片、花萼片、花瓣及花药冲洗干净,按不同部位分装到3个500烧杯中,放入超净工作台;先用70%酒精浸没并轻摇10秒进行预消毒;倒出酒精,加入3%次氯酸钠浸没,轻摇11分钟;倒净次氯酸钠,用无菌水冲洗5遍以上,倒出无菌水。
3.将消毒后的外植体放入带有滤纸的无菌平皿中,用解剖剪和解剖刀将嫩叶剪成5mm2大小、茎段长2—3cm每段至少有1 个侧芽、将花苞打开取花药,分别接种到带有培养基的平皿中并封口(每皿3—5个)。
4.标记好后,放入培养室中培养(2周左右)。
5.配制分化培养基:MS+6BA2+NAA2培养基,配制1升,灭菌后分装到35个100ml的三角瓶中。
6.挑选长有愈伤组织的外植体,将其转移到分化培养基中。
在超净工作台中,将培养皿封口膜在酒精灯旁打开,将长有愈伤组织的外植体用灭菌的镊子从平皿中取出,转移到带有分化培养基三角瓶中(每瓶最多)并封口。
7.标记好后,放入培养室培养。
继续观察愈伤组织的生长情况。
四.实验结果茎段出愈率=25根出愈/总接种40根*100%=63%叶片出愈率=5片出愈/总接种30片*100%=17%花药及萼片出愈率=1片出愈/总接种20片*100%=5%通过实验得出月季茎段的出愈率最高,其次是叶片及花药。
接种过程中有三个平皿出现污染现象。
五.问题分析及解决1.三个污染的外植体,两个是叶片内延至周围。
月季的组培实践
月季的组培实践1.1 实验材料月季。
1.2 材料处理月季枝条在自来水下冲洗干净, 用75%乙醇表面消毒30–40秒, 再用0.1%HgCl 2溶液灭菌2–6分钟, 无菌水冲洗3–5次。
在无菌条件下将叶片、叶柄和茎段剪成0.5 cm见方的小块或1 cm的小段, 并露出新鲜伤口。
培养瓶开口于酒精灯火焰处,接种于诱导愈伤组织培养基上2 培养基成分与培养条件2.1 培养基及培养条件(1) 诱导愈伤组织和不定芽均以MS培养基为基础.培养基诱导愈伤组织的最佳培养基配比为1.0 mg·L–16-BA+3.0 mg·L–12,4-D(2) 诱导不定芽产生的植物生长调节剂配比1.0 mg²L–1 6-BA+0.1 mg·L–1NAA+0.02 mg·L–1TDZ(3) 1/4MS+0.1 mg·L–1NAA为生根培养基.(含30 g²L–1蔗糖和7.0 g²L–1琼脂, pH 5.8–6.2), 并于121°C高压蒸汽灭菌25分钟。
培养条件为(25±2)°C, 每天16小时光照, 光照强度为40 μmol²m–2²s–1。
2.2 愈伤组织诱导选取经处理的外植体接种于不同激素配比(表1)的MS培养基上进行愈伤组织诱导。
定期观察, 3–4周继代1次。
2.3 不定芽的诱导和增殖外植体在愈伤组织诱导培养基上培养30天后, 挑选长势良好的愈伤组织, 接种yu配比植物生长调节剂的培养基中进行不定芽诱导.2.4 生根诱导将长势良好的再生苗移植到生根培养基上诱导生根.2.5 移栽炼苗将再生根生长状况良好的微型月季幼苗取出, 用流水缓慢地将根部残留的培养基冲洗干净(注意不要伤及根部), 移栽至土壤中炼苗1–7天。
月季组织培养
有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等
不同植物激素使用顺序和使用量
使用顺序 实验结果
先生长素, 有利于分裂但 后细胞分裂素 不分化 先细胞分裂素, 细胞既分裂也 分化 后生长素 同时使用 分化频率提高
生长素细胞 结果 分裂素比值 比值高时 促根分化, 抑芽形成 比值低时 促芽分化, 抑根形成 比值适中 促进愈伤组 织生长
3 .培养基
• 用于月季的基本培养基种类很多,如 B5、N6、WPM和 MS 培养基等。众多培养基中以 MS 培养 基的效果为最好,广泛用于月季的离体快速繁殖中。培养基的培养成分(主要是各类无机盐浓度) 及物理性能(pH 值、糖分以及固化支持物)会影响月季的组培。对 MS 培养基的成分及物理性能 进行合理的选择会提高月季组织培养的成功率。 MS 培养基中无机盐离子浓度因月季培养阶段的不同而有不同: 1)茎段培养阶段,将带有腋芽的嫩茎接种到不添加任何激素类物质的 MS 和 1/2MS 培养基上,两 周后,MS 培养基上的腋芽生长,而在 1/2MS 培养基上的腋芽几乎不萌发或发育不良。通过提高 MS 培养基中氯化钴的浓度,并用硫酸铵代替硝酸铵培养“Bulgarian rose”,可使其茎的生长状况 得到改善。同时有报道认为在 MS 培养基中添加硝酸银可以缓解叶片衰败并提高茎段侧芽的生长。 2)诱导生根阶段,一般要求较低的 MS 培养基无机盐离子浓度。Skirvin 等在用(Forever Yours )月季做生根试验时发现,采用1/4MS 培养基,不加生长素即可以促进生根。
外植体消毒
接种
冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌 水冲洗至少三次之上
培
养
栽
培
移
栽
月季组织培养
(b)移栽。幼苗出瓶后,先洗去沾附的琼 脂培养基,再种植到粗沙+园田土(1:3) 介质中,总的原则是疏松透气,有一定的 保水、保肥能力。种植密度2~3厘米×4~ 6厘米/株,移栽完毕浇透水,并用0.1%的 百菌清、多菌灵或甲基托布津等喷雾保苗, 能显著提高成活率。 (c)移栽后管理。移栽后需保持相对湿度 85%以上,在温室、拱棚中移栽,覆好遮 荫网,一般成活率都比较高,并注意通风 和温度管理。4~6周后,须做好第二次移 植,通常植入5厘米×9厘米的塑料杯中, 每杯种1苗,再经4~6周,地上、地下部分 都充分生长,有些植株还能开花。
• (4) 壮苗培养 ①对增殖倍率高的品 种,所增殖的嫩茎很细弱,要求进行一次 壮苗培养,以取得适合生根和今后移栽的 苗子。壮苗培养的培养基为:MS+BA0.30.5+NAA0.01-0.1,如果并不特别强调繁 殖速度,也可以一直使用这种培养基,以 壮苗为主,增殖为辅,使增殖与壮苗合为 一步。②培养条件。光照10~12小时/天, 光强800~1800LX,温度20~23℃,最高 24~26℃。
(四)问题与讨论
• 初代培养外植体的褐变:褐变是由于植物组织
中的多酚氧化酶被激活而使细胞的代谢发生变化。 在褐变过程中产生醌类物质,他们多呈褐色,当 扩散到培养基后,就会抑制其他酶的活性,从而 影响从接种的外植体的一种现象。 减轻褐变现象发生的方法: (1)合适的培养基。降低无机盐浓度和细胞分 裂素浓度,但蔗糖浓度不能降低。 (2)使用抗氧化剂PVP半光氨酸 (3)使用吸附剂活性炭,0.1%~0.5% (4)连续转移
• (5)生根与移栽 月季嫩芽生长到一定 长度时,就应切割下来,转入生根培养基。 切下的嫩芽长度以2~3厘米为宜,让幼苗基 部伤口愈合,已长出根原基,幼根尚未长出, 即出瓶种植。这种方法不会损伤根系,移栽 速度快,成活率高。 • (a)以MS培养基为基础,配方为 MS+NAA0.5,此外加入300mg/L活性炭, 30g/L蔗糖。插植2厘米以上无根嫩茎,经2 周左右出现根原基,幼根尚未长出即出瓶种 植。
月季组培实验报告(3篇)
第1篇一、实验简介实验名称:月季组培实验实验目的:通过组培技术,了解月季组织培养的原理和方法,掌握无菌操作技术,提高植物繁殖效率,为月季的快速繁殖和遗传改良提供技术支持。
实验时间:2023年X月X日至X月X日实验地点:XX大学园艺实验室实验材料:月季植株(品种:XX)实验设备:超净工作台、无菌操作箱、高温高压灭菌器、移液枪、解剖刀、培养皿、试管、滤纸、镊子、剪刀、酒精灯、高压蒸汽灭菌锅等。
二、实验方法1. 外植体选取与消毒:- 选择生长健壮的月季植株,取其茎尖作为外植体。
- 使用无菌水清洗外植体,然后用75%酒精浸泡30秒,再用无菌水冲洗3次。
- 将外植体置于0.1%的氯化汞溶液中消毒5分钟,再用无菌水冲洗5次。
2. 诱导生根:- 将消毒后的外植体切成1-2厘米的小段,接种到含有不同激素比例的MS培养基中。
- 将接种后的培养皿放入培养箱中,培养温度为25℃,光照时间为12小时/天。
3. 生根培养:- 当外植体开始生根时,将培养基更换为含有较低激素浓度的MS培养基。
- 继续培养至生根率达到80%以上。
4. 炼苗与移栽:- 将生根的植株从培养皿中取出,置于温室中炼苗。
- 炼苗成功后,将植株移栽到花盆中,进行正常的养护管理。
三、实验结果与分析1. 外植体消毒效果:- 通过显微镜观察,发现消毒后的外植体表面无细菌污染,说明消毒效果良好。
2. 诱导生根效果:- 在不同激素比例的培养基中,生根效果最好的培养基为1/2MS+0.5mg/LNAA+0.5mg/L IBA。
- 在此培养基中,生根率达到90%,平均根长为3.5厘米。
3. 炼苗与移栽效果:- 炼苗过程中,植株生长良好,无病虫害发生。
- 移栽后的植株成活率达到了95%。
四、实验讨论1. 外植体选取:- 本实验选择茎尖作为外植体,主要是因为茎尖细胞分裂旺盛,易于诱导生根。
2. 消毒方法:- 消毒是组培实验的关键步骤,本实验采用氯化汞溶液消毒,效果良好。
3. 激素配比:- 激素配比对生根效果有显著影响,本实验通过优化激素配比,提高了生根率。
月季组织培养
目录摘要 (4)前言 (4)综述 (5)1.外植体 (5)1.1取材部位1.2取材时间1.3取材大小2. 消毒 (8)3. 接种方式 (8)4.培养基 (9)4.1基本培养基4.2激素4.2.1不同激素对诱导愈伤组织的影响4.2.2不同激素对继代培养的影响4.2.3不同激素对生根培养的影响4.3糖浓度的影响4.4无机盐4.5琼脂5.培养基的配置 (13)6.培养条件 (14)7.防褐化 (14)技术路线与实验设计 (15)参考文献 (17)摘要:为了进行月季组织培养实验,我们查阅了相关文献,从多个方面了解影响月季组织培养的因素,如外植体的取材部位、时间、大小、消毒、接种方式、不同阶段激素的配比、培养基成分、培养条件等,以期在实验中调控月季组培的环境,确保实验顺利进行。
基于我们想探究激素对组织培养中细胞的脱分化和再分化的作用这一想法,我们的设计了以NAA浓度、6BA浓度、外植体部位为影响因素的正交实验(L9(34)),并考察NAA与6BA的交互作用。
同时,我们还以接种方式作为单因素考察其对愈伤组织诱导的影响。
关键词:组织培养、影响因素、正交前言在阅读了植物组织培养的相关文献资料后,我们设计了此次组织培养实验方案,考察细胞分裂素浓度、生长素浓度、接种方式、取材部位因素对愈伤组织的形成有何影响,期望寻找出诱导月季愈伤组织的最佳条件;同时探究由愈伤组织诱导出芽及生根所需的最佳浓度配比。
并在月季组织培养过程中,掌握外植体消毒方面要注意的事项,整个培养过程中培养条件的选取与控制,实验过程中出现的现象的观察记录以及分析,在这个过程中不断加强理论与实践的联系,深化对理论知识的理解。
对于外植体选择,我们采用了以往研究者的做法,即选用带腋芽的枝条。
但是,我们的不同之处在于,我们还保留了一部分刚好能包裹住腋芽的叶柄。
这样做的目的是为了在消毒时避免芽受到太大损伤。
参考论文中防褐化多用抗氧化剂和其他抑制剂,减轻外植体在组培中的酶促褐变,我们根据生理生化原理,考虑到酶活性与温度有关、以及外植体内的酚类物质含量有关,因此需对外植体做如下处理:接种前先将外植体用低温水流冲洗24小时;选择晴朗天气采摘外植体。
月季植物组培方案
月季组织培养方案1供试材料来源:本实验材料取自盆栽的丰花月季,剪取腋芽尚未萌发的枝条,去除茎段两端各2毫米,选芽以茎段中芽为最好。
2技术路线:外植体选取——初代培养——增值培养——生根培养——训化3方法步骤:(1)外植体的剪取和消毒程序的筛选: 取无菌苗叶片切成0.5cm×0.5cm的小块,叶柄,茎段切成小段。
外植体很小时,有利于培养脱毒的植株(对月季的杉树坏疽环斑病毒可通过茎尖培养的方式达到脱毒的目的,如果单纯为了快速繁殖,可用大的茎尖或茎段进行离体培养,这时外植体的大小决定了茎尖的成活比例。
一般说外植体愈大,成活率愈高,成苗时间愈短。
外植体的大小同时影响外植体自身的发育和月季组培苗茎的增殖,外植体的长度在9.0-10.0mm,直径在3.0-3.5mm范围时(茎的增殖和发育是最好的).消毒:接种材料为当年抽生侧芽饱满的幼嫩茎段,自来水冲洗10-20min;75%或70%乙醇表面消毒15s。
用无菌水冲洗3次。
2%NaClO灭菌5—10min。
然后用无菌水冲洗3次。
(2)初代培养基的筛选:诱导培养基以MS为基本培养基,附加适量的细胞分裂素6一苄氨基嘌呤(6-BA)和生长素萘乙酸(NAA)。
NAA增加至0.1mg,L时,6一BA浓度的高与低已对增殖系数不产生明显影响。
最适的侧芽诱导培养基为MS + 6一B A 0.5,3.0 mg,L + NAA 0.0l,1(0mg,L,且培养基中添加蔗糖有增加丛生芽数量的作用。
(3)增殖培养基的筛选:诱导培养基上已经萌发的嫩芽转入附加6一BA、NAA等激素的MS培养基中,进行增殖继代。
KT,IAA等激素作用效果较差,协同作用不明显。
低浓度的6 一BA有利于不定芽的增殖,浓度过高则抑制不定芽增殖,适量NAA有利于芽和叶生长,但浓度过高诱导产生大量愈伤组织,不利于侧芽的直接分化和生长。
在NAA浓度相同BA 浓度不同的培养基中,随BA浓度的升高,芽苗的增殖系数也相应提高。
月季组织培养(1)
月季组织培养分组:12级生技2班3组指导老师:韩文军成员:成晨,江应龙,牟思斯,盛威摘要了解月季组织培养的研究概况,以及组织培养中遇到的相关问题的研究。
外植体的选择为月季枝条,灭菌用75%酒精和10%次氯酸钠,初代培养基为MS+BA 1mg/L,继代培养基为MS+BA1.5mg/L 十N A A 0.05m g/ L。
引言月季是中国十大名花之一,被誉为“花中皇后”,具有极高的观赏价值和商业价值①它是蔷薇科蔷薇属多年生落叶或常绿灌木②,被广泛运用于园林绿化,具有很高的观赏价值和经济价值。
目前月季的繁殖手段除了传统的扦插、嫁接、压条之外,还有月季的组织培养技术,相对前面几种方法来说,月季的组织培养技术能大幅地提高获得月季植株的速度和质量,正越来越被广泛地运用到实际生产中。
一方面,组织培养可有效地保持母株的优良性状;另一方面,它对植物品种改良和选育新品种也有重要意义③。
0实验流程外植体处理→初代培养→继代培养→生根培养→壮苗炼苗→移栽1外植体的选择和灭菌1.1外植体的选择月季组培外植体通常采用带芽茎段。
同一枝条上不同部位的腋芽诱导效果不同。
取枝条中部的腋芽效果最好,这可能与月季枝条不同部位的腋芽成熟程度及休眠状态不同等因素有关。
很多研究都证明枝条中部的腋芽萌发较顶部和基部时间早,且中部的腋芽长势好,增殖系数高,其次是基部,再次是顶部④-⑥。
另外,取材时也注意天气的选择,根据几次初代培养的结果来看,天气晴好时取材初代培养的成功率要比阴雨天要高,具体原因可能是阴雨天植物的外植体带菌比较多,杀菌不彻底从而使培养失败。
此外,外植体的休眠状态对芽的萌发也有影响,李青等⑦采用1 年生枝条的冬芽和当年生枝条的腋芽为外植体进行比较,发现越冬芽较嫩枝条的芽成活率高,且萌动所需时间较短,主要原因是芽内积累了丰富的营养物质,在适宜的条件下很快萌发生长;而春季嫩枝上的芽,由于刚刚形成且未经休眠,所以本身较弱,但越冬芽污染率高于嫩枝芽。
月季植物组织培养实验报告
月季植物组织培养实验报告姓名:张恒玉(天津师范大学10生乙10517085)摘要:月季(Floribunda roses)为蔷薇科蔷薇属木本植物,其花姿优美,花型丰富,花色齐备, 树型易修剪,栽培难度小;其花型大,美丽,幽雅,高贵。
在鲜花应用中,月季花的地位和比重与日俱增,是世界上著名的四大切花之一。
植物组织培养主要以绿色植物细胞或组织块为研究主要对象,把植物体上的生活器官、组织块活细胞从整体上离体下来进行人工培养。
以细胞全能性为理论基础对最适月季培养的培养基、激素、培养基质进行筛选,使离体组织经过脱分化和再分化而发育成新的植物个体。
为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径,在月季的改良上显示了很大的应用潜力。
关键词:月季组织培养Rose Plant Tissue Culture Lab ReportName: ZhangHengyu(Tianjin Normal University college of Life Science, Biological Sciences 300387)Abstract:Rose (Floribunda roses) for the woody Rosaceae Rosa, the beautiful flower position, abundant flowers, colors available, easy to trim the tree, planting small difficulty; its flowers large, beautiful, elegant, noble. Applications in the flowers, the status and the proportion rose growing is the world's leading one of the four cut flowers. Plant Tissue Culture main object of the green plant cells or tissue blocks for research, Of life on the plant organ, tissue block living cells isolated from the whole down the artificial culture, Cell totipotency theory based on the optimum rose culture medium, hormones, culture media filter, Isolated tissue and develop into new individual plants after dedifferentiation and redifferentiation. breeding of new varieties offer a new way, in the rose show a significant improvement potential applications.Keywords: Rose tissue culture1 月季介绍月季为常绿有刺灌木,或呈蔓状与攀援状。
月季外植体培养实验报告
月季外植体培养实验报告引言外植体培养是一种常用的植物组织培养技术,通过将从植物中取下的外植体(如茎段、叶片等)在含有适宜营养物质的培养基上进行培养,可以实现植物的无性繁殖和快速繁殖,研究不同因素对植物生长和发育的影响。
本实验旨在探究月季外植体的培养技术及其对外植体生长的影响。
实验方法实验材料准备选取大棚中生长良好、无病虫害的月季植株作为供试材料。
准备无菌操作台、培养基、外植体切割工具等实验器材。
外植体的选择和处理从月季植株中选择茎段作为外植体。
将茎段从植株上剪下,并在实验室中进行无菌处理。
过程包括外植体表面浸泡在70%的酒精中,然后将其浸泡在含有0.1%双氧水的消毒液中,最后将其用无菌蒸馏水冲洗3次。
培养基的准备和无菌分装采用MS培养基作为基础培养基,并添加适量的植物生长激素(如IAA、GA3等)和糖类。
将培养基溶解,并倒入试管中。
对试管进行高压灭菌,保证培养基的无菌性。
外植体的接种和培养将处理好的外植体接入培养基中,每个试管放入一枚外植体,并尽量避免外植体之间的接触。
将试管密封并放置于室温光照适宜的培养箱中,进行培养。
生长指标的测定和分析定期观察外植体的生长情况,包括根系的生长、茎段的伸长以及叶片的形成等指标,并记录观察结果。
利用SPSS软件对数据进行统计分析。
实验结果与分析经过10天的培养,可以观察到月季外植体有生长的迹象。
经过统计分析,发现添加IAA和GA3的培养基对月季外植体的生长起到了明显的促进作用。
在添加IAA的培养基中,外植体的根系生长更加旺盛,根长度显著增加;在添加GA3的培养基中,外植体的茎段更加伸长,茎高度有所增加。
而添加过多或过少的激素则会对外植体的生长产生抑制作用,结果显示IAA和GA3的最佳浓度分别为2mg/L和1mg/L。
结论本实验表明,在月季外植体培养中,添加适量的IAA和GA3可以促进外植体生长。
具体而言,适量的IAA可以促进根系发育,适量的GA3可以促进茎段伸长。
月季组培实验报告
月季快速繁殖实验报告月季介绍月季花(学名: Rosa chinensis Jacq.)被称为花中皇后,又称“月月红”,是常绿、半常绿低矮灌木,四季开花. -般为红色.或粉色、偶有白色和黄色.可作为观赏植物,也可作为药用植物,亦称月季。
有三个自然变种,当代月季花型多样,有单瓣和重瓣,尚有高心卷边等优美花型;其色彩艳丽、丰富,不仅有红、粉黄、白等单色,尚有混色、银边等品种;多数品种有芳香。
月季的品种繁多,世界上已有近万种,中国也有千种以上。
一、实验目的1.掌握月季快繁体系: ①母株的选择②外植体消毒与接种③诱导培养④生根培养⑤.驯化移栽的操作流程2.掌握无菌操作的植物组织培养办法;3.通过配备ms 培养基母液,掌握母液的配备和保存办法;4.理解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育,最后长成完整再生植株的过程,加深对植物细胞的全能性的理解。
二、实验原理(一)植物组织培养植物组织培养是把植物的器官,组织以至,单个细胞,应用无菌操作使其在人工条件下,能够继续生长,甚至分化发育成- -完整植株的过程。
植物的组织在培养条件下,原来已经分化停止生长的细胞,又能重新分裂,形成没有组织构造的细胞团,即愈伤组织。
这-过程称为"脱分化作用”,已经“脱分化”的愈伤组织,在一定条件下,又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官,这一过程称“再分化作用”。
(二)植物细胞的全能性植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都含有该植物的全套遗传基因,在一定培养条件下每个细胞都可发育成一种与母体一-样的植株。
(三)组织的分化外植体诱导出愈伤组织后,通过继代培养,能够在愈伤组织内部形成一类分生组织即含有分生能力的小细胞团,然后,再分化成不同的器官原基。
有些状况下,外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。
(四)培养基的构成培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近,似成功地使用该培养基进行组织培养的重要条件。
月季培养实习报告
月季培养实习报告一、实习背景与目的近年来,随着我国城市绿化和家庭养花事业的蓬勃发展,月季作为一种观赏价值高、花期长、适应性强的花卉,越来越受到广大花卉爱好者的青睐。
为了提高自己的花卉栽培技能,本次实习我选择了月季培养作为研究方向,旨在学习掌握月季的繁殖、栽培管理、病虫害防治等方面的知识,为今后的花卉种植工作打下坚实基础。
二、实习内容与过程1. 月季繁殖(1)扦插繁殖:选取健康、无病虫害的月季枝条,剪取长度为15-20cm的插条,插入消毒后的培养土中,保持适当的湿度,大约经过2周时间,插条即可生根发芽。
(2)嫁接繁殖:采用切接法,将砧木和接穗在形成层紧密对接,用嫁接膜绑扎固定,大约经过2周时间,嫁接部位即可愈合生长。
2. 月季栽培管理(1)土壤与施肥:月季喜排水良好、肥沃的土壤。
在栽培过程中,应定期施用有机肥和复合肥,以保证月季生长所需的养分。
(2)浇水与光照:月季喜湿润环境,但不耐水湿。
浇水应遵循“不干不浇,浇则浇透”的原则。
同时,月季喜阳光充足的环境,应保证其充分接受光照。
(3)修剪与整形:为保持月季良好的生长态势,应及时修剪病弱枝、枯枝和过密枝,促使植株通风透光。
同时,根据需要对植株进行整形,以达到理想的美观效果。
3. 病虫害防治(1)病害防治:月季常见的病害有白粉病、锈病等。
防治方法包括:选用抗病品种、加强栽培管理、及时拔除病株、用药物治疗等。
(2)虫害防治:月季常见的虫害有蚜虫、红蜘蛛等。
防治方法包括:物理防治(如挂黄板、设置防虫灯等)、生物防治(如利用天敌昆虫、施用生物农药等)和化学防治(如喷洒低毒高效农药等)。
三、实习收获与体会通过本次月季培养实习,我对月季的繁殖、栽培管理、病虫害防治等方面有了更深入的了解,实践操作能力得到了很大提高。
同时,我也认识到,作为一名花卉栽培工作者,不仅需要掌握丰富的理论知识和实践技能,还要具备良好的观察力、创新力和敬业精神,才能在花卉栽培领域取得更好的成绩。
组培月季实习报告
一、实习背景随着现代生物技术的快速发展,组织培养技术在植物繁殖中的应用越来越广泛。
为了深入了解组织培养技术在月季繁殖中的应用,提高自己的实践操作能力,我于XX年XX月XX日至XX年XX月XX日在XX花卉研究所进行了为期一个月的组培月季实习。
二、实习内容1. 组培基础知识学习实习初期,我重点学习了组织培养的基本原理、操作步骤和注意事项。
通过学习,我了解了月季植物组织培养的流程,包括外植体选择、消毒、诱导愈伤组织、诱导芽分化、诱导根分化以及生根培养基的制备等。
2. 实践操作在掌握了组培基础知识后,我开始进行实际操作。
具体内容包括:(1)外植体消毒:选取健康的月季枝条,用75%酒精和氯化汞进行表面消毒,再用无菌水冲洗。
(2)诱导愈伤组织:将消毒后的外植体接种到MS培养基上,添加适当的植物生长调节剂,在恒温培养箱中诱导愈伤组织形成。
(3)诱导芽分化:将愈伤组织转移到分化培养基上,添加适量的生长素和细胞分裂素,诱导芽分化。
(4)诱导根分化:将分化出的芽转移到生根培养基上,添加适量的生长素,诱导根分化。
(5)生根培养基的制备:根据实验要求,制备适宜的生根培养基。
3. 数据记录与分析在实习过程中,我详细记录了每一步操作的步骤、时间、温度、光照等数据,并对实验结果进行分析,以便了解月季组织培养的效果。
三、实习收获1. 提高了动手能力:通过实际操作,我掌握了组织培养的基本技能,提高了自己的动手能力。
2. 深化理论知识:在实习过程中,我将所学理论知识与实际操作相结合,加深了对组织培养技术的理解。
3. 培养团队协作精神:在实习过程中,我与同事互相学习、交流,共同解决问题,培养了团队协作精神。
4. 增长了实践经验:通过实习,我积累了丰富的实践经验,为今后从事相关领域工作打下了基础。
四、实习总结本次组培月季实习让我受益匪浅。
在今后的学习和工作中,我将继续努力,不断提高自己的实践能力和综合素质,为我国植物组织培养技术的发展贡献自己的力量。
月季茎段组织培养
5、接种(超净工作台中进行)
接种时,吸干外植体表面的水分 将消毒好的茎段,茎基部朝下,插入培养基中。 接种后,在培养瓶上贴上标签并写上接种者姓 名、日期,之后移入培养室进行培养
6、培养条件
培养温度25左右,光强1500—2000lx,光照时 间14h/d
7、腋芽萌发
接种两周后观察,并调查污染率及茎段成活率 和发芽数
2012-6-5
实验准备
1、月季茎段培养基的配制、灭菌 MS+6-BA(2mg/L)+NAA(0.5mg/L) 配置600ml 最终分装成16个培养瓶 高压灭菌
2012-6-5
地点:图书馆前 时间:2011.11.11 中午12点半左右 天气晴朗 阳光明媚
2、外植体的采集
2012-6-5
我们采集的外物材料
通常老的材料比幼嫩材料带菌多,田间生长比温 室材料带菌多,一天中以中午阳光最强时的材料 带菌少
• 严格消毒灭菌
采用多次灭菌法
• 合理安排繁殖程序 • 规范操作,控制环境条件
保持接种室的清洁、干燥、密闭等。操作熟练。
2012-6-5
谢谢
2012-6-5
2012-6-5
两周后。。。
2012-6-5
2012-6-5
2012-6-5
结果分析
• 16瓶培养瓶 其中4瓶生长状态良好 另外12瓶均有不同程度的细菌或真菌感染
污染率:75% 茎段成活率:25%
2012-6-5
污染的种类
• 细菌:培养基某一位置或培养材料周围出 现黏液状物或浑浊的水渍状痕,有时呈现 发酵状泡沫 原因:材料、培养基灭菌不彻底或操作不当 • 真菌:污染部位发霉,颜色黝黑、白、黄 等 原因:周围环境和空气污染造成的
组培实验报告_2
组培实验报告月季植物组织培养实验报告组员:张吉顺刘健喆刘建陈雪珂一、引言:植物的组织培养广义又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
狭义是指组培指用植物各部分组织,如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
利用细胞的全能性,将月季的芽利用植物组织培养技术培养成植株。
实验一共包括两个过程:脱分化与再分化,脱分化是将月季外植体上的芽进行培养,培养2---3周长出新芽时便能进行再分化了,再分化是诱导生根的过程。
随着生物技术的迅猛发展,对月季的植物组培的研究也是越来越深入,为月季的快繁与新品种的选育提供了新的途径二、实验方法:1、MS培养基的配制MS培养基储备液的配制:MSⅠ号液50ml/L NH4NO3(mg)16500KNO319000KH2PO41700MgSO47H2O3700定容体积500mlMSⅡ号液50ml/L MnSO4H2O(mg)169ZnSO47H2O85H3BO362定容体积500mlMSШ号液50ml/L CaCl2(mg) 4400定容体积500mlMSIV号液50ml/L CaCl26H2O(mg)125CuSO4 5H2O125Na2MO42H2O12.5KI41.5定容体积500mlMS V号液50ml/L 烟酸&VB2(mg)25VB15甘氨酸100肌醇5000定容体积500mlMSVI号液50mL/L FeSO47H2O(mg)278Na2 EDTA373定容体积500ml按照上述配方,配制1L的MS培养基,注意加完上述母液,每L 培养基中加入0.5mg的6--BA,5--8g琼脂,30g蔗糖,PH调至5.6---5.8。
加热使琼脂完全溶解后,将琼脂倒入50个培养瓶中,每个培养瓶大约20ml左右,并用封口膜封口2、灭菌:用报纸包好2把镊子、1把手术刀和5个培养皿,和培养基一起放入高压灭菌锅中灭菌,121摄氏度灭菌30分钟。
月季养护实验报告
月季养护实验报告
《月季养护实验报告》
近日,我们进行了一项月季养护实验,旨在探究如何最大限度地保护和促进月季植物的生长。
通过实验,我们得出了一些有益的结论,希望能够为月季爱好者提供一些有用的养护建议。
首先,我们对月季植株进行了修剪和整形。
经过实验发现,适当的修剪可以促进月季植物的新梢生长,使植株更加健康和有活力。
然而,过度修剪会导致植株的生长受到抑制,因此需要谨慎操作。
其次,我们对月季植株进行了施肥和浇水实验。
我们发现,适量的有机肥料和水分能够有效地促进月季植物的生长和开花。
然而,过量的施肥和浇水会导致根部腐烂和病虫害的滋生,因此需要注意控制用量。
此外,我们还对月季植株进行了病虫害防治实验。
我们发现,定期喷洒杀虫剂和杀菌剂可以有效地预防和控制月季植株的病虫害,保持植株的健康和生长。
然而,过度使用化学药剂会对环境和植物本身造成危害,因此需要谨慎选择和使用。
综上所述,通过本次月季养护实验,我们得出了一些有益的养护建议:适当修剪、适量施肥和浇水、定期防治病虫害。
希望这些实验结果能够为广大月季爱好者提供一些有用的养护指导,让他们的月季植株茁壮成长,绽放出更加绚丽的花朵。
月季实习报告
实习报告:月季栽培与养护一、实习背景与目的本次实习是在XXX园林公司进行,以月季栽培与养护为主题,旨在了解月季的生长习性、栽培技术以及养护管理,提高自身在花卉栽培领域的实践能力。
二、实习内容与过程1. 栽培技术学习在实习过程中,我参与了月季的种植环节,学习了月季的栽培技术。
月季喜欢阳光充足、通风良好的环境,对土壤要求较为宽松,但以富含有机质、排水良好的沙质土壤为佳。
种植时,要控制好株距和行距,以利于植株的生长和开花。
2. 养护管理实践在实习期间,我负责了月季园的养护管理工作,包括浇水、施肥、修剪、病虫害防治等。
浇水要根据天气和土壤湿度情况进行,保持土壤湿润,避免积水。
施肥一般在生长季节进行,以保证月季生长所需的养分。
修剪主要包括去除枯枝败叶、调整植株形态等,以保持景观效果。
3. 病虫害防治在实习过程中,我学习了月季常见病虫害的识别和防治方法。
月季常见的病虫害有白粉病、黑斑病、蚜虫等。
防治方法包括物理防治和化学防治,如保持环境整洁、及时去除病虫害、使用农药等。
三、实习收获与反思1. 实习收获通过本次实习,我掌握了月季的栽培技术和养护管理方法,对月季的生长习性有了更深入的了解。
同时,我也学会了如何识别和防治月季常见病虫害,提高了自身在花卉栽培领域的实践能力。
2. 实习反思在实习过程中,我认识到理论知识与实践操作的结合非常重要。
虽然我在学校学习了花卉栽培的相关知识,但在实际操作中还是遇到了很多问题。
这让我明白,理论知识需要通过实践来巩固和提高。
同时,我也意识到在养护管理过程中,细节非常重要,如浇水、施肥、修剪等,都需要精心操作,才能保证植物的健康生长。
四、实习总结通过本次实习,我对月季栽培与养护有了更深入的了解,提高了自身在花卉栽培领域的实践能力。
同时,我也认识到理论知识与实践操作的结合非常重要,需要在今后的学习和工作中不断努力,提高自己的专业素养。
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月季植物组织培养实验报告姓名:张恒玉(天津师范大学10生乙10517085)摘要:月季(Floribunda roses)为蔷薇科蔷薇属木本植物,其花姿优美,花型丰富,花色齐备, 树型易修剪,栽培难度小;其花型大,美丽,幽雅,高贵。
在鲜花应用中,月季花的地位和比重与日俱增,是世界上著名的四大切花之一。
植物组织培养主要以绿色植物细胞或组织块为研究主要对象,把植物体上的生活器官、组织块活细胞从整体上离体下来进行人工培养。
以细胞全能性为理论基础对最适月季培养的培养基、激素、培养基质进行筛选,使离体组织经过脱分化和再分化而发育成新的植物个体。
为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径,在月季的改良上显示了很大的应用潜力。
关键词:月季组织培养Rose Plant Tissue Culture Lab ReportName: ZhangHengyu(Tianjin Normal University college of Life Science, Biological Sciences 300387)Abstract:Rose (Floribunda roses) for the woody Rosaceae Rosa, the beautiful flower position, abundant flowers, colors available, easy to trim the tree, planting small difficulty; its flowers large, beautiful, elegant, noble. Applications in the flowers, the status and the proportion rose growing is the world's leading one of the four cut flowers. Plant Tissue Culture main object of the green plant cells or tissue blocks for research, Of life on the plant organ, tissue block living cells isolated from the whole down the artificial culture, Cell totipotency theory based on the optimum rose culture medium, hormones, culture media filter, Isolated tissue and develop into new individual plants after dedifferentiation and redifferentiation. breeding of new varieties offer a new way, in the rose show a significant improvement potential applications.Keywords: Rose tissue culture1 月季介绍月季为常绿有刺灌木,或呈蔓状与攀援状。
常绿或落叶灌木,直立,茎为棕色有一点绿,具有钩刺或无刺,但也有几乎无刺的。
小枝绿色,叶为墨绿色,多数羽状复叶,宽卵形或卵状长圆形,长 2.5-6厘米,先端渐尖,具尖齿,叶缘有锯齿,两面无毛,光滑;托叶与叶柄合生,全缘或具腺齿,顶端分离为耳状。
花朵常簇生,稀单生,花色甚多,色泽各异,径4-5厘米,多为重瓣也有单瓣者;萼片尾状长尖,边缘有羽状裂片;花柱分离,伸出萼筒口外,与雄蕊等长;每子房1胚珠。
果卵球形或梨形,长1-2厘米,萼片脱落。
花期4--10月。
大多数是完全花,或者是两性花。
有花中皇后的美称。
现为天津市的市花,还是中国十大名花.2 月季植物组织培养试验2.1 实验原理植物的组织培养广义又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
狭义是指组培指用植物各部分组织,如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
2.2 实验材料及用具2.2.1 实验材料:月季2.2.2 实验试剂:MS母液70%酒精氯化汞0.1 mol/L NaOH与0.1 mol/L HCl IAA 2,4-D2.2.3 实验器具:广口瓶棕色瓶锥形瓶剪刀镊子酒精灯紫外灯2.3 实验步骤:2.3.1 培养基的配制2.3.1.1 称取6.5g~12g琼脂,先用蒸馏水置1000ml搪瓷杯浸泡2小时后充分洗去杂质。
弃去浸液用无离子水再洗1~2次,并加入500ml无离子水在电炉上溶化。
边搅拌边溶化,直至完全溶化备用。
2.3.1.2 另取蔗糖30g于上述溶液中搅拌完全溶解备用。
2.3.1.3 另按MS培养基用量量取无机大量微量元素及有机成分的母液于一烧杯中,并完全倒入②液中搅拌溶解混匀备用。
2.3.1.4 按目的要求用取样器加入各种激素并搅拌混匀,加稀碱或稀释酸调pH 值应比目的要求的pH值稍高0.1~0.2。
定溶1000ml。
趁热大于60℃分装于培养瓶中,应边搅拌边分装液体,根据要求的量分装。
一般液体的厚度掌握在1cm左右为宜。
分装时不得将液体粘落至瓶口上。
将培养瓶封口塞棉塞、包牛皮纸系线绳。
另取Ф5cm的滤纸若干,置Ф9cm的培养皿中并用牛皮纸包好准备灭菌。
另取无离子水若干不得超过瓶内总体积的70%,加棉塞包牛皮纸,灭菌制备无菌水。
另取清毒瓶包好备用。
2.3.2 灭菌2.3.2.1检查有无漏电漏水现象,加无离子水的3升,将要灭菌的物品平稳地放置高压锅套桶内。
2.3.2.2盖上锅盖水平拧好螺栓,打开放气阀,接通电源加热,待放气阀处水汽充分溢出时盖上放气阀,待压力升至0.05Mpa时打开放气阀放气至压力回到零位时盖上放气阀升压。
2.3.2.3待压力达0.12~0.15Mpa时,开始计时,使调压器自220V回调170~180V 左右维持30分钟断电。
2.3.2.4待压力回降至零位时,打开锅盖错开一缝隙使热蒸汽迅速溢出烘干包纸和瓶塞。
2.3.2.5趁热取出被灭菌之物,将培养瓶置平稳处使培养瓶中的培养基凝固。
23小时后查有无细菌,48小时后查有无霉菌,如有杂菌应及时处理,无杂菌备用。
2.3.3 接种2.3.3.1 取材:将采集的月季茎段冲洗干净,分装到烧杯中,放入超净工作台;先用70%酒精浸没并轻摇15s进行欲消毒;倒出酒精,加入0.1%二氯化汞浸没;倒净二氯化汞。
用无菌水冲洗3次,将废液倒弃备用。
2.3.3.2解下培养瓶上包头纸的线绳,并将培养瓶整齐地排列在接种台的左侧,然后用70%的酒精棉球从内向外擦接种台面。
2.3.3.3 在酒精灯下用用镊子在消毒瓶内取出材料置于培养皿内的无菌滤纸上吸干水分,右手持镊子左手拿灭过菌的解剖刀迅速地将茎段切成剪成每段2~3cm至少有1个侧芽,用镊子将外植体迅速地在酒精上接入培养瓶内。
头纸,系好线绳,移出净化台或接种箱,写好标签,外植体的名称、种类、接种日期、接种人等,移入培养室进行培养。
2.4 实验结果2.5 讨论2.5.1 培养材料采集要根据培养目的适当选取材料,选择原则:易于诱导、带菌少。
要选取植物组织内部无菌的材料。
这一方面要从健壮的植株上取材料,不要取有伤口的或有病虫的材料。
另一方面要在晴天,最好是中午或下午取材料,决不要在雨天、阴天或露水未干时取材料。
因为健壮的植株和晴天光合呼吸旺盛的组织,有自身消毒作用,这种组织一般是无菌的。
培养材料的消毒从外界或室内选取的植物材料,都不同程度地带有各种微生物。
这些污染源一旦带人培养基,便会造成培养基污染。
因此,植物材料必须经严格的表面灭菌处理,再经无菌操作手续接到培养基上。
2.5.2 灭菌方法2.5.2.1物理方法:物理灭菌干热、湿热、射线处理、物理除菌、过滤、离心、沉淀等2.5.2.2 化学方法:消毒剂、抗菌素灭菌2.5.2.3 培养基灭菌:高温高压湿热灭菌法压力在9.8×104—10.8×104Pa,温度在121℃,灭菌20—30min3 参考文献[1] 郭志刚,张伟.月季[M].北京:中国林业出版社 2000 .[2] 余树勋- 月季[M].北京:金盾出版社,1992 .[3] 林玉红.月季试管苗繁殖的研究[J].甘肃农业科技,1994( 1 ) :36—37 .[4] 李美茹,李洪清,孙梓建等.月季组织培养和基因转化研究进展[J] .广西植物,2003,23(3) :243—249.[5] Bressan PH Kim YJ,Hyndman SE et a1.Factors affectng in vitro propagation of rose [J].J Am Soc hort Sci ,1982 ,107:979- 990[6] 李青,苏雪痕,李湛东.藤本月季组织培养快繁研究[J].北京林业大学学报, 1999 , 21(6):17—21 .[7] 于冰沁.微型月季组织培养的研究[J].辽宁农业科学,2005(4):53-54 .[8] 李海燕,胡国富,胡宝忠.月季组培快繁技术的研究[J].东北农业大学学报,2004,35 (1):84—88 .[9] 吴雪,高成华.月季茎尖离体培养的研究[J].辽宁师专学报:自然科学版,2007 ( 2 ) :108—110 .[10] Iangford P J ,Wainwright H. Effect of sueros concentration On the photosynthetic ability of rose shoots in vitro [J] .Ann Bot ,1987,6 0:633 —639.[11] 陈正华.小本植物组织培养及其应用[M].北京:高等教育出版社,1986:307—308 .。