7抗原抗体反应

免疫黏附实验 0.005ug
抗原定性定量
D 标记反应
方法
荧光标记实验
敏感性
定性 定位
用途
抗原分析
酶标记实验
定性 定位
抗原分析
放射性免疫实验 0.0001-0.001ug 定性 定量 定位 抗原分析
E 中和反应
方法
敏感性
用途
病毒中和实验 0.0001-0.0004ug 抗原定性定量
杀菌反应
0.00001-0.0001ug 抗原定性定量
三免（1-2周）
四免（3-5天）
强化免疫
抗血清的制备过程
3、抗血清的纯化与保存
采血测定抗体效价
达期望效价后眼球放血、心脏采血、动 脉放血等方式收集血液，
斜面放置以采集析出的血清
一、凝集反应 agglutination
是颗粒性抗原(如细菌、病毒、红细胞等)与相应抗体结合 后，在电解质存在的情况下，抗原抗体凝聚成肉眼 可见的凝集物的反应。1µg/ml
不重叠决定簇 ：抗原决定簇之间相距较远，各 自与抗体的结合互不影响。
变构效应
抗原与一个抗体结合导致抗原结构 的变化，这种变化影响了抗原与其 它相应抗体的结合。
四、抗原抗体反应中量的关系
。
1、抗原与抗体反应的阶段性
第一阶段：抗原抗体相遇立即发生特异性结合。 第二阶段：形成肉眼可见的凝集与沉淀。 第三阶段：产生免疫生理效应阶段。
毒素定性定量
B 凝集反应
方法
直接凝集实验
间接凝集实验
抗球蛋白实验
敏感性
0.01ug
用途
颗粒抗原定性定量
0.005ug
颗粒抗原定性定量
0.0045ug 细菌病毒红细胞定性定量
C 补体参与反应
方法
免疫溶血实验
敏感性
0.001-0.003ug
用途
抗原定性定量
补体结合反应 0.001- 0.01ug 抗原定性定量
盐键作用
盐键，也称离子键。正负电荷之间的一种 相互吸引作用。
溶液PH的改变影响蛋白质分子的解离，改 变蛋白质带电的状况，影响抗原与抗体的 结合与解离。
疏水作用
疏水基团或疏水侧链为避开水而相互接 近，接近范德华距离时出现范德华力。 浓盐可破坏疏水作用使抗原抗体解离。
影响抗原与抗体反应的因素
1、抗原与抗体以极性键结合时，4°C亲和/合力最大。
抗原抗体反应
凝集反应 沉淀反应 免疫标记法 补体参加的反应
抗血清的制备过程
1、动物免疫 A 抗原：病毒、细菌、蛋白质、半抗原 B 剂量：小鼠数ug、兔羊数百ug，数mg C 免疫途径：腹腔ip、肌肉im、皮内id、
皮下s.c、静脉iv
抗血清的制备过程
2、免疫程序
首免（大动物1-2月）（小动物2周） 次免（大动物1-2月）（小动物2周）
（3）、后带现象： 抗原过量的带现象。
五、抗原与抗体的交叉反应
六、常用血清学反应
血清学反应类型(反应性质) A 凝聚性反应： 凝集反应、沉淀反应 B 标记抗体技术： 荧光标记、酶标记、
同位素标记、发光物标记 C 补体参与反应： 溶菌反应、溶血反应、补体结合反
应、免疫黏附血凝反应、团集反应 D 中和反应： 血清病毒中和实验、毒素中和实验
抗原与抗体的反应中，抗原或半抗原与抗 体的结合强度称为亲和/合力。
亲和/合力大小依赖于抗体的结合位点和抗原 决定簇在空间上的密和程度。
亲和力 与 亲合力
亲和力：单价抗原与抗体的反应结合力称 为亲和力。
亲合力：多价抗原与多个抗体分子反应结 合力称为亲合力。
重叠决定簇 与 不重叠决定簇
重叠决定簇 ：抗原与抗体结合后，在空间上 干扰了其它抗体与相应决定簇的 结合。
第七章 抗原抗体反应及应用
免疫诊断 免疫预防 免疫治疗
免疫诊断
抗原抗体特异性的结合是免疫检测的基础
抗原或抗体的检测 免疫诊断
免疫细胞的检测
一、 抗原与抗体反应特点
1、 特异性：分子结构的空间互补 wk.baidu.com、可逆性：动态平衡 3、可见性：
二、抗原抗体的结合力
抗原与抗体以非共价键结合： 1、范德华力：定向效应、诱导效应、分散效应 2、盐键作用：静电引力 3、氢键作用：方向性和饱和性 4、疏水作用:
1.直接凝集反应 细菌或红细胞与相应抗体直接反应出现凝集现象。 2.间接凝集反应 将可溶性抗原包被在红细胞或胶乳颗粒表面与相应 抗体反应出现颗粒物凝集的现象。
凝集原与凝集素
凝集原： 参与凝集反应的抗原称为凝集原。
凝集素： 参与凝集反应的抗体称为凝集素。
1.直接凝集反应
A 玻片凝集法
2、抗原与抗体反应的带现象
。
抗体与多价抗原之间反应可能出现的一种现象。
抗体与单价抗原的结合物是可溶性的。
抗体与多价抗原结合形成沉淀与凝集。抗原与抗 体之间的比例合适才能出现肉眼可见的沉淀。
（1）、带现象： 抗原或抗体过多，则抗原与抗体的结合不能 形成大的复合物，抑制可见反应的出现称为 带现象。
（2）、前带现象： 抗体过量的带现象。
三、抗原抗体结合的可逆性
Ag + Ab
k1 Ag-Ab
k2
K= K1/K2 = [Ag-Ab] / [Ag][Ab]
K为平衡常数，也叫结合常数或亲和常数
解离常数 Kd = 1/Ka (MOL/L)
Ka 平衡常数 Kd 解离常数
Kd值越大，亲和力越小； Kd值越小，亲和力越大。
亲和/合力 Affinity , Avidity
2、抗原与抗体以非极性键结合时，温度对亲和力 影响很小。
3、抗原与抗体反应速度主要与抗原与抗体分子的扩 散速率和碰撞几率相关。
影响抗原与抗体反应的因素
4、抗体与单价半抗原反应特异性极强。
2、抗体与同源抗原反应最强，与异源抗原反应 比较弱。
如：人/牛布氏杆菌
3、变态抗体：
抗体与异源抗原反应强，与同源抗原反应弱。
血清学反应类型-反应敏感性与用途分
A 沉淀反应 B 凝集反应 C 补体参与反应 D 标记反应 E 中和反应
A 沉淀反应
方法
液相沉淀反应
敏感性
3-20ug
用途
可溶性抗原定性定量
免疫电泳
3-20ug 可溶性抗原定性及抗原分析
双向双扩散
0.2-1.0ug 血清细菌浸出液定性定量
双向单扩散 0.008-0.025ug
范德华力
1、定向效应 发生在极性分子或极性基团之间的， 在永久偶极间的静电力的相互作用。
氢键
。
2、诱导效应 发生在极性分子与非极性分子之间 的， 永久偶极与它诱导而来的诱导 偶极之间的静电力的相互作用。
。
3、分散效应 主要范德华力，发生在非极性分子或 基团之间的仅有的一种范德华力， 也称LONDON分散力。