薄层色谱法的应用

（一）薄层色谱的应用

薄层色谱技术的优点：薄层图谱以彩色图像呈现，直观、易于辨认；广泛的适用性，至今为多国药典用于植物药的鉴别；多样品在同板同时平行比较；色谱可供多层次分析，制成的摄影可长期保留；可利用不同参数进行多次分析计算，不必重复分离。

TLC在中药质量控制中的主要应用：鉴别、半定量评估、化合物定量分析。在没有任何化学对照品的情况下，对比TLC板上相同位置斑点颜色，也能够很容易地识别不同药材。半定量评估包括过程控制、稳定性测试、限量检查三个方面。在cGMP环境下，记录原料在生产过程的每一步中如何转换/保存、如何与成品比较、每一批产品的组分如何保持稳定等很有必要。利用HPTLC指纹图谱，通过比较斑点数目、顺序和相对强度（或者光密度扫描产生的峰）可以完成这些工作。且可以用鉴定过的原料或有独立规范的成品作为参比物。稳定性测试是HPTLC比较新的一个应用，用以确定提取物和成品的保质期。测试是要确认产品在规定时间内能否保持稳定。另一方面，方法要能检测到所有的降解产物。倘若方法经过严格验证，可用半定量检测进行稳定性测试，对被测的标示物无需测定其绝对量。采用定量配制的对照品对照或对照品稀释对照。供试品溶液色谱中待检查的斑点应与对应的对照品溶液或系列对照品溶液的相应斑点比较，颜色（或荧光）不得更深。或照薄层色谱扫描法操作，峰面积值不得大于对照品的峰面积值。必要时应规定检查的斑点数和限量值。化合物定量分析化合物定量分析对TLC来说是最高要求。由于受到该技术分

离能力的限制，像植物材料这样的复杂样品对其所有组分往往不能实现基线分离，因而大多数分析采用HPLC。

薄层色谱方法标准操作规程：薄层色谱是一开放体系，环境因素对色谱层析行为影响很大。而薄层色谱实验过程各单元独立，实验人员参与的步骤操作多，因此不同人的操作技巧会明显地影响色谱质量。同一份样品，往往在不同人或不同实验室得出完全不同的结果，这就要求必须建立薄层色谱SOP。而薄层色谱方法标准操作规程包括以下方面：代表性样品的收集；薄层色谱条件的确立；样品提取与前处理、点样、饱和、展开剂、不同品牌薄层板、温度、湿度、耐用性的考察；薄层板标注、文件名称标注、图谱输出等。其中展开剂的选择和优化属关键环节。